Petrohradská státní univerzita
Fakulta medicíny.
Práce na kurzu
obor: Mikrobiologie
téma: Syfilis - mikrobiologický aspekt
Úvod
Sexuálně přenosná infekční onemocnění (STI) jsou součástí infekční patologie a jsou lidem známy od nepaměti. Přinejmenším Hippokrates psal o nemoci velmi připomínající kapavku (výtok z močové trubice u mužů) již v 5. století před naším letopočtem. e. a již ve 2. století Galén popsal úplný klinický obraz této nemoci a zavedl termín kapavka.
Speciální rentgenové paleontologické studie prokázaly syfilitickou povahu poškození kostí koster z pohřbů datovaných do 2. století před naším letopočtem. e. - I století. Epidemie syfilis v Evropě v 15.-16. století si vyžádala desítky tisíc životů a přitáhla pozornost nejen lékařů, ale i osvícené evropské veřejnosti, spisovatelů, básníků: Fracastoro, Rabelais, Pare atd. V Rusku syfilis se objevil na počátku 16. století, a přestože nebyl tak rozšířený jako v Evropě, přesto důsledky syfilitické infekce v podobě charakteristických deformací a fyzické degradace, možnosti přenosu na potomstvo okamžitě upoutaly pozornost osvětlovačů. domácí vědy k tomuto problému - M.Ya Mudrová, N.I. Pirogová, S.P. Botkin, F. Koch a další.
Léčba syfilis se v té době prováděla především rtuťovými přípravky, které se vtíraly do různých oblastí kůže nebo dokonce inhalovaly ve formě páry. Závažnost syfilitické infekce se samozřejmě oslabila, ale zvýšil se počet případů poškození vnitřních orgánů a nervového systému v důsledku toxického účinku rtuti. Prvním lékem, který kombinoval účinnost léčby syfilis a byl relativně bezpečnější než rtuť, byl slavný lék 606 (salvarsan), syntetizovaný Ehrlichem v roce 1909. To byl historický okamžik, který znamenal zrod éry chemoterapie infekčních chorob.
Ve 30. letech byla syntetizována sulfonamidová léčiva, která se ukázala jako velmi účinná při léčbě kapavky a dalších zánětlivých onemocnění urogenitální oblasti, jejichž etiologie tehdy nebyla známa.
Antibiotika se však v boji proti pohlavně přenosným chorobám ukázala jako nejúčinnější. První zkušenost s léčbou syfilis penicilinem v roce 1943 od Mahoneyho, Arnolda a Harrise byla mimořádně úspěšná: i malé dávky penicilinu vedly k trvalému vyléčení syfilis u lidí a pokusných zvířat. Od té doby uplynulo více než půl století, ale i dnes jsou antibiotika hlavními a často jedinými léky pro léčbu pohlavně přenosných chorob.
Úkolem vybraným ke zvážení v této práci je „Syfilis – mikrobiologický aspekt“. Téma je posuzováno z pohledu mikrobiologie. Abychom pochopili a zvážili procesy spojené s touto nemocí, je nejprve nutné definovat:
Syfilisje infekční onemocnění způsobené Treponema pallidum, přenášené převážně sexuálně, s chronickým recidivujícím průběhem a charakteristickou periodicitou klinických příznaků, schopné postihnout všechny orgány a systémy. Ve vědě existuje určitá klasifikace syfilis: Primární syfilis; séronegativní, séropozitivní, sekundární syfilis; čerstvá, recidivující, latentní, terciární syfilis; aktivní, latentní, latentní syfilis; Séropozitivní časná, séropozitivní pozdě, vrozená časná syfilis, pozdní, latentní, neurosyfilis, viscerální syfilis. Původcem onemocnění je Treponema pallidum (Tgeropeta pallidum), spirálovitý, 4-14 mikrometrů dlouhý a 0,2-0,25 mikrometrů v průměru, má 8-12 uniformních kadeří, může existovat ve třech formách - spirální, cystická a L- formulář . Nejčastější (klasický) průběh syfilis je způsoben přítomností spirální formy patogenu, ostatní formy si pravděpodobně udržují dlouhý latentní průběh. U neléčených pacientů přetrvává získaná syfilis řadu let. V klasickém průběhu onemocnění jsou 4 období: inkubační, primární, sekundární, terciární. Osoba se syfilis je přímým zdrojem infekce. Hlavní cestou infekce je přímý kontakt (obvykle sexuální) s nemocnou osobou. Při vrozené syfilis dochází k infekci in utero - přes cévy placenty. Treponema pallidum, které se dostaly do těla, se šíří lymfatickým systémem, aktivně se množí a vstupují do různých orgánů a tkání, což způsobuje určité projevy onemocnění. Postupem času se počet Treponema pallidum v těle pacienta snižuje, ale reakce tkáně na patogen se stává prudší. Připouštějí možnost dlouhého (mnoho let) asymptomatického průběhu syfilis od samého počátku onemocnění s následným rozvojem poškození nervového systému a viscerálních forem onemocnění. Tato práce bude podrobně zkoumat procesy spojené s příčinami a následky onemocnění, diagnostiku, průběh onemocnění a jeho léčbu z pohledu mikrobiologie. 1. Období onemocnění
1.1 Inkubační doba
Inkubační doba trvá od okamžiku infekce až do objevení se prvního klinického příznaku - chancre (v průměru - 20-40 dní). Někdy se zkracuje na 10-15 dní při masivní infekci, která je doprovázena mnohočetným nebo bipolárním chancrem, stejně jako při superinfekci. Prodloužení inkubační doby na 3-5 měsíců je často pozorováno u závažných doprovodných onemocnění nebo po léčbě malými dávkami antibiotik. .2 Primární syfilis
Hard chancre (vředy), jeden nebo více, se nejčastěji nacházejí na genitáliích, v místech, kde se obvykle vyskytují mikrotraumata při pohlavním styku. U mužů je to hlava, předkožka a méně často dřík penisu; někdy se vyrážka může nacházet uvnitř močové trubice. U homosexuálů se nacházejí v obvodu řitního otvoru, v hloubce kožních záhybů, které jej tvoří, nebo na sliznici konečníku. U žen se obvykle objevují na malých a velkých stydkých pyscích, na vstupu do pochvy, na hrázi, méně často na děložním čípku. V druhém případě lze vřed vidět pouze při gynekologickém vyšetření na židli pomocí zrcadel. Chancres se může objevit prakticky kdekoli: na rtech, v koutku úst, na hrudi, podbřišku, na ohanbí, v tříslech, na mandlích, v druhém případě připomínající bolest v krku, při které hrdlo sotva bolí a teplota neroste. U některých pacientů dochází ke ztluštění a otoku se silným zarudnutím, dokonce až zmodráním kůže; u žen - v oblasti velkých stydkých pysků, u mužů - v předkožce. S přidáním „sekundárního“, tzn. další infekce, rozvíjejí se komplikace. U mužů se jedná nejčastěji o zánět a otok předkožky (fimózu), kde se obvykle hromadí hnis a v místě již existujícího šrámu lze někdy nahmatat bulku. Pokud v období narůstajícího otoku předkožky dojde k jejímu posunutí zpět a otevření hlavice penisu, pak zpětný pohyb není vždy úspěšný a hlavice je skřípnuta zataveným kroužkem. Nabobtná a pokud se neuvolní, může zemřít. Někdy je taková nekróza (gangréna) komplikována vředy předkožky nebo lokalizovanými na hlavě penisu. Asi týden po objevení se chancroidu se blízké lymfatické uzliny (nejčastěji v tříslech) bezbolestně zvětšují a dosahují velikosti; hrášek, švestky nebo dokonce slepičí vejce. Na konci primárního období se také zvyšují další skupiny lymfatických uzlin. .3 Sekundární syfilis
Začíná výskytem hojné vyrážky po celém těle, které často předchází zhoršení zdravotního stavu a teplota se může mírně zvýšit. Chancre nebo jeho zbytky, stejně jako zvětšené lymfatické uzliny, jsou do této doby stále zachovány. Vyrážka se obvykle projevuje jako malé růžové skvrny, které rovnoměrně pokrývají kůži, nevystupují nad povrch kůže, nesvědí ani se neodlupují. Tento druh skvrnité vyrážky se nazývá syfilitická roseola. Jelikož nesvědí, lidé, kteří na sebe nedávají pozor, je mohou snadno přehlédnout. Dokonce i lékaři se mohou mýlit, pokud nemají důvod se domnívat, že má pacient syfilis, a diagnostikovat spalničky, zarděnky, spálu, které se nyní často vyskytují u dospělých. Kromě roseoly se vyskytuje papulární vyrážka, skládající se z uzlů velikosti hlavy zápalky až hrášku, jasně růžové, s namodralým, nahnědlým nádechem. Mnohem méně časté jsou pustulózní nebo pustulózní vyrážky podobné běžnému akné nebo vyrážky planých neštovic. Stejně jako jiné syfilitické vyrážky ani pustuly nebolí. Stejný pacient může mít skvrny, uzliny a pustuly. Vyrážky trvají několik dní až několik týdnů a poté bez léčby zmizí, aby byly po více či méně dlouhé době nahrazeny novými, čímž se otevírá období sekundární recidivující syfilis. Nové vyrážky zpravidla nepokrývají celou kůži, ale nacházejí se v oddělených oblastech, jsou větší, bledší (někdy sotva znatelné) a mají tendenci se seskupovat, tvoří prstence, oblouky a jiné tvary. Vyrážka může být stále makulární, nodulární nebo pustulózní, ale s každým novým výskytem je počet vyrážek menší a větší. Pro období sekundárního relapsu jsou typické uzliny na zevním genitálu, v perineální oblasti, v blízkosti řitního otvoru a pod podpaží. Zvětšují se, jejich povrch vlhne, tvoří oděrky, mokvající výrůstky navzájem splývají, vzhledem připomínají květák. Takové