Analýza moči LHC je jedním z nejúčinnějších a nejpřesnějších typů diagnostiky vzorku moči. Používá se k identifikaci různých typů infekcí močového systému v lidském těle. Tento systém se skládá z dvojice ledvin, močovodů, močového měchýře a močové trubice. Hlavní funkcí močového systému lidského těla je proces tvorby moči a také její hromadění a uvolňování do vnějšího prostředí.
co to je?
Jak je uvedeno výše, bakteriologická analýza moči umožňuje určit přítomnost infekcí v těle. Jeho hlavní odlišností od ostatních typů výzkumu je délka studia, která je deset dní. V laboratorních podmínkách se moč umístí do agaru nebo cukerného bujónu, tedy do živného média příznivého pro bakterie. Napomáhá jejich růstu a vývoji.
Při LHC analýze moči je koncentrace (počet) mikroorganismů v jedné jednotce objemu biomateriálu určena jednotkami tvořícími kolonie (CFU). Představují jednoho živá buňka mikrobů, které pak produkují celou kolonii mikroskopických organismů.
Tento typ diagnostiky moči je nejspolehlivější. Může poskytnout údaje, které nelze získat z jiných testů moči. Ale také je poznamenána jeho nevýhoda. Spočívá v délce studia a také ve vysokých nárocích při sběru materiálu.
Indikace pro analýzu
- infekce močového systému;
- kontrola terapeutické terapie;
- objasnění zjištěného onemocnění;
- relaps současného onemocnění;
- těhotenství;
- diabetes mellitus a imunodeficience;
- předpoklady o flóře odolné vůči léčbě antibiotiky.
Příprava na analýzu
Materiál se shromažďuje ve sterilní plastové nádobě. To by měla být ranní průměrná porce moči (tři až pět mililitrů). Nádoba na sběr materiálu je dána osobě v laboratoři. A samotný postup odběru moči by měl být proveden po řádné hygienické toaletě pohlavních orgánů. V tomto případě je třeba vyloučit antiseptika. Materiál pro diagnostiku se odebírá před zahájením léčby antibiotiky nebo v jejích intervalech. Po takové léčbě by před provedením bakteriologického testu moči měly uplynout dva až tři týdny.
Shromážděná část moči musí být transportována do krátké obdobíčas. Pokud je vzorek materiálu skladován při teplotě +18-20 stupňů Celsia - po dobu jedné až dvou hodin. Pokud je moč uložena v chladničce při teplotě +4-8 stupňů - po dobu pěti až šesti hodin.
Typy analýz
Mezi bakteriologický rozbor moč vylučuje:
- BAK kultivace moči pro flóru se stanovením citlivosti na hlavní spektrum antibiotik;
- BAK kultivace moči pro flóru se stanovením citlivosti na široký rozsah antibiotika;
- BAC kultivace moči pro flóru se stanovením citlivosti na hlavní spektrum antibiotik a bakteriofágů;
- BAC kultivace moči pro flóru se stanovením citlivosti na široké spektrum antibiotik a bakteriofágů.
Všechny výše uvedené typy diagnostiky umožňují správně určit typ antibiotika pro další léčbu.
LAC test moči během těhotenství
Bakteriologická diagnostika během těhotenství je zařazena do hlavního seznamu provedených studií. U žen lze materiál pro tento typ studie odebrat z pochvy, nosu a moči. Materiál se odebírá z pochvy k identifikaci nemocí, které jsou pohlavně přenosné. Z nosu - určit Staphylococcus aureus. Vzorek moči se používá ke stanovení asymptomatické nebo latentní bakteriurie.
Analýza moči LHC musí být během těhotenství provedena dvakrát. První je při registraci u prenatální poradna, a druhý - ve 36 týdnech těhotenství. Ale je zde možnost absolvování analýzy a velké množství krát, pokud má těhotná žena onemocnění ledvin, močového měchýře a také zvýšené množství protein nebo leukocyty, když klinická analýza moč.
Příprava
Pro sběr materiálu pro výzkum si těhotná žena potřebuje koupit sterilní nádobu, do které umístí průměrnou část ranní moči. Poté je biomateriál odeslán do lékařské laboratoře.
