Chybné výsledky testů na syfilis. Falešně pozitivní reakce na sérologické testy na syfilis

Vnější projevy, které se objevují v pozdějších stádiích, jsou snadno zaměnitelné s jinými nemocemi. Proto hodně záleží na výsledcích laboratorních testů. Toto odvětví medicíny však zatím nemůže nabídnout univerzální analýzu pro ověření syfilis.

Testy na syfilis: diagnostické přístupy

Všechny metody, které se používají k detekci syfilis, spadají do dvou různých kategorií.

Klíčový rozdíl mezi nimi je následující:

• Hledejte přímo patogen. Jde o tzv. přímé testy. Materiál je fragment tkáně získaný z podezřelé léze.
• Studie k identifikaci specifických protilátek – imunoglobulinů – které imunitní systém produkuje v reakci na vstup Treponema pallidum do krve. Materiálem pro výzkum je krevní plazma.

Obě tyto kategorie mají své výhody a nevýhody. V prvním případě je důležité, aby se buňky spirochet dostaly do testovaného vzorku (vysoká specificita, ale ne vždy přijatelná citlivost).

Metody z druhé kategorie mají naopak vysokou senzitivitu, ale jejich specifičnost ponechává mnoho přání. Takže pravdivá odpověď na otázku je, může být test na syfilis špatný?, jednoznačné: ano. A to v obou směrech – nebo falešně negativní. Zvláště pokud byla studie provedena pouze jednou metodou.

Testování na syfilis: přímé testy

Patří mezi ně testy na syfilis, které odhalí buď samotný treponém, nebo jeho unikátní genetický materiál.

Chcete-li to provést v lékařská praxe aplikovat:

• Studium vzorku pod mikroskopem v tmavém poli - mikroskopie v tmavém poli.
• Přímá imunofluorescence. Jedná se o modifikaci mikroskopie v tmavém poli.
• Hledání fragmentů DNA Treponema pomocí polymerázové řetězové reakce (PCR).

Pro mikroskopii v tmavém poli se odebírá výboj z dostupné podezřelé léze. Pokud je výsledek pozitivní, jsou v okuláru viditelné živé, pohyblivé spirochety. Přímá fluorescence využívá stejný materiál jako mikroskopie v tmavém poli. Vzorek je fixován parafínem. A na něj se aplikují antitreponemální protilátky, předem značené fluorescenčním barvivem. Pokud materiál obsahuje původce syfilis, imunoglobuliny se pevně vážou na proteiny na povrchu mikroba a září v ultrafialovém světle. Je docela snadné si všimnout takové záře.

Tyto testy jsou levné a mají vysokou specificitu, ale nízkou citlivost.

Pro spolehlivý výsledek je nutné, aby vzorek obsahoval alespoň 1000 - 100 000 mikrobiálních tělísek. A pro mikroskopii v temném poli je důležité, aby byly živé a v pohybu. Metoda PCR umožňuje dávat přesný výsledek, pokud zkoumaný vzorek obsahuje alespoň 10 spirochet. Specifičnost dosahuje 100 %, takže pochyby Může být test na syfilis falešně pozitivní? v tomto případě by nemělo.

Pokud však nedodržíte techniku ​​odběru vzorků nebo uděláte během studie technickou chybu, můžete získat falešný výsledek. negativní výsledek. A to je podstatná nevýhoda. Náklady na studium jsou také poměrně vysoké.

Syfilis je doprovázena četnými příznaky a má velký počet klinické formy. Jeho rozpoznání je založeno na komplexním klinickém a laboratorním vyšetření pacienta. Obecná analýza krev na syfilis nese málo informací, proto se nepoužívá k diagnostice onemocnění.

K analýze lze vzít následující materiály:

• krev z prstu a žíly;
• mozkomíšní mok - mozkomíšní mok;
• výtok tvrdého chancre (vředy);
• oblasti regionálních lymfatických uzlin.

