Оценка на резултатите от бактериологичните изследвания. Какво е бактериологично изследване, как се провежда, интерпретация на резултатите

LHC анализът на урината е един от най-ефективните и точни видове диагностика на проба от урина. Използва се за идентифициране на различни видове инфекции на отделителната система в човешкото тяло. Тази система се състои от двойка бъбреци, уретери, пикочен мехур и уретра. Основната функция на отделителната система на човешкото тяло е процесът на образуване на урина, както и нейното натрупване и освобождаване във външната среда.

Какво е?

Както беше отбелязано по-горе, бактериологичният анализ на урината позволява да се определи наличието на инфекции в организма. Основната му разлика от другите видове изследвания е продължителността на изследването, която е десет дни. В лабораторни условия урината се поставя в агар или захарен бульон, т.е. в хранителна среда, благоприятна за бактериите. Подпомага растежа и развитието им.

При LHC анализ на урина концентрацията (броят) на микроорганизмите в една единица обем биоматериал се определя от единици, образуващи колонии (CFU). Те представляват едно жива клеткамикроби, което след това произвежда цяла колония от микроскопични организми.

Този тип диагностика на урината е най-надеждната. Той може да предостави данни, които не могат да бъдат получени от други тестове на урина. Но недостатъкът му също е отбелязан. Това се крие в продължителността на изследването, както и високите изисквания при събирането на материал.

Показания за анализ

  • инфекции на пикочната система;
  • контрол на терапевтичната терапия;
  • изясняване на идентифицираното заболяване;
  • рецидив на текущото заболяване;
  • бременност;
  • захарен диабет и имунна недостатъчност;
  • предположения за флора, устойчива на антибиотично лечение.

Подготовка за анализ

Материалът се събира в стерилен пластмасов контейнер. Това трябва да е сутрешната средна порция урина (три до пет милилитра). Контейнер за събиране на материал се предоставя на лице в лабораторията. А самата процедура за събиране на урина трябва да се извърши след подходяща хигиенна тоалетна на гениталните органи. В този случай антисептиците трябва да бъдат изключени. Материалът за диагностика се събира преди началото на лечението с антибиотици или в интервали от него. След такова лечение трябва да минат две до три седмици, преди да вземете бактериологичен тест на урината.

Събраната част от урината трябва да се транспортира до кратък периодвреме. Ако материалната проба се съхранява при температура от +18-20 градуса по Целзий - за един до два часа. Ако урината се съхранява в хладилник при температура от +4-8 градуса - пет до шест часа.

Видове анализи

Между бактериологичен анализотделя урина:

  • BAK култура на урина за флора с установяване на чувствителност към основния спектър антибиотици;
  • БАК култура на урина за флора с установяване на чувствителност към широк обхватантибиотици;
  • BAC култура на урина за флора с установяване на чувствителност към основния спектър антибиотици и бактериофаги;
  • BAC култура на урина за флора с установяване на чувствителност към широк спектър от антибиотици и бактериофаги.

Всички горепосочени видове диагностика ви позволяват правилно да определите вида на антибиотика за по-нататъшно лечение.

LAC тест за урина по време на бременност

Бактериологичната диагностика по време на бременност е включена в основния списък на проведените изследвания. При жените материалът за този вид изследване може да бъде взет от вагината, носа и урината. Взема се материал от вагината за идентифициране на болести, предавани по полов път. От носа - да се определи Стафилококус ауреус. Проба от урина се използва за установяване на асимптоматична или латентна бактериурия.

LHC анализът на урината трябва да се извърши два пъти по време на бременност. Първият е при регистрация с предродилна клиника, а вторият - на 36 седмица от бременността. Но има възможност за преминаване на анализа и голямо количествопъти, ако бременна жена има бъбреци, пикочен мехур и увеличено количествопротеин или левкоцити, когато клиничен анализурина.

Подготовка

За да събере материал за изследване, бременната жена трябва да закупи стерилен контейнер, в който да постави средна порция сутрешна урина. След това биоматериалът се изпраща в медицинска лаборатория.