Aby analýza vykazovala spolehlivé výsledky, měli byste při sběru materiálu dodržovat základní doporučení. Tyto zahrnují:
- důkladná hygienická toaleta genitálií;
- odběr průměrné porce materiálu (při odběru moči je nutné zavést tampon do pochvy);
- normální pitný režim (pít hodně tekutin může předem zředit koncentraci moči a odstranit bakterie z těla);
- dodání biomateriálu do laboratoře do hodiny.
Interpretace bakteriologického vyšetření moči
CFU
Při dekódování výsledků se často používá zkratka CFU. Jak je uvedeno výše, CFU je jednotka tvořící kolonie. Pokud se během studie zjistí, že jeho množství je v rozmezí 1000 CFU/ml, bude to znamenat přítomnost mikrobů ve vzorku materiálu, který náhodně pocházel z genitálií. V tomto případě není nutná žádná léčba.
Když výsledek analýzy ukazuje počet jednotek tvořících kolonie 1 000 000, znamená to, že jde o zánětlivý proces způsobený infekcemi pohlavních orgánů. Pomocí tohoto typu studie se určí typ bakterií a citlivost na antibiotika.
Výsledek analýzy může ukázat střední limity, jako je 1000-10000 CFU/ml. Toto posouzení je zpochybněno a samotná diagnóza by se měla opakovat. Ale v každém případě by jeho výklad měl provádět pouze ošetřující lékař.
Bakterie v moči
Často analýza BAK prokáže přítomnost bakterií v moči, které se do ní dostaly z lidského tlustého střeva. Přesouvají se z anální oblasti do močová trubice, načež pronikají do měchýř a dál. Tato cesta pronikání bakterií se obvykle nazývá vzestupná. Nejčastěji se tento typ mikrobiální expozice vyskytuje u žen kvůli jejich anatomická struktura. Existuje také sestupná cesta, kdy se mikroorganismy dostávají do moči při infekci v ledvinách. Při takovém posouzení by měla být provedena analýza kurativní terapie antibiotické léky.
4.5 4,50 z 5 (5 hlasů)
Klasické bakteriologické vyšetření je „zlatým“ standardem mikrobiologické diagnostiky.
Účelem bakteriologického výzkumu je izolovat čistá kultura patogen a jeho identifikace.
Algoritmus pro bakteriologický výzkum:
Primární mikroskopie studovaného materiálu (volitelná fáze, dle povahy materiálu);
Primární výsev k izolaci čisté kultury;
Akumulace čisté kultury;
Studie komplexu biologické vlastnosti vybraná kultura;
Konečná identifikace patogenu.
1. den studia
1. Primární mikroskopie
Výsledek primární mikroskopie poskytuje přibližnou představu o přítomnosti různých morfologických forem mikroorganismů v klinickém materiálu a také umožňuje jejich primární identifikaci podle morfologických a tinktoriálních vlastností a výběr médií pro primární inokulaci.
Hnisavý výboj - je nutná primární mikroskopie.
Mozkomíšní mok- je nutná primární mikroskopie sedimentu.
Sputum - primární mikroskopie se provádí z ředění 10 4 -10 5.
Výtěry z krku a nosu – primární mikroskopie se neprovádí.
Krev - primární mikroskopie se neprovádí.
Feces - primární mikroskopie se neprovádí.
2. Primární výsev
Testovaný materiál po primární mikroskopii nebo bez ní (výkaly, moč, výtěry z nosu a krku, krev) se naočkuje na vhodné médium, aby se izolovala čistá kultura:
Cukrový vývar, krevní agar - na streptokoky;
Žloutkový agar, krevní agar - pro stafylokoky;
Endo medium - pro bakterie z čeledi Enterobacteriaceae;
MPA (masový peptonový agar) - pro gramnegativní bakterie;
MPA (očkování podle Shukevichovy metody) - pro izolaci Protea;
Kitta-Tarozzi médium - pro izolaci anaerobů;
Sabouraudovo médium - pro izolaci hub.
Výsev je prvním stupněm bakteriologického vyšetření (pokud se neprovádí primární mikroskopie).