Výběr materiálu a diagnostická metoda závisí na stadiu onemocnění. O tom, jaké testy se na syfilis dělají, si povíme v další části.

Klasifikace metod laboratorní diagnostiky onemocnění

V počáteční fáze Můžete použít bakterioskopickou metodu, založenou na identifikaci patogenu - Treponema pallidum - pod mikroskopem. V budoucnu jsou široce využívány sérologické testy založené na stanovení mikrobiálních antigenů a protilátek produkovaných tělem v biologickém materiálu.

Bakteriologické studie se neprovádějí, protože původce syfilis roste velmi špatně živná média v umělých podmínkách.

Všechny metody pro detekci treponému, to znamená typy testů na syfilis, jsou rozděleny do dvou velkých skupin:

1. Přímé, které přímo detekují samotného mikroba:

• mikroskopie v tmavém poli (detekce treponémů na tmavém pozadí);
• RIT test – infekce králíků testovaným materiálem;
• polymeráza řetězová reakce(PCR), která detekuje úseky genetického materiálu mikroorganismu.

2. Nepřímá (sérologická), založená na detekci protilátek proti mikrobu, které tělo produkuje v reakci na infekci.

Sérologické testy se dělí do dvou skupin

Netreponemální:

• reakce fixace komplementu s kardiolipinovým antigenem (CCk);
• mikroprecipitační reakce (MPR);
• test rychlé reaginace plazmy (RPR);
• test s toluidinovou červení.

Treponemal:

• reakce fixace komplementu s treponemálním antigenem (RSCT);
• imobilizační reakce treponema (RTI nebo RIBT);
• imunofluorescenční reakce (RIF);
• pasivní hemaglutinační reakce (RPHA);
• enzymový imunotest (ELISA);
• imunoblotování.

Metody těchto analýz jsou poměrně složité, proto se zaměříme především na to, kdy se provádějí a jak přesné informace poskytují.

Řekněme hned, že základem pro diagnostiku syfilis jsou sérologické metody. Jak se nazývá test na syfilis: v každém případě může vyšetření zahrnovat různé techniky. Níže o nich budeme hovořit podrobněji.

Přímé testy

Jejich detekce pod mikroskopem přesvědčivě dokazuje přítomnost treponém. Pravděpodobnost syfilis dosahuje 97%. Nicméně mikroby lze detekovat pouze u 8 z 10 pacientů negativní test nemoc nevylučuje.

Diagnostika se provádí v obdobích, kdy se vyskytuje chancre resp vyrážka. Právě ve vypouštění těchto infekčních elementů hledají původce onemocnění.

Efektivnější, ale zároveň nákladnější a komplexnější analýzou je průkaz treponem po předléčení fluorescenčními protilátkami. Jsou to látky, které se „lepí“ na mikroby a vytvářejí „záři“ v mikroskopovém poli.

Citlivost metod klesá s dlouhým trváním onemocnění, léčbou vředů a vyrážek antiseptiky a také po léčbě.

Biologická metoda diagnostiky RIT je vysoce specifická, ale nákladná a výsledek je získán pouze prostřednictvím na dlouhou dobu když se u infikovaného zvířete rozvine nemoc. V současné době se metoda prakticky nepoužívá, i když je prakticky nejpřesnější ze všech. Výborným krevním testem na syfilis k detekci genetického materiálu treponém je PCR. Jeho jediným omezením je relativně vysoká cena diagnostiky.

Sérologické metody

Netreponemální testy

RSKk a RMP

Nejznámější z těchto testů je Wassermanova reakce. Toto je ta cesta rychlá diagnostika(expresní test na syfilis), založený na podobné reakci protilátek z krve nemocného na samotné treponémy a na kardiolipin získaný z hovězího srdce. V důsledku této interakce protilátek a kardiolipinu se tvoří vločky.