За да може анализът да покаже надеждни резултати, трябва да се придържате към основните препоръки при събирането на материал. Те включват:

  • задълбочена хигиенна тоалетна на гениталиите;
  • събиране на средна част от материала (при събиране на урина е необходимо да поставите тампон във влагалището);
  • нормално режим на пиене (пиене на много течностиможе да разреди концентрацията на урината и предварително да премахне бактериите от тялото);
  • доставка на биоматериал в лабораторията в рамките на един час.

Тълкуване на бактериологично изследване на урина

CFU

При дешифрирането на резултатите често се среща съкращението CFU. Както беше отбелязано по-горе, CFU е единица, образуваща колония. Ако по време на изследването се установи, че количеството му е в рамките на 1000 CFU / ml, това ще покаже наличието на микроби в пробата от материал, който случайно е дошъл от гениталиите. В този случай не се изисква лечение.

Когато резултатът от анализа показва броя на образуващите колонии единици от 1 000 000, това означава, че има възпалителен процес, причинен от инфекции на гениталните органи. С помощта на този вид изследване се определя вида на бактериите и чувствителността към антибиотични лекарства.

Резултатът от анализа може да показва междинни граници, като 1000-10000 CFU/ml. Тази оценка се поставя под въпрос и самата диагноза трябва да се повтори. Но във всеки случай, тълкуването му трябва да се извършва само от лекуващия лекар.

Бактерии в урината

Често анализът на BAK показва наличието на бактерии в урината, които са влезли в нея от дебелото черво на човека. Те се движат от аналната област към пикочен канал, след което проникват в пикочен мехури по-нататък. Този път на проникване на бактерии обикновено се нарича възходящ. Най-често този тип микробна експозиция се проявява при жените поради техните анатомична структура. Има и низходящ път, при които микроорганизмите попадат в урината по време на инфекция в бъбреците. При такава оценка трябва да се извърши анализ лечебна терапияантибиотични лекарства.

4.5 4,50 от 5 (5 гласа)

Класическото бактериологично изследване е “златен” стандарт за микробиологична диагностика.

Целта на бактериологичното изследване е да се изолира чиста културапатоген и неговата идентификация.

Алгоритъм за бактериологично изследване:

Първична микроскопия на изследвания материал (незадължителен етап, в зависимост от естеството на материала);

Първична сеитба за изолиране на чиста култура;

Натрупване на чиста култура;

Проучване на комплекса биологични свойстваизбрана култура;

Окончателна идентификация на патогена.

1-ви ден от изследването

1. Първична микроскопия

Резултатът от първичната микроскопия дава приблизителна представа за наличието на различни морфологични форми на микроорганизми в клиничния материал, а също така позволява тяхната първична идентификация по морфологични и тинкториални свойства и избор на среда за първична инокулация.

Гноен секрет - необходима е първична микроскопия.

Гръбначно-мозъчна течност- необходима е първична микроскопия на седимента.

Храчките - първичната микроскопия се извършва от разреждания 10 4 -10 5.

Натривки от гърло и нос - първична микроскопия не се прави.

Кръв - първична микроскопия не се извършва.

Фецес - първична микроскопия не се извършва.

2. Първично засяване

Материалът за изследване след първична микроскопия или без нея (изпражнения, урина, натривки от носа и гърлото, кръв) се посява върху подходящи среди за изолиране на чиста култура:

Захарен бульон, кръвен агар - за стрептококи;

Жълтъчно-солен агар, кръвен агар - за стафилококи;

Ендо среда - за бактерии от семейство Enterobacteriaceae;

MPA (месопептонен агар) - за грам-отрицателни бактерии;

MPA (засяване по метода на Шукевич) - за изолиране на Proteus;

среда Kitta-Tarozzi - за изолиране на анаероби;

Среда на Сабуро - за изолиране на гъбички.