Výsev se provádí takto:
Výsev s pruhem a vypálení smyčky. Materiál se odebírá kalcinovanou bakteriologickou kličkou a horní pole kalíšku je hustě naočkováno proužkem. Dále se smyčka znovu kalcinuje a přivede do sektoru s hustými sazenicemi a přes celý pohár se nakreslí 2-3 svislé čáry. Poté se pohár obrátí, na spodním poli poháru zůstane hustě osetý sektor. Smyčka se znovu zahřeje a výsev se 2-3 horizontálními tahy rozprostírá po misce.
Výsev stěrkou. Materiál se nanáší špachtlí nebo pipetou na povrch média a poté se špachtlí rozsype po celém povrchu.
Výsev tamponem. Pro naočkování se tampon s testovaným materiálem vloží do kelímku a jeho obsah se krouživými pohyby vtírá do živného média.
Výsev podle sektorů. Při tomto výsevu se dno kalíšku vytahuje do sektorů, setí se provádí čárkovanými pohyby od okraje kalíšku ke středu a podél sektorů.
2. den studie
1. Zaznamenejte růst na živných půdách jako homogenní nebo heterogenní.
2. Proveďte popis kulturních statků.
Algoritmus pro popis kolonií
V důsledku růstu na živném médiu se tvoří kolonie (potomci jedné buňky). Izolované kolonie jsou vybrány a studovány – začíná druhá etapa studie zaměřená na studium kulturních vlastností bakterií. Znalost těchto vlastností je nezbytná pro identifikaci výsledné čisté kultury, protože každý typ mikroorganismu při pěstování na určitém živném médiu odpovídá určitým kulturním vlastnostem.
Studium kolonií:
Makroskopicky: pouhým okem v procházejícím a odraženém světle;
Mikroskopicky: při malém zvětšení suchého mikroskopického systému.
V procházejícím světle studují:
Velikost kolonií (velké, střední, malé, trpasličí);
Tvar kolonie (pravidelný, nepravidelný, kulatý);
Průhlednost kolonie (průhledná, neprůhledná).
V odraženém světle určete:
Barva (bezbarvá nebo barevná);
Povaha povrchu (hladký, hrbolatý, lesklý, drsný);
Výška kolonií nad povrchem média (stlačená, plochá, vyvýšená).
Mikroskopicky vyhodnotit:
Hrana (hladká, nerovná);
Struktura (homogenní, nehomogenní).
Studium kolonií končí přípravou nátěru, Gramovým barvením a mikroskopií.
Při odběru materiálu z kolonie na přípravu nátěru se posuzuje jeho konzistence (měkký, slizký, suchý).
Pokud se pod mikroskopem ukáže, že kultura je čistá, pak se subkultivuje na šikmém agaru za účelem akumulace.
3. den studie
1. Popis vzorce růstu na šikmém agaru:
Homogenní, heterogenní;
Po tahu, souvisle, souvisle.
2. Kontrola čistoty nashromážděné kultury. Připraví se stěry, obarví se podle Grama a podrobí se mikroskopickému zkoumání. Pokud byla nashromážděna čistá kultura, podstoupí další identifikaci. Identifikace bakterií podle rodu a druhu je založena na studiu metabolických charakteristik - biochemická identifikace a antigenní struktura - sérologická identifikace.
3. Studujte biochemické vlastnosti. Biochemické vlastnosti – schopnost bakterií rozkládat určité substráty produkcí příslušných enzymů. Ke studiu biochemických vlastností se používají diferenciálně diagnostická média obsahující různé substráty (pestré řady). Patří mezi ně Hiss média se sacharidy, lakmusové mléko, želatina, média s aminokyselinami, MPB (maso-peptonový bujón) s indikátory pro sirovodík a indol.
Sacharolytické vlastnosti jsou studovány na Hiss médiu. Obsahují peptonovou vodu, sacharidový substrát (různé mono- a polysacharidy), vícesytné alkoholy a indikátor.
Pokud mají bakterie enzymy, které rozkládají sacharidový substrát, uvolňují metabolické produkty (kyselinu nebo kyselinu a plyn). Když se tvoří kyselina, indikátor změní barvu média, když se tvoří plyn, jsou zaznamenány zlomy v médiu.
