Tvarus aukšto ūkinių gyvūnų produktyvumo išsaugojimas labai priklauso nuo to, ar žmonės sumaniai naudojasi savo kūno adaptacinėmis ir apsauginėmis savybėmis. Tampa būtinybė sistemingai ir visapusiškai tirti natūralų gyvūnų atsparumą. Ūkio sąlygomis laukiamą poveikį gali duoti tik tie gyvūnai, kurie turi didelį natūralų atsparumą nepalankioms aplinkos sąlygoms.
Gamybos technologija gyvulininkystėje turi būti derinama su fiziologiniais gyvūno poreikiais ir galimybėmis.
Yra žinoma, kad labai produktyviems gyvūnams ir naminiams paukščiams orientacija biocheminiai procesai medžiagų, sudarančių produktą, sintezė yra labai intensyvi. Ši įtampa medžiagų apykaitos procesai gyvūnams tai dar labiau apsunkina tai, kad produktyvus laikotarpis iš esmės sutampa su nėštumo laikotarpiu. Imunobiologiniu požiūriu gyvų organizmų būklė šiuolaikinėmis sąlygomis būdingas imunologinio reaktyvumo ir nespecifinio imuniteto sumažėjimas.
Natūralaus gyvūnų atsparumo tyrimo problema sulaukė daugelio tyrinėtojų dėmesio: A.D. Ado; S.I. Pliaščenka; GERAI. Buraja, D.I. Barsukova; I.F. Chrabustovskis.
Apsauginė kraujo funkcija, profesorius A.Ya. Jaroševas tai apibūdino taip: „Kraujas yra vieta, kur yra įvairių rūšių antikūnų – tiek susidarančių reaguojant į mikroorganizmų, medžiagų, toksinų patekimą, tiek tų rūšių, kurios suteikia įgytą ir įgimtą imunitetą.
Natūralus atsparumas ir imunitetas yra apsaugos priemonės. Vieno iš šių apsauginių įtaisų pranašumas yra ginčytinas. Neabejotina, kad į inkubacinis periodas Prieš susiformuodamas imunitetas, organizmas suteikia lemiamą atsparumą infekciniam sukėlėjui ir dažnai būna nugalėtojas. Būtent šį pradinį atsparumą infekciniam sukėlėjui vykdo nespecifiniai gynybos veiksniai. Tuo pačiu metu natūralaus atsparumo ypatybė, priešingai nei imunitetas, yra organizmo gebėjimas paveldėti nespecifinius apsauginius veiksnius.
Natūralus arba fiziologinis organizmo atsparumas yra bendra tiek augalų, tiek gyvūnų biologinė savybė. Organizmo atsparumas žalingi veiksniai išorinė aplinka, įskaitant mikroorganizmus.
Natūralaus imuniteto tyrimo srityje, plėtojant teorinius principus ir taikant pasiektus pasiekimus žemės ūkio gamybos praktikoje, daug nuveikė šalies ir užsienio augalų selekcininkai. Kalbant apie gyvulininkystę, šios sunkiausios ir labai svarbiausios problemos tyrimai yra gana padriki, atskiri ir nejungiami bendro dėmesio.
Negalima paneigti, kad dirbtinė ūkinių gyvūnų imunizacija suvaidino ir atlieka neįkainojamą vaidmenį kovojant su daugeliu užkrečiamos ligos, darantis milžinišką žalą gyvulininkystei, tačiau negalima galvoti, kad tai vienintelis būdas neribotą laiką išsaugoti gyvūnų gerovę.
Medicina ir veterinarija žino daugiau nei tūkstantį mikroorganizmų sukeliamų infekcinių ligų. Net jei nuo visų šių ligų būtų sukurtos vakcinos ir serumai, sunku įsivaizduoti platų jų praktinį panaudojimą masiniu mastu.
Kaip žinia, gyvulininkystėje imunizacija atliekama tik nuo pavojingiausių infekcijų grėsmingose zonose.
Tuo pačiu metu laipsniška, neabejotinai labai ilgalaikė didelio atsparumo gyvūnų atranka ir atranka leis sukurti individus, jei ne visiškai, tai iš esmės atsparius daugumai kenksmingų veiksnių.
Vidaus ir užsienio gyvulininkystės patirtis rodo, kad ūkiuose ir paukštynuose labiau paplitusios ne labai užkrečiamos ligos, o tokios užkrečiamos ir neužkrečiamos ligos, kuris gali atsirasti sumažėjus bandos natūralaus atsparumo lygiui.
Svarbus rezervas didinant produktų gamybą ir gerinant jų kokybę yra sergamumo ir atliekų mažinimas. Tai įmanoma didinant bendrą organizmo atsparumą, parenkant asmenis, atsparius įvairioms ligoms.
Natūralaus atsparumo didinimo problema yra glaudžiai susijusi su genetinių polinkių naudojimu, kelia didelį mokslinį susidomėjimą ir turi didelę ekonominę reikšmę. Gyvūnų imunizacija ir jų genetinis atsparumas turi papildyti vienas kitą.
Atsparumo kai kurioms ligoms veisimas atskirai gali būti efektyvus, tačiau veisimas atsparumui kelioms ligoms vienu metu lygiagrečiai su veisimu pagal produktyvumo požymius praktiškai neįmanomas. Remiantis tuo, būtina atranka, siekiant padidinti bendrą natūralaus organizmo atsparumo lygį. Yra daug pavyzdžių, kai vienpusė atranka siekiant produktyvumo, neatsižvelgiant į natūralų atsparumą, lėmė ankstyvą skerdimą ir vertingų linijų bei šeimų praradimą.
Gyvūnų ir paukščių kūrimas su aukštas lygis natūralus atsparumas reikalauja specialių veisimo ir genetinių programų, kuriose didelis dėmesys turėtų būti skiriamas tokiems klausimams kaip paukščių, kuriems būdingas padidėjęs natūralus atsparumas, fenotipo ir genotipo nustatymas, atsparumo požymio paveldimumo tyrimas, natūralaus atsparumo požymių ryšio nustatymas. ir ekonomiškai naudingų savybių, natūralaus atsparumo savybių atsparumo panaudojimas selekcijos metu. Tuo pačiu natūralaus atsparumo lygis visų pirma turėtų atspindėti organizmo gebėjimą atlaikyti nepalankius aplinkos veiksnius ir parodyti organizmo apsauginių jėgų rezervą.
Natūralaus atsparumo lygio kontrolė gali būti planuojama augimo ir produktyvumo laikotarpiais, atsižvelgiant į ūkyje pritaikytas technologijas, arba priverstinai prieš diegiant technologinius metodus: naujos įrangos įdiegimą, gyvulių ir paukščių perkėlimą iš vieno. laikymo kitam sąlygos, skiepijimas, ribotas šėrimas, naujų naudojimas pašarų priedai ir tt Tai leis laiku nustatyti neigiamos pusės veiklai ir užkirsti kelią produktyvumo mažėjimui, sumažinti skerdimo ir mirtingumo procentą.
Visi gyvūnų ir naminių paukščių natūralaus atsparumo nustatymo duomenys turi būti lyginami su kitais augimo ir vystymosi stebėjimo rodikliais, kurie gaunami veterinarijos laboratorijoje.
Natūralaus atsparumo lygio stebėjimas turėtų padėti nustatyti planuojamus gyvulių saugos skaičius ir laiku numatyti esamų pažeidimų priemones.
Natūralaus atsparumo lygio tyrimai leidžia atrankos laikotarpiu atrinkti labai produktyvius individus, kurie tuo pačiu metu pasižymi dideliu atsparumu normalios funkcijos fiziologinės sistemos.
Planiniai natūralaus atsparumo lygio tyrimai turi būti atliekami toje pačioje grupėje tam tikrais kalendoriniais laikotarpiais, susijusiais su medžiagų apykaitos procesų stresu tam tikrais produktyvumo laikotarpiais. skirtingi laikotarpiai produktyvumas, augimo laikotarpiai).
Natūralus atsparumas – tai viso organizmo reakcija, kurią reguliuoja centrinis nervų sistema. Todėl, norint spręsti apie natūralaus atsparumo laipsnį, reikėtų naudoti kriterijus ir testus, atspindinčius viso organizmo reaktyvumo būklę.
Imuninės sistemos funkcijų specifiškumą lemia svetimų medžiagų, antigenų indukuojami procesai, grindžiami pastarųjų atpažinimu. Tačiau specifinių imuninių procesų diegimo pagrindas yra senesnės reakcijos, susijusios su uždegimu. Kadangi jie jau egzistuoja bet kuriame organizme prieš prasidedant bet kokiai agresijai ir jų vystymuisi nereikia sukurti imuninio atsako, gynybos mechanizmai vadinamas natūraliu arba įgimtu. Jie yra pirmoji gynybos linija nuo biologinės agresijos. Antroji gynybos linija yra adaptyvusis imuninis atsakas – antigenui specifinis imuninis atsakas. Patys natūralūs imuniteto faktoriai gana efektyviai užkerta kelią biologinei agresijai ir su ja kovoja, tačiau aukštesniųjų gyvūnų organizme šie mechanizmai dažniausiai yra praturtinti specifiniais komponentais, kurie tarsi sluoksniuojasi ant jų. Sistema gamtos veiksniai imunitetas yra riba tarp faktinio Imuninė sistema ir patofiziologijos sritis, kurioje taip pat atsižvelgiama į daugelio natūralaus imuniteto apraiškų, kurios yra neatsiejama uždegiminio atsako sudedamoji dalis, mechanizmai ir biologinė reikšmė.
