Predstavuje moderný typ laboratórneho výskumu, ELISA alebo enzýmový imunosorbentový test, ktorý vám umožňuje nájsť špecifické protilátky alebo antigény určitých ochorení v krvi. To umožňuje odhaliť tak etiológiu ochorenia, ako aj určiť jeho štádium. Navyše výsledky tohto typu výskumu možno prezentovať kvantitatívne aj kvalitatívne. Pozrime sa teda podrobne na princíp metódy enzýmovej imunoanalýzy, jej metodiku a podstatu.
Čo je to enzýmová imunoanalýza
Enzýmová imunoanalýza, ktorá je predpísaná pre čo najkomplexnejšie posúdenie zdravia, vám umožňuje posúdiť celkový zdravotný stav a posúdiť jeho ochranné funkcie. Tento laboratórny test vám umožňuje diagnostikovať infekčné, autoimunitné, hematologické patológie pomocou krvného testu.
Podstata enzýmového imunotestu je diskutovaná vo videu nižšie:
Komu je predpísaný?
Táto štúdia môže byť predpísaná pacientom, ktorí majú diagnostikované nasledujúce ochorenia:
- choroby vírusového pôvodu, ktoré zahŕňajú hepatitídu;
- pohlavne prenosné choroby - chlamýdie, trichomonas, syfilis, ureaplazma, mykoplazma;
- imunodeficiencie;
- vykonanie predoperačného komplexného vyšetrenia.
Na stanovenie hladín hormónov a posúdenie kvality typu vykonávanej terapie je tiež predpísaný krvný test ELISA.
Lekár môže predpísať tento test na určenie štádia existujúceho ochorenia, čo umožňuje včasné prispôsobenie použitej liečby. A vysoká presnosť získaných údajov umožňuje mať najkomplexnejší obraz o zdraví. Zároveň sa údaje získavajú po štúdii vo veľmi krátkom časovom období, čo umožňuje sledovať dynamiku vývoja patologického procesu.
Prečo robiť takéto testy?
Keďže vďaka analýze krvi ELISA je možné získať značné množstvo informácií o zdravotnom stave a patologických procesoch prebiehajúcich v organizme, umožňuje maximálne zohľadniť počiatočné údaje (celkový zdravotný stav, štádium choroba, dynamika vývoja patologického procesu, indikátor účinnosti použitej terapie) pri zostavovaní liečebných režimov.
Z tohto dôvodu, aby sa dosiahol najvýraznejší výsledok liečby a najrýchlejšie zastavenie patologického procesu v tele, je predpísaný krvný test ELISA. Na základe získaných údajov možno rýchlejšie vyliečiť závažné ochorenia imunitného systému, prítomnosť antigénov v krvi a príčiny alergií pomocou najúčinnejších metód.
Vymenovanie analýzy ELISA sa vykonáva pre rôzne patológie a malo by sa vykonávať iba podľa predpisu lekára. Frekvenciu rozborov určuje aj lekár a pri darovaní krvi na rozbor ELISA je obraz choroby najúplnejší. Keďže získať dynamiku priebehu ochorenia je možné vykonaním tohto testu viac ako raz, najčastejšie sa darovanie krvi môže predpísať trikrát až päťkrát. To umožňuje porovnávať množstvo protilátok v krvi v rôznych časových obdobiach.
Typy takéhoto postupu
Existuje niekoľko typov enzýmových imunotestov. Líšia sa typom tekutiny odobratej z ľudského tela, na základe čoho sa študuje jej zloženie a prítomnosť určitých antigénov.
V tomto prípade sa na analýzu môže odobrať nielen krv človeka, ale aj jeho ďalšie tekutiny:
- plodová voda,
- cerebrospinálny mok,
- obsah sklovca,
- ťahy,
- hlien z močovej trubice a krčka maternice.
Samotná operácia odberu určitého typu tekutiny je štandardná a vykonáva sa v dennom stacionári.
Indikácie na testovanie
Test ELISA zvyčajne predpisuje lekár, ak je potrebné získať podrobný obraz o aktuálnej chorobe, ktorá sa vyskytuje v akejkoľvek forme: chronická, pomalá alebo akútna. Za indikácie pre tento typ analýzy možno považovať nasledujúce stavy a liečebné účely:
- hľadanie antigénov určitých chorôb;
- stanovenie hormonálneho stavu;
- detekcia vírusu hepatitídy v tele;
- výskum v oblasti ;
- hľadanie protilátok proti akémukoľvek typu infekčnej choroby;
- vyšetrenie na prítomnosť autoimunitných lézií tela.
Informácie o enzýmovej imunoanalýze nájdete v nasledujúcom videu:
Kontraindikácie pre
Doteraz neboli identifikované žiadne kontraindikácie pre enzýmovú imunoanalýzu.