V Rusku tato analýza prakticky nepoužívaný. Byla nahrazena mikroprecipitační reakcí. Nevýhodou metody je její nízká specificita. Falešně pozitivní test krev na syfilis se vyskytuje u tuberkulózy, krevních onemocnění, systémového lupus erythematodes, během těhotenství, po narození dítěte, během menstruační krvácení a v mnoha dalších případech. Proto s kladným RW více přesné metody diagnostika

Po infekci se reakce stává pozitivní po dvou měsících. Se sekundární syfilis je pozitivní téměř u všech pacientů.

Mikroprecipitační reakce, která nahradila Wassermanovu reakci, má podobný mechanismus. Je levný, snadno se implementuje, rychle se vyhodnocuje, ale může také poskytnout falešně pozitivní výsledek. Tyto dva testy se používají jako screeningové testy.

RMP se stává pozitivní měsíc po objevení se chancre. K jeho provedení se používá krev z prstu.

Může být test na syfilis špatný? Samozřejmě ano, zvláště při použití netreponemových testů.

Příčiny akutních falešně pozitivních vzorků při použití RMP:

• akutní infekční onemocnění;
• zápal plic;
• infarkt myokardu;
• mrtvice;
• zranění a otravy.

Chronické falešně pozitivní výsledky se často vyskytují u následujících onemocnění:

• tuberkulóza;
• brucelóza;
• leptospiróza;
• sarkoidóza;
• revmatická onemocnění;
• Infekční mononukleóza;
• zhoubné nádory;
• cukrovka;
• jaterní cirhóza a další.

Pokud se objeví kontroverzní testy, používají se k objasnění diagnózy treponemální sérologické testy.

RPR a test toluidinové červeně

Rychlý plazmatický reagin test (syfilis rpr test) je dalším typem reakce s kardiolipinovým antigenem. Používá se v následujících případech:

• screening populace;
• podezření na syfilis;
• vyšetření dárce.

Zmiňme se ještě o testu s toluidinovou červení. Všechny tyto metody se používají k hodnocení účinnosti léčby. Jsou semikvantitativní, to znamená, že se snižují s zotavením a zvyšují se s relapsem infekce.

Negativní výsledky netreponemových testů s největší pravděpodobností naznačují, že subjekt nemá syfilis. Proto se k posouzení vyléčení používají netreponemální testy. První taková analýza by měla být provedena 3 měsíce po ukončení léčby.

Treponemální testy

Treponemální testy jsou založeny na použití treponemálních antigenů, což výrazně zvyšuje jejich diagnostická hodnota. Používají se v následujících situacích:

• pozitivní screeningový test (mikroprecipitační reakce);
• rozpoznání falešně pozitivních výsledků screeningu;
• podezření na syfilis;
• diagnostika latentních forem;
• retrospektivní diagnóza, když pacient dříve trpěl onemocněním.

RIT a RIF

Nejkvalitnější (vysoce citlivé a vysoce specifické) jsou RIT a RIF. Nevýhody těchto metod jsou složitost, doba trvání, nutnost moderní vybavení a vyškolený personál. U většiny vyléčených pacientů zůstávají treponemální testy pozitivní po mnoho let, a proto je nelze použít jako kritérium vyléčení.

RIF je pozitivní dva měsíce po infekci. Pokud je negativní, je pacient zdravý, pokud je pozitivní, pravděpodobnost onemocnění je vysoká.

RIT se zvláště často používá, když pozitivní výsledky RMP k vyloučení nebo potvrzení onemocnění. Je vysoce citlivý a umožňuje vám s velkou přesností říci, zda má pacient syfilis nebo ne. Test se však stane pozitivním až tři měsíce po infekci.

Imunoblotting

Imunoblotting je ještě citlivější než RIF, ale méně citlivý než RPHA. Používá se zřídka, hlavně pro diagnostiku syfilis u novorozenců.

Uvedené metody nejsou vhodné pro screening, tedy rychlou detekci onemocnění, protože se stávají pozitivními později než mikroprecipitační reakce.