Tai yra, kartu su imunologiniu reaktyvumu organizme egzistuoja nespecifinės gynybos arba nespecifinio atsparumo sistema. Nepaisant to, kad nespecifinį gyvūnų ir naminių paukščių atsparumą įvairiems neigiamiems aplinkos poveikiams didžiąja dalimi užtikrina organizmo leukocitų sistema, tai priklauso ne tiek nuo leukocitų skaičiaus, kiek nuo jų nespecifinių apsauginių faktorių, kurie yra organizme. kūną nuo pirmos gyvenimo dienos ir išlieka iki mirties. Jį sudaro šie komponentai: odos ir gleivinių nepralaidumas; skrandžio turinio rūgštingumas; kraujo serume ir kūno skysčiuose yra baktericidinių medžiagų – lizocimo, propedino (išrūgų baltymų, M+ jonų ir komplemento komplekso), taip pat fermentų ir antivirusinių medžiagų (interferono, karščiui atsparių inhibitorių).
Pirmieji į kovą įtraukiami nespecifiniai gynybos veiksniai, kai į organizmą patenka svetimi antigenai. Jie tarsi paruošia dirvą tolesniam imuninių reakcijų, lemiančių kovos baigtį, vystymuisi.
Natūralų gyvūnų atsparumą įvairiems neigiamiems aplinkos poveikiams užtikrina nespecifiniai apsauginiai faktoriai, kurie organizme yra nuo pirmos gyvenimo dienos ir išlieka iki mirties. Tarp jų lemiamą vaidmenį atlieka fagocitozė su apsauginiais ląstelių mechanizmais ir humoralinio atsparumo faktoriais, iš kurių svarbiausi yra lizocimas ir baktericidiniai veiksniai. Tai yra, ypatingą vietą tarp apsauginių faktorių užima fagocitai (makrofagai ir polimorfonukleariniai leukocitai) ir kraujo baltymų sistema, vadinama komplementu. Jie gali būti klasifikuojami kaip nespecifiniai ir imunoreaktyvūs apsauginiai faktoriai.
Gyvūnų ir naminių paukščių nespecifinio imuniteto faktorių pokyčiai turi su amžiumi susijusių ypatybių, ypač su amžiumi, humoralinių daugėja, o ląstelinių mažėja.
Humoriniai nespecifinio atsparumo veiksniai užtikrina baktericidinį ir bakteriostatinį audinių ir organizmo sulčių poveikį bei sukelia tam tikrų mikroorganizmų rūšių lizę. Gyvo organizmo apsauginių savybių pasireiškimo nuo mikrobinio agento laipsnį gerai iliustruoja bendras kraujo serumo baktericidinis aktyvumas. Baktericidinis kraujo serumo aktyvumas yra neatskiriamas visų esamų antimikrobinių medžiagų antimikrobinio aktyvumo rodiklis, tiek karščiui labilių (komplementas, propedinas, normalūs antikūnai), tiek karščiui stabilių (lizocimas, beta-lizinas) principu.
Tarp natūralaus organizmo imuniteto veiksnių yra lizocimas – universalus, senovinis apsauginis fermentas, plačiai paplitęs augalų ir gyvūnų pasaulyje. Lizocimas ypač paplitęs gyvūnų ir žmonių organizme: kraujo serume, virškinimo liaukų išskyrose ir. kvėpavimo takai, pienas, ašarų skystis, gimdos kaklelis, kepenys, blužnis, paukščių kiaušiniai.
Lizocimas yra bazinis baltymas, kurio molekulinė masė yra 14-15 tūkst. Jo molekulę sudaro viena polipeptidinė grandinė, susidedanti iš 129 aminorūgščių liekanų ir turinti 4 disulfidines jungtis. Gyvūnų lizocimą sintetina ir išskiria granulocitai, monocitai ir makrofagai.
Lizocimas kraujo serume atlieka bent dvejopą vaidmenį. Pirma, jis turi antimikrobinį poveikį platus ratas saprofitiniai mikrobai, naikinantys ląstelių sienelėse esančias mukoproteinines medžiagas. Antra, neatmetama galimybė dalyvauti įgytose imuninėse reakcijose. Beta-lizinas turi savybę sunaikinti bakterines ląsteles, kai jį aktyvuoja komplementas.
Šis fermentas turi pagrindines baltymo savybes ir sukelia greitą kai kurių bakterijų tipų gyvų ląstelių lizę. Jo veikimas išreiškiamas tam jautrių mikroorganizmų specifinių mukopolisacharidinių lukštų ištirpinimu arba jų augimo slopinimu. Be to, lizocimas naikina daugeliui kitų rūšių priklausančias bakterijas, bet nesukelia jų lizės.
Lizocimas yra granulocituose ir dėl net minimalaus ląstelių pažeidimo aktyvioje formoje išsiskiria į leukocitus supančią skystą aplinką. Šiuo atžvilgiu neatsitiktinai šis fermentas priskiriamas prie medžiagų, lemiančių natūralų ir įgytą organizmo imunitetą infekcijai.
Komplemento sistema yra sudėtingas baltymų kompleksas, daugiausia pateikiamas β-globulino frakcijoje, numeracija, įskaitant reguliavimo, apie 20 komponentų, kurie sudaro 10% kraujo serumo baltymų ir yra kaskadiškai veikiančių peptidų hidrolazių sistema. Komplemento komponentų katabolizmas yra didžiausias, palyginti su kitais serumo baltymais, per dieną atnaujinama iki 50% sistemos baltymų.
Atsižvelgiant į tai, kaip sudėtingi serumo baltymai yra komplemento sistemoje, nenuostabu, kad prireikė maždaug 70 metų, kol buvo nustatyta, kad komplementas susideda iš 9 komponentų, o juos savo ruožtu galima suskirstyti į 11 nepriklausomų baltymų.
Komplementą pirmą kartą aprašė Buchneris 1889 m. Pavadinimu „aleksinas“ tai yra termolabilis faktorius, kuriam esant stebima mikrobų lizė. Komplementas gavo savo pavadinimą dėl to, kad jis papildo (papildo) ir sustiprina antikūnų ir fagocitų veikimą, apsaugodamas žmogaus ir gyvūnų organizmą nuo daugumos bakterinių infekcijų. 1896 m. Borde'as pirmasis nustatė, kad komplementas yra šviežiame serume esantis faktorius, būtinas bakterijų ir raudonųjų kraujo kūnelių lizei. Šis veiksnys nepasikeitė po pirminės gyvūno imunizacijos, kuri leido aiškiai atskirti komplementą nuo antikūnų. Kadangi greitai buvo suprasta, kad komplementas nėra vienintelė funkcinė serumo medžiaga, visas dėmesys buvo nukreiptas į jo gebėjimą stimuliuoti nepažeistų ląstelių lizę; komplementas buvo pradėtas vertinti beveik išimtinai atsižvelgiant į jo gebėjimą paveikti ląstelių lizę.
Komplemento tyrimas ląstelių lizės stadijų kinetinės analizės aspektu leido gauti tikslius duomenis apie nuoseklią komplemento komponentų sąveiką ir svarbius komplemento sistemos daugiakomponentiškumo įrodymus. Šių veiksnių nustatymas parodė, kad komplementas yra svarbus uždegiminio proceso tarpininkas.
Komplementas yra svarbiausias visos įgytų ir normalių antikūnų sistemos aktyvatorius, kurių nesant imuninės reakcijos (hemolizė, bakteriolizė ir iš dalies agliutinacijos reakcija) yra neveiksmingi. Komplementas yra kaskadiškai veikiančių peptidinių hidrolazių sistema, žymima nuo C1 iki C9. Nusprendė, kad dauguma Komponentą sintetina hepatocitai ir kitos kepenų ląstelės (apie 90%, C3, C6, C8, B faktorius ir kt.), taip pat monocitai – makrofagai (C1, C2, C3, C4, C5).
Įvairūs komplemento komponentai ir jų fragmentai, susidarantys aktyvacijos proceso metu, gali sukelti uždegiminius procesus, ląstelių lizę, skatinti fagocitozę. Galutinis rezultatas gali būti C5, C6, C7, C8 ir C9 komponentų komplekso surinkimas, kuris atakuoja membraną, formuoja joje kanalus ir padidina membranos pralaidumą vandeniui ir jonams, o tai sukelia ląstelių mirtį.
Komplemento aktyvinimas gali vykti dviem pagrindiniais būdais: alternatyviuoju – nedalyvaujant antikūnams ir klasikiniu – dalyvaujant antikūnams.
Baktericidiniai veiksniai yra glaudžiai susiję vienas su kitu, o vieno iš jų serumo atėmimas sukelia kitų turinio pokyčius.
Taigi, komplementas kartu su antikūnais ar kitomis jautrinančiomis medžiagomis gali sunaikinti kai kurias bakterijas (pvz., Vibrio, Salmonella, Shigella, Escherichia), pažeisdamas ląstelės sienelę. Muschel ir Treffers parodė, kad baktericidinė reakcija S. Typhi – jūrų kiaulytė C’ – triušio arba žmogaus antikūnai“ kai kuriais atžvilgiais primena hemolizinės reakcijos sistemą: Md++ sustiprina baktericidinį aktyvumą; baktericidinio veikimo kreivės yra panašios į hemolizinės reakcijos kreives; tarp antikūnų ir komplemento baktericidinio aktyvumo yra atvirkštinis ryšys; Norint sunaikinti vieną bakterijos ląstelę, reikia labai mažo antikūnų kiekio.
Norint, kad bakterijų ląstelės sienelės būtų pažeistos ar pakitusios, būtinas lizocimas, o šis fermentas bakterijas veikia tik po to, kai jos buvo gydomos antikūnais ir komplementu. Įprastame serume yra pakankamai lizocimo, kad pakenktų bakterijoms, tačiau pašalinus lizocimą, pažeidimo nepastebėta. Pridėjus kristalinio kiaušinio baltymo lizocimo, atkuriamas antikūnų komplemento sistemos bakteriolitinis aktyvumas.
Be to, lizocimas pagreitina ir sustiprina baktericidinį poveikį. Šie stebėjimai gali būti paaiškinti remiantis prielaida, kad antikūnas ir komplementas liečiasi su membrana bakterinė ląstelė, atskleiskite substratą, kurį veikia lizocimas.