Počas tehotenstva, keď dochádza k neustálym zmenám hladín hormónov v krvi, je potrebné túto analýzu vykonávať opakovane, aby sa potvrdil získaný výsledok. Aj novorodenci a dojčatá môžu mať nesprávne údaje z testov: počas vývoja plodu sa môžu určité typy protilátok dostať do krvi plodu cez placentu matky. Preto by sa ich prítomnosť v analýze nemala považovať za príznak existujúcej infekcie.
Test bezpečnosti
Uskutočnenie postupu odoberania akéhokoľvek druhu tekutiny z ľudského tela neprináša žiadne negatívne účinky na telo. Úplná sterilita počas manipulácií zabraňuje riziku infekcie akýmikoľvek typmi chorôb.
Príprava na podujatie
Ak chcete získať čo najspoľahlivejšie výsledky štúdie, pred odberom krvi (alebo inej tekutiny) na analýzu by ste sa mali zdržať pitia alkoholických nápojov a drog.
Ako procedúra prebieha a ako sa počas nej cítite
Na vykonanie testu ELISA sa krv pacienta odoberie striktne na prázdny žalúdok: najmenej hodiny pred zákrokom by ste nemali jesť žiadnu formu jedla. Analýza sa odoberá z ulnárnej žily.
Prítomnosť akýchkoľvek chorôb a užívané lieky sa hlásia lekárovi najčastejšie, lieky budú vysadené v čase darovania krvi. Pocity počas procedúry sú podobné ako pri odbere krvi na biochemickú analýzu.
Dekódovanie výsledkov
Diagnostika ELISA umožňuje určiť prítomnosť infekcie v tele, aktivitu patologického procesu a etiológiu existujúcej infekcie. Rýchly príjem výsledkov analýzy (do 24 hodín) je jednou z výhod tohto typu výskumu.
Proces dekódovania prijatých informácií vykonáva lekár. Malo by sa vziať do úvahy, že správnosť výsledkov získaných o dynamike akýchkoľvek procesov je zaručená, keď sa testy vykonávajú v jednom laboratóriu.
Priemerné náklady na postup
Priemerná cena testu ELISA závisí od zamerania rozboru a stanovenia konkrétnych hodnôt. Stanovenie sérologických markerov infekčných ochorení rôznych typov (anti-HAV IgG, anti-HAV IgM, HBsAg) teda bude stáť od 200 do 320 rubľov a uskutoční sa do 2 pracovných dní. Náklady na tento postup sa tiež považujú za jeho výhodu: cenová dostupnosť akéhokoľvek typu výskumu vám umožňuje vykonávať výskum pri akejkoľvek veľkosti rozpočtu.
Cena testu ELISA závisí od politiky lekárskej inštitúcie, ale mala by sa považovať za všeobecne dostupný postup, ktorý vám umožní získať podrobný obraz o existujúcej chorobe a poskytnúť čo najkompletnejšiu liečbu.
Informácie o normách a vlastnostiach výskumu ELISA nájdete vo videu nižšie:
(odkaz na 3. článok v tomto súbore), ktorý umožňuje posúdiť schopnosť tela odolávať infekčným ochoreniam a ukázať fázu ochorenia, hrá dôležitú úlohu enzýmová imunoanalýza (ELISA). Vykonanie tejto štúdie vám umožňuje komplexne posúdiť aktivitu ochrannej funkcie krvi a identifikovať stav imunodeficiencie pri infekčných patológiách, ako aj krvných ochoreniach, autoimunitných procesoch a hormonálnych problémoch.
Ako je možné pokryť toľko cieľov v jednej analýze a aké sú náznaky jej implementácie? Skúsme na to prísť.
Čo je krvný test vykonaný metódou ELISA?
Ide o laboratórne vyšetrenie, ktoré umožňuje určiť prítomnosť špecifických protilátok (ochranné krvné faktory proteínovej povahy) proti určitým antigénom (patogénne agens). Spomedzi protilátok majú primárny význam imunoglobulíny, ktoré môžu existovať vo forme imunokomplexov.
Imunoglobulíny sú produkované ako výsledok zložitých ľudských neurohumorálnych reakcií, ktoré sa vyskytujú ako odpoveď na zavedenie cudzích antigénov. Každý typ patogénneho agens produkuje svoje vlastné špecifické protilátky. Pôsobia „naviazaním“ antigénu alebo patologického mikroorganizmu, čím sa vytvorí komplexná zlúčenina „antigén-protilátka“, po ktorej nasleduje neutralizácia, enzymatická lýza, fagocytózové reakcie a odstránenie z tela.