Сеитбата е първият етап от бактериологичното изследване (ако не е извършена първична микроскопия).

Сеитбата се извършва, както следва:

Засяване с жилка и изпичане на примката. Материалът се взема с калцинирана бактериологична примка и горното поле на чашката се посява плътно с щрих. След това примката се калцинира отново и се поставя в сектор с гъсто засяване и се начертават 2-3 вертикални линии през цялата чаша. След това чашата се обръща, плътно засаденият сектор остава в долното поле на чашата. Примката се загрява отново и посевът се разнася в чашата с 2-3 хоризонтални удара.

Засяване с шпатула. Материалът се нанася върху повърхността на средата с шпатула или пипета и след това се разпръсква по цялата повърхност с шпатула.

Засяване с тампон. За инокулация тампон с тестовия материал се поставя в чаша и съдържанието му се втрива в хранителната среда с кръгови движения.

Сеитба по сектори. При тази сеитба дъното на чашата се изтегля на сектори, сеитбата се извършва с прекъснати движения от ръба на чашата към центъра и по секторите.

Ден 2 от изследването

1. Запишете растежа върху хранителни среди като хомогенни или хетерогенни.

2. Извършване на описание на културни ценности.

Алгоритъм за описване на колонии

В резултат на растеж върху хранителна среда се образуват колонии (потомци на една клетка). Изолираните колонии се избират и изследват - започва вторият етап от изследването, насочен към изучаване на културните свойства на бактериите. Познаването на тези свойства е необходимо за идентифициране на получената чиста култура, тъй като всеки вид микроорганизъм, когато расте върху определена хранителна среда, отговаря на определени културни свойства.

Изследване на колонии:

Макроскопски: с просто око в пропусната и отразена светлина;

Микроскопски: при малко увеличение на суха микроскопска система.

В предавана светлина те изучават:

Размерът на колониите (големи, средни, малки, джуджета);

Форма на колонията (правилна, неправилна, кръгла);

Прозрачност на колонията (прозрачна, непрозрачна).

В отразена светлина определете:

Цвят (безцветен или цветен);

Естеството на повърхността (гладка, неравна, лъскава, грапава);

Височината на колониите над повърхността на средата (потиснати, плоски, повдигнати).

Микроскопски оценете:

Ръб (гладък, неравен);

Структура (хомогенна, нехомогенна).

Изследването на колониите завършва с изготвяне на цитонамазка, оцветяване по Грам и микроскопия.

При вземане на материал от колония за приготвяне на намазка се оценява неговата консистенция (мека, лигава, суха).

Ако културата се окаже чиста при микроскопия, тогава тя се субкултивира върху наклонен агар за натрупване.

Ден 3 от изследването

1. Описание на модела на растежпод наклон на агар:

Хомогенен, разнороден;

По хода, непрекъснато, непрекъснато.

2. Проверка на чистотата на натрупаната култура. Приготвят се натривки, оцветяват се по Грам и се изследват под микроскоп. Ако е натрупана чиста култура, тя се подлага на допълнителна идентификация. Идентифицирането на бактериите по род и вид се основава на изследване на метаболитни характеристики - биохимична идентификация и антигенна структура - серологична идентификация.

3. Проучване биохимични свойства. Биохимични свойства - способността на бактериите да разграждат определени субстрати поради производството на подходящи ензими. За изследване на биохимичните свойства се използват диференциални диагностични среди, съдържащи различни субстрати (разнообразни серии). Те включват Hiss среда с въглехидрати, лакмусово мляко, желатин, среда с аминокиселини, MPB (месопептонен бульон) с индикатори за сероводород и индол.

Захаролитичните свойства се изследват върху среда на Hiss. Те съдържат пептонна вода, въглехидратен субстрат (различни моно- и полизахариди), многовалентни алкохолии индикатор.

Ако бактериите имат ензими, които разграждат въглехидратния субстрат, те отделят метаболитни продукти (киселина или киселина и газ). Когато се образува киселина, индикаторът променя цвета на средата; когато се образува газ, се записват прекъсвания в средата.