Reaguojant į patogeninių mikrobų patekimą į kraują, padidėja leukocitų skaičius, o tai vadinama leukocitoze. Pagrindinė leukocitų funkcija yra sunaikinti patogenus. Neutrofilai, kurie sudaro didžiąją dalį leukocitų, turi ameboidinius judesius ir gali judėti. Susilietus su mikrobais šios didelės ląstelės juos užfiksuoja, įsiurbia į protoplazmą, virškina ir sunaikina. Neutrofilai fiksuoja ne tik gyvas, bet ir negyvas bakterijas, sunaikintų audinių liekanas ir svetimkūniai. Limfocitai taip pat dalyvauja atkūrimo procesai po audinių uždegimo. Vienas baltasis kraujo kūnelis gali sunaikinti daugiau nei 15 bakterijų ir kartais žūva. Tai yra, poreikis nustatyti leukocitų fagocitinį aktyvumą kaip organizmo atsparumo rodiklį yra akivaizdus ir nereikalauja pagrindimo.
Fagocitozė yra ypatinga endocitozės forma, kurios metu sugeriamos didelės dalelės. Fagocitozę vykdo tik specifinės ląstelės (neutrofilai ir makrofagai). Fagocitozė yra vienas iš ankstyviausių žmogaus gynybos mechanizmų ir įvairių tipų gyvūnų iš daugelio išorinių poveikių. Priešingai nei tiriant kitas veiksmingas neutrofilų funkcijas, fagocitozės tyrimai tapo tradiciniais. Kaip žinoma, fagocitozė yra daugiafaktorinis ir daugiapakopis procesas, o kiekvienam jo etapui būdingas sudėtingų biocheminių procesų kaskados vystymasis.
Fagocitozės procesas skirstomas į 4 etapus: priartėjimas prie fagocituojamo objekto, dalelių kontaktas ir sukibimas su leukocitų paviršiumi, dalelių įsisavinimas ir jų virškinimas.
Pirmas etapas: leukocitų gebėjimas migruoti link fagocituojamo objekto priklauso ir nuo paties objekto chemotaktinių savybių, ir nuo kraujo plazmos chemotaktinių savybių. Chemotaksė yra judėjimas tam tikra kryptimi. Todėl būtent chemotaksė yra tam tikra neutrofilų įtraukimo į imuninę homeostazę garantija. Chemotaksė apima mažiausiai dvi fazes:
1. Orientacijos fazė, kurios metu ląstelės arba pailgėja, arba susidaro pseudopodijos. Apie 90% ląstelių per kelias sekundes yra nukreiptos tam tikra kryptimi.
2. Poliarizacijos fazė, kurios metu vyksta ligando ir receptoriaus sąveika. Be to, vienodas atsakas į skirtingo pobūdžio chemotaktinius veiksnius leidžia manyti, kad šie gebėjimai yra universalūs, kurie, matyt, yra neutrofilų sąveikos su išorine aplinka pagrindas.
Antrasis etapas: dalelių sukibimas su leukocitų paviršiumi. Leukocitai reaguoja į dalelių sukibimą ir gaudymą padidindami metabolinio aktyvumo lygį. Tris kartus padidėja O2 ir gliukozės absorbcija, padidėja aerobinės ir anaerobinės glikolizės intensyvumas. Ši metabolinė būsena fagocitozės metu vadinama „metaboliniu sprogimu“. Jį lydi neutrofilų degranuliacija. Egzocinozės būdu granulių turinys patenka į tarpląstelinę aplinką. Tačiau neutrofilų degranuliacija fagocitozės metu yra visiškai tvarkingas procesas: pirmiausia specifinės granulės susilieja su išorine ląstelės membrana, o tik tada azurofilinės granulės. Taigi, fagocitozė prasideda nuo egzocitozės - baktericidinių baltymų ir rūgščių hidrolazių, dalyvaujančių imuninių kompleksų rezorbcijoje ir ekstraląstelinių bakterijų neutralizavime, avariniu išskyrimu į išorinę aplinką.
Trečias etapas: po dalelių kontakto ir sukibimo su fagocito paviršiumi, seka jų absorbcija. Fagocituota dalelė patenka į neutrofilų citoplazmą dėl išorinės ląstelės membranos invaginacijos. Invaginuota membranos dalis su uždara dalele yra atskiriama, todėl susidaro vakuolė arba fagosoma. Šis procesas gali vykti vienu metu keliose leukocitų ląstelės paviršiaus srityse. Lizosomų granulių membranų ir fagocitinės vakuolės kontaktinė lizė ir susiliejimas lemia fagolizosomos susidarymą ir baktericidinių baltymų bei fermentų patekimą į vakuolę.
Ketvirtasis etapas: tarpląstelinis irimas (virškinimas). Fagocitinės vakuolės, susidarančios ląstelės membranos išsikišimo ir raištelių metu, susilieja su granulėmis, esančiomis citoplazmoje. Dėl to atsiranda virškinimo vakuolės, užpildytos granulių ir fagocituotų dalelių turiniu. Per pirmąsias tris minutes po fagocitozės bakterijų pripildytose vakuolėse palaikomas neutralus pH, kuris yra optimalus fermentų, specifinių granulių – lizocimo, laktoferino ir šarminės fosfatazės – veikimui. Tada pH vertė nukrenta iki 4, todėl yra optimalus azurofilinių granulių fermentų - mieloperoksidazės ir vandenyje tirpių rūgščių hidrolazių - veikimo.
Gyvų objektų sunaikinimas arba baigta fagocitozė turėtų būti laikomas galutiniu reiškiniu, kuriame sutelkta daug ląstelės efektorinio potencialo grandžių. Esminis žingsnis tiriant fagocitų antimikrobines savybes buvo idėjos, kad bakterijų žudymas (žudikų efektas) neturi nieko bendra su negyvų objektų – žuvusių mikrobų, jų pačių audinių fragmentų – skilimu (virškinimu). ląstelės ir kt. Tai palengvina naujų baktericidinių faktorių ir sistemų atradimas, jų citotoksiškumo mechanizmai ir ryšio su fagocitinėmis reakcijomis metodai. Reaktyvumo požiūriu visus baktericidinius neutrofilų veiksnius galima suskirstyti į 2 grupes.
Pirmasis apima komponentus, suformuotus brandžiame neutrofilyje. Jų lygis nepriklauso nuo ląstelių stimuliacijos, o visiškai priklauso nuo granulopoezės proceso metu susintetintos medžiagos kiekio. Tai apima lizocimą, kai kuriuos proteolitinius fermentus, laktoferiną, katijoninius baltymus ir mažos molekulinės masės peptidus, vadinamus „defensinais“ (iš anglų kalbos apibrėžimo – apsauga). Jie lizuoja (lizocimas), naikina (katijoniniai baltymai) arba slopina bakterijų augimą (laktoferinas). Jų vaidmenį antimikrobinėje gynyboje patvirtina stebėjimai, atlikti esant anaerobiniam režimui: neutrofilai, netekę galimybės panaudoti baktericidines aktyvinto deguonies savybes, paprastai žūva mikroorganizmai.
Stimuliuojant neutrofilus susidaro arba smarkiai suaktyvėja antrosios grupės faktoriai. Kuo intensyvesnė ląstelių reakcija, tuo didesnis jų kiekis. Padidėjęs oksidacinis metabolizmas lemia deguonies radikalų susidarymą, kurie kartu su vandenilio peroksidu, mieloperoksidaze ir halogenais sudaro nuo deguonies priklausomo citotoksiškumo aparato efektorinę grandį. Būtų neteisinga supriešinti įvairius antimikrobinius veiksnius. Jų veiksmingumas labai priklauso nuo abipusės pusiausvyros, fagocitozės atsiradimo sąlygų ir mikrobo tipo. Pavyzdžiui, aišku, kad anaerobinėje aplinkoje išryškėja nuo deguonies nepriklausomi biocidiniai momentai. Jie sunaikina daugybę bakterijų, tačiau net viena atspari virulentiška padermė gali atskleisti gedimą panašią sistemą. Antimikrobinis potencialas susideda iš vienas kitą papildančių, dažnai vienas kitą kompensuojančių sąveikų, užtikrinančių maksimalų baktericidinių reakcijų efektyvumą, sumos. Atskirų jo grandžių pažeidimas silpnina neutrofilus, bet nereiškia visiško bejėgiškumo saugantis nuo infekcinių ligų sukėlėjų.
Todėl mūsų supratimo apie granulocitus, ypač apie neutrofilus, transformacija pastaraisiais metais labai pasikeitė, o šiandien – nevienalytiškumas. funkcionalumą Neutrofilai vargu ar suteikia pagrindo juos klasifikuoti kaip žinomas ląsteles, susijusias su įvairių formų imunologinis atsakas. Tai patvirtina tiek didžiulis neutrofilų funkcinių galimybių spektras, tiek jų įtakos mastas.
Didelio susidomėjimo kelia natūralaus atsparumo pokyčiai, priklausantys nuo įvairių veiksnių.
Vienas iš svarbiausių natūralaus organizmo stabilumo problemos aspektų yra su amžiumi susijusių jo savybių tyrimas. Reaktyviosios savybės augančiame organizme vystosi palaipsniui ir galutinai susiformuoja tik esant tam tikram bendro fiziologinio brendimo lygiui. Todėl jauni ir suaugę organizmai turi skirtingą jautrumą ligoms ir skirtingai reaguoja į patogeninių sukėlėjų poveikį.
Daugumos žinduolių postnataliniam vystymosi laikotarpiui būdinga sumažėjusio kūno reaktyvumo būsena, išreikšta visišku nespecifinių humoralinių veiksnių nebuvimu arba silpnu pasireiškimu. Šiam laikotarpiui taip pat būdingas neadekvatus uždegiminis atsakas ir ribotas specifinių humoralinių apsauginių faktorių pasireiškimas. Gyvūnams vystantis, jų reaktyvumas pamažu tampa sudėtingesnis ir gerėja, o tai siejama su liaukų vystymusi vidinė sekrecija, tam tikro lygio medžiagų apykaitos formavimas, apsauginių priemonių nuo infekcijų, apsinuodijimų tobulinimas ir pan.