Poznámka:Práve prítomnosťou určitých komplexov metóda ELISA určuje typ patogénu alebo škodlivej látky prítomnej u pacienta.
Základné princípy fungovania ľudskej imunity sa môžete naučiť sledovaním tejto videorecenzie:
Čo sú imunoglobulíny?
Bolo objavených a študovaných 5 hlavných tried imunoglobulínov – IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. úloha zvyšku ešte nie je úplne objasnená a je predmetom vedeckého výskumu.
Poznámka:V praktickej medicíne majú najväčší význam imunoglobulíny tried A, M a G. Informatívnosť definície je založená na rôznych časových intervaloch ich výskytu, maxima a miznutia.
Pozrime sa na túto otázku podrobnejšie.
Hlavná úloha imunoglobulín A (IgA) spočíva v ochranných funkciách slizníc dýchacích ciest, gastrointestinálneho traktu a močového systému. Pri akútnom nástupe ochorenia je nemožné ich identifikovať. Tieto ochranné komplexy sa objavujú až od 2. týždňa nástupu ochorenia, niekedy aj neskôr. Väčšina imunoglobulínu A sa koncentruje v mukóznych tkanivách. Približne 80 %. Zvyšné protilátky cirkulujú v krvi. Hlavnou funkciou je neutralizácia a ničenie mikroorganizmov. Po odznení akútnych prejavov ochorenia začne množstvo týchto imunoglobulínov klesať a úplne vymizne až 8 týždňov po nástupe ochorenia. Ak sa IgA zistí neskôr, znamená to chronický proces.
Hlavné a prvé markery akútnej fázy vývoja patológie sú imunoglobulíny triedy M (IgM). Odhalia sa do 5. dňa nástupu ochorenia. Ich prítomnosť v krvi sa dá zistiť približne do 6 týždňov. Potom začnú rýchlo miznúť.
Reziduálna imunitná odpoveď je charakterizovaná prítomnosťou v krvi imunoglobulíny triedy G (IgG). Vzhľad týchto faktorov v krvi sa zistí približne mesiac po nástupe ochorenia. V budúcnosti môžu byť detekované mnoho mesiacov, rokov a dokonca aj celý život, pričom vykonávajú ochrannú funkciu proti návratu (recidíve) choroby av niektorých prípadoch znemožňujú sekundárny vývoj patológie. Ak sa množstvo imunoglobulínu G opäť začne zvyšovať, potom je možné podozrenie na opätovnú infekciu. Podobný záver možno vyvodiť vykonaním dvoch alebo troch vzoriek odobratých v intervale 2 týždňov.
Imunoglobulín D (IgD) nachádza sa na B-lymfocytoch, nachádza sa v nízkych koncentráciách u zdravých ľudí. Po 10 rokoch života dosahuje maximálne hodnoty. Množstvo imunoglobulínu D sa zvyšuje počas tehotenstva, u pacientok so systémovými ochoreniami spojivového tkaniva a ochoreniami spôsobenými stavom imunodeficiencie.
Indikácie pre použitie enzýmových imunoanalytických krvných testov
Stanovenie protilátok proti prítomnosti patogénnych mikróbov v tele, ktoré spôsobujú:
- trichomoniáza;
- ureaplazmóza a
Dochádza k zvýšeniu množstva imunoglobulínov a s.
Diagnostika sa vykonáva na zistenie:
- herpetické ochorenia;
- skupiny vírusovej hepatitídy;
- vírus Epstein-Barrovej;
- cytomegoalovírus.
Pomocou ELISA môžete určiť prítomnosť protilátok proti 600 typom alergénov, zistiť stav imunodeficiencie, vykonať komplexné vyšetrenie pred transplantáciou a vykonať komplexnú analýzu účinnosti liečby.
ELISA je ďalšou metódou na detekciu rakovinových buniek.
Ako sa vykonáva krvný test ELISA?
Na enzýmový imunotest sa vo väčšine prípadov používa krv pacienta, niekedy sa odoberá sklovcové tkanivo, tekutina z miechového kanála a plodová voda.
Krv sa odoberá injekčnou ihlou do injekčnej striekačky z kubitálnej žily. Štúdia sa uskutočňuje na prázdny žalúdok. Malo by sa pamätať na to, že užívanie určitých liekov môže ovplyvniť výsledok testu. Pred darovaním krvi sa musíte zdržať fajčenia a pitia alkoholu. Užívanie drog môže skresliť výsledky.
V prípade negatívnych hodnôt imunoglobulínov IgM, IgG, IgA môžeme hovoriť o absencii ochorenia alebo jeho počiatočnej fáze je možný aj negatívny výsledok s úplným zotavením po značnom čase.
Ak sa nezistia IgA a IgM a IgG je pozitívny, potom s najväčšou pravdepodobnosťou hovoríme o vytvorenej imunite po infekčnom ochorení alebo po očkovaní.