Протеолитичните свойства се изследват чрез култивиране върху желатин и лакмусово мляко. Ако бактериите имат протеази, желатинът се втечнява. В млякото се появява кремав съсирек, а над него течност - пептонизация на млякото (поради факта, че бактериалните протеази разграждат млечния казеин до пептон).

Пептолитични свойства. По-често бактериите са в състояние да разграждат междинните продукти от разграждането на протеините - пептони. Продуктите от този процес: амини (скатол, индол), аминокиселини, газове (сероводород, амоняк, въглероден двуокис). Те могат да бъдат открити с индикаторна хартия:

Лакмус - за откриване на амоняк;

Навлажнен с оксалооцетна киселина - за откриване на индол;

Навлажнен с оловен ацетат - за откриване на сероводород. Продуктите на дезаминиране и декарбоксилиране на аминокиселини се откриват с помощта на тест ленти, които променят цвета си при промяна на рН на средата.

Ден 4 от изследването

1. Запишете резултатите от биохимичните тестове. След като дадена култура бъде идентифицирана спрямо нейния вид, се изследват редица допълнителни характеристики, като чувствителност към антибиотици, токсигенност, наличие на вирулентни фактори, плазмиден профил и също се извършва вътревидова диференциация.

2. Резултатите от биохимичната идентификация служат като основа за серологична идентификация. Серологичната идентификация на изолираната култура се извършва в реакция на стъклена аглутинация, като се използват подходящи имуноадсорбирани серуми, изборът на които се определя от резултатите от биохимичната идентификация.

Вътрешноспецифична диференциация - определяне дали щамът принадлежи към определен фаговар, бактериоциногеновавар, бактериоциновар, биовар, резистовар и др. Това ни позволява да идентифицираме епидемиологични връзки между щамове от един и същи вид.

Идентифицирането на изолираната култура ни позволява да направим заключение за това кой микроорганизъм служи етиологичен факторзаболявания. Когато е избрано опортюнистични бактериинеобходимо е да се спазват критериите за етиологично значение:

Наличие на бактерии в материала от патологичното огнище в количество най-малко 10 5 CFU ml/g;

Повтаряща се изолация от материал от същата култура;

Повишаване на титъра на антителата в кръвния серум на пациента към автощама 4 пъти или повече.

Определяне на бактериални фаги (фаготипизиране)

Идентификацията на Phagovar се извършва според епидемиологични показания за установяване на епидемиологични връзки между болни хора. За да проведете изследването, вземете петриеви панички с MPA, изсушете повърхността, начертайте дъното на квадрати и ги маркирайте. След това 3-4-часова култура в бульон се засява с морава, изсушава се и капка от съответния стандартен фаг в работно разреждане се прилага към всеки квадрат. Културите се поставят в термостат за един ден. След 24 часа се взема предвид спектърът на чувствителност на културата към определени фаги чрез литично действие.

определяне на бактериоциновар

За определяне на бактериоциновар се определя чувствителността на изследваните щамове към референтния бактериоциновар. Подобно на фаготипизирането, то се извършва по епидемиологични показания.

За провеждане на изследването се засяват съответните стандартни продуциращи култури от типични бактериоцини хранителни среди. Културите се поставят в термостат при 37 °C за 48 часа.

Порасналите колонии от индикаторни култури се инактивират с хлороформ, след което върху повърхността се изсипват 2-4 ml разтопен агар, в който първо се добавят 0,2 ml от изследваната 4-часова бульонна култура. След като агарът се втвърди, посевите отново се поставят в термостат за 18-24 часа. След определеното време се взема предвид наличието на зони на инхибиране на растежа около индикаторните култури, като по този начин се определя бактериоциноварът на изследваните бактерии.