Ląstelių gynybos veiksniai gyvūno organizme atsiranda anksčiau nei humoraliniai. Veršeliams ląstelinė apsauginė organizmo funkcija ryškiausia pirmosiomis dienomis po gimimo. Vyresniame amžiuje fagocitozės laipsnis palaipsniui didėja, kai opson-fagocitinis indikatorius svyruoja aukštyn arba žemyn, priklausomai nuo sulaikymo sąlygų. Perėjus nuo pieninių pašarų prie augalinių pašarų, sumažėja leukocitų fagocitinis aktyvumas. Veršelių vakcinacija pirmosiomis gyvenimo dienomis padidina fagocitozės aktyvumą.
Be to, veršelių, atsivestų iš neimunizuotų karvių, leukocitų fagocitinis aktyvumas yra 5 kartus mažesnis nei veršelių, atsivestų iš karvių, imunizuotų paratifoidiniu antigenu. Priešpienio šėrimas taip pat padidino baltųjų kraujo kūnelių aktyvumą.
Fagocitinės reakcijos veršeliams didėja iki 5 dienų amžiaus, vėliau 10 dienų amžiaus pradeda smarkiai mažėti. Dauguma mažas našumas fagocitozė stebima sulaukus 20 dienų. Leukocitų fagocitinis aktyvumas šiuo laikotarpiu net mažesnis nei vienadienių veršelių. Nuo 30 dienų amžiaus jis stebimas laipsniškas didėjimas leukocitų fagocitinis aktyvumas ir jų mikroorganizmų absorbcijos intensyvumas. Didžiausią vertę šie rodikliai pasiekia sulaukus 6 mėnesių. Vėliau fagocitozės rodikliai keičiasi, tačiau jų reikšmės išlieka beveik 6 mėnesių amžiaus. Vadinasi, ląstelių faktoriaiŠiame amžiuje veršelių apsauga jau yra visiškai susiformavusi jų kūne.
Naujagimiams veršeliams normalių Gärtner antigeno agliutininų nėra ir jie atsiranda tik 2...2,5 mėnesio amžiaus. Veršeliai, paskiepyti pirmosiomis gyvenimo dienomis paratifo vakcina, negamina antikūnų. Agliutininai prie šio antigeno atsiranda tik 10...12 dienų amžiaus ir susidaro žemu titru iki 1,5 mėn. Per pirmąsias 3...7 veršelių gyvenimo dienas jie yra silpnai išreikšti ir pasiekia suaugusių gyvulių lygį tik 2 mėnesių amžiaus.
Mažiausias baktericidinio aktyvumo lygis veršelių kraujo serume stebimas naujagimiams prieš gaunant priešpienį. 3 dieną po gimimo padidėja kraujo serumo baktericidinis aktyvumas, o 2 mėnesių amžiaus jis praktiškai pasiekia suaugusių gyvūnų lygį.
Naujagimiams veršeliams prieš šėrimą priešpieniu lizocimas neaptinkamas. Išgėrus priešpienio atsiranda lizocimo, tačiau iki 10 dienos jo sumažėja beveik perpus. Tačiau iki vieno mėnesio amžiaus lizocimo titras palaipsniui vėl didėja. Iki to laiko veršeliai jau gali savarankiškai gaminti lizocimą. 2 mėnesių amžiaus lizocimo titras pasiekia didžiausią vertę, tada iki 6 mėnesių jo kiekis išlaikomas maždaug tokiame pačiame lygyje, o vėliau titras vėl sumažėja sulaukus 12 mėnesių.
Kaip matyti, per pirmąsias 10 veršelių gyvenimo dienų didelis leukocitų gebėjimas fagocitozei kompensuoja kraujo serumo baktericidinio aktyvumo trūkumą. Vėlesniais laikais kraujo serumo baktericidinio aktyvumo pokyčiai būna banguoti, matyt, tai susiję su sulaikymo sąlygomis ir metų laikais.
Pirmąją gyvenimo dieną ėriukų fagocitinis indeksas yra gana aukštas, o sulaukus 15 dienų jis smarkiai sumažėja, vėliau vėl didėja ir pasiekia maksimumą 2 mėnesių amžiaus arba šiek tiek vėliau.
Taip pat gana išsamiai ištirta su amžiumi susijusi ėriukų organizmo natūralaus atsparumo humoralinių veiksnių dinamika. Taigi pirmosiomis gyvenimo dienomis jų natūralaus atsparumo rodikliai sumažėjo. Gebėjimas gaminti antikūnus pasireiškia 14...16 dienų amžiaus ir pasiekia suaugusių gyvūnų imunologinio reaktyvumo lygį 40...60 dienų. Pirmosiomis ėriukų gyvenimo dienomis mikrobų slopinimas sąlytyje su kraujo serumu būna silpnai išreikštas 10...15 dienų amžiaus, serumo baktericidinis aktyvumas šiek tiek padidėja ir 40...60 dienų pasiekia lygį; būdingas suaugusioms avims.
Paršeliams nuo gimimo iki 6 mėnesių amžiaus taip pat stebimas tam tikras ląstelių ir humoralinių apsaugos faktorių rodiklių pokyčių modelis.
Mažiausias paršelių fagocitozės dažnis stebimas 10 dienų amžiaus, vėliau, iki 6 mėnesių amžiaus, laipsniškas padidėjimas. Tai reiškia, kad iki 10 dienų amžiaus paršeliams smarkiai sumažėja visi fagocitozės rodikliai. Labiausiai ryškus fagocitozės pasireiškimas stebimas 15 dienų amžiaus paršeliams. Anksti nujunkytų ir dirbtinai šertų paršelių fagocitinio indekso reikšmės yra mažesnės nei po paršavede šertų paršelių, nors ankstyvas nujunkymas neturėjo įtakos jų augimui.
Mažiausias opsono-fagocitinės reakcijos dažnis stebimas sulaukus 20 dienų. Šiuo laikotarpiu mažėja ne tik leukocitų fagocitinis aktyvumas, bet ir jų skaičius 1 mm3 kraujo (fagocitinis pajėgumas). Staigus fagocitozės dažnio sumažėjimas, matyt, yra susijęs su antikūnų, skatinančių fagocitozę su priešpieniu, tiekimo nutraukimu. Nuo 20 dienų leukocitų fagocitinis aktyvumas palaipsniui didėja ir pasiekia maksimumą sulaukus 4 mėnesių amžiaus.
Papildomas paršelių aktyvumas pradedamas aptikti tik 5 dienų amžiaus ir, palaipsniui didėjant, iki 2...3 gyvenimo mėnesio pasiekia suaugusių gyvūnų lygį.
Aukšto titro susidarymas išrūgų baltymai paršeliams pasireiškia nepriklausomai nuo paršavedžių vakcinacijos, iki ketvirtos gyvenimo savaitės pabaigos. Baktericidinės savybės paršelių kraujas ryškiausias trečią gyvenimo savaitę.
2 dienų amžiaus paršeliai turi gerai išreikštą kraujo serumo gebėjimą slopinti tiriamųjų mikrobų augimą.
Iki 10 dienų smarkiai sumažėja serumo baktericidinis gebėjimas. Tuo pačiu metu sumažėja ne tik serumo mikrobų augimo slopinimo intensyvumas, bet ir jo veikimo trukmė. Vėliau, didėjant gyvūnų amžiui, padidėja kraujo serumo baktericidinis aktyvumas.
Vadinasi, jauni gyvūnai pirmąsias 3...4 gyvenimo dienas pasižymi silpna imunine branda, jų natūralus atsparumas neigiamam aplinkos veiksnių poveikiui yra mažas, o tai siejama su dideliu sergamumu ir mirtingumu šiuo laikotarpiu.
Naminiams paukščiams ankstyvam vystymosi laikotarpiui (60 dienų) būdingas silpnas nespecifinio organizmo imuniteto humoralinių veiksnių pasireiškimas. Priešingai nei šie rodikliai, ankstyvoje ontogenezės stadijoje paukščio kūne yra daug lizocimo. Kalbant apie ląstelių apsauginius veiksnius, šie rodikliai yra gana aukšti.
Jaunatvinio lydymosi ir organizmo brendimo laikotarpiu kiekvienas specifinis natūralaus organizmo atsparumo rodiklis turi savo individualią kitimo dinamiką. Taigi, kraujo redokso funkcija ir toliau nuolat didėja. 150 dienų amžiaus pakaitinių jaunų gyvūnų kraujo serumo papildomas aktyvumas žymiai padidėja. Lizocimo kiekis kraujo serume turi aiškią tendenciją mažėti. Baktericidinis kraujo serumo aktyvumas šiame naminių paukščių poembrioninio vystymosi etape žymiai padidėja ir viršija 60 dienų amžiaus viščiukų lygį. Paukščių brendimo laikotarpis pasižymėjo nežymiu pseudoeozinofilinių granulocitų fagocitų intensyvumo sumažėjimu ir fagocitinių pseudoeozinofilinių granulocitų procento padidėjimu.
Trečiąjį tyrimo laikotarpį, palyginti su pirmuoju ir antruoju, daugiausia lemia paukščio kiaušinėlių gamyba. Prasidėjus kiaušialąstėms ir vėlesniam jo padidėjimui, žymiai sumažėja kraujo redokso funkcija. Papildomas kraujo serumo aktyvumas didėja didėjant kiaušinėlių gamybai, o didžiausias jo kiekis užfiksuotas sulaukus 210-300 dienų, o tai atitiko kiaušinių padėjimo piką. Baktericidinis aktyvumas linkęs didėti kiaušialąsčių atsiradimo pradžioje iki maksimumo, o vėliau mažėja. Tai, matyt, siejama su intensyvesne kiaušinėlius formuojančių organų veikla. Padidėjus kiaušialąsčių kiekiui, fagocitų intensyvumas ir fagocitinių pseudoeozinofilinių granulocitų procentas suaugusiems paukščiams didėja, palyginti su jauniklių. Taigi galime teigti, kad naminių paukščių natūralaus atsparumo rodikliai didelę įtaką daro įtaką jų produktyvumo lygiui; kuo didesnis produktyvumas, tuo intensyvesni nespecifiniai organizmo apsauginiai faktoriai.