ELISA a RPGA

Moderní vysoce informativní standardizované metody diagnostiky syfilis - ELISA a RPGA. Jsou levné, rychle se instalují a testují velké množství. Tyto testy lze použít k potvrzení diagnózy.

Analýza RPGA se stává pozitivní s primární séropozitivní syfilis, tj. s výskytem chancre (měsíc po infekci). Je zvláště cenný při diagnostice pozdních a vrozené formy nemocí. Pro diagnostickou přesnost však musí být RPGA doplněn alespoň jedním netreponemálním a jedním treponemovým testem. Tento trojitý test je nejvíce spolehlivá analýza pro syfilis. Nevýhoda RPGA - konzervace pozitivní reakce po dlouhou dobu, což neumožňuje použít test jako kritérium pro vyléčení.

Test ELISA na syfilis je pozitivní tři týdny po onemocnění. Nevýhodou ELISA je, že může být falešná. K falešně pozitivní reakci dochází, když systémová onemocnění, metabolické poruchy, stejně jako u dětí narozených nemocným matkám.

Nedostatky sérologické metody vedly k vývoji nejpokročilejších metod, které nedávají chyby, ale jsou stále drahé a zřídka používané - plynová chromatografie a hmotnostní spektrometrie.

Algoritmus pro diagnostiku syfilitické infekce v různých fázích

V primárním séronegativním období (do 2 měsíců po infekci) se vyhledávání treponemu provádí v tmavém poli nebo pomocí fluorescenčních protilátek.

Pro primární séropozitivní, sekundární a latentní syfilis se používají RMP a ELISA a jako konfirmační test se používá RPGA.

U pacientů s relapsy sekundární syfilis se vyšetřují prvky vyrážky a snaží se z nich izolovat treponémy pro mikroskopické vyšetření.

V terciárním období je karcinom močového měchýře negativní u třetiny pacientů. ELISA a RPGA jsou pozitivní, ale nemusí indikovat terciární syfilis, ale předchozí onemocnění. Slabý pozitivní test hovoří více o uzdravení než o terciární syfilis.

Při stanovení diagnózy „vrozená syfilis“ se bere v úvahu přítomnost onemocnění u matky, rozdíl ve výskytu rakoviny močového měchýře u matky a dítěte, pozitivní ELISA a RPHA u novorozence, imunoblotování.

Těhotné ženy musí být vyšetřeny na syfilis, zejména ty, které již prodělaly mrtvé narození, nevyvinuté těhotenství nebo předčasné potraty. Provádějí RMP, ELISA, RPGA. Před ukončením těhotenství jsou vyšetřeni na přítomnost onemocnění.

Pravidla pro získání testu na syfilis

Chcete-li získat doporučení do laboratoře, musíte navštívit místního lékaře. Pokud se chcete nechat otestovat rychleji, lze to provést v soukromé laboratoři bez doporučení (například laboratoře Invitro provádějí test na syfilis rychle a anonymně).

Jak se nechat vyšetřit na syfilis? Krev se daruje ráno, nalačno. Můžete pít pouze čistou vodu.

Příprava: dva dny před testem musí být vyloučena ze stravy tučná jídla a hlavně alkohol.

Jak se provádí analýza? obvyklým způsobem z prstu nebo loketní žíly.

Jak dlouho trvá test na syfilis? Výsledek testu je obvykle připraven druhý den. Přepis lze převzít od lékaře nebo laboratoře.

Jak dlouho je analýza platná? Po dobu až tří měsíců.

Analýza mozkomíšního moku

V některých případech se k diagnostice neurosyfilis provádí vyšetření mozkomíšního moku.

Toto vyšetření je předepsáno všem pacientům s latentní syfilis pokud mají známky patologie nervový systém, stejně jako s latentní a pozdní neurosyfilis.

Kromě toho se analýza provádí u všech pacientů po uzdravení, pokud si udrží pozitivní sérologické reakce. O tom, že k tomuto jevu dochází poměrně často, jsme již psali v našem článku.