výrůstky, doprovázené páchnoucím zápachem, jsou málo bolestivé, ale mohou překážet při chůzi. Pacienti se sekundární syfilidou mají tzv. „syfilitickou angínu“, která se od běžné liší tím, že když mandle zčervenají nebo se na nich objeví bělavé skvrny, hrdlo nebolí a tělesná teplota se nezvýší. Na sliznici krku a rtů se objevují bělavé ploché útvary oválného nebo bizarního tvaru. Na jazyku jsou jasně červené oblasti oválných nebo vroubkovaných obrysů, ve kterých nejsou žádné papily jazyka. V koutcích úst mohou být praskliny – tzv. syfilitické džemy. Na čele se někdy objevují hnědočervené uzliny - „koruna Venuše“. Kolem úst se mohou objevit hnisavé krusty, které simulují běžnou pyodermii. Vyrážka na dlaních a chodidlech je velmi častá. Pokud se v těchto oblastech objeví vyrážky, rozhodně byste se měli poradit s venerologem, i když kožní změny zde mohou být i jiného původu (například plísňové). Někdy se na zádech a po stranách krku tvoří malé (velikost nehtu) zaoblené světlé skvrny, obklopené tmavšími oblastmi kůže. „Náhrdelník Venuše“ se neodlupuje a nebolí. Objevuje se syfilitická plešatost (alopecie) ve formě buď rovnoměrného řídnutí vlasů (až výrazné) nebo malých četných skvrn. Připomíná srst ožranou moly. Často také vypadává obočí a řasy. Všechny tyto nepříjemné jevy se objevují 6 a více měsíců po infekci. Zkušenému venerologovi stačí letmý pohled na pacienta, aby mu na základě těchto příznaků diagnostikoval syfilis. Léčba rychle vede k obnovení růstu vlasů. U oslabených pacientů, stejně jako u pacientů, kteří zneužívají alkohol, jsou často mnohočetné vředy roztroušené po kůži, pokryté vrstvenými krustami (tzv. „maligní“ syfilis). Pokud pacient není léčen, může několik let po infekci vstoupit do terciárního období. .4 Terciární syfilis
Na kůži se objevují jednotlivé velké uzliny až do velikosti vlašského ořechu nebo dokonce kuřecího vejce (guma) a menší (tuberkuly), které se zpravidla nacházejí ve skupinách. Guma postupně roste, kůže se zbarví do modročervena, poté se z jejího středu začne vylučovat viskózní tekutina a vznikne dlouhodobě nehojící se vřed s charakteristickým nažloutlým spodkem „mastného“ vzhledu. Gumózní vředy se vyznačují dlouhou existencí, trvající mnoho měsíců a dokonce let. Jizvy po zahojení zůstávají na celý život a z jejich typického hvězdicového vzhledu lze po dlouhé době pochopit, že tento člověk měl syfilis. Tuberkuly a dásně se nejčastěji nacházejí na kůži přední plochy nohou, v oblasti lopatek, předloktí atd. Jedním z častých míst terciárních lézí je sliznice měkkého a tvrdého patra . Ulcerace se zde mohou dostat až do kosti a zničit kostní tkáň, měkké patro, zvrásnit jizvami nebo vytvořit otvory vedoucí z dutiny ústní do dutiny nosní, čímž hlas získá typický nosní tón. Pokud se dásně nacházejí na obličeji, mohou zničit kosti nosu a ten „propadne“. Ve všech fázích syfilis mohou být postiženy vnitřní orgány a nervový systém. V prvních letech onemocnění se u některých pacientů rozvine syfilitická hepatitida (poškození jater) a projevy „latentní“ meningitidy. S léčbou rychle mizí. Mnohem méně často, po 5 a více letech, se v těchto orgánech někdy tvoří zhutnění nebo gumma, podobné těm, které se objevují na kůži. Nejčastěji bývá postižena aorta a srdce. Vytvoří se syfilitické aneuryzma aorty; v některé části této životně důležité cévy se její průměr prudce rozšíří a vznikne vak s velmi tenkými stěnami (aneuryzma). Prasknutí aneuryzmatu vede k okamžité smrti. Patologický proces může také „sklouznout“ z aorty do ústí koronárních cév, které zásobují srdeční sval, a pak dochází k záchvatům anginy pectoris, které nejsou zmírněny běžně používanými prostředky. V některých případech způsobuje syfilis infarkt myokardu. Již v časných stadiích onemocnění se může rozvinout syfilitická meningitida, meningoencefalitida, prudké zvýšení nitrolebního tlaku, mozkové příhody s úplným nebo částečným ochrnutím atd. Tyto závažné jevy jsou velmi vzácné a naštěstí celkem dobře reagují na léčbu. léčba syfilis treponema 1.5 Pozdní projevy syfilis
Objevují se, pokud osoba nebyla léčena nebo byla léčena špatně. U tabes dorsalis postihuje treponema pallidum míchu. Pacienti trpí záchvaty akutní nesnesitelné bolesti. Kůže ztrácí citlivost natolik, že nemusí cítit spálení a věnují pozornost pouze poškození kůže. Chůze se mění, stává se „kachní“, nejprve se objevují potíže s močením a poté močová a fekální inkontinence. Zvláště závažné je poškození zrakových nervů, které v krátké době vede ke slepotě. Mohou se vyvinout těžké deformity velkých kloubů, zejména kolen. Zjišťují se změny velikosti a tvaru zornic a jejich reakce také na snížení nebo úplné vymizení šlachových reflexů, které jsou způsobeny dopadem na kolenní šlachu (patelární reflex) a přes patu (Achillův reflex). Progresivní paralýza se obvykle rozvíjí po 15-20 letech. Jde o nevratné poškození mozku. Chování člověka se prudce mění: snižuje se schopnost pracovat, nálada kolísá, schopnost sebekritiky klesá, objevuje se buď podrážděnost, výbušnost, nebo naopak nepřiměřená veselost a nedbalost. Nemocný špatně spí, často ho bolí hlava, třesou se mu ruce, cukají mu obličejové svaly. Po nějaké době se stává netaktním, hrubým, chlípným a projevuje sklony k cynickému zneužívání a obžerství. Jeho rozumové schopnosti se vytrácejí, ztrácí paměť, zejména na nedávné události, schopnost správně počítat při jednoduchých početních operacích „v hlavě“, při psaní vynechává nebo opakuje písmena a slabiky, jeho rukopis je nerovnoměrný, nedbalý, řeč je pomalý, monotónní, jako by „klopýtal“. Pokud není léčba provedena, úplně ztrácí zájem o okolní svět, brzy odmítá opustit své lůžko a s příznaky celkové paralýzy nastává smrt. Někdy s progresivní paralýzou se objevují bludy vznešenosti, náhlé záchvaty vzrušení, agrese, nebezpečné pro ostatní. .6 Vrozená syfilis
Dítě se může nakazit v matčině lůně. Někdy se narodí mrtvé v 5-6 měsících těhotenství nebo se narodí předčasně živé. Donošené dítě se může narodit s klinickými projevy onemocnění nebo s latentní infekcí. K projevům vrozené syfilis většinou nedochází hned po narození, ale během prvních 3 měsíců života. Na vzhledu a chování nemocného dítěte, které v „klasických“ případech vypadá jako „malý stařík“, jsou však již od počátku patrné určité rysy. Jedná se o dystrofického člověka s velkou hlavou a vyhublým tělem, bledou, nažloutlou kůží. Je neklidný, bez zjevného důvodu křičí, špatně se vyvíjí a málo přibírá na váze, a to i přes absenci gastrointestinálních poruch. V prvních dnech či týdnech života se mu na dlaních a chodidlech mohou objevit puchýře (syfilitický pemfigus) obklopené fialovým lemem. Jejich obsah je zpočátku průhledný, pak se stává hnisavým a krvavým, pak se obaly puchýřů scvrknou do krusty. Kolem úst a na čele kůže místy ztlušťuje, leskne se, fialově, při pláči nebo sání dítěte praská a zanechávají jizvy umístěné radiálně v koutcích úst. Na trupu, hýždích a končetinách se často objevují skvrny nebo uzliny. V místech tření a přirozených záhybů někdy mokvají a ulcerují. V prvních týdnech života se objevuje takzvaná „syfilitická rýma“; nosní průchody se prudce zužují, dýchání je obtížné a sání je téměř nemožné, pokud není nos dítěte před každým krmením důkladně pročištěn. V těžších případech se mohou tvořit vředy – nejen na nosní sliznici, ale i na chrupavce a kosti nosní přepážky. Zároveň se ničí a mění se tvar nosu („sedlový“, „tupý“, „kozí“ nos). Poškození vnitřních orgánů začíná v děloze. Játra jsou zvětšená a hustá a následně se může rozvinout cirhóza. Slezina je také obvykle zvětšená a ztluštělá. Je možný těžký zápal plic a potom dítě zemře buď před narozením, nebo krátce po něm. Méně často jsou postiženy ledviny a další orgány. Při vrozené syfilis se kosti mění. Paže nebo noha leží nehybně, jako by byly ochrnuté, protože sebemenší pohyb způsobuje posunutí deformovaných kostí a způsobuje akutní bolest. V místě jejich oddělení se odhalí všechny známky zlomeniny: otok, bolest atd. Tyto zlomeniny dostaly zvláštní název podle jména autora, který je popsal: pseudoparalýza (neboli falešná paralýza) Papouška. Závažné změny mohou nastat i v centrálním nervovém systému. „Nerozumný“ pláč dítěte bez ohledu na příjem potravy je jedním z příznaků syfilitické meningitidy. Mohou se objevit záchvaty křečí, které obvykle procházejí beze stopy, ale někdy zanechávají strabismus a poloparalýzu končetin, známky mozkového hydrocefalu (hydrocefalus), což vede ke zvýšení intrakraniálního tlaku a zvětšení objemu lebky. V dnešní době se dítě s vrozenou syfilidou nejčastěji rodí v termínu, s normální váhou a bez viditelných projevů onemocnění. Při vyšetření lze zjistit pouze zvětšená játra a slezinu, kostní změny (osteochondritida) a pozitivní krevní reakce na syfilis. Někdy jsou poslední jmenovaní jediným příznakem vrozeného onemocnění, které se pak nazývá vrozená latentní syfilis. Onemocnění lze poprvé odhalit ve vyšším věku – po 2 letech (pozdní vrozená syfilis). V tomto období je možné poškození zraku rychle vedoucí k oslepnutí, poškození ucha provázené náhlou a nevratnou hluchotou a změny tvaru horních zubů (řezáků). Charakteristická je zvláštní stavba holeně („šavlovité holeně“). 2. Diagnostika syfilis