Proteolytické vlastnosti jsou studovány kultivací na želatině a lakmusovém mléce. Pokud mají bakterie proteázy, želatina zkapalní. V mléce se objeví krémově zbarvená sraženina a nad ní tekutina - peptonizace mléka (kvůli tomu, že bakteriální proteázy rozkládají mléčný kasein na pepton).
Peptolytické vlastnosti. Častěji jsou bakterie schopny rozkládat meziprodukty štěpení bílkovin – peptony. Produkty tohoto procesu: aminy (skatol, indol), aminokyseliny, plyny (sirovodík, čpavek, oxid uhličitý). Lze je detekovat pomocí indikátorového papíru:
Lakmusový test - k detekci amoniaku;
Navlhčený kyselinou oxaloctovou - k detekci indolu;
Navlhčený octanem olovnatým - pro detekci sirovodíku. Produkty deaminace a dekarboxylace aminokyselin jsou detekovány pomocí testovacích proužků, které mění barvu při změně pH média.
4. den studie
1. Zaznamenejte výsledky biochemických testů. Poté, co byla kultura identifikována ke svému druhu, je studována řada dalších charakteristik, jako je citlivost na antibiotika, toxikogenita, přítomnost faktorů virulence, plazmidový profil a také se provádí vnitrodruhová diferenciace.
2. Výsledky biochemické identifikace slouží jako podklad pro sérologickou identifikaci. Sérologická identifikace izolované kultury se provádí ve skleněné aglutinační reakci s použitím vhodných imunoadsorbovaných sér, jejichž výběr je dán výsledky biochemické identifikace.
Vnitrodruhová diferenciace – určení, zda kmen patří ke konkrétnímu fagovaru, bakteriocinogenovavaru, bakteriocynovaru, biovaru, rezistovaru atd. Umožňuje nám identifikovat epidemiologické souvislosti mezi kmeny stejného druhu.
Identifikace izolované kultury nám umožňuje učinit závěr o tom, který mikroorganismus slouží etiologický faktor nemocí. Při výběru oportunní bakterie je nutné splnit kritéria etiologické významnosti:
Přítomnost bakterií v materiálu z patologického ložiska v množství alespoň 10 5 CFU ml/g;
Opakovaná izolace z materiálu stejné kultury;
Zvýšení titru protilátek v krevním séru pacienta na autostrain 4krát nebo více.
Stanovení bakteriálních fágů (fágová typizace)
Identifikace fagovarů se provádí podle epidemiologických indikací k vytvoření epidemiologických spojení mezi nemocnými lidmi. Pro provedení studie vezměte Petriho misky s MPA, osušte povrch, nakreslete dno do čtverců a označte je. Dále se 3-4hodinová kultura v bujónu naočkuje trávníkem, suší se a na každý čtverec se aplikuje kapka odpovídajícího standardního fága v pracovním ředění. Plodiny se umístí na jeden den do termostatu. Po 24 hodinách je zohledněno spektrum citlivosti kultury na určité fágy lytickým působením.
stanovení bakteriocynovaru
Pro stanovení bakteriocynovaru je stanovena citlivost studovaných kmenů na referenční bakteriocynovar. Stejně jako fágová typizace se provádí podle epidemiologických indikací.
Pro provedení studie se vysejí odpovídající standardní produkující kultury typických bakteriocinů živná média. Plodiny se umístí do termostatu při 37 °C na 48 hodin.
Vyrostlé kolonie indikátorových kultur se inaktivují chloroformem, načež se na povrch nalijí 2-4 ml roztaveného agaru, do kterého se nejprve přidá 0,2 ml studované 4hodinové bujónové kultury. Po vytvrzení agaru se plodiny opět umístí na 18-24 hodin do termostatu. Po stanovené době se zohlední přítomnost zón inhibice růstu kolem indikátorových kultur, čímž se stanoví bakteriocynovar studovaných bakterií.
©2015-2019 web
Všechna práva náleží jejich autorům. Tato stránka si nečiní nárok na autorství, ale poskytuje bezplatné použití.