V prípade vysokého titra IgM s negatívnymi hodnotami IgG a IgA možno konštatovať, že ide o akútne infekčné ochorenie.
Simultánne pozitívne hodnoty výsledkov imunoglobulínov - IgA, IgM, IgG sú charakteristické pre akútnu fázu relapsu existujúceho chronického ochorenia.
Pri chronickej infekcii, ktorá je v doznievajúcej fáze procesu (remisia), ELISA ukazuje negatívne hodnoty imunoglobulínu M (IgM), zatiaľ čo výsledok imunoglobulínov G (IgG) a A (IgA) bude pozitívny.
Výhody metódy enzýmového imunotestu krvi
Hlavné výhody metódy ELISA sú:
- nízke náklady na analýzu;
- diagnostická špecifickosť, presnosť;
- dynamická kontrola (opakovanie analýzy na určenie účinnosti liečby a štádií ochorenia);
- možnosť vykonávať hromadné vyšetrenia v oblastiach infekcie;
- rýchlosť získavania výsledkov;
- relatívna jednoduchosť analýzy;
- možnosť využitia informačných technológií pri spracovaní;
- bezpečnosť a bezbolestnosť pre pacienta.
Má krvný test ELISA nejaké nevýhody?
Hlavným negatívnym aspektom štúdie je možnosť získania falošne negatívnych a falošne pozitívnych údajov. Príčinou nedorozumení môžu byť technické nedostatky alebo užívanie liekov, ktoré môžu skresliť obraz.
ELISA sa používa na zistenie:
- (ascaris, pinworms);
- akútne a chronické formy opisthorchiázy;
- trichinelóza;
- prítomnosť Giardia (ako dodatočná analýza);
- formy leishmaniózy;
- amébiáza;
- obsah toxoplazmy;
Na záver treba poznamenať, že moderná imunológia je neustále v štádiu vývoja a hľadá nové metódy diagnostiky a liečby chorôb.
Stepanenko Vladimir, chirurg
Analýza ELISA je moderná laboratórna diagnostická technika pre značný počet rôznych chorôb. Skratka znamená enzýmový imunotest. Podstatou techniky je stanovenie titra (aktivity) protilátok.
Technika ELISA si v súčasnosti získava výraznú obľubu. Používa sa v klinickej medicíne na diagnostiku rôznych patológií, ako aj v experimentálnych štúdiách, ktoré vyžadujú presné stanovenie koncentrácie rôznych zlúčenín v študovaných médiách.
Princíp techniky ELISA
Enzýmová imunoanalýza je imunologická reakcia. Je založená na pridaní špecifických protilátok 
alebo antigénov do testovacieho média (najčastejšie testovanej krvi), po ktorom nasleduje enzymatické stanovenie koncentrácie výsledných komplexov antigén-protilátka. Na základe koncentrácie komplexu je možné posúdiť hladinu alebo aktivitu zlúčeniny, ktorá sa stanovuje v testovacom médiu.
Stanovenie koncentrácie komplexov antigén-protilátka sa zvyčajne uskutočňuje pomocou špeciálneho zariadenia pomocou chromatografickej metódy.
Indikácie na použitie
Analýza ELISA sa vykonáva pre rôzne indikácie, z ktorých hlavné v klinickej medicíne sú:
- Diagnóza infekčnej patológie s prevažne sexuálnym prenosom (STI), ktorá zahŕňa chlamýdie, mykoplazmózu, ureaplazmózu, trichomoniázu, pri identifikácii špecifických protilátok proti infekčnému agens.
- Diagnostika infekčných ochorení rôznej lokalizácie na určenie štádia patologického procesu, predovšetkým v procese diagnostiky parenterálnej vírusovej hepatitídy a HIV.
- Stanovenie koncentrácií hormónov na diagnostiku rôznych patológií orgánov endokrinného systému (žliaz s vnútornou sekréciou).
- Stanovenie rôznych zlúčenín na diagnostiku príčiny intoxikácie tela v prípade otravy, uhryznutia hmyzom alebo hadom.
Pre tieto zdravotné indikácie sa vykonáva krvný test ELISA. Táto technika sa aktívne využíva aj v experimentálnej medicíne počas rôznych klinických štúdií pri vývoji nových liekov a vakcín na imunoprofylaxiu.
Ako prebieha výskum
Krvný test pomocou ELISA sa vykonáva v špecializovanom laboratóriu. Na jej uskutočnenie sa najskôr odoberie venózna krv, zvyčajne z loketnej žily v objeme 5-10 ml, ktorá sa následne odošle do laboratória. V priemere je možné výsledok testu získať už nasledujúci deň, čo je dôležitý bod pre rýchle predpísanie liečby po diagnostikovaní ochorenia.