Diagnostika slouží k potvrzení klinické diagnózy syfilis, diagnostice latentní syfilis, sledování účinnosti léčby a jako jedno z kritérií vyléčení pacientů se syfilidou k preventivnímu vyšetření určitých skupin populace. Některé aspekty imunologie syfilis. Na imunitní odpovědi organismu se podílejí jak buněčné (makrofágy, T-lymfocyty), tak humorální mechanismy (syntéza specifických Ig). Výskyt antisyfilitických protilátek nastává v souladu s obecnými schématy imunitní odpovědi: nejprve se produkuje IgM, s progresí onemocnění začíná převládat syntéza IgG; IgA je produkován v relativně malých množstvích. Problematika syntézy IgE a IgD není v současnosti dostatečně prozkoumána. IgM se objevuje 2-4 týdny po infekci a mizí u neléčených pacientů asi po 18 měsících; při léčbě časné syfilis - po 3-6 měsících, pozdě - po 1 roce. IgG se obvykle objevuje ve 4. týdnu po infekci a obvykle dosahuje vyšších titrů než IgM. Protilátky této třídy mohou přetrvávat dlouhou dobu i po klinickém vyléčení pacienta. Antigenní struktura Treponema pallidum. Následující antigeny byly nejvíce studovány. Proteinové antigeny Treponema pallidum. Obsahují frakci společnou pro patogenní treponemy a saprofytické treponemy, proti kterým se syntetizují skupinové protilátky. Navíc existuje frakce specifická pouze pro patogenní treponémy. Proteinové antigeny Treponema pallidum jsou vysoce imunogenní, protilátky proti nim se v těle objevují na konci inkubační doby nebo během prvního týdne po objevení se chancre. Antigeny polysacharidové povahy. Jsou slabě imunogenní, protože protilátky proti nim nedosahují významných titrů, takže role těchto protilátek v sérodiagnostice syfilis je nevýznamná. Lipidové antigeny Treponema pallidum. Tvoří asi 30 % suché hmotnosti buňky. Kromě lipidů Treponema pallidum se v těle pacienta objevuje velké množství látek lipidového charakteru v důsledku destrukce tkáňových buněk, především lipidů mitochondriální membrány. Zřejmě mají stejnou strukturu jako lipidové antigeny Treponema pallidum a mají vlastnosti autoantigenů. Protilátky se objeví v těle pacienta přibližně 5-6 týdnů po infekci. Moderní metody sérodiagnostiky syfilis jsou založeny na identifikaci protilátek různých tříd v těle pacienta. Podle charakteru detekovaných protilátek se obvykle všechny sérologické reakce na syfilis dělí na specifické a nespecifické. Nespecifické sérologické reakce (NSR). Reakce této skupiny jsou založeny na průkazu antilipidových protilátek v těle pacienta. Všechny reakce této skupiny jsou založeny na jednom ze dvou principů. Reakce založené na principu fixace komplementu. Wassermanova reakce (WR) a její četné modifikace. Pro účely sérodiagnostiky syfilis je tato reakce využívána v kvalitativní i kvantitativní verzi, je-li provedena klasickou metodou a metodou studené vazby. Reakce se provádí se dvěma antigeny: kardiolipinem a treponemem, připraveným z Reiterova treponému zničeného ultrazvukem. V primárním období syfilis se reakce stává pozitivní 2-3 týdny po objevení se chancre nebo 5-6 týdnů po infekci, v sekundárním - u téměř 100% pacientů, v terciárním aktivním - 70-75%, s tabes dorsalis - v 50 %, progresivní obrna v 95-98 %. Wassermanova reakce často přináší nespecifické pozitivní výsledky u bakteriálních, virových a protozoálních infekcí, u pacientů se zhoubnými novotvary i u zdravých jedinců po požití alkoholu. Často jsou falešně pozitivní výsledky Wassermanovy reakce pozorovány u těhotných žen v osmém měsíci a po porodu. Reakce založené na principu aglutinace kardiolipinu. Mikroreakce s krevní plazmou a inaktivovaným sérem jsou metodami expresní diagnostiky syfilis. Mikroreakce se diagnostikují kapáním pomocí speciálního antigenu. Nejcitlivější a zcela specifickou reakcí je reakce s plazmou. Na druhém místě v citlivosti a prvním ve specificitě je reakce s inaktivovaným sérem. Tyto testy lze doporučit pouze jako screeningové testy, po nichž následuje screening jedinců s pozitivními výsledky pomocí specifických testů. Specifické sérologické reakce. Reakce této skupiny jsou založeny na průkazu protilátek proti původci onemocnění – Treponema pallidum. Tato skupina zahrnuje následující reakce. Imunofluorescenční reakce (RIF). Zaujímá ústřední postavení mezi specifickými reakcemi. Jeho princip spočívá v tom, že testovacím sérem se zpracuje antigen, kterým je Treponema pallidum kmene Nichols, získaný z králičí orchitidy, vysušený na podložním sklíčku a fixovaný acetonem. Po promytí se lék ošetří luminiscenčním sérem proti lidským globulinům. Fluorescenční komplex (anti-lidský globulin + fluorescein thioisokyanát) se váže na lidský globulin na povrchu Treponema pallidum a může být identifikován fluorescenční mikroskopií. Pro sérodiagnostiku syfilis se používá několik modifikací RIF. A. Imunofluorescenční reakce s absorpcí (RIF-absorbance). Skupinové protilátky jsou z testovaného séra odstraněny pomocí kulturních treponém zničených ultrazvukem, což dramaticky zvyšuje specificitu reakce. A jelikož se testovací sérum ředí pouze 1:5, zachovává si modifikace vysokou citlivost. Pokud jde o citlivost a specificitu, RIF-abs není horší než Nelsonova reakce (RIT), ale je mnohem jednodušší na provedení. RIF-abs se stává pozitivní na začátku 3. týdne po infekci (před objevením se chancre nebo současně s ním) a je metodou pro časnou sérodiagnostiku syfilis. Sérum často zůstává pozitivní několik let po úplné léčbě časné syfilis a u pacientů s pozdní syfilis - po celá desetiletí. Indikace pro provádění RIF-abs: pozitivní výsledky Wassermanovy reakce u těhotných žen při absenci klinických a anamnestických údajů naznačujících syfilis; vyšetření osob s různými somatickými a infekčními chorobami, které dávají pozitivní výsledky při testování ve Wassermanově reakci; vyšetření osob s klinickými projevy charakteristickými pro syfilis, ale s negativními výsledky ve Wassermanově reakci; včasná diagnóza syfilis; jako kritérium úspěšnosti antisyfilitické léčby. Přechod pozitivního RIF-abs na negativní v důsledku léčby je 100% kritériem pro vyléčení syfilis. B. Reakce IgM-RIF-abs. Výše bylo zmíněno, že u pacientů s časnou syfilidou se v prvních týdnech onemocnění objevují IgM, které jsou v tomto období nositeli specifických vlastností séra. V pozdějších stádiích onemocnění začíná převažovat IgG. Stejná třída imunoglobulinů je také zodpovědná za falešně pozitivní výsledky, protože skupinové protilátky jsou výsledkem dlouhodobé imunizace saprofytickými treponémy (dutina ústní, pohlavní orgány atd.). Samostatná studie tříd Ig je zvláště zajímavá v sérodiagnostike kongenitální syfilis, kde antitreponemální protilátky syntetizované v těle dítěte budou zastoupeny IgM a IgG budou mateřského původu. Reakce IgM-RIF-abs je založena na použití konjugátu anti-IgM ve druhé fázi namísto anti-lidského fluorescenčního globulinu. Indikace pro tuto reakci jsou: sérodiagnostika vrozené syfilis, protože reakce nám umožňuje vyloučit IgG mateřského původu, který prochází placentou a může způsobit falešně pozitivní výsledek RIF-ab v nepřítomnosti aktivní syfilis u dítěte; odlišení reinfekce (reinfekce) od relapsu syfilis, ve kterém bude pozitivní RIF-abs, ale negativní IgM-RIF-abs; hodnocení výsledků léčby časné syfilis: při plné léčbě je IgM-RIF-abs negativní. Při provádění této reakce mohou být ve vzácných případech pozorovány falešně pozitivní a falešně negativní výsledky. B. Reakce 19SIgM-RIF-a6c. Tato modifikace RIF je založena na předběžné separaci větších molekul 19SIgM od menších molekul 7SIgM studovaného séra. To lze provést pomocí gelové filtrace. Vyšetření séra obsahujícího pouze frakci 19SIgM v reakci RIF-abs eliminuje všechny možné zdroje chyb. Reakční technika, zejména frakcionace testovacího séra, je však složitá a časově náročná, což výrazně omezuje možnost jejího praktického využití. Imobilizační reakce Treponema pallidum (TRE). Toto je první ze specifických reakcí navržených pro sérodiagnostiku syfilis. Jeho princip spočívá v tom, že při smíchání