Natūralaus organizmo pasipriešinimo samprata
Nespecifiniai anatominiai ir fiziologiniai veiksniai bei labai specializuota imuninė sistema dalyvauja organizmo antiinfekcinėje gynyboje. Imuninė sistema, kuri antikūnų ir įjautrintų ląstelių (limfocitų, makrofagų) pagalba veikia prieš infekcinės ligos sukėlėją ar kitą svetimą medžiagą (antigeną), veiksmingiau užtikrina antiinfekcinę apsaugą. Tačiau organizmo atsparumas ir apsauga nuo ligų sukėlėjų priklauso ne tik nuo specifinių imuninio atsako mechanizmų, bet ir nuo daugelio nespecifinių faktorių bei mechanizmų. Nespecifinės apsauginės reakcijos yra vienintelis veiksnys, neleidžiantis vystytis infekciniam procesui.
Nespecifinį antimikrobinį imunitetą užtikrina šie veiksniai: anatominis ir fiziologinis, humoralinis, ląstelinis.
Atsparumas
Anatominiai ir fiziologiniai natūralaus atsparumo veiksniai:
Odos gleivinės barjerai. Nepažeista oda ir gleivinės yra ne tik mechaninis barjeras mikroorganizmams, bet ir turi savybę daryti žalingą poveikį šiems mikroorganizmams. Baktericidinis odos poveikis siejamas su prakaito išskiriamomis medžiagomis ir riebalinės liaukos, taip pat su odoje esančiomis riebalų rūgštimis. Gleivinės (konjunktyva, nosies gleivinė, burnos gleivinė ir kt.) taip pat turi barjerinių savybių. Baktericidinė medžiaga lizocimas, esantis ašarų skystyje, seilėse, nosies gleivėse, kraujyje, limfoje, piene, vištienos baltymuose ir žuvų ikre, vaidina svarbų vaidmenį apsauginėse odos ir gleivinių savybėse. Lizocimas yra baltyminė medžiaga, kuri stipriai tirpdo mureiną daugelio rūšių bakterijų ląstelių sienelėje. Be tiesioginio antibakterinio aktyvumo, lizocimas turi savybę skatinti fagocitozę.
Be lizocimo, ryškų baktericidinį aktyvumą turi virškinamojo trakto liaukų (seilių, skrandžio sulčių, tulžies) išskyros.
Uždegimas. Patogeniniai mikroorganizmai, įveikę odos ir gleivinės barjerus, pradeda masiškai skverbtis į gilesnius audinius. Užkrėstoje vietoje per trumpą laiką išsivysto uždegiminė reakcija arba uždegimas. Uždegimas yra sudėtinga kraujagyslių ir audinių apsauginė ir prisitaikanti organizmo reakcija, reaguojant į patogeninio dirgiklio veikimą. Uždegimas apsaugo organizmą nuo patogeninių veiksnių poveikio. Uždegiminės reakcijos dėka pažeidimo šaltinis atribojamas nuo viso organizmo, pašalinamas patogeninis veiksnys, padidėja vietinis ir bendras imunitetas. Tačiau tam tikromis sąlygomis uždegimas gali tapti žalingas organizmui (audinių nekrozė, disfunkcija).
Toliau patekdami į audinius ir kraują, mikroorganizmai susiduria su nauju barjeru – limfmazgiais. Jie yra išilgai limfinių kraujagyslių ir atlieka unikalių filtrų, sulaikančių mikrobų ląsteles, vaidmenį.
Jei patogenui pavyksta įveikti šį barjerą, tada makroorganizme pasikeičia medžiagų apykaitos lygis ir tam tikri fiziologiniai procesai. Taigi, sergant daugeliu infekcinių ligų, kūno temperatūra pakyla dėl medžiagų apykaitos ir energijos procesų pokyčių.
Humoraliniai nespecifinio atsparumo veiksniai.
Natūralūs (normalūs) antikūnai. Niekada anksčiau nesirgusių ar imunizuotų gyvūnų kraujyje nedidelėmis koncentracijomis randama medžiagų, kurios gali reaguoti su daugeliu antigenų. Šios medžiagos vadinamos normaliais antikūnais. Vis dar nėra sutarimo dėl normalių antikūnų šaltinių.
Lizinai. Serumo baltymai, galintys ištirpinti kai kurias bakterijas ir raudonuosius kraujo kūnelius. Laktoferinas. Glikoproteinas, turintis geležies surišimo aktyvumą. Tai specifinis liaukų sekrecijos komponentas – seilių, pieno, ašarų, virškinamojo ir urogenitalinio trakto liaukų. Laktoferinas yra veiksnys vietinis imunitetas, apsaugantis epitelio dangtelius nuo mikrobų.
Papildyti. Daugiakomponentė baltymų sistema kraujo serume ir kituose kūno skysčiuose. Komplementas susideda iš devynių komponentų, kurie laisvai cirkuliuoja organizme neaktyvuotų pirmtakų pavidalu ir priklauso kraujo plazmos beta-globulino frakcijai. Komplemento pirmtakų gamintojai yra makrofagai, kaulų čiulpų ląstelės, kepenys, plonoji žarna ir limfmazgiai. Tam tikromis sąlygomis neaktyvuoti komplemento pirmtakai aktyvuojami griežtai apibrėžta tvarka klasikiniu arba alternatyviu būdu.
Iš esmės nėra esminių biocheminių skirtumų tarp klasikinio ir alternatyvaus komplemento aktyvinimo būdų. Tačiau, anot klinikinės apraiškos skirtumai gana dideli. Alternatyviu būdu žymiai padidėja baltymų molekulių, turinčių didelį biologinį aktyvumą, fragmentų kiekis kraujotakoje, siekiant neutralizuoti, kurie sudėtingi mechanizmai aktyvuojami, o tai padidina vangų, dažnai generalizuoto uždegiminio proceso išsivystymo galimybę. Klasikinis būdas yra nekenksmingesnis organizmui. Su juo mikroorganizmus vienu metu veikia fagocitai ir antikūnai, kurie specifiškai suriša mikroorganizmų antigeninius determinantus ir aktyvina komplemento sistemą, taip skatindami fagocitozės aktyvavimą. Šiuo atveju užpulta ląstelė sunaikinama tuo pačiu metu, kai dalyvauja antikūnai, komplementas ir fagocitai, kurie išoriškai gali nepasireikšti. Šiuo atžvilgiu klasikinis komplemento aktyvinimo būdas laikomas labiau fiziologiniu antigenų neutralizavimo ir perdirbimo būdu nei alternatyva.
Interferonas. IF yra baltyminės medžiagos, kurias gamina stuburinių gyvūnų ląstelės, reaguodamos į virusų ir kitų natūralių bei sintetinių induktorių patekimą. Šiuo metu žinoma 14 α-interferonų (α-IF), kuriuos gamina makrofagai ir limfocitai, β-interferonas (β-IF), kurį gamina fibroblastai, ir γ-interferonas (γ-IF), kurį gamina periferinio kraujo T-limfocitai. . Virusinės infekcijos metu infekuotose ląstelėse indukuojama interferono sintezė, kuris vėliau išskiriamas į tarpląstelinę erdvę, kur prisijungia prie gretimų neužkrėstų ląstelių receptorių. Interferono molekulės neturi tiesioginio antivirusinio poveikio, tačiau prisijungusios prie neužkrėstų ląstelių jose sukelia baltymų, turinčių antivirusinį aktyvumą ir ribojančių viruso plitimą iš užkrėsto židinio, sintezę. Dėl medžiagų apykaitos procesų pokyčių IF veikiamoje ląstelėje sutrinka viruso prisirišimas prie ląstelės, slopinama endocitozė, slopinama transkripcija ir transliacija.
Ląstelių natūralaus atsparumo veiksniai
Fagocitų sistema. Fagocitozė yra ypatinga endocitozės forma, kurios metu absorbuojamos didelės dalelės (mikrobai, ląstelės ir kt.). Aukštesniems gyvūnams fagocitozę vykdo tik specifinės ląstelės (neutrofilai ir makrofagai), kurios yra kilusios iš bendros pirmtakės ląstelės ir apsaugo gyvūnus ir žmones nuo infekcijos, apimdamos invazinius mikroorganizmus, taip pat pašalina senas ar pažeistas ląsteles ar ląstelių membranas.
Tarp makrofagų skiriamos judrios (cirkuliuojančios) ir nejudrios (sėdimos) ląstelės. Judrieji makrofagai yra periferinio kraujo monocitai, o nejudrūs makrofagai – tai kepenų, blužnies, limfmazgių makrofagai, išklojantys smulkiųjų kraujagyslių ir kitų organų bei audinių sieneles.
Fagocitų aktyvumas yra susijęs su opsoninų buvimu kraujo serume. Opsoninai yra normalaus kraujo serumo baltymai, kurie jungiasi su mikrobais, todėl pastarieji fagocitams tampa lengviau prieinami.
Skiriama visiška fagocitozė (kai fagocituotų ląstelių mirtis) ir nebaigta fagocitozė (fagocitų viduje esantys mikroorganizmai nemiršta).
Taigi natūralaus gyvų organizmų atsparumo pagrindas yra nespecifinių mechanizmų, kurių dauguma reaguoja į audinių pažeidimus, veikimas. uždegiminės reakcijos. Šiuose mechanizmuose dalyvauja ir ląsteliniai (makrofagai, putliosios ląstelės, neutrofilai ir kt.), ir humoraliniai (komplementas, interferonas, lizocimas ir kt.) faktoriai. Šie veiksniai turi ribotą galimybę atpažinti ir sunaikinti bakterijas, virusus, taip pat tuos, kurie dalyvauja kontroliuojant somatinių ląstelių dauginimosi ir diferenciacijos procesus, saugant organizmą nuo navikų augimo.