Datum vytvoření stránky: 27.04.2016
Diagnostika infekční choroby nutné pro následné adekvátní etiotropní terapie zaměřené na zničení patogenu patologický proces. Detekce a identifikace patogenních mikroorganismů provedeno s pomocí různé techniky laboratorní diagnostika, jedním z nich je bakteriologický výzkum.
Bakteriologie jako věda se rozvinula v r XIX století díky zavedení bakteriologických výzkumných technik.
Princip a podstata techniky
Hlavním cílem bakteriologického výzkumu je detekce a následná identifikace patogenního (chorobotvorného) mikroorganismu ve studovaném materiálu. K tomu se provádí inokulace na speciální živná média (maso-peptonový bujón, pevné agarové médium), na kterých v přítomnosti patogenu v materiálu po nějaké době rostou kolonie mikroorganismů. Identifikují se mikroskopickými (velikost buněk, jejich tvar, určitá barva při barvení podle Grama), biochemickými (schopnost štěpit určité sacharidy popř. 
proteiny) a antigenní (interakce s protilátkami proti hlavním třídám patogenů) vlastnosti. Obecně tato diagnostická technika vyžaduje od 48 do 72 hodin, což je poměrně dlouhá doba (zejména pokud je nutné rychle zahájit etiotropní terapii infekční patologie). Nicméně tenhle typ laboratorní diagnostika dnes neztrácí svůj význam, protože je spolehlivá velké množství infekční choroby.
Velmi často se během bakteriologické studie navíc zjišťuje citlivost izolovaného patogenního mikroorganismu na hlavní skupiny moderní antibiotika. To umožňuje následně zvolit nejúčinnější etiotropní terapii.
Kdy se provádí bakteriologická diagnostika?
Indikací pro provedení bakteriální studie je diagnostika různých infekčních onemocnění, mezi které patří:
Tato technika může být také použita k určení původce hnisavých procesů. různé lokalizace. Nejprve je nutné určit citlivost identifikovaných mikroorganismů na antibiotika, protože s rozvojem hnisavého procesu jsou patogeny často odolné vůči většině antibiotik.
Diagnostika dysbakteriózy pomocí bakteriologického vyšetření umožňuje určit typ oportunních mikroorganismů, jakož i jejich množství, na základě čehož je učiněn závěr o závažnosti narušení normální mikroflóry.
Materiál používaný pro bakteriologické vyšetření je moč, krev, výtěry z nosní dutiny, močové trubice, pochvy, konečníku, stolice, spermie u mužů, sputum. Výběr materiálu závisí na indikacích pro postup. tato metoda laboratorní diagnostika a lokalizace patologického procesu.
Dekódování výsledků
Ve většině případů je výsledek studie založen na 2 ukazatelích - na skutečnosti přítomnosti detekovatelných 
mikroorganismus (pozitivní popř negativní výsledek), stejně jako číslo bakteriální buňky na jednotku objemu studovaného materiálu (tento ukazatel se vyskytuje pouze tehdy, když pozitivní výsledek). Bakteriální množství je vyjádřeno jako počet jednotek tvořících kolonie (CFU). Čím vyšší je tento indikátor, tím větší je počet bakterií v testovaném materiálu. Výsledek může zahrnovat i indikátory citlivosti identifikovaného mikroorganismu na antibiotika. Obvykle se skládá ze seznamu hlavních tříd antibakteriální látky (
Pro získání spolehlivého výsledku musí být analýza provedena nejméně 2 týdny poté poslední schůzka antibiotika a (nebo) antibakteriální léky.
- Škrábání z močová trubice Test se doporučuje provést 2 hodiny po posledním močení, od hltanu a nosohltanu – nalačno (4-5 hodin po posledním jídle, v tomto případě je nutné vyloučit čištění zubů a vyplachování úst), na jiná ložiska speciální trénink není požadováno.
- Moč. Předmětem studie je průměrná porce volně uvolněné moči v množství 3-5 ml ve sterilním plastovém jednorázovém kontejneru (nádobku lze získat na recepci) po důkladné toaletě zevního genitálu bez použití antiseptik. . Doba dodání do laboratoře pokojová teplota– 1-2 hodiny, při teplotě 2-8°C – 5-6 hodin.