séra pacienta se suspenzí živého patogenního Treponema pallidum za přítomnosti komplementu dochází ke ztrátě mobility Treponema pallidum, zatímco při smíchání suspenze Treponema pallidum se sérem osob, které ano nemají syfilis, pohyblivost Treponema pallidum je udržována po dlouhou dobu. Protilátky proti imobilisinu detekované v této reakci jsou klasifikovány jako pozdní protilátky; objevují se později než protilátky fixující komplement a dosahují maximálního titru do 10. měsíce onemocnění. Proto je reakce nevhodná jako metoda časné diagnostiky. U sekundární neléčené syfilis je však reakce pozitivní v 95 % případů. U terciární syfilis poskytuje RIT pozitivní výsledky od 95 do 100 %. U syfilis vnitřních orgánů, centrálního nervového systému, vrozené syfilis se procento pozitivních výsledků RIT blíží 100. Senzitivita a specificita RIT je přibližně stejná jako u RIF-Abs, s výjimkou diagnózy časné syfilis. Negativní RIT v důsledku plné léčby se nevyskytuje vždy; reakce může zůstat pozitivní po mnoho let. Indikace reakcí jsou stejné jako u RIF-abs. RIT je ze všech specifických reakcí nejsložitější a časově nejnáročnější, proto se v zahraničí používá pouze k vyšetření v pochybných případech. Enzymově vázaný imunosorbentní test (ELISA). Princip metody spočívá v tom, že povrch nosiče v pevné fázi (jamky z polystyrenových nebo akrylových panelů) je senzibilizován antigeny Treponema pallidum. Poté se do těchto jamek přidá testovací sérum. Pokud jsou v séru protilátky proti Treponema pallidum, vytvoří se komplex antigen + protilátka navázaný na povrch nosiče. V další fázi se do jamek nalije protidruhové (proti lidským globulinům) sérum značené enzymem (peroxidázou nebo alkalickou fosfatázou). Značené protilátky (konjugát) interagují s komplexem antigen + protilátka a tvoří nový komplex. K jeho identifikaci se do jamek nalije roztok substrátu (kyselina 5-aminosalicylová). Působením enzymu substrát mění barvu, což ukazuje na pozitivní výsledek reakce. Senzitivitou a specificitou se metoda blíží RIF-abs. Indikace pro ELISA jsou stejné jako pro RIF-abs. Byly vyvinuty makro- a mikro-varianty ELISA. Odezvu lze automatizovat. Nepřímá hemaglutinační reakce (RIHA). Princip spočívá v tom, že jako antigen jsou použity formalinizované a tannizované erytrocyty, na kterých jsou adsorbovány antigeny treponema pallidum. Když se takový antigen přidá do pacientova séra, červené krvinky se slepí – hemaglutinace. Specificita a senzitivita reakce je vyšší ve srovnání s jinými metodami průkazu protilátek proti Treponema pallidum za předpokladu vysoké kvality antigenu. Reakce se stává pozitivní ve 3. týdnu po infekci a zůstává mnoho let po uzdravení. Počet falešně pozitivních a falešně negativních výsledků je malý. Pro tuto reakci byla vyvinuta mikrometoda a také automatizovaná mikrohemaglutinační reakce. V zahraničí je analogem této reakce TRHA (T. Pallidum hemaglutination). Ve třetí fázi se do jamek zavede erytrocytární diagnosticum. V pozitivních případech dochází k hemaglutinaci - červené krvinky jsou fixovány na stěnách jamek, v negativních případech se červené krvinky usazují na dně jamek ve formě disku. Reakce může být dodána v kvalitativní a kvantitativní verzi a je k dispozici pro automatizaci. 3. Zásady léčby a prevence syfilis
Nezbytnou podmínkou pro uzdravení pacientů je včasná, rázná a dovedně prováděná léčba. Moderní principy léčby syfilis jsou založeny na četných teoretických principech, datech z experimentálních studií a klinických pozorování. Před přistoupením ke specifické léčbě je nutné diagnózu syfilis klinicky podložit a laboratorně potvrdit. Je třeba připomenout, k čemu tato diagnóza vede, jak ovlivňuje budoucí osud člověka. Léčba syfilis musí být přísně individuální, na základě charakteristik těla pacienta, období onemocnění, jeho formy, pracovních a životních podmínek, předchozích onemocnění atd. Během léčby musí pacient dodržovat zvláštní režim. Dodržování léčebného a zdravotního režimu do značné míry určuje celkový stav pacienta a umožňuje tak plnou antisyfilitickou léčbu. Velký význam má i podpůrná léčba. Bez ohledu na stadium onemocnění je nutné uchýlit se k obecné posilující terapii (výživa, vitamíny atd.), aby se stimulovaly ochranné a kompenzační mechanismy těla. Moderní specifická činidla mají silný účinek na původce onemocnění. Při jejich předepisování je však třeba vzít v úvahu kontraindikace každého z antisyfilických léků a také celkový stav pacienta. V současné době používají venerologové k léčbě syfilis především tyto skupiny léků: antibiotika, vizmut a jodové přípravky. Použití každého z těchto prostředků má své vlastní indikace a kontraindikace. Antibiotika. Pro svou vynikající terapeutickou kvalitu a dobrou snášenlivost právem zaujaly přední místo. K léčbě pacientů s infekčními formami syfilis se používají léky skupiny penicilinu: sodná sůl benzylpenicilinu, Bicillin -1, Bicillin -3, Bicillin -5. Celková dávka léků skupiny penicilinů závisí na období onemocnění a je stanovena lékařem v souladu s „Pokyny pro léčbu a prevenci syfilis“, přijatými v naší zemi v roce 1988. Přípravky vizmutu V roce 1921 byl do léčby syfilis pomocí Sazerac a Levaditi zaveden vizmut, který rychle a pevně vstoupil do arzenálu antisyfilitických léků. Nejvýhodnější přípravky vizmutu jsou: Biyokhinal, Bispoveral atd. Když jsou přípravky vizmutu zavedeny do těla, jsou přenášeny krevním řečištěm, ukládány a zadržovány po dlouhou dobu ve vnitřních orgánech, což způsobuje podráždění jejich nervových receptorových zón. Kontraindikace užívání léků na bázi bismutu jsou: onemocnění ledvin, alveolární pyorrhea, tuberkulóza, diabetes mellitus, srdeční onemocnění. Jodové přípravky. Jodové přípravky získaly všeobecné uznání jako specifický lék na syfilis v roce 1830 díky práci Zollese. Jodové preparáty jsou nyní široce používány v léčbě pacientů s terciární syfilis (k urychlení resorpce syfilitických infiltrátů) mezi cykly. Jód se nejčastěji používá ve formě roztoku. jodid draselný
2-12% pro 2-3 polévkové lžíce. lžíce denně po jídle, nejlépe v mléce. Méně používané jsou Lugolův roztok a tablety Sayodin. Dnes bohužel neexistují žádná absolutní a spolehlivá kritéria pro vyléčení, ačkoli lékaři o vyléčitelnosti této infekce nepochybují. V současné době je fakt vyléčení stanoven na základě dlouhodobého sledování pacientů po ukončení specifické léčby po dobu 1-3-5 let klinického pozorování. V souladu se stávajícími pokyny mohou být osoby, které podstoupily preventivní léčbu, odhlášeny po 6 měsících klinického pozorování. V případě sekundárního na 3 roky, v případě terciárního skrytého, 5 let lékařské prohlídky. Spočívá ve včasné diagnostice syfilis, komplexní léčbě, sanitární a výchovné práci mezi obyvatelstvem, organizaci každodenního života a odstranění nezaměstnanosti a prostituce. Navzdory tomu, že moderní medicína disponuje účinnými diagnostickými a terapeutickými metodami, stala se syfilis epidemií ve vyspělých i rozvojových zemích. Závěr
Na závěr je třeba učinit několik závěrů. V této práci v kurzu jsme zkoumali jednu z pohlavně přenosných nemocí, které se přenášejí jak sexuálně, tak z rodičů na děti. V naší práci jsme zhodnotili historii studia onemocnění, procesy spojené s jeho průběhem, důsledky spojené s tímto typem onemocnění a způsoby diagnostiky syfilis a způsoby její léčby. S pomocí prací ruských vědců, jako jsou: Akovbyan V.A., Rezaikina A.V., Sokolovsky E.V., Belgesov N.V., Buzina T.S., Kolobova A.A., a další, jsme byli schopni zvážit současný stav těchto problémů a určit vyhlídky do budoucna. vývoj diagnostiky a léčby syfilis. Podle svědectví mnoha odborníků, teoretiků i praktiků; Syfilis je jedním z nejsložitějších typů onemocnění a v současné době nejsou mikrobiologové schopni definitivně analyzovat všechna stadia onemocnění a všechny možné účinné metody jeho léčby. V posledních letech 20. a v prvních letech 21. století se ruským mikrobiologům zpřístupnily zkušenosti ze západní Evropy a USA, což přispělo i ke studiu syfilis ruskými vědci. Seznam použité literatury