Stuburiniams gyvūnams, ypač šiltakraujams, evoliucijos procese tuo pačiu metu staigiai pasikeitė jų dydis, kūno temperatūra, gyvenimo trukmė ir buveinė. Visų pirma, visų buvimas maistinių medžiagų ir pastovi temperatūra (termostatas su pastovia maistine terpe) sukūrė gyvūnams palankiausią aplinką daugybės svetimų mikroorganizmų, įskaitant patogeninius, gyvenimui. Norint apsisaugoti nuo jų, naujų, efektyvesnių imuniniai mechanizmai apsauga. Tai tapo įmanoma, kai aukštesniems gyvūnams atsirado papildoma, pažangiausia limfoidinė imuninė sistema, kurios pagrindiniai elementai yra T ir B limfocitai, pasižymintys specifiškumu ir gebėjimu sukurti ir saugoti imunologinę atmintį apie ligos sukėlėją. ligos ir kiti genetiškai svetimi veiksniai.
1. Vienas iš lemiamų veiksnių, lemiančių infekcijos vystymąsi ir, atitinkamai, užkrečiamos ligos , yra jautrus mikroorganizmas. Mechanizmų rinkinys, lemiantis organizmo imunitetą (atsparumą) bet kokio mikrobinio agento veikimui,žymimas terminu „antimikrobinis (antimikrobinis) atsparumas“. Tai viena iš bendro makroorganizmo fiziologinio reaktyvumo apraiškų, jo reakcijos į specifinį dirgiklį – mikrobinį agentą.
Atsparumas antimikrobinėms medžiagoms yra grynai individualus, jo lygį lemia organizmo genotipas, amžius, gyvenimo ir darbo sąlygos ir kt.
Įvairių nespecifinių apsaugos veiksnių padidėjimą ypač palengvina ankstyvas prisirišimas prie krūties ir žindymas.
Pagal specifiškumąAntimikrobinės apsaugos mechanizmai skirstomi:
- įjungta nespecifinis - pirmasis apsaugos nuo mikrobų lygis;
- konkretus - antrasis imuninės sistemos teikiamos apsaugos lygis. Įgyvendinta tokiu būdu:
Per antikūnus - humoralinis imunitetas;.
Dėl efektorinių ląstelių (T-žudikų ląstelių ir makrofagų) funkcijos - ląstelinis imunitetas.
Pirmasis ir antrasis apsaugos lygiai yra glaudžiai tarpusavyje susiję makrofagai.
Nespecifiniai ir specifiniai antimikrobinės apsaugos mechanizmai gali būti audinių(susijęs su ląstelėmis) ir humoralinis.
2.Nespecifinis mikrobų atsparumas- Tai įgimta makroorganizmo savybė, jeigu perduodamas paveldėjimo būdu daugeliu mechanizmų, kurie skirstomi į šiuos tipus:
- medžiaga;
Humoralinis;
Ekskrecinis (funkcinis).
Nespecifinės natūralios antimikrobinės gynybos audinių mechanizmų linksusieti:
Barjerinė funkcija oda ir gleivinės;
Atsparumas kolonizacijai, kurį užtikrina normali mikroflora;
Uždegimas ir fagocitozė (taip pat gali būti susiję su specifine gynyba);
Limfmazgių barjerų fiksavimo funkcija;
Ląstelių reaktyvumas;
Natūralių žudikų ląstelių funkcija.
Pirmoji kliūtis mikrobams prasiskverbti į vidinę organizmo aplinką yra oda Ir gleivinės. Sveika, nepažeista oda ir gleivinės yra nepralaidžios daugumai mikroorganizmų. Tačiau kai kurių rūšių infekcinių ligų sukėlėjai gali prasiskverbti pro juos. Tokie patogenai vadinami ypač pavojingas, Tai maro, tuliaremijos, juodligės, kai kurių mikozių ir virusinių infekcijų sukėlėjai. Darbas su jais atliekamas su specialiais apsauginiais kostiumais ir tik specialiai įrengtose laboratorijose.
Be grynai mechaninės funkcijos, oda ir gleivinės turi antimikrobinis poveikis - Ant odos patekusios bakterijos (pavyzdžiui, E. coli) gana greitai žūva. Odos ir gleivinių bakteriniškumą užtikrina:
Jo normali mikroflora (atsparumo kolonizacijai funkcija);
Prakaito (pieno rūgšties) ir riebalinių (riebalų rūgščių) liaukų išskyros;
Seilių lizocimas, ašarų skystis ir kt.
Jei patogenas įveikia odos ir gleivinės barjerą, jis patenka į poodinį audinį/pogleivinį sluoksnį, kur realizuojasi vienas iš pagrindinių nespecifinių audinių gynybos mechanizmų yra uždegimas.Dėl uždegimo vystymosi,:
Patogeno dauginimosi šaltinio izoliavimas nuo aplinkinių audinių;
jo vėlavimas injekcijos vietoje;
Reprodukcijos lėtėjimas;
Galiausiai - jo mirtis ir pašalinimas iš kūno.
3. Vystantis uždegimui realizuojama Kitas universalus nespecifinės audinių apsaugos mechanizmas fagocitozė.
Fagocitozės reiškinį atrado ir ištyrė didysis rusų mokslininkas I. I. Mechnikovas.
Šių daugelio metų darbo rezultatas buvo fagocitinė imuniteto teorija, už kurio sukūrimą Mechnikovas buvo apdovanotas Nobelio premija.
Fagocitinis gynybos mechanizmas susideda iš keli iš eilės fazės:
Pripažinimas;
Atrakcija;
Absorbcija;
Nužudymas;
Intraląstelinis virškinimas.
Fagocitozė su visais etapais vadinama baigtas. Jei nevyksta žudymo ir tarpląstelinio virškinimo fazės, atsiranda fagocitozė nebaigtas. Esant nepilnai fagocitozei, mikroorganizmai kaupiasi leukocitų viduje ir kartu su jais pasklinda po visą organizmą. Taigi nepilna fagocitozė, o ne gynybinis mechanizmas, virsta savo priešingybe, padedančia mikroorganizmams apsisaugoti nuo makroorganizmo poveikio ir jame plisti.
Audinių ir humoraliniai nespecifinio atsparumo mechanizmai
1. Limfmazgių barjerinė funkcija
2. Kiti audinių antimikrobinės apsaugos mechanizmai
3. Humoraliniai nespecifinio atsparumo mechanizmai
1. Jei mikroorganizmai prasiskverbia pro uždegiminį barjerą, y., uždegimas kaip nespecifinės apsaugos mechanizmas neveikia patogenai patenka į limfagysles, o iš ten į regioninius limfmazgius. Limfmazgių barjerų fiksavimo funkcijaįgyvendinama taip:
Viena vertus, regioniniai limfmazgiai išlaiko mikroorganizmus grynai mechaniškai;
Kita vertus, jie sustiprina fagocitozę.
2. Į audinių nespecifinės antimikrobinės apsaugos mechanizmus taip pat taikyti ląstelių ir audinių reaktyvumasIrnatūralių žudikų (NK) ląstelių aktyvumas kurie demonstruoja savo savybes, jei ligos sukėlėjas prasiskverbia pro limfinį barjerą ir patenka į kraują.
3. Natūralios nespecifinės antimikrobinės gynybos humoralinių mechanizmų link susieti fermentų sistemos, esančios kraujyje ir kituose kūno skysčiuose:
Papildymo sistema (taip pat gali būti įtraukta į specialią apsaugą). Papildyti - Tai nespecifinė kraujo fermentų sistema, kurią sudaro 9 skirtingos baltymų frakcijos, kurios adsorbuojamos kaskados pridėjimo prie antigeno-antikūno komplekso procese ir turi lizuojantį poveikį antikūnų surištoms frakcijoms. ląstelių antigenai. Komplementas yra nestabilus, sunaikinamas kaitinant, laikant ar veikiant saulės šviesai;
lizocimas - baltymas, randamas kraujyje, seilėse, ašarose ir audinių skystyje. Veikia prieš gramteigiamas bakterijas, nes sutrikdo mureino sintezę bakterijų ląstelės sienelėje;
beta lizinai - aktyvesnis prieš gramneigiamas bakterijas;
leukozės - proteolitiniai fermentai, išsiskiriantys naikinant leukocitus. Jie sutrikdo mikrobinių ląstelių paviršiaus baltymų vientisumą;
interferonas- ląstelių produktas, turintis antivirusinį ir reguliuojantį aktyvumą;
Produkdino sistema- baltymų kompleksas, turintis antivirusinį ir antibakterinį aktyvumą, esant magnio druskoms;
eritrinas.
Į nespecifinės natūralios antimikrobinės apsaugos šalinimo (funkcinius) mechanizmussusieti:
Čiaudėjimas;
Inkstų ir žarnyno ekskrecinė funkcija;
Karščiavimas.
Apsauga nuo mikroorganizmų nėra pagrindinė šių mechanizmų funkcija, tačiau jų indėlis išlaisvinant organizmą nuo jų yra gana didelis.
Visi aukščiau išvardyti natūralios nespecifinės antimikrobinės apsaugos mechanizmai visada aktyvūs prieš bet kokius mikrobų agentus:šių mechanizmų aktyvumas netampa ryškesnis kartojant ar pakartotinai kontaktuojant su mikroorganizmais. Taip nespecifinės antimikrobinės apsaugos mechanizmai skiriasi nuo specifinio antimikrobinio atsparumo mechanizmų, įtrauktų į imunitetas.
Humoralinius nespecifinius apsauginius veiksnius atstovauja įvairūs baltymai ir peptidai, esantys kraujyje ir kūno skysčiuose. Jie patys gali turėti antimikrobinių savybių arba gali suaktyvinti kitus humoralinius ir ląstelinius imuniteto mechanizmus.