Rozbor mozkomíšního moku na syfilis předepisuje a provádí pouze lékař.

Mozkomíšní mok se získává punkcí mezi dvěma obratli bederní oblasti. Odebírá se po 4 ml do dvou zkumavek. Poté je místo vpichu ošetřeno jódem a pokryto sterilní obvaz. Po punkci by měl pacient ležet na břiše s nožním koncem lůžka zvednutým alespoň 3-4 hodiny, poté může ležet na boku. Klid na lůžku po punkci je indikována na dva dny.

Mozkomíšní mok z první zkumavky se vyšetřuje pomocí obecně uznávaných reakcí na obsah bílkovin, buněk a stanovení známek meningitidy (zánětu mozkových blan).

Mozkomíšní mok z druhé zkumavky je vyšetřen na obsah protilátek proti treponemu pomocí Wassermanovy reakce, RMP, RIF a RIBT, kterou jsme probrali výše.

Podle závažnosti poruch se rozlišují čtyři typy změn v mozkomíšním moku. Jejich analýzou může lékař dojít k závěru, že existuje různé formy léze nervového systému (vaskulární neurosyfilis, syfilitická meningitida, meningovaskulární syfilis, tabes dorsalis, pozdní mezenchymální neurosyfilis), stejně jako uzdravení pacienta s pozitivními sérologickými testy.

Sérologické testy pro detekci syfilis jsou založeny na detekci protilátek, které se tvoří v souvislosti s treponémem, který infikoval celé tělo nebo jeho specifickou oblast. Lékařský výzkum tvrdí, že jeden ze tří vyšetřených pacientů s diagnózou falešně pozitivní syfilis nemusí být touto nemocí infikován. Přibližně 32 % s „pozitivním“ výsledkem nejprve ztratilo diagnózu po druhém testu laboratorní výzkum. To znamená, že tisíce pacientů mohly být podrobeny zbytečné léčbě, pokud by nepodstoupili další testování.

V medicíně je falešně pozitivní syfilis definována, když testy prohlásí přítomnost protilátek, ale onemocnění ve skutečnosti chybí. Testy k detekci tohoto onemocnění jsou klasifikovány podle typu použitého antigenu. Mohou být netreponemální a treponemální. Bohužel krevní test je velmi citlivý na přítomnost protilátek v něm, takže někdy dává falešné informace v přítomnosti jiných onemocnění.

Při provádění netreponemálních testů v teče krev hledání protilátek proti kardiolipinu. Tato složka je výsledkem destrukce tkáně, ke které dochází u mnoha onemocnění. Jeho přítomnost nemusí nutně znamenat přítomnost syfilis, ale pouze proces destrukce, který v těle začal. Po obdržení kladné odpovědi musíte patogen hledat opakovaným testováním pomocí treponemální metody, která je velmi zřídka nepravdivá.

Falešná ELISA je výjimečný jev

Falešně pozitivní RW testy jsou dobře známé, zatímco falešně pozitivní syfilis ELISA je extrémně vzácný, protože tento test se provádí k potvrzení diagnózy. Navzdory skutečnosti, že ELISA má míru přesnosti asi 98 %, lze získat falešně pozitivní výsledky na syfilis, pokud má pacient nějaké akutní, resp. chronická onemocnění. Mezi nimi je poznamenáno smíšená nemoc pojivové tkáně, autoimunitní onemocnění, diabetes mellitus, cirhóza jater v důsledku alkoholismu, virové infekce a těhotenství. Při provádění studií ELISA nejvíce moderní drogy a činidla. To vede k tomu, že díky extrémně vysoké citlivosti činidel lze získat falešně pozitivní ELISA i po vyléčení onemocnění.