1. Akovbyan V.A., Rezaikina A.V., Tikhonova L.I. Charakteristika epidemiologických vzorců, které určují šíření sexuálně přenosných nemocí v Rusku // Vestn. dermatologie a venerologie. - 1998. - č. 1. - S.4-6. Antonev A.A., Romaněnko G.F., Myskin V.S. Prostituce a pohlavně přenosné choroby // Vestn. dermatologie a venerologie. - 1997. - č. 6. - S.20-22. Arabský E.R., Sokolovský E.V. Sociální a lékařsko-psychologické charakteristiky žen trpících syfilidou // Journal of dermatovenerology and cosmetology. - Petrohrad. - 1999. - N 1. - s. 53-58. Belgesov N.V., Ivanov A.M., Sboychakov V.B., Verbov V.N. Kritéria pro výběr enzymatických imunosorbentních testovacích systémů pro diagnostiku syfilis v krevním podání // Materiály výroční vědecké konference věnované 75. výročí katedry mikrobiologie České republiky. vojenské lékařské akademii. VMedA. - Petrohrad, 1998.- S.40-42. Buzina T.S. Fenomén „hledání senzace“ a problém prevence AIDS u drogové závislosti // Problémy. Narkologie. - 1994. - č. 2. - S.84-88. Verbov V.N., Ivanov A.M., Sboychakov V.B., Kolobov A.A. Kombinované použití syntetických analogů antigenů T. pallidum v enzymatickém imunosorbentním testu pro diagnostiku syfilis // Sborník z vědecké konference s mezinárodní účastí "" Virové infekce na on the. práh 21. století: epidemiologie a prevence“. - Petrohrad, 1999.- S.185-186. Golovanova E. A., Verbov V. N., Menshikova A. Yu., Makarova M. A., Kaftyreva L. A. Využití latexového diagnostika pro identifikaci enterohemoragické Escherichia séroskupiny O157 // Materiály celoruské vědecké a praktické konference „Dětské nemoci na řadě století: přítomnost a budoucnost." - Petrohrad, 1999. - S.26-27. Gurvich I.N. Sociální psychologie zdraví. Petrohrad: St. Petersburg State University, 1999. - 1023 Kolobov A. A., Ivanov A. M., Verbov V. N., Shevyakova L. A., Ismagulova G. D. Charakteristika syntetických analogů antigenů patogenů syfilis v enzymové imunoanalýze // Sborník ze 7. mezinárodní konference AIDS, rakovina a související problémy." - Ruský žurnál HIV/AIDS a související problémy. - 1999. - T.3, N1. - S.108. Kubanova A.A., Loseva O.K. Základy primární prevence sexuálně přenosných infekcí (STI) ve skupinách se zvýšeným behaviorálním rizikem // Russian Journal. kožní a pohlavní choroby. - 2000. - č. 5. - S. 4-7. Kungurov N.V., Gerasimova N.M., Sirneva T.A. a kol. O zlepšení forem boje proti syfilis // Materials of the X Scientific and Practical Conf. dermatologové a venerologové oblasti Amur s celoruskou účastí Aktuální problémy dermatologie a venerologie. - Blagoveščensk, 1998. - S. 100-101. Lichtshangof A.Z., Arapenkov D.A. Moderní medicínské, sociální a organizační problémy poskytování lékařské péče pacientům se syfilidou a kapavkou. - Petrohrad: Nakladatelství GPMA, 1999. - 68 s. Luzan N.V., Kamaldinov D.O., Lukyanyuk E.V., Yashina E.Yu. Prevence HIV/AIDS, pohlavně přenosných chorob. Peerovi pomůže metodická příručka pro práci s mládežnickým publikem pro mládežnické vedoucí a instruktory Peer programu. - Novosibirsk: Sibiřský chronograf, 1999. - 72 s. Mylyueva V.A., Ryumshina T.A., Degtyar Yu.S. Klinické a epidemiologické aspekty kapavky u dospívajících // Bulletin of Dermatology and Venereology. - 1990. - č. 8. - S.49-51. Raznatovský IM, Sokolovskij EV, Krasnoselskikh TV a kol. Příčiny a faktory přispívající k rozvoji sérologické rezistence po moderní léčbě syfilis // Journal. dermatovenerol. a kosmetika. - 1996. - č. 1. - S.60-66. Rodionov AN. Syfilis: průvodce pro lékaře. Petrohrad: Petr, 1997 Sboychakov V. B., Ivanov A. M., Verbov V. N., Krutetskaya I. Yu., Ismagulova G. D., Kolobov A. A. Improving the enzyme-linked immunosorbent testovací systém pro diagnostiku syfilis na základě studia spektra specifických protilátek proti T. pallidum. Sborník příspěvků z vědecké konference s mezinárodní účastí "Virové infekce na prahu 21. století: epidemiologie a prevence." - Petrohrad, 1999.- S.278-279. Sboychakov V. B., Ivanov A. M., Verbov V. N., Kolobov A. A., Ismagulova G. D., Bakuradze E. F. Použití modifikovaného enzymového imunosorbentního testu pro diagnostiku syfilis // Materiály vědecké a praktické konference XXXI dermatovenerologové, urologové a gynekologové porodníci Petrohrad. - Petrohrad, 1996.- S.25. Sokolovsky E.V., Karapetyan A.F., Ostrovsky D.V. Drogově závislé prostitutky: lékařské a sociální charakteristiky vysoce rizikových skupin // Journal of Dermatovenereology and Cosmetology. - 1999. - N 1. - S.49-52. Syrneva T. A., Zilberg N. V. Hlavní trendy ve výskytu syfilis v regionu Sverdlovsk // Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology. - 2001. - N 2. - S. 33-36 Taits B.M., Starchenko M.E., Smirnova T.S. Problémy dermatovenerologické služby prevence STI v Petrohradě // Mat. XXXU vědecko-praktické conf. dermatovenerologové a lékaři příbuzných specializací v Petrohradě. - Petrohrad, 2000. - S.4-5. Tikhonova L.I., Privalova N.K. Prognóza výskytu různých forem syfilis v Ruské federaci // Mat. XXXU vědecko-praktické conf. dermatovenerologové a lékaři příbuzných specializací v Petrohradě. - Petrohrad, 2000. - S.5-6. Chuchelin G.N., Vinokurov I.N., Skuratovič A.A. Sociální a epidemiologické charakteristiky pacientů se syfilisem a kapavkou, kteří opakovaně trpí sexuálně přenosnými chorobami // Bulletin of Dermatology and Venereology. - 1983. - č. 10. - S.27-30.
Obecná charakteristika spirochet.
Spirochetózy je skupina infekčních onemocnění způsobených spirálovitými bakteriemi, vyznačující se celkovou intoxikací a druhově specifickou cykličností vývoje.
Taxonomie:
Řád: Spirochaetales (z řeckého speira - kadeř, chaite - vlasy)
Čeleď: Spirochaetaceae, Leptospiraceae
Rod: Spirochaeta Leptospira
Morfologie: dlouhé, tenké, spirálovitě zakřivené mikroorganismy, velikosti 0,1-0,3x5-250 mikronů. Centrální strukturou je protoplazmatický válec, který obsahuje cytoplazmu, nukleoid, 70 S ribozomy a enzymy, obklopený cytoplazmatickou membránou a buněčnou stěnou. Protoplazmatický válec má díky peptidoglykanu stálý spirálový tvar, který vytváří primární kudrlinky. Jejich počet, typ, sklon a úhel sklonu se u různých druhů liší. Sekundární kadeře jsou výsledkem zakřivení celého těla. Kolem spirálovitého cytoplazmatického válce je periplazmatický bičík (bičík), jehož jeden konec je připojen k jednomu z pólů protoplazmatického válce a druhý k druhému přibližně uprostřed buňky, počet bičíků je od 2 do 100 (jedna polovina je připojena k jednomu sloupku a druhá k druhému sloupku). Periplazmatické bičíky spirálovitě ovíjejí protoplazmatický válec a vytvářejí axiální vlákno, na jehož vrcholu je vícevrstvá vnější membrána (vnější obal spirochéty); bičík se nachází mezi ním a válcem (periplazmatický bičík nebo endoflagellum).
Rozdíly od enzoflagella:
neustále obalovat tělo buňky;
zcela umístěn uvnitř buňky;
kontrahovat rotací kolem své osy, translačně a flexe;
zachovat mobilitu v médiu s relativně vysokou viskozitou.
Netvoří spory ani tobolky. Za nepříznivých podmínek vznikají cysty následkem stočení do klubíčka.
Tintoriální vlastnosti: jsou špatně barvené anime barvivy, kromě borélií, gramnegativní, používá se metoda Morozovova stříbření.
Kulturní vlastnosti: náročné na nutriční média, je nutné přidat nativní bílkoviny, sacharidy a mastné kyseliny. Podle způsobu ukládání energie se dělí na anaeroby, fakultativní anaeroby, mikroaerofily a aeroby. Optimální teplota pro Leptospiry a Borrelie je 28-30 C.
Biochemické vlastnosti : kataláza-, ureáza-, oxidáza-negativní, Voiges-Proskauerova reakce „-“, nesnižují dusičnany.
Odpor: záleží na rodu a druhu.
Role v patologii .
Treponema jsou původci syfilis, yaws, pinta, bejel;
Borrelie– epidemická a endemická recidivující horečka přenášená klíšťaty, lymská borelióza;
Leptospira– leptospiróza.
Obecné příznaky spirochetózy:
cyklický kurz;
detekce patogenů v krvi a tkáních;
hlavní metody mikrobiologické diagnostiky: bakterioskopické a sérologické.
2. Mikrobiologie syfilis.
Syfilis - chronické infekční pohlavní onemocnění charakterizované zvlněným průběhem, kdy se střídají období aktivních klinických projevů onemocnění s dlouhými latentními obdobími.
Historie objevů.
Původce syfilis byl identifikován v roce 1905 Schaudinem a Hoffmanem a pojmenoval ho světlá spirocheta. Wasserman spolu s Keisserem a Brooke navrhl sérologický test pro diagnostiku syfilis.
Taxonomie.
Objednejte Spirochaetales
Čeleď: Spirochaetaceae
Rod: Treponema
Druh: Treponema pallidum
Morfologie: spirálovité bakterie o rozměrech 6-14x0,2-0,3 mikronů, počet primárních kadeří je od 8 do 12, umístěných ve stejné vzdálenosti od sebe; Z konců buňky vybíhají tři periplazmatické bičíky. Netvoří spory ani tobolky, ale v těle pokusných zvířat dokážou syntetizovat pouzdrovitou pochvu mukopolysacharidové povahy. Za nepříznivých podmínek se mohou proměnit v cysty, granulovaná a cystovitá kulovitá tělíska.
Tintoriální vlastnosti: špatně barvené anilinovými barvivy, gramnegativní, dle Romanovského-Giemsa - ve slabě růžové barvě (pallidum - bledé), používají metodu Morozovova stříbření a negativní kontrastní barvení dle Burriho, nejúčinnější studie je v temno- polní nebo fázově kontrastní mikroskop.