©2015-2019 сайт
Всички права принадлежат на техните автори. Този сайт не претендира за авторство, но предоставя безплатно ползване.
Дата на създаване на страницата: 2016-04-27

Диагностика инфекциозни заболяваниянеобходими за последващи адекватни етиотропна терапиянасочени към унищожаване на патогена патологичен процес. Откриване и идентификация патогенни микроорганизмиизвършено с помощта различни техники лабораторна диагностика, едно от които е бактериологично изследване.

Бактериологията като наука се развива през XIX век благодарение на въвеждането на бактериологични изследователски техники.

Принципът и същността на техниката

Основната цел на бактериологичното изследване е откриването и последващото идентифициране на патогенен (болестотворен) микроорганизъм в изследвания материал. За да направите това, инокулацията се извършва върху специални хранителни среди (месен пептонен бульон, твърда агарна среда), върху която, в присъствието на патоген в материала, след известно време растат колонии от микроорганизми. Те се идентифицират чрез микроскопски (размер на клетките, тяхната форма, определен цвят при оцветяване по Грам), биохимични (способността да разграждат определени въглехидрати или
протеини) и антигенни (взаимодействие с антитела към основните класове патогени) свойства. Като цяло тази диагностична техника изисква от 48 до 72 часа, което е доста дълго (особено ако е необходимо бързо да се започне етиотропна терапия инфекциозна патология). въпреки това този видлабораторната диагностика не губи своята актуалност днес, тъй като е надеждна за голямо количествоинфекциозни заболявания.

Много често по време на бактериологично изследване допълнително се определя чувствителността на изолирания патогенен микроорганизъм към основните групи съвременни антибиотици. Това дава възможност впоследствие да се избере най-ефективната етиотропна терапия.

Кога се извършва бактериологична диагностика?

Показанието за провеждане на бактериално изследване е диагностицирането на различни инфекциозни заболявания, които включват:


Тази техника може да се използва и за определяне на причинителя на гнойни процеси. различни локализации. На първо място, това е необходимо за определяне на чувствителността на идентифицираните микроорганизми към антибиотици, тъй като с развитието на гноен процес патогените често са резистентни към повечето антибиотици.

Диагностиката на дисбактериозата чрез бактериологично изследване позволява да се определи вида на опортюнистични микроорганизми, както и тяхното количество, въз основа на което се прави заключение за тежестта на нарушението на нормалната микрофлора.

Материалът, използван за бактериологично изследване, е урина, кръв, тампони от носната кухина, уретрата, вагината, ректума, изпражнения, сперма при мъжете, храчки. Изборът на материал зависи от показанията за процедурата. този методлабораторна диагностика и локализиране на патологичния процес.

Декодиране на резултатите

В повечето случаи резултатът от изследването се основава на 2 показателя - фактът на наличието на откриваем
микроорганизъм (положителен или отрицателен резултат), както и числото бактериални клеткиза единица обем от изследвания материал (този показател възниква само когато положителен резултат). Бактериалното изобилие се изразява като броя на единиците, образуващи колонии (CFU). Колкото по-висок е този показател, толкова по-голям е броят на бактериите в тествания материал. Резултатът може да включва и показатели за чувствителността на идентифицирания микроорганизъм към антибиотици. Обикновено се състои от списък с основни класове антибактериални средства (

За да се получи надежден резултат, анализът трябва да се извърши поне 2 седмици след това последна срещаантибиотици и (или) антибактериални лекарства.