Důvody pro falešně pozitivní test

Lékaři čelí různé projevy nemoci naznačují biologické falešné předpoklady. Podíl lidí, kteří obdrželi falešně pozitivní test na syfilis měla ve skutečnosti lupus. Do této skupiny patří také bejel a recidivující horečka, leptospiróza a leptospira. Po obdržení takového závěru však lékař nemůže okamžitě určit přítomnost onemocnění, pokud ve stejnou dobu vnější znaky chybí. Je nutné přezkoušení. Absence příznaků podruhé a negativní výsledek pouze naznačuje, že osoba obdržela chybný verdikt. Zbývá jen najít alternativní nemoc, která se zatím umně skrývá a nenechá se vizuálně odhalit.

Falešně pozitivní reakce na syfilis se vyskytuje v nepřítomnosti onemocnění pod vlivem řady faktorů. Při přijímání takových dat se nelekejte - řada testů má chybu, a proto mohou vykazovat nesprávný výsledek.

Testy na syfilis přicházejí ve dvou hlavních typech: treponemální a netreponemální.

První z nich jsou právem považovány za přesnější, protože jsou určeny k určení DNA světlé spirochety v těle. Tyto metody jsou zaměřeny přímo na identifikaci samotného treponému nebo jeho metabolických produktů. Ukazují se vysoká účinnost díky velké přesnosti. Takové testy se však neprovádějí na všech klinikách, protože to vyžaduje speciální vybavení a činidla. Proto se nepoužívají ve screeningových studiích. Mezi nejoblíbenější metody treponemy patří:

• Imunofluorescenční reakce (RIF). Přímo detekuje protilátky a antigeny. Pomocí přijatých informací můžete nejen identifikovat syfilis, ale také určit jeho fázi.
• Pasivní hemoaglutinační reakce (RPHA). Detekuje shlukování červených krvinek (erytrocytů), ke kterému dochází v důsledku nahromadění specializovaných protilátek na povrchu.
• Enzymově vázaný imunosorbentní test (ELISA). Určuje přítomnost určitých protilátek, které jsou produkovány různé fáze nemocí. Na základě poměru množství těchto protilátek se určí stadium onemocnění.
• Polymerázová řetězová reakce (PCR). Zaměřeno na identifikaci úseků bakteriální DNA v krevní plazmě.

Netreponemální vyšetření se také nazývají nespecifická. Jsou zaměřeny na identifikaci protilátek, které se tvoří jako reakce na infekci. To znamená, že nepřímo identifikují patogen. Ale takové studie mají své výhody:

• schopnost rychle dosáhnout výsledků;
• relativní levnost;
• provádí na standardním laboratorním vybavení.

Tato analýza je zaměřena na detekci specializovaného proteinu v lidské plazmě, který vzniká v důsledku destrukce tkáně Treponema pallidum. Mezi hlavní metody tohoto typu patří:

• Wassermanova reakce;
• mikroskopický test;
• makroskopický test.

Důležité! Chyba v takových diagnostických metodách dosahuje 20%. Proto byste při přijetí pozitivního závěru neměli panikařit.

Hlavní důvody jevu

Chyba při provádění treponemálních testů je maximálně 5 %. Netreponemální vykazují falešný výsledek mnohem častěji. Nejčastější důvody tohoto jevu jsou:

• maligní novotvary;
• infekce Kochovým bacilem (tuberkulóza) v jakékoli formě;
• patologie enterovirové povahy;
• Infekční mononukleóza;
• hepatitida všech typů;
• zápal plic;
• Lymeská nemoc;
• alkoholismus;
• závislost;
• dermatitidu;
• očkování, které bylo provedeno méně než 21 dní před testem;
• diabetes všech typů;
• věk nad 70 let;
• těhotenství.

Pokud jsou zjištěny nesprávné výsledky, nelekejte se - lékař určitě předepíše opakování testu. Opakovaný netreponemální test se obvykle objednává po 2-3 týdnech. Pokud opět vykazuje pozitivní odezvu, je vyžadována vysoce přesná treponemální studie.