Kulturní vlastnosti : obligátní anaeroby, chemoorganoheterotrofy, optimální teplota - 35°C, při teplotách nad 40°C ztrácejí životaschopnost. Velmi náročné na živná média; je nutný přídavek ledviny, mozkové tkáně nebo ascitické tekutiny. Treponemata pěstovaná na živných médiích („kultivované“ kmeny) se stávají hrubšími, kratšími, polymorfními a ztrácejí svou imunogenicitu a patogenitu. Treponemy rostou dobře, aniž by ztratily své imunogenní a patogenní vlastnosti ve varlatech králíků a v kuřecích embryích - „tkáňových“ kmenech, které se používají k izolaci a studiu patogenu od pacientů.
Biochemické vlastnosti : neaktivní, rozkládají glukózu, galaktózu, sacharózu, maltózu, mannitol za vzniku kyseliny; vytvořit indol a sirovodík, zkapalnit želatinu; redukovat dusičnan stříbrný na kovové stříbro, které dodává látkám černou nebo tmavě hnědou barvu.
Antigenní struktura : komplexní, proteiny vnější membrány (tepelně labilní, zničené při 76-80°C, polysacharidy (termostabilní); lipoproteiny, což jsou zkříženě reagující antigeny běžné u lidí a skotu, např. kardiolipinový antigen je extrakt lipoproteinů ze srdce skot, používaný v sérologických reakcích v diagnostice.
Faktory patogenity :
a) toxiny:
endotoxin (LPS buněčné stěny);
b) enzymy patogenity nebyly identifikovány;
c) strukturální a chemické složky buňky:
pohyblivost způsobená bičíky;
adhesiny;
proteiny vnější membrány.
Odpor: citlivé na faktory prostředí, UV záření, vysychání, vysoké teploty (při 40°C po dobu 1 hodiny ztrácejí patogenní vlastnosti, při 48°C umírají po 10 minutách); dis. roztoky v pracovních koncentracích mají škodlivý účinek; odolává nízkým teplotám (v chladu zůstává až 50 dní, při zmrazení až 1 rok), v plné krvi a séru při 4°C zůstávají životaschopné 24 hodin; citlivé na soli těžkých kovů a antibiotika (penicilin, erythromycin, karbenicilin atd.)
Epidemiologie.
Zdrojem nákazy je nemocný člověk. Neexistuje žádný bakteriální nosič se syfilisem.
Přenosová cesta:
1) kontakt: a) přímý; b) nepřímé.
2) transplacentární (z matky na novorozence);
3) transfuze.
Vstupní brána: sliznice pohlavních orgánů, dutina ústní atd., kůže s narušenou celistvostí.
Role a patologie
Syfilidou onemocní jen lidé. Experimentálně můžete infikovat opice, králíky a křečky. U opic se vyvíjí chancroid u králíků a křečků, dochází k celkové chronické infekci.
Strana 63 z 91
PATOGENNÍ SPIROCHETY
Spirochety tvoří na rozdíl od bakterií méně běžnou skupinu mikroorganismů.
Všechny spirochety netvoří spory ani tobolky. Nebarví se na Gram (gram negativní). Obtížná kultivace na živných půdách. Spirochety – saprofyty se nacházejí ve vodních plochách bohatých na organický odpad, v kalech, v lidské ústní dutině a střevech. Patogenní spirochety se na základě morfologických charakteristik dělí do tří skupin.
- Treponema, mající tvar pravidelné spirály. Patří sem spirochéta syfilis.
- Borrelie ve tvaru zvlněné nitě s ohyby a širšími přesleny. Do této skupiny patří spirochéty s recidivující horečkou a Vincentova spirochéta.
- Leptospira s četnými malými kadeřemi a charakteristickými háčkovitými zakončeními (infekční žloutenka leptospir).
SPIROCHETE SYFILIS
Původcem syfilis je světlá spirocheta Spirochaeta pallida, poprvé popsaná F. Schaudinem a E. Hoffmannem v roce 1905. O 2 roky dříve při pokusech na opicích objevil spirochétu syfilis D.K.
Morfologie a tinktoriální vlastnosti. Světlá spirocheta je velmi jemná, tenká, slabě se lámající nit s malými, stejnoměrnými, pravidelnými ohyby (obr. 104 a 105 na vložce).
Rýže. 104. Treponema pallidum v tmavém poli.
V průměru je to od 6 do 14 mikronů na délku a 0,25 mikronu na tloušťku. Pojmenování bledý získal pro svou špatnou lakovatelnost anilinovými barvivy a špatnou viditelnost v živém stavu. Tyto vlastnosti jsou způsobeny nízkým obsahem nukleoproteinů a bohatstvím lipoidů v těle spirochéty. K obarvení použijte metodu Romanovského (obr. 105) nebo natřete po prvním vystavení nějakému mořidlu. Nejlepší metodou pro detekci spirochete pallidum je vyšetření v tmavém poli. V čerstvém materiálu, při zkoumání v ultramikroskopu se ztmaveným zorným polem, vykazuje světlá spirocheta aktivní pohyby kolem podélné osy a také translační a rotační pohyby.
Pěstování. Na běžných živných půdách se spirochéta syfilis nerozmnožuje. V. M. Aristovsky a A. A. Geltser úspěšně použili tekuté živné médium sestávající z králičího séra s přídavkem kousku mozkové tkáně. Po výsevu se povrch média naplní vazelínou. V kulturách jsou spirochety hrubší, kratší a liší se polymorfismem. Výsledné kultury postrádají patogenní vlastnosti a nazývají se „kulturní“ na rozdíl od „tkáňových“, které si uchovávají patogenní
vlastnosti a jsou udržovány v laboratořích pasážemi na králících.
Odpor. Světlá spirocheta špatně odolává vysychání a vysoké teplotě. Zahřátí na 45-48° ho zabije do hodiny, na 55° za 15 minut. Méně citlivé na nízké teploty. Při 10 °C zůstává životaschopný až několik dní. Dezinfekční prostředky mají destruktivní účinek. Z chemikálií má nejsilnější účinek 1-2% roztok fenolu.
Patogenita pro zvířata. I. I. Mečnikov a D. K. Zabolotny byli první, kdo získali experimentální syfilis u lidoopů. Králíci se mohou infikovat injekcí patologického materiálu do rohovky, přední oční komory, kůže, sliznice atd. V tomto případě se u zvířat vyvine primární léze ve formě typické sklerózy (chancroid) v místě vakcinace .
Patogeneze a klinický obraz syfilis. Jediným zdrojem nákazy je člověk se syfilidou. Onemocnění se může přenášet jak přímým kontaktem (nejčastěji sexuálním), tak prostřednictvím předmětů kontaminovaných syfilitickým sekretem. Jedení ze sdíleného nádobí, používání společné lžíce atd. (nepřímý kontakt) může přispět k šíření syfilis v domácnosti.
Světlá spirochéta se do těla dostává přes poškozené sliznice a kůži. Po 3-4 týdnech se v místě vstupní brány - chancre (vřed s hustými okraji a dnem - odtud název chancre) objevuje primární skleróza, která charakterizuje primární období syfilis.
Následně mikrob proniká do těla lymfatickými a oběhovými cestami a šíří se po těle – začíná druhé období. Toto období je charakteristické poškozením kůže a sliznic, na kterých se objevují roseola, papuly, vezikuly a pustuly – syfilidy. Druhé období trvá 2-3 měsíce až několik let. Pokud nebyla syfilis dostatečně léčena, začíná třetí období - gumové. Gumy (granulomy) jsou buněčné nahromadění sestávající z lymfocytů, epiteloidních a plazmatických buněk. Mohou být v tloušťce kůže, sliznic, vnitřní
orgánů atd. Gumy někdy dosahují velkých rozměrů, malé cévky kolem nich postupně ubývají v průsvitu a nakonec se uzavírají. V tomto ohledu je narušena výživa dásňových buněk a dochází k jejich hluboké destrukci s tvorbou vředů a jizev v jakýchkoli tkáních a orgánech.
V některých případech se syfilis dostává do čtvrtého období, které je charakterizováno lézemi centrálního nervového systému ve formě progresivní paralýzy a tabes dorsalis. Klinické projevy syfilis se vyznačují tím, že vznikající léze kůže a sliznic jsou ve většině případů nebolestivé, mizí i bez terapeutického zásahu, opakují se a nakonec způsobují těžké léze třetího a čtvrtého období.
Imunita. U lidí neexistuje vrozená imunita vůči syfilis. Přenesené onemocnění také nezanechává ten typ získané imunity, který je charakteristický pro většinu infekčních onemocnění. Během sekundární infekce pacienta se syfilidou spirochety neumírají, ale přetrvávají a šíří se po těle, infikují orgány a tkáně spolu s přeživšími spirochety primární infekce. Při sekundární infekci syfilisem však primární forma reakce - chancre - chybí. Tento imunologický stav se nazývá "shanker imunita".
„Imunitou“ u syfilis rozumíme imunologickou restrukturalizaci organismu, díky které se mění povaha patologických změn i samotný klinický obraz. Mechanismus této „imunity“ není způsoben humorálními faktory, i když protilátky (lysiny, aglutininy) se v séru pacientů nacházejí.
Laboratorní diagnostika. V prvním období syfilis se diagnostika provádí pomocí bakterioskopického vyšetření v tmavém poli nebo v obarvených stěrech materiálu z chancre.
Pro výzkum je nutné extrahovat tkáňový mok z hlubokých částí léze, obsahující větší množství spirochet. Za tímto účelem nejprve důkladně otřete povrch chancre sterilním tamponem namočeným ve fyziologickém roztoku, poté z něj lehkým stlačením dna vředu vymačkejte malé množství tkáňového moku. Pokud se to nepodaří, je dno vředu podrážděno lehkým seškrábnutím skalpelem nebo ostrou lžičkou. Vzniklá kapalina se odsaje Pasteurovou pipetou.