- Spermie pro bakteriologický výzkum se sbírá do sterilní plastové jednorázové nádoby se širokým hrdlem masturbací (nádobu lze získat na recepci). Doba dodání materiálu do laboratoře při pokojové teplotě je 1-2 hodiny.
- Sputum Doporučuje se sbírat ráno, nalačno po sanitaci ústní dutina, do sterilní plastové nádoby. Doba dodání materiálu do laboratoře při pokojové teplotě je 1-2 hodiny, při teplotě 2-8°C - 5-6 hodin.
- Plot tajný prostaty provádí urolog po předběžné masáži prostaty ( tuto manipulaci prováděno pouze v Centrální kancelář). Před odběrem sekretu prostaty se doporučuje sexuální abstinence po dobu alespoň 2 dnů.
- Bakteriologický výzkum mateřské mléko . Mateřské mléko se sbírá pouze před nakrmením dítěte nebo dvě hodiny po kojení. Vyšetřovaná pacientka si myje levou a pravou prsní žláza teplá voda mýdlem a ubrousky osušte čistým ručníkem. Povrch bradavek a konečků prstů ošetřete vatou mírně navlhčenou 70% ethylalkohol. První část mateřského mléka, přibližně 0,5 ml, se vyhodí. Poté, aniž by se dotkla bradavky rukama, žena odsaje 0,5 - 1 ml mléka z každé žlázy do samostatné sterilní nádobky (nádobky lze získat na recepci). Doba dodání do laboratoře při pokojové teplotě je 1-2 hodiny, při teplotě 2-8°C – 5-6 hodin.
- Plot s inoviální tekutina na bakteriologické vyšetření provádí lékař ve sterilním plastovém obalu (nádobku lze získat na recepci). Tento postup se neprovádí v laboratorním prostředí. Doba dodání materiálu do laboratoře při pokojové teplotě je 1-2 hodiny, při teplotě 2-8°C - 5-6 hodin.
- Plot výtok z rány pro bakteriologické vyšetření provádí lékař, v jednorázové nádobce s Amesovým médiem (nádobku lze získat na recepci). Doba dodání materiálu do laboratoře při pokojové teplotě je do 6 hodin, při teplotě 2-8°C - do 2 dnů.
- Žluč pro bakteriologický výzkum se odebírá při sondáži odděleně po částech A, B a C do tří sterilních zkumavek nebo při operaci injekční stříkačkou do jedné zkumavky při dodržení pravidel asepse (v laboratoři se tento postup neprovádí). Doba dodání materiálu do laboratoře při pokojové teplotě je 1-2 hodiny, při teplotě 2-8°C - 5-6 hodin.
Bakteriologický (mikrobiologický) rozbor zahrnuje studie vzorků stolice, moči, sputa, hrdla atd. Provádějí se za účelem identifikace původce infekce zánětlivý proces, stanovit diagnózu a předepsat vhodnou léčbu.
Bakteriologický rozbor také umožňuje stanovit citlivost bakterií na antibiotika, v některých případech i na bakteriofágy. Spočívá v izolaci čisté kultury původce onemocnění a jeho identifikaci, tedy ve studiu vlastností mikroorganismů v bakteriologická laboratoř za účelem příslušnosti k jednomu nebo jinému druhu nebo rodu.
Izolace čisté kultury patogenu z výsevu je první fází studie. Jsou to následující:
- identifikace mikroorganismů;
- stanovení citlivosti identifikovaných patogenních mikroorganismů na antibiotika a bakteriofágy.
K izolaci čistých kultur lze použít jak mechanické, tak biologické metody.
Na mechanická metoda kapka testovaného materiálu se rozemele na povrch hustého živného média v první, druhé a třetí Petriho misce. A samotná izolace čisté kultury zahrnuje její výzkum a screening na čerstvém živném médiu.
Biologické metody jsou zase založeny na zohlednění specifických vlastností izolovaného mikroba, což jej odlišuje od ostatních mikrobů ve zkoumaném materiálu. Tato metoda využívá živná média, ve kterých jsou vytvořeny příznivé podmínky pro rozvoj určitého druhu mikroba.