Ako sa pripraviť na ELISA
Ak chcete získať spoľahlivé výsledky výskumu pomocou enzýmového imunotestu, mali by ste dodržiavať niekoľko jednoduchých prípravných odporúčaní, ktoré zahŕňajú:
- Deň pred testom by ste mali prestať jesť tučné jedlá (mäso, údeniny) a alkohol.
- Materiál na štúdiu sa musí podať ráno na lačný žalúdok.
- V deň štúdie je vhodné vyhnúť sa fyzickému a psycho-emocionálnemu stresu.
- Pred štúdiom by ste sa mali pokúsiť nefajčiť.
Väčšina falošne pozitívnych výsledkov enzýmového imunosorbentného testu je spôsobená nesprávnou implementáciou prípravných odporúčaní. To je vo väčšine prípadov spojené s konzumáciou tučných jedál, ktoré vedú k zvýšeniu koncentrácie triglyceridov (tukov) v krvnej plazme, ktoré znižujú špecifickosť testu ELISA.
Dekódovanie výsledkov
Krvný test na protilátky pomocou ELISA má 2 modifikácie - kvalitatívne a kvantitatívne stanovenie. o 
Pri kvalitatívnom stanovení protilátok môže byť výsledok pozitívny (detegujú sa protilátky, čo naznačuje možnú prítomnosť patologického procesu spôsobeného infekčným agensom) alebo negatívny (neexistujú žiadne protilátky, čo naznačuje neprítomnosť infekčného procesu).
Neprítomnosť protilátok nie je vždy 100% indikátorom neprítomnosti infekčného procesu. Je to spôsobené tým, že po infekcii sa protilátky nevytvoria okamžite, ale po určitú dobu (minimálne cca 2 týždne). Preto na potvrdenie neprítomnosti infekcie možno po určitom čase zopakovať test ELISA.
Kvantitatívna ELISA sa používa na stanovenie titra (aktivity) protilátok, ako aj ich tried. Vo väčšine prípadov sa na diagnostiku infekčných ochorení stanovujú protilátky triedy IgG (imunoglobulín G) a IgM (imunoglobulín M), ktoré sa v organizme tvoria v rôznych intervaloch po infekcii, takže dešifrovanie výsledku testu môže mať viacero významov:
- Zvýšenie aktivity IgM a absencia IgG je dôkazom nedávnej infekcie a akútneho priebehu infekčného procesu.
- Zvýšenie aktivity IgM a IgG je exacerbáciou infekčného procesu počas jeho chronického priebehu a dlhotrvajúcej infekcie.
- Vysoká aktivita IgG a neprítomnosť IgM je chronický priebeh infekčného procesu na pozadí dlhotrvajúcej infekcie, po ktorej uplynulo viac ako šesť mesiacov (čas potrebný na tvorbu protilátok triedy IgG).
Vo všeobecnosti má dešifrovanie výsledkov ELISA pre každý infekčný proces určité vlastnosti. Presnejšie určenie prítomnosti infekčnej choroby, ako aj štádia jej priebehu vykonáva lekár.
ELISA je v súčasnosti metódou voľby na diagnostiku väčšiny infekčných ochorení. Na základe výsledkov takejto štúdie má lekár možnosť stanoviť presnú diagnózu a určiť štádium patologického procesu s cieľom predpísať následnú adekvátnu a účinnú liečbu.
Na stanovenie hladiny biologicky aktívnych látok, ako sú imunologické komplexy, je potrebný špeciálny laboratórny test. Ak existuje podozrenie na hematologické, infekčné alebo autoimunitné ochorenie, špecialisti predpisujú krvný test na ELISA. V priebehu článku sa pozrieme na to, čo to je, ako sa na to pripraviť, čo ukazuje a ako to rozlúštiť sami.
Čo je to za štúdiu - krvný test ELISA? Skratka znamená enzýmový imunotest krvi, pri ktorom sa stanovuje kvantitatívny a kvalitatívny obsah rôznych biologicky aktívnych látok, ako aj protilátok a antigénov v biologickom materiáli.
Čo sa používa pri enzýmovom imunoteste krvi:
- cerebrospinálna tekutina;
- hlien močovej trubice, krčka maternice;
- plodová voda;
- obsahu sklovca.
Enzýmová imunoanalýza sa predpisuje na účely diagnostiky pohlavne prenosných chorôb, infekčných a onkologických procesov, alergických reakcií, porúch endokrinného a reprodukčného systému, autoimunitných a imunodeficitných chorôb, ako aj na posúdenie rizika vzniku niektorých ochorení obličiek.