Kapka kapaliny se nejlépe zkoumá v tmavém poli, kde je dobře patrná morfologie jasně osvětlených spirochet a jejich charakteristické pohyby.
Saprofytické spirochéty nacházející se na genitáliích a v dutině ústní (na genitáliích - Sp. refringens, v dutině ústní - Sp. microdentium) se od světlé spirochéty liší svou morfologií a vzorem pohybu. Sp. refringens má hrubší tělo s velkými kadeřemi, nemá pohyb vpřed, Sp. microdentium se liší od světlé spirochéty povahou svého pohybu.
Můžete si také připravit nátěry s inkoustem Burri (viz str. 51), kde je na černém pozadí dobře patrný tvar šedobílých spirochet a jejich kadeře.
Pro vyšetření barevného preparátu se připravují tenké stěry: kapku tekutiny dejte na podložní sklíčko, rozetřete ji po povrchu okrajem druhé sklenice (stejně jako při přípravě stěru z kapky krve). Nátěry se suší na vzduchu, fixují v metylalkoholu a barví 12-15 hodin podle Romanovského (str. 52): světlá spirochéta zrůžoví, což ji umožňuje odlišit od ostatních saprofytických spirochet, které se barví do modra (viz. Obr. 105).
Rýže. 105. Světlá spirocheta ve výboji chancre. Barvení podle Romanovského.
Takto dlouhotrvající zabarvení přípravku se vysvětluje tím, že světlá spirocheta špatně přijímá anilinová barviva.
Ve druhém období syfilis, kdy se na kůži a sliznicích objevují syfilidy, se také odebírá tkáňová šťáva z postižených míst a vyšetřuje se na přítomnost spirochet.
Po 4-5 týdnech od začátku infekce lze provést sérologické vyšetření, které je nejčastější metodou diagnostiky syfilis.
Serodiagnostika syfilis je založena na Wassermanově reakci a sedimentačních reakcích.
Wassermanova reakce. Technika Wassermanovy reakce se neliší od techniky reakce fixace komplementu. Významným rozdílem je způsob přípravy antigenů a také jejich titrace.
Jako antigeny pro Wassermannovu reakci se používají lipoidní extrakty z patologických nebo normálních tkání. Vyšší aktivitou se vyznačují tzv. specifické antigeny připravené ze syfilitických orgánů, díky čemuž jejich titr obvykle dosahuje tisícin mililitru (titr 0,007, 0,05 na 1 ml atd.). Nespecifické antigeny jsou méně aktivní, takže jejich titr je nižší a pohybuje se v rozmezí setin mililitru (například titr 0,01, 0,02 na 1 ml).
Při provádění Wassermanovy reakce se používají 3 antigeny (č. 1, 2 a 3 kardiolipin). Antigen č. 1-specifický. Obsahuje lipidy syfilitické spirochety získané extrakcí z testikulární tkáně králíka infikovaného syfilis. Antigeny č. 2 a 3 jsou nespecifické a obsahují normální tkáňové lipidy (alkoholové extrakty hovězího srdečního svalu s přídavkem 0,25-0,3 % cholesterolu). Kardiolipinový antigen je čištěný přípravek, musí se rychle naředit a po naředění by měl být mírně opalescentní, ale ne zakalený. Titr antigenu označuje jeho množství, které by mělo být v 1 ml fyziologického roztoku a které nezpomaluje hemolýzu v přítomnosti hemolytického systému a komplementu.
Pokud je například na ampuli uveden titr antigenu 0,05 ml, znamená to, že během provozu by měl být antigen naředěn fyziologickým roztokem tak, aby na ml kapaliny bylo 0,05 ml antigenu.
Vzhledem k tomu, že antigeny mohou mít různé antikomplementární vlastnosti, je před provedením Wassermannovy reakce komplement titrován nejen v čisté formě, ale také v přítomnosti antigenů. Protože se Wassermanova reakce provádí se 3 antigeny, komplement by měl být titrován každým antigenem zvlášť.
Modifikace Wassermanovy reakce - Grigoriev-Rapoportova reakce (tabulka 25). Tato reakce je založena na využití komplementární aktivity testovaného séra. Reakce využívá (nejpozději 36 hodin po obdržení) aktivní (nezahřáté) sérum pacienta. K provedení reakce jsou zapotřebí antigeny, hemolytické sérum a defibrinovaná, nepromytá ovčí krev filtrovaná přes dvě vrstvy gázy.
Schéma Grigorjev - Rapoportovy reakce
Ingredience (v ml) | Zkumavky | ||
Aktivní testovací sérum | |||
Solný | |||
Antigen-specifický, zředěný titr | |||
Antigen nespecifický, naředěný podle titru | |||
Pokojová teplota 22° po dobu 25 minut |
|||
Hemolytický systém | |||
Pokojová teplota 22° po dobu 25 minut. |
|||
V případech, kdy nedochází k hemolýze v sérové kontrole, se reakce opakuje a do 0,2 ml testovacího séra se přidá 0,2 ml zjevně aktivního negativního séra, a proto se přiměřeně sníží objem přidaného fyziologického roztoku.
Výsledky experimentu se berou v úvahu ihned po ukončení reakce na základě odečtů prvních dvou zkumavek obsahujících antigen. Pozitivní výsledek je charakterizován úplným zpožděním hemolýzy, negativním výsledkem je úplná hemolýza. V kontrolním séru (3. zkumavka bez antigenu) by mělo dojít k úplné hemolýze.
Kromě těchto reakcí se pro sérodiagnostiku syfilis široce používají sedimentární reakce, jejichž podstatou je interakce inaktivovaného séra pacienta s antigenem, v důsledku čehož se ve zkumavce vytvoří sraženina. Z nich se nejvíce používají Kahnovy a Sachs-Vitebského reakce.
Kahnova reakce. K provedení Kahnovy reakce jsou potřeba následující složky: 1) inaktivované krevní sérum nemocného člověka, 2) speciální Kahnův antigen a 3) fyziologický roztok.
Kahnův antigen je extrakt lipoidů ze svalů ovčího srdce, do kterého se přidává cholesterol. Před experimentem, v závislosti na titru uvedeném na štítku, se antigen zředí následovně. Do jedné čisté a suché zkumavky se nalije antigen a do druhé se nalije fyziologický roztok v množství uvedeném na štítku (1-1.1-1.2). Potom se fyziologický roztok z druhé zkumavky rychle nalije do první zkumavky obsahující antigen (a ne naopak). Výsledná směs se míchá, 6-8krát přelévá ze zkumavky do zkumavky a nechá se 10 minut zrát při pokojové teplotě.
Nastavení experimentu. Šest aglutinačních trubic je instalováno ve stojanu. První tři zkumavky (1., 2. a 3.) jsou experimentální, další tři (4., 5. a 6.) jsou kontrolní (antigenová kontrola). Naředěný antigen se po jeho vyzrání zavede mikropipetou do 3 zkumavek a 3 kontrolních zkumavek. Mikropipeta s antigenem by měla být spuštěna na dno suché zkumavky, aniž by se dotýkala jejích stěn, čímž je zajištěno přesné měření antigenu. 0,5 ml se nalije do 1. zkumavky, 0,025 ml do 2. a 0,0125 ml antigenu do 2. stejné množství antigenu se nalije do 3 kontrolních zkumavek. Do všech zkumavek se přidá 0,15 ml testovacího séra a do kontrolních zkumavek se přidá stejné množství fyziologického roztoku. Stojan se zkumavkami se silně protřepává po dobu 3 minut, aby se sérum promíchalo s antigenem, a umístí se do termostatu při 37° na 10 minut. Po vyjmutí z termostatu přidejte 1 ml fyziologického roztoku do první experimentální a první kontrolní zkumavky a 0,5 ml fyziologického roztoku do druhé a třetí experimentální a kontrolní zkumavky. Obsah zkumavek se znovu protřepe a zohlední se výsledky reakcí (schéma Kahnovy reakce je uvedeno v tabulce 26).
Poznámka. Pro libovolný počet testovacích sér se provede jedna kontrola antigenu. V pozitivních případech reakce se provádí kontrola séra. Za tímto účelem se nalije do zkumavky v množství 0,1 ml, přidá se 0,3 ml fyziologického roztoku a třepe se po dobu tří minut.
Reakce se zaznamenává pouhým okem, pomocí lupy nebo aglutinoskopu.
Tabulka 26
Schéma Cahnovy reakce 
Při zohlednění reakce pouhým okem se každá zkumavka vyjme ze stojanu a mírně nakloněná drží mírně nad úrovní očí před zdrojem světla. Precipitace vloček (sraženiny) ve zkumavkách s testovacím sérem slouží jako indikace pozitivní Kahnovy reakce a je indikována plusy. Ostře pozitivní reakce je označena čtyřmi plusy (+ + + +) - je charakterizována ztrátou jasně viditelných vloček ve všech zkumavkách a mírně opalizující kapalinou. Pozitivní reakce je označena třemi plusy (+ + +) a je charakterizována méně výrazným srážením vloček ve všech zkumavkách. Slabě pozitivní reakce, označená dvěma plusy (+ +), je charakterizována slabší tvorbou sedimentu a přítomností malých částic v zakalené kapalině. Tvorba velmi malých suspendovaných částic v zakalené kapalině je označena jedním plus (+). Nepřítomnost sedimentu a volně suspendovaných částic v kapalině je indikátorem negativní reakce a je označena mínusem (-). V kontrolních zkumavkách by neměly být pozorovány žádné vločky.
SEDIMENTÁRNÍ REAKCE CYTOCHOLU (tabulka 27) podle Sachse-Vitebského. Pro tuto reakci je potřeba mít inaktivované testovací sérum a Sachs-Vitebského cytocholický antigen, což je extrakt lipoidů ze svalů srdce skotu, do kterého se přidává cholesterol.