  • Остъргване от пикочен канал Препоръчва се тестът да се направи 2 часа след последното уриниране, от фаринкса и назофаринкса – на празен стомах (4-5 часа след последното хранене, в този случай е необходимо да се изключи миенето на зъбите и изплакването на устата), за други локуси специално обучениене е задължително.
  • Урина. Предмет на изследване е средна порция свободно отделена урина в количество 3-5 ml в стерилен пластмасов контейнер за еднократна употреба (контейнерът може да се получи на рецепцията) след щателна тоалетна на външните полови органи без използване на антисептици. . Време за доставка до лабораторията стайна температура– 1-2 часа, при температура 2-8°C – 5-6 часа.
  • сперма за бактериологично изследване се събира в стерилен пластмасов контейнер за еднократна употреба с широко гърло чрез мастурбация (контейнерът може да се получи на рецепцията). Времето за доставка на материала до лабораторията при стайна температура е 1-2 часа.
  • храчки Препоръчително е да се събира сутрин, на празен стомах след саниране устната кухина, в стерилен пластмасов контейнер. Времето за доставка на материала до лабораторията при стайна температура е 1-2 часа, при температура 2-8°C - 5-6 часа.
  • Ограда тайна простатната жлеза извършва се от уролог след предварителен масаж на простатата ( тази манипулацияизвършва само в Централен офис). Преди събиране на простатен секрет се препоръчва сексуално въздържание поне 2 дни.
  • Бактериологични изследвания кърма . Кърмата се събира само преди хранене на бебето или два часа след кърмене. Изследваната пациентка се мие отляво и отдясно млечна жлеза топла водасъс сапун и подсушете с чиста кърпа. Третирайте повърхността на зърната и върховете на пръстите с памучна вата, умерено навлажнена със 70% етилов алкохол. Първата порция кърма, приблизително 0,5 ml, се изхвърля. След това, без да докосва зърното с ръце, жената изцежда 0,5 - 1 ml мляко от всяка жлеза в отделен стерилен контейнер (контейнери могат да бъдат получени на рецепцията). Времето за доставка до лабораторията при стайна температура е 1-2 часа, при температура 2-8°C – 5-6 часа.
  • Ограда с иновална течност за бактериологично изследване се извършва от лекар в стерилен пластмасов контейнер (контейнерът може да се получи на рецепцията). Тази процедура не се извършва в лабораторни условия. Времето за доставка на материала до лабораторията при стайна температура е 1-2 часа, при температура 2-8°C - 5-6 часа.
  • Ограда отделяне от рана за бактериологично изследване се извършва от лекар, в контейнер за еднократна употреба със среда на Ames (контейнерът може да се получи на рецепцията). Времето за доставка на материала в лабораторията при стайна температура е в рамките на 6 часа, при температура 2-8°C - до 2 дни.
  • Жлъчка за бактериологично изследване се събира по време на сондиране, поотделно, в части А, В и С в три стерилни епруветки или по време на операция с помощта на спринцовка в една епруветка, като се спазват правилата за асептика (тази процедура не се извършва в лабораторията). Времето за доставка на материала до лабораторията при стайна температура е 1-2 часа, при температура 2-8°C - 5-6 часа.

Бактериологичен (микробиологичен) анализ включва изследвания на изпражнения, урина, храчки, проби от гърлото и др. Те се провеждат, за да се установи причинителя на инфекцията възпалителен процес, постави диагноза и предпише подходящо лечение.

Бактериологичният анализ също така дава възможност да се определи чувствителността на бактериите към антибиотици, а в някои случаи и към бактериофаги. Състои се в изолиране на чиста култура на причинителя на заболяването и идентифицирането му, т.е. изследване на свойствата на микроорганизмите в бактериологична лабораторияс цел принадлежност към един или друг вид или род.

Изолирането на чиста култура на патогена от засяването е първият етап от изследването. Следните са:

  • идентификация на микроорганизми;
  • определяне на чувствителността на идентифицирани патогенни микроорганизми към антибиотици и бактериофаги.

За изолиране на чисти култури могат да се използват както механични, така и биологични методи.

При механичен методкапка от тестовия материал се смила върху повърхността на плътна хранителна среда в първото, второто и третото петриево блюдо. А самото изолиране на чиста култура включва нейното изследване и скрининг върху свежа хранителна среда.

Биологичните методи от своя страна се основават на отчитане на специфичните свойства на изолирания микроб, което го отличава от другите микроби в изследвания материал. Този метод използва хранителни среди, в които се създават благоприятни условия за развитието на определен вид микроби.

Предварителна заявка за консултация