1.1.1. Lizocimas (muramidazė) yra lizosomų fermentas, kurio aktyvumas pasireiškia daugiausia gramteigiamų bakterijų ląstelių sienelėse hidrolizuojant poliaminocukrų -1-4-glikozidinį ryšį. Antimikrobinis veikimas lizocimas yra susijęs su jo gebėjimu skaidyti glikozidinius ryšius N-mureino molekulėje (L-acetil-muramo rūgšties ir N-acetilgliukozamino polimeras), kuri yra gramteigiamų ir gramneigiamų mikroorganizmų ląstelės sienelės dalis. Kartu su komplementu ir kai kuriais cheminiais bei fiziniais veiksniais lizocimas taip pat gali lizuoti gramneigiamų mikroorganizmų ląsteles. Sąveikaujant su sekreciniais imunoglobulinais, lizocimas dalyvauja formuojant vietinį imunitetą.
1.1.2. Komplementas – serumo baltymų sistema susideda iš daugiau nei 20 globulino prigimties komponentų ir yra laikoma profermentų kompleksu, kuriam reikalingas nuoseklus aktyvinimas, pradedant nuo pirmojo (klasikinio aktyvavimo kelio), trečiojo ir penktojo komplemento komponentų (alternatyvaus aktyvavimo kelio). Suaktyvintas komplementas, sąveikaujantis su antigeno-antikūno kompleksu, pastarąjį lizuoja. Be citolizės, komplementas dalyvauja anafilaksijoje, imuninėje adhezijoje, kongliutinacijoje, fagocitozėje ir limfocitų antigenų atpažinime.
Fagocitozę suaktyvina komplementas, kai jo komponentai C3 ir C5 dalyvauja chemotaksyje ir C3 traukime (imuninė adhezija). C3 fragmentų receptorių taip pat yra ant B limfocitų, kurie yra visaverčiai antikūnus gaminančių ląstelių pirmtakai pirminiame ir antriniame imuniniame atsake į nuo užkrūčio liaukos priklausomus ir nuo užkrūčio liaukos nepriklausomus antigenus.
1.1.3. Properdinas yra serumo euglobulinas, kuris migruoja tarp - ir -globulinų. Tai suaktyvina alternatyvų komplemento aktyvinimo būdą, naudojant sudėtingą sistemą, kurią sudaro 6 veiksniai. Alternatyvaus kelio aktyvatoriai yra A klasės imunoglobulinai, endotoksinas, zimozanas ir kiti polisacharidai.
Kartu su komplementu propedinas dalyvauja sunaikinant daugiausia gramneigiamas bakterijas, pakitusius raudonuosius kraujo kūnelius, neutralizuojant ir inaktyvuojant kai kuriuos virusus.
1.1.4. C reaktyvusis baltymas (CRP) yra indukuojamas faktorius ir priklauso vadinamųjų ūminės fazės plazmos baltymų grupei. Jis gavo savo pavadinimą dėl savo sugebėjimo prisijungti prie pneumokokinės ląstelės sienelės C-polisacharido. Tai žiedo formos pentameras, susidedantis iš identiškų subvienetų, kurių molekulinė masė 21000 D. Kiekvienas CRP subvienetas turi aktyvius centrus, kurie jungiasi su fosforilcholinu, polikatijonais, polianijonais ir galaktanais. Fosforilcholinas yra bakterijų ląstelių sienelių ir ląstelių membranų fosfolipidų komponentas. Tikslinis CRP gali suaktyvinti komplemento sistemą klasikiniais ir alternatyviais būdais. Kompleksai, kuriuose yra CRP, yra tirpinami komplemento taip pat, kaip antigeno-antikūno kompleksai. CRP yra geras opsoninas ir fagocitų judrumo stimuliatorius. Pagrindinė CRP sintezės vieta yra kepenys, kita CRP gamybos vieta yra limfoidinės ląstelės.
1.1.5. Interferonas (IFN) yra mažos molekulinės masės baltymas, sintetinamas ląstelėse in vitro ir in vivo veikiant įvairiems pašaliniams veiksniams: virusams, bakterijoms, nukleino rūgštims, sintetiniams polimerams ir kt. Interferonas apibrėžiamas kaip baltyminis faktorius, neturintis viruso specifiškumo, o jo aktyvumas prieš virusus, bent jau homologinėse ląstelėse, vyksta dalyvaujant ląstelių metabolizmui, apimančiam RNR ir baltymų sintezę.
Atsižvelgiant į susidarymo vietą ir sandarą, išskiriami trys INF tipai: , , . IFN- daugiausia formuoja B limfocitai ir kiti (leukocitai, I tipas), IFN- - epitelio ląstelės ir fibroblastai (fibroblastai, I tipas), -IFN - imuniniai limfocitai, dalyvaujant makrofagams (imuniniai, II). tipas). IFN antigeninius skirtumus lemia ne veikiančio induktoriaus, o gaminančių ląstelių prigimtis. IFN skirstomi ne tik į 3 tipus, bet kiekvienas iš jų susideda iš kelių skirtingų baltymų frakcijų. Pagal tarptautinę klasifikaciją α-IFN susideda iš 12 porūšių. Aprašyti 4 -IFN potipiai ir 3 -IFN potipiai.
IFN gamybą organizme daugiausia vykdo leukocitai, T ir B limfocitai, makrofagai, RES ląstelės ir gleivinės epitelio ląstelės. IFN susidarymas virusinių infekcijų metu vyksta labai greitai, nuo pirmųjų ligos valandų, laikui bėgant sutampa su viruso dauginimu ir gerokai lenkia specifinių imunoglobulinų, net IgM, atsiradimą. Interferonai yra limfokinų komplekso dalis ir patys pagal savo prigimtį yra limfokinai. Imuninį IFN, kaip ir limfokiną, gamina T limfocitai, reaguodami į antigeninę stimuliaciją.
1.1.6. Nespecifinio atsparumo humoralinio ryšio būklės neatskiriamas rodiklis yra baktericidinis kraujo serumo aktyvumas. Jį tarpininkauja paprasti baltymai (laktoferinas, transferinas, interferonas, interleukinas-1,-6,-8, naviko nekrozės faktorius, trombocitus aktyvinantis faktorius, lizocimas, fibronektinai), kompleksiniai baltymai (komplementas, fibrinopeptidai), ūminės fazės baltymai. uždegimas (haptodeptos, fibrinogenas, C reaktyvusis baltymas ir kt.).
Kraujo serume baktericidinių reakcijų iniciatoriai yra M klasės imunoglobulinai, kaip labiausiai priklausomi nuo komplemento, gleivinės sekrete - A klasės imunoglobulinai, kaip labiausiai priklausomi nuo lizocimų.
Kalbant apie gramneigiamus mikroorganizmus, kraujo serumo baktericidinis aktyvumas yra palaipsniui į šį procesą įtrauktų veiksnių sinerginio veikimo rezultatas: pradžioje - imunoglobulinai ir komplementas, vėliau - lizinai ir lizocimas. Gramneigiamų bakterijų lizė daugiausia vyksta dėl komplemento, dėl kurio sunaikinami kraštiniai membranos sluoksniai, o jį sustiprina lizocimas.
Gramteigiamų bakterijų atžvilgiu lizocimas veikia kaip pagrindinis lizinis faktorius, -lizinas yra pagalbinis. Mikrobai, padengti membrana su išeikvotu standžiu sluoksniu, gali būti lizuojami naudojant vien komplementą. Nelizuotos, o pažeistos bakterijos yra lengviau jautrios fagocitozei, ypač po jų paviršiuje esančių imunoglobulinų ir komplemento adsorbcijos.
Imunitetas suprantamas kaip procesų ir mechanizmų visuma, užtikrinanti organizmui pastovią vidinę aplinką iš visų genetiškai svetimų egzogeninės ir endogeninės prigimties elementų. Nespecifiniai atsparumo veiksniai yra įgimto imuniteto apraiškos. Paryškinkite: mechaninės kliūtys(oda, gleivinės), humoraliniai veiksniai(imunocitokinai, lizocimas, beta-lizinai, proteino proteinų sistema, ūminės fazės baltymai) ir ląstelių faktoriai(fagocitai, natūralios žudančios ląstelės). Skirtingai nuo imuniteto, nespecifiniam atsparumui būdingi:
1) Specifinio atsako į tam tikrus antikūnus nebuvimas;
2) tiek indukuojamų, tiek neindukuojamų apsauginių faktorių buvimas;
3) Negebėjimas išsaugoti atminties nuo pradinio kontakto su antigenu.
Pagrindinės efektorinės ląstelės naikinant mikrobus yra fagocitai (neutrofilai, makrofagai). Tačiau fagocitų funkcijos neapsiriboja pašalinių dalelių žudymu. Fagocitas atlieka 3 pagrindinės funkcijų grupės:
1) Apsauginis(iš tikrųjų fagocitozė)
2) Atstovaujantis- makrofagai pateikia Ag limfocitams ląstelių bendradarbiavimo sistemoje
3) Sekretorė– gamina daugiau nei 60 aktyvių mediatorių, įskaitant IL-1.8; reaktyviosios deguonies rūšys, arachidono rūgšties metabolizmo produktai ir kt.
Išsivysčius nepakankamam kurio nors iš nespecifinio atsparumo faktorių aktyvumui, išsivysto imunodeficito būsena, todėl būtina turėti idėją, kaip įvertinti kiekvieno iš minėtų komponentų funkcinį aktyvumą.
Schema 1. Pagrindiniai įvairių fagocitozės stadijų vertinimo metodai.
1. Atsižvelkite į skrodytų gyvūnų kultūrų rezultatus. Apskaičiuokite bendrą užterštumą skirtinguose sektoriuose, užpildykite užterštumo lentelę savo užrašų knygelėje skirtingi organai ir eksperimentiniai gyvūnų audiniai.