Krvný test na ELISA počas tehotenstva je predpísaný na účely včasnej detekcie, porúch vývoja v počiatočných štádiách a sledovania ich dynamiky. Analýza ELISA vám navyše umožňuje kontrolovať hladinu protilátok, ktoré môžu vyvolať rozvoj závažných neurologických porúch u dieťaťa, čím sa zabráni rozvoju komplikácií nielen počas tehotenstva, ale aj počas pôrodu.
Umožňuje v predstihu reagovať na zistené problémy a výrazne zlepšiť zdravotný stav matky aj jej dieťatka.
Výhody krvnej ELISA zahŕňajú:
- vysoký (až 90%) stupeň citlivosti;
- možnosť včasnej diagnostiky pri súčasnom určení štádia ochorenia;
- nízke náklady na činidlá a následne dostupnosť;
- minimálne množstvo materiálu na výskum;
- minimálne podmienky prijatia;
- možnosť dlhodobého skladovania činidiel;
- schopnosť kontrolovať dynamiku vývoja patologického procesu.
Testovacie systémy Nevýhody enzýmovej imunoanalýzy:
- nie je možné určiť pôvodcu choroby, iba laboratórne sa na ňu získa imunitná odpoveď
- možnosť získania falošného výsledku (vo veľmi zriedkavých prípadoch, hlavne počas tehotenstva).
Príprava
Princíp tohto typu krvného testu je založený na tvorbe špecifických protilátok v ľudskom tele, keď doň vstupujú antigény, teda cudzie agens, ktoré vyvolávajú rozvoj konkrétneho ochorenia. V dôsledku ich interakcie sa vytvárajú komplexy „antigén-protilátka“, ktoré sa študujú počas enzýmového imunotestu.
V tomto ohľade, aby sa neovplyvnili tieto komplexy, a teda spoľahlivosť získaných výsledkov, analýza krvi a iného biologického materiálu na ELISA vyžaduje určitú prípravu.
Taktiež 14 dní pred navrhovaným vyšetrením je pozastavená špecifická liečba a ukončené používanie antibakteriálnych a antivírusových liekov.
Krv na test ELISA sa daruje zo žily. Bezprostredne pred odberom krvi by ste mali obmedziť fyzickú aktivitu, vyhýbať sa aj fajčeniu a pitiu alkoholických nápojov.
Existuje niekoľko metód a metód na vykonávanie enzýmového imunotestu: priame a nepriame metódy, kompetitívne a blokujúce metódy.
Základom vyšetrenia krvi (akéhokoľvek iného biologického materiálu) pomocou ELISA je algoritmus pozostávajúci z dvoch reakcií – imunitnej a enzymatickej.
Počas prvej sa patologické agens viažu na ochranné prvky buniek biologického materiálu odobraného na výskum. Vytvára sa imunitný komplex antigén-protilátka. Vyzerá to takto. Antigény sú prítomné na povrchu absolútne všetkých buniek.
Keď cudzie bunky vstúpia do tela, zachytia ich imunitné bunky (na ktorých povrchoch sa nachádzajú protilátky), ktoré porovnávajú údaje o antigénoch z povrchu novoprijatých buniek s informáciami uloženými v ich vlastnej „pamäti“. Ak sa tieto údaje nezhodujú, aktivujú sa ochranné funkcie tela, ktoré spočívajú vo vytvorení imunitného komplexu.
Potom sa uskutoční enzymatická reakcia, ktorá vizualizuje výsledky predchádzajúcej reakcie. Jeho princíp je založený na premene látky z jednej látky na druhú. Pre každý typ testu ELISA má materiál vytvorený počas imunitnej reakcie špecifický enzým, ktorého ošetrenie sa používa na stanovenie koncentrácie cudzieho agens (na základe intenzity farby roztoku).
Dekódovanie
Vďaka krvnému testu na ELISA laboratórni technici určujú A, G a M. Pozitívny výsledok pri testovaní krvi (iných biologických surovín) na ELISA umožňuje nielen stanoviť diagnózu, ale aj štádium ochorenia, nakoľko ako aj charakter jeho priebehu (akútny alebo chronický).
Tieto imunoglobulíny sa v prítomnosti patologického procesu v tele pacienta tvoria počas rôznych období ochorenia:
- Imunoglobulíny M, IgM– sa tvoria päť dní po nástupe ochorenia a zostávajú v krvi 1,5 mesiaca, potom zmiznú. Detekcia IgM indikuje prítomnosť akútneho primárneho patologického procesu v tele a potrebu zvýšenej terapeutickej intervencie.
- Imunoglobulíny G, IgG– vyskytnú sa štyri týždne po infekcii, ich prítomnosť v organizme možno zistiť aj niekoľko mesiacov. Detekcia IgG indikuje anamnézu osoby s predchádzajúcim ochorením. Zvýšenie ich hladiny môže tiež naznačovať opätovnú infekciu.