Tabulka 27
Schéma cytocholické Sachs-Vitebského reakce
Třepejte 1 minutu a nechte 30 minut při pokojové teplotě
Fyziologický roztok I 0,5 I 0,5 I 0,5
Pokud se v antigenu tvoří krystaly cholesterolu, měl by být zahříván ve vodní lázni o teplotě 55-56° nebo v termostatu. Titr antigenu je uveden na ampuli. Antigen se naředí fyziologickým roztokem podle uvedeného titru, 1 ml antigenu se rychle přidá pipetou do 2 ml fyziologického roztoku, dobře se promíchá stejnou pipetou a nechá se 10 minut zrát při pokojové teplotě.
Experiment se provádí ve třech aglutinačních zkumavkách. Do první zkumavky se odměří 0,1 ml testovacího séra a přidá se 0,05 ml naředěného antigenu, do druhé zkumavky se nalije 0,05 ml naředěného antigenu a 0,1 ml fyziologického roztoku a nalije se 0,1 ml testovacího séra a 0,05 ml. do třetí zkumavky ml ethylalkoholu. Všechny zkumavky se protřepávají po dobu jedné minuty a nechají se 30 minut při teplotě místnosti. Poté se do každé z nich přidá 0,5 ml
fyziologický roztok, znovu protřepejte a zohledněte výsledky. Antigenová kontrola se umístí do jedné zkumavky pro celý experiment. Sachs-Vitebského reakce je brána v úvahu stejným způsobem jako Kahnova reakce.
Imobilizační reakce Treponema pallidum. V současné době se k diagnostice syfilis využívá i treponémová imobilizační reakce, jejíž podstata! spočívá ve schopnosti krevního séra pacienta se syfilidou zastavit pohyb spirochet. Antigenem pro tuto reakci jsou živé treponémy získané z testikulární tkáně infikovaného králíka. Antigen je považován za vhodný, pokud mikroskopie odhalí velké množství pohyblivých treponémů. Tři týdny před reakcí by pacient neměl dostávat antibiotika ani jiná antisyfilitika. Tato reakce je specifičtější a citlivější ve srovnání s Wassermanovou a sedimentární reakcí.
Chemoterapie. K léčbě syfilis se úspěšně používají přípravky ze rtuti, bismutu, arsenu (salvarsan, novarsenol, miarsenol) a penicilinu.
T. pallidum poddruh pallidum je spirálovitá bakterie o rozměrech 6-14x0,2-0,3 µm; v plodinách mohou být velké. Spirálové lokny jsou stejně vysoké, může jich být až 14 schopných tvořit tvary L.
Základní způsob reprodukce syfilis- příčné dělení. Původce syfilis Ve vnějším prostředí není příliš stabilní a při vyschnutí odumírá, ale v chladu přetrvává až 50 dní. Zahřívání na teplotu 40 °C po dobu jedné hodiny vede ke ztrátě patogenních vlastností; při 48 °C bakterie umírají do 10 minut.
Původce syfilisšpatně se barví anilinovými barvivy (odtud název „bledá spirochéta“). Bakterie syfilis redukovat dusičnan stříbrný na kovové stříbro, které dodává látkám černou nebo tmavě hnědou barvu.
V domácí praxi je rozšířená morozovská metoda stříbření. Podle Romanovského-Giemsy je zbarven do růžova a je nepatogenní Treponema- ve fialové nebo modré barvě. Používá se také negativní kontrast Burri.
Kulturní vlastnosti syfilis. Kultivace původce syfilis
Bledá spirocheta náročný na podmínky pěstování, špatně roste na umělých médiích; Metody pro stabilní produkci kultur stále chybí.
U nás největší počet kmeny syfilis zdůraznili kazaňští mikrobiologové V.M. Aristovsky a P.P. Geltser.
Tyto "Kazaň" kmeny syfilis spolu s kmenem Reiter se používá k produkci Ag pro sérodiagnostiku. Při dlouhodobé kultivaci bakterie syfilis adaptovat se na jednodušší prostředí (například Kitta-Tarozzi) a ztrácet patogenní vlastnosti.
Kolonie syfilis malé, objevují se 3-5. den kultivace.
č. 23 Původce syfilis. Taxonomie. Charakteristický. Mikrobiologická diagnostika. Léčba.
treponema palladium; T. entericum
Morfologie: typické treponémy s 8-12 přesleny, motorický aparát - 3 periplazmatické bičíky na každém pólu buňky. Barva podle Grama není vnímána; skvrna Romanovsky-Giemsa je slabě růžová, odhalená impregnací stříbra.
Kulturní vlastnosti: virulentní kmen na jámě. neroste v prostředí, ke kumulaci kultury dochází infekcí králíka ve varleti. Virulentní kmeny se kultivují na médiu obsahujícím mozkovou a ledvinovou tkáň.
Biochemické vlastnosti: mikroaerofilní
Antigenní struktura: komplex, má specifické proteinové a lipoidní antigeny, které jsou svým složením identické s kardiolipinem extrahovaným z hovězího srdce (difosfadylglycerol)
Faktory patogenity: adheziny se účastní procesu přichycení, lipoproteiny se podílejí na rozvoji imunopatologických procesů.
Odolnost: citlivý na sušení, sluneční záření, zůstává na předmětech až do zaschnutí. Za nepříznivých podmínek se přeměňuje na L-formy a tvoří cysty.
Patogeneze: Způsobuje syfilis. Od vstupní brány se treponémy dostávají do regionálních lymfatických uzlin, kde se množí. Dále T. proniká do krevního řečiště, kde se připojuje k endoteliálním buňkám a způsobuje endarteriitidu, což vede k vaskulitidě a nekróze tkáně. Krví se T. šíří po celém těle a zasévá orgány: játra, ledviny, kosti, kardiovaskulární a nervový systém.
Imunita: není vyvinuta ochranná imunita. V reakci na patogenní antigeny se rozvíjí HRT a autoimunitní procesy. Humorální imunita je vyvinuta jako odpověď na T. lipoidní antigen a je titrem IgA a IgM.
Mikroskopické vyšetření.
Proveďte pro primární syfilis během výskytu chancre. Materiál pro výzkum: chancre výtok, obsah regionálních lymfatických uzlin, ze kterého se připravuje „rozdrcená“ kapka a zkoumá se v tmavém poli. Pokud je výsledek pozitivní, jsou vidět tenké zvlněné nitě dlouhé 6-14 mikronů, které mají 10-12 stejnoměrných malých kadeří pravidelného tvaru. Treponema pallidum je charakterizována pohyby podobnými kyvadlu a translačně-flexi. S rozvojem lézí na ústní sliznici při sekundární syfilis, stejně jako s lokalizací chancre v dutině ústní, je nutné odlišit Treponema pallidum od saprofytického Treponema, což jsou zástupci normální mikroflóry. Rozhodující diagnostický význam má v tomto případě detekce typických treponem v punktátu regionálních lymfatických uzlin.
Serodiagnostika. Wassermanova reakce se provádí současně se 2 antigeny: 1) specifický, obsahující antigen patogenu - treponémy zničené ultrazvukem; 2) nespecifické - kardiolipin. Testovací sérum se naředí v poměru 1:5 a RSC se umístí podle obecně uznávané metody. Při pozitivní reakci je pozorováno zpoždění hemolýzy, při negativní reakci dochází k hemolýze červených krvinek; intenzita reakce se hodnotí podle toho od (+ + + +) do (-). První období syfilis je séronegativní a je charakterizováno negativní Wassermanovou reakcí. U 50 % pacientů se reakce stává pozitivní nejdříve 2-3 týdny po objevení se chancre. Ve druhém a třetím období syfilis dosahuje frekvence pozitivních reakcí 75–90 %. Po průběhu léčby se Wassermanova reakce stává negativní. Paralelně s Wassermanovou reakcí se provádí mikroprecipitační reakce s nespecifickým kardiolipinovým antigenem a testovaným inaktivovaným krevním sérem nebo plazmou. 3 kapky séra se nanesou do jamky na plexisklové destičce (nebo běžném skle) a přidá se 1 kapka kardiolipinového antigenu. Směs se důkladně promíchá a zohlední se výsledky. Pozitivní reakce s krevním sérem pacienta se syfilis je charakterizována tvorbou a ztrátou vloček různých velikostí; s negativním výsledkem je pozorována rovnoměrná světelná opalescence.
RIF – nepřímá imunofluorescenční reakce – je specifická pro diagnostiku syfilis. Jako antigen se používá suspenze tkáňových treponémů. Použije se reakce RIF_200. Sérum pacienta se inaktivuje stejným způsobem jako u Wassermannovy reakce a naředí se v poměru 1:200. Kapky antigenu se aplikují na podložní sklíčka, suší se a fixují v acetonu po dobu 5 minut. Poté se na přípravek aplikuje pacientovo sérum, po 30 minutách se promyje a vysuší. Dalším krokem je ošetření léku fluorescenčním sérem proti lidským globulinům. Preparát je studován pomocí fluorescenčního mikroskopu, přičemž se zaznamenává stupeň luminiscence treponem.
Specifická je také RIT reakce imobilizace treponémů. Živá kultura Treponema se získává kultivací v králičím varleti. Varle je rozdrceno ve speciálním médiu, ve kterém zůstávají treponémy pohyblivé. Reakce je nastavena následovně: Suspenze tkáňových (pohyblivých) treponem se ve zkumavce spojí s testovaným sérem a přidá se čerstvý komplement. Do jedné kontrolní zkumavky je místo testovacího séra přidáno sérum zdravého člověka, do druhé místo čerstvého komplementu inaktivovaný - neaktivní. Po uchování při 35 °C za anaerobních podmínek (anaerostat) se ze všech zkumavek připraví „rozdrcená“ kapka a v tmavém poli se stanoví počet pohyblivých a nepohyblivých treponém.
Léčba: Peniciliny, tetracykliny, léky obsahující vizmut.