2. Apibūdinkite koloniją (mokytojo pasirinkimu) pagal standartinę schemą (žr. temą „ Bakteriologinis metodas tyrimai“).
3. Paruoškite tepinėlius ir juos nudažykite Gramu. Mikroskopas, apibūdinkite morfologinį vaizdą.
4. Ištirkite nepilnos fagocitozės vaizdą gatavuose preparatuose.
5. Išanalizuoti fagocitozės eksperimento nustatymo schemą.
6. Išanalizuoti opsono-fagocitinės reakcijos inscenizacijos schemą.
Kontroliniai klausimai:
1. Išvardykite pagrindines nespecifinio pasipriešinimo veiksnių grupes.
2. Apibūdinkite anatomines nespecifinio atsparumo kliūtis.
3. Kokie pagrindiniai skirtumai tarp nespecifinio atsparumo ir imuniteto.
4. Apibūdinkite humoralinius nespecifinio atsparumo veiksnius (lizocimas, imunocitokinai, komplementas, beta-lizinai, propidino sistema, ūminės fazės baltymai)
5. Komplemento sistema: struktūra, funkcijos, aktyvinimo tipai?
6. Kokius žinote ląstelių nespecifinio atsparumo veiksnius?
7. Apibūdinkite fagocitozės stadijas.
8. Kokios yra fagocitozės formos.
9. Kokie yra fagocitozės mechanizmai.
10. Apibūdinkite pagrindines laisvųjų radikalų formas.
11. Koks yra fagocitų indeksas ir fagocitų skaičius. Vertinimo metodai.
12. Kokiais metodais galima papildomai įvertinti fagocito aktyvumą?
13. Tarpląstelinio žudymo įvertinimo metodas: klinikinė reikšmė, pastatymas.
14. Opsonizacijos esmė. Fagocitinis-opsoninis indeksas.
15. NST testas: nustatymas, klinikinė reikšmė.
16. Bakterijų antilizocimo, antikomplementarinio, antiinterferoninio aktyvumo svarba.
3 TEMA. IMUNITETINĖS REAKCIJOS (1 PAMOKA)
Viena iš imunologinio reaktyvumo formų yra organizmo gebėjimas gaminti antikūnus reaguojant į antigeną. Antigenas yra tam tikros medžiagos cheminė struktūra, nešantis svetimą genetinę informaciją. Antigenai gali būti pilni, ty galintys sukelti antikūnų sintezę ir prie jų prisijungti, ir defektiniai arba haptenai. Haptenai gali prisijungti tik prie antikūno, bet nesukelti jo sintezės organizme. Bakterijas ir virusus sudaro sudėtinga antigenų sistema (4.5 lentelės), kai kurie iš jų turi toksinių ir imunosupresinių savybių.
4 lentelė
Bakterijų antigenai
5 lentelė
Virusų antigenai
Imunologinių tyrimų metodai - diagnostikos metodai tyrimai, pagrįsti specifine antigenų ir antikūnų sąveika. Plačiai naudojamas laboratorinė diagnostika infekcinės ligos, kraujo grupių, audinių ir navikų antigenų, baltymų tipo nustatymas, alergijų ir autoimuninių ligų atpažinimas, nėštumas, hormoniniai sutrikimai, taip pat tiriamajame darbe. Tai apima serologines reakcijas, kurios paprastai apima tiesioginio antigenų ir kraujo serumo antikūnų poveikio in vitro reakcijas. Atsižvelgiant į mechanizmą, serologines reakcijas galima suskirstyti į reakcijas, pagrįstas agliutinacijos reiškiniu; reakcijos, pagrįstos kritulių reiškiniu; lizės ir neutralizacijos reakcijos.
Reakcijos, pagrįstos agliutinacijos reiškiniu. Agliutinacija – tai ląstelių arba atskirų dalelių, pernešančių antigenus, klijavimas imuninis serumasšiam antigenui. Bakterijų agliutinacijos reakcija tinkamo antibakterinio serumo naudojimas yra viena iš paprasčiausių serologinių reakcijų. Bakterijų suspensija dedama į įvairius tiriamojo kraujo serumo skiedimus ir per tam tikras laikas susisiekite el t° 37° registruoja didžiausią kraujo serumo praskiedimą, kuriam esant įvyksta agliutinacija. Yra smulkiagrūdžių ir stambiagrūdžių agliutinacijos reakcijų. Kai bakterijos jungiasi per H-antigeną, susidaro didelių ag-at konjugatų nuosėdos dribsnių pavidalu. Susilietus su O-ag, atsiranda smulkiagrūdžių nuosėdų. Bakterijų agliutinacijos reakcija naudojama diagnozuojant daugelį infekcinių ligų: bruceliozę, tuliaremiją, vidurių šiltinę ir paratifosą, žarnyno infekcijas, šiltinę.
Pasyvi arba netiesioginė hemagliutinacijos reakcija(RPGA, RNGA). Jame naudojami raudonieji kraujo kūneliai arba neutralios sintetinės medžiagos (pavyzdžiui, latekso dalelės), kurių paviršiuje sorbuojami antigenai (bakterijų, virusų, audinių) arba antikūnai. Jų agliutinacija įvyksta, kai pridedami atitinkami serumai arba antigenai. Raudonieji kraujo kūneliai, įjautrinti antigenais, vadinami antigeniniais eritrocitų diagnostikais ir naudojami antikūnams aptikti bei titruoti. Eritrocitai įjautrinti antikūnais. vadinami imunoglobulino eritrocitų diagnostika ir naudojami antigenams nustatyti. Pasyvioji hemagliutinacijos reakcija naudojama diagnozuoti bakterijų sukeltas ligas ( vidurių šiltinės ir paratifas, dizenterija, bruceliozė, maras, cholera ir kt.), pirmuonys (maliarija) ir virusai (gripas, adenovirusinės infekcijos, virusinis hepatitas B, tymai, erkinio encefalito, Krymo hemoraginė karštligė ir kt.).
Reakcijos, pagrįstos kritulių reiškiniu. Nusodinimas atsiranda dėl antikūnų sąveikos su tirpiais antigenais. Paprasčiausias nusodinimo reakcijos pavyzdys yra nepermatomos nuosėdų juostos susidarymas mėgintuvėlyje prie antigeno sluoksnio ant antikūno ribos. Plačiai naudojamos įvairios nusodinimo reakcijos pusiau skystame agaro arba agarozės gelyje (dvigubos imunodifuzijos metodas pagal Ouchterlony, radialinės imunodifuzijos metodas, imunoelektroforezė), kurios yra ir kokybinės, ir kiekybinės. Dėl laisvos antigenų ir antikūnų difuzijos gelyje jų optimalaus santykio zonoje susidaro specifiniai kompleksai – kritulių juostos, kurios aptinkamos vizualiai arba dažant. Metodo ypatumas yra tas, kad kiekviena pora antigenas-antikūnas formuoja individualią kritulių juostą, o reakcija nepriklauso nuo kitų antigenų ir antikūnų buvimo tiriamoje sistemoje.
1.Įdėkite orientacinė reakcija agliutinacija ant stiklo. Norėdami tai padaryti, ant stiklelio pipete užlašinamas lašas diagnostinio serumo ir lašelis druskos tirpalas. Į kiekvieną mėginį, naudojant bakteriologinę kilpą, pridedamas nedidelis kiekis. bakterinė kultūra ir emulsuoti. Po 2-4 minučių, teigiamu atveju, serumo mėginyje atsiranda dribsnių, lašas tampa skaidrus. Kontroliniame mėginyje lašas išlieka tolygiai drumstas.
2. Atlikite išsamią agliutinacijos reakciją. Reakcijai atlikti paimkite 6 mėgintuvėlius. Pirmieji 4 mėgintuvėliai yra eksperimentiniai, 5 ir 6 yra kontroliniai. Į visus mėgintuvėlius, išskyrus 1, įpilkite 0,5 ml fiziologinio tirpalo. Pirmuosiuose 4 mėgintuvėliuose titruokite tiriamąjį serumą (1:50; 1:100; 1:200; 1:400). Į visus mėgintuvėlius, išskyrus 5, įpilkite 0,5 ml antigeno. Sukratykite mėgintuvėlius ir padėkite į termostatą (37 0 C) 2 valandoms, tada palikite mėginius kambario temperatūra 18:00 val. Rezultatai registruojami pagal šią schemą:
Visiška agliutinacija, aiškiai apibrėžtos flokuliuojančios nuosėdos, skaidrus supernatantas
Nevisiška agliutinacija, ryškios nuosėdos, viršūnė šiek tiek drumstas
Dalinė agliutinacija, yra nedidelės nuosėdos, skystis drumstas
Dalinė agliutinacija, nuosėdos silpnos, skystis drumstas
Nėra agliutinacijos, nuosėdų, skystis drumstas.
3. Diagnozuodami toksogeninį C.diphtheriae padermę, susipažinkite su kritulių reakcijos formuluote.
4. Išanalizuoti tiesioginių ir netiesioginių Kumbso reakcijų schemas.
Kontroliniai klausimai
1. Imunitetas, jo rūšys
2. Centriniai ir periferiniai imuniteto organai. Funkcijos, struktūra.
3. Pagrindinės ląstelės, dalyvaujančios imuninėse reakcijose.
4. Antigenų klasifikacija, antigenų savybės, haptenų savybės.
5. Bakterijos ląstelės, viruso antigeninė struktūra.
6. Humoralinis imunitetas: bruožai, pagrindinės ląstelės, dalyvaujančios humoraliniame imunitete.
7. B-limfocitai, ląstelių sandara, brendimo ir diferenciacijos fazės.
8. T-limfocitai: ląstelių struktūra, brendimo ir diferenciacijos fazės.
9. Trijų ląstelių bendradarbiavimas imuniniame atsake.
10. Imunoglobulinų klasifikacija.
11. Imunoglobulino sandara.
12. Nepilni antikūnai, struktūra, reikšmė.
13. Imuninės reakcijos, klasifikacija.
14. Agliutinacijos reakcija, formulavimo galimybės, diagnostinė reikšmė.
15. Kumbso reakcija, pastatymo schema, diagnostinė reikšmė.
16. Nusodinimo reakcija, formulavimo galimybės, diagnostinė vertė.