- Imunoglobulíny A, IgA– objavia sa v čase infekcie a sú prítomné v tele štyri týždne. Zníženie ich obsahu naznačuje začiatok zotavenia. Opätovné objavenie sa v testoch po tom, čo osoba podstúpila liečbu a zotavila sa, naznačuje, že choroba sa stala chronickou. Súčasná detekcia IgA a IgG vo výsledkoch ELISA tiež naznačuje prítomnosť chronického procesu v tele.
Treba tiež poznamenať, že súčasná prítomnosť IgG a IgM v analýzach naznačuje, že chronický proces sa zhoršil a pacient musí začať liečbu. Ak sa počas vyšetrenia nezistil žiadny z imunoglobulínov, znamená to absenciu imunitnej odpovede.
Krvný test na enzýmovú imunoanalýzu je bežnou metódou na identifikáciu rôznych patológií. Výsledok krvného testu, ktorého ELISA interpretáciu interpretoval lekár laboratórnej diagnostiky, je vo väčšine prípadov spoľahlivý.
Čo je ELISA
ELISA je moderná diagnostická metóda, ktorá sa používa na diagnostiku infekcií, hormonálnych a imunitných porúch a rakoviny v laboratórnych podmienkach. Metóda umožňuje zistiť protilátky proti infekcii v počiatočných štádiách ochorenia. Táto metóda patrí medzi nepriame diagnostické metódy, keďže odhaľuje imunitnú odpoveď organizmu. Medzi výhody ELISA v porovnaní s inými diagnostickými metódami patrí vysoká úroveň vyrobiteľnosti, ktorá znižuje pravdepodobnosť chýb. Metóda je vysoko citlivá a používa sa na diagnostiku chorôb u detí aj dospelých. Existuje široká škála rôznych modifikácií ELISA.
Metóda ELISA je založená na špecifickosti imunochemických reakcií, ako aj na fyzikálno-chemických vzorcoch reakcií komplexov antigén-protilátka. Reakcie sa uskutočňujú za účasti špecifických enzýmov, ktoré sú markermi na detekciu protilátok. V dôsledku imunochemickej reakcie sa prísne definované protilátky viažu na zodpovedajúce antigény. Krvný test pomocou enzýmovej imunoanalýzy takmer eliminuje možnosť získania falošne pozitívneho výsledku. Špecialisti na laboratórnu diagnostiku posudzujú pozitívny alebo negatívny výsledok podľa toho, či je roztok pri enzymatickej indikácii komplexu antigén-protilátka zafarbený. Ak sa roztok zafarbí, potom došlo k interakcii antigénu s protilátkou, výsledok ELISA je pozitívny.
Aké choroby možno zistiť pomocou ELISA?
Výskum pomocou enzýmového imunotestu umožňuje:
- identifikovať množstvo infekčných chorôb;
- diagnostikovať autoimunitné ochorenia;
- zistiť prítomnosť onkológie;
- identifikovať hormonálne poruchy;
- vykonať iný výskum.
Krvný test pomocou metódy ELISA vám umožňuje určiť prítomnosť nasledujúcich infekcií:
Metóda sa používa na identifikáciu antigénov patogénov mnohých infekcií, ako aj na identifikáciu protilátok rôznych tried. Metóda ELISA sa stala veľmi populárnou na detekciu syfilisu, HIV a vírusovej hepatitídy. Stanovenie prítomnosti a hladiny protilátok v krvnom sére na účely primárnej diagnózy STI sa neodporúča. V tomto prípade môže byť prítomnosť protilátok v krvi len znakom toho, že telo pacienta bolo v minulosti v kontakte s infekčným agensom.
Diagnostika rôznych autoimunitných ochorení pomocou ELISA sa vykonáva vyšetrením:
- antinukleárne telieska;
- protilátky proti dvojvláknovej DNA;
- protilátky proti rozpustným jadrovým antigénom (ENA skríning);
- antikardiolipínové protilátky;
- IgG na citrulinovaný peptid;
- reumatoidný faktor;
- C-reaktívny proteín;
- autoprotilátky proti cytoplazmatickým antigénom neutrofilov (ANCA skríning).
Špecifické imunitné komplexy sú charakteristické pre určité autoimunitné ochorenia. Napríklad protilátky s dvojvláknovou DNA sú charakteristické pre ochorenie, ako je systémový lupus erythematosus.
Rakovina sa určuje enzýmovým imunotestom krvného séra na špecifické nádorové markery, ako je PSA, CA-125.
PSA indikuje prítomnosť adenómu prostaty a rakoviny prostaty. CA-125 je nádorový marker rakoviny vaječníkov. Hodnota sa zvyšuje aj pri rakovinových nádoroch maternice, mliečnych žliaz a endometria.
Príprava na analýzu
Aby ste zabezpečili maximálnu presnosť výsledkov, musíte dodržiavať určité pravidlá prípravy na štúdiu. Rozbor na laboratórnu diagnostiku metódou ELISA sa zvyčajne robí ráno z antekubitálnej žily. Je potrebné darovať krv striktne na prázdny žalúdok. Okrem tohto jednoduchého návodu by ste mali dodržiavať nasledujúce odporúčania na prípravu:
- 24 hodín pred testom je potrebné vyhnúť sa pitiu alkoholu a fajčeniu;
- vyhnúť sa ťažkej fyzickej aktivite;
- zostať v pokojnom stave;
- vyhnúť sa nervovému napätiu;
- darovať krv na ELISA nie skôr ako 10 dní po ukončení liečby;
- informujte svojho lekára o užívaní potrebných liekov.
Okrem toho sa niekoľko dní pred testom odporúča dodržiavať diétu. Zároveň zo stravy vylúčte tučné jedlá a vyprážané jedlá. Pred testom na vírusovú hepatitídu vylúčte zo stravy nielen mastné a vyprážané jedlá, ale aj citrusové plody, ako aj oranžovú zeleninu.
Treba poznamenať, že výsledky určitého rozsahu hormonálnych štúdií sú ovplyvnené takými faktormi, ako je fáza menštruačného cyklu. Potrebu vykonať test v jednej alebo druhej fáze menštruačného cyklu je potrebné vopred prediskutovať so svojím lekárom. V opačnom prípade môžete získať neočakávané výsledky. Napríklad normálna hladina luteinizačného pohlavného hormónu u žien sa líši v závislosti od dňa cyklu:
- 1-12 dní - 2-14 medu / l;
- 12-14 dní - 24-150 mU / l;
- od 15. dňa pred začiatkom nového cyklu - 2-17 mU / l.
Dekódovanie výsledkov ELISA
Analýza nám umožňuje určiť prítomnosť protilátok rôznych tried v tele. Existujú 3 triedy protilátok:
K produkcii týchto protilátok dochádza v rôznych štádiách ochorenia. IgM protilátky sú prvé, ktoré sa po infekcii v tele vytvárajú. Ich prítomnosť je v každom prípade indikátorom ochorenia. Táto trieda protilátok chýba v tele zdravého človeka.
Tieto imunoglobulíny sú prítomné v krvnom sére približne 5-6 týždňov.
Imunoglobulíny triedy G prítomné v krvi naznačujú, že osoba buď už trpela ochorením, alebo je nosičom infekcie. Tieto protilátky sa začínajú vytvárať po protilátkach triedy M, u väčšiny ochorení 3-4 týždne po infekcii. Ich prítomnosť v tele je možná niekoľko rokov. A pri niektorých ochoreniach (napríklad syfilis) je IgG prítomný v krvi po celý život.
Ak je IgA v organizme prítomný, je potrebné s infekciou bojovať čo najintenzívnejšie. Protilátky tejto triedy sa objavujú iba v prípade chronického infekčného ochorenia. Vymiznutie IgA naznačuje zničenie infekcie.
Ak sa test ELISA vykonáva u detí mladších ako 1,5 roka, je potrebné vziať do úvahy nasledujúcu vlastnosť: krv dieťaťa obsahuje IgG matky na rôzne infekcie. To neznamená, že dieťa je choré. V tomto prípade je to skôr norma. Prítomnosť IgM je dôkazom vnútromaternicovej infekcie alebo infekcie získanej po narodení. Matkin IgM nemôže vstúpiť do tela dieťaťa cez placentu.
V tabuľke sú uvedené možné kombinácie prítomnosti alebo neprítomnosti protilátok 3 tried v tele a ich interpretácia.
Keď dekódovacie testy (+) označujú pozitívny výsledok a (-) označuje opak, to znamená negatívny. Výsledok ukazujúci prítomnosť alebo neprítomnosť látky v tele sa nazýva kvalitatívny. Dá sa kvantitatívne doplniť. Kvantitatívny výsledok odráža kvantitatívny obsah rôznych látok v tele.
Stojí za zmienku, že testovacie systémy majú svoje vlastné referenčné hodnoty definované výrobcom, ktoré charakterizujú ukazovatele. Prekročenie referenčných hodnôt spravidla znamená prítomnosť určitých patológií v tele testovaného subjektu.
Po obdržaní výsledkov ELISA by mal získané hodnoty dešifrovať ošetrujúci lekár. Iba on bude schopný správne posúdiť získané výsledky a určiť štádium ochorenia.
V kontakte s
