Petrohradská štátna univerzita
Fakulta medicíny.
Práca na kurze
odbor: Mikrobiológia
téma: Syfilis - mikrobiologický aspekt
Úvod
Sexuálne prenosné infekčné choroby (STI) sú súčasťou infekčnej patológie a sú známe človeku od nepamäti. Prinajmenšom Hippokrates písal o chorobe veľmi pripomínajúcej kvapavku (výtok z močovej trubice u mužov) už v 5. storočí pred Kristom. e., a už v 2. storočí Galen opísal úplný klinický obraz tejto choroby a zaviedol termín kvapavka.
Špeciálne röntgenové paleontologické štúdie preukázali syfilitickú povahu poškodenia kostí kostier z pohrebísk z 2. storočia pred Kristom. e.-I storočie. Epidémia syfilisu v Európe v 15. – 16. storočí si vyžiadala desaťtisíce obetí a prilákala pozornosť nielen lekárov, ale aj osvietenej európskej verejnosti, spisovateľov, básnikov: Fracastoro, Rabelais, Pare atď., V Rusku syfilis sa objavila na začiatku 16. storočia, a hoci nebola taká rozšírená ako v Európe, no napriek tomu dôsledky syfilitickej infekcie v podobe charakteristických deformácií a fyzickej degradácie, možnosti prenosu na potomkov okamžite upútali pozornosť svetonázorov. domácej vedy k tomuto problému - M.Ya, N.I. Pirogová, S.P. Botkin, F. Koch a ďalší.
Liečba syfilisu sa v tom čase uskutočňovala najmä ortuťovými prípravkami, ktoré sa vtierali do rôznych oblastí kože alebo sa dokonca inhalovali vo forme pary. Samozrejme, závažnosť syfilitickej infekcie sa oslabila, ale zvýšil sa počet prípadov poškodenia vnútorných orgánov a nervového systému v dôsledku toxického účinku ortuti. Prvým liekom, ktorý spájal účinnosť liečby syfilisu a bol relatívne bezpečnejší ako ortuť, bol známy liek 606 (salvarsan), ktorý Ehrlich syntetizoval v roku 1909. Bol to historický moment, ktorý znamenal zrod éry chemoterapie infekčných chorôb.
V 30. rokoch boli syntetizované sulfónamidové lieky, ktoré sa ukázali ako veľmi účinné pri liečbe kvapavky a iných zápalových ochorení urogenitálnej oblasti, ktorých etiológia bola vtedy neznáma.
Antibiotiká sa však ukázali ako najúčinnejšie v boji proti pohlavne prenosným chorobám. Prvá skúsenosť s liečbou syfilisu penicilínom v roku 1943 od Mahoneyho, Arnolda a Harrisa bola mimoriadne úspešná: aj malé dávky penicilínu viedli k trvalému vyliečeniu syfilisu u ľudí a pokusných zvierat. Odvtedy uplynulo viac ako polstoročie, ale aj dnes sú antibiotiká hlavnými a často jedinými liekmi na liečbu pohlavne prenosných chorôb.
Úloha vybraná na zváženie v tejto práci je „Syfilis – mikrobiologický aspekt“. Téma je posudzovaná z pohľadu mikrobiológie. Aby sme pochopili a zvážili procesy spojené s touto chorobou, je najprv potrebné definovať:
syfilisje infekčné ochorenie spôsobené Treponema pallidum, prenášané prevažne sexuálne, s chronickým recidivujúcim priebehom a charakteristickou periodicitou klinických príznakov, schopné postihnúť všetky orgány a systémy. Vo vede existuje určitá klasifikácia syfilisu: Primárny syfilis; séronegatívny, séropozitívny, sekundárny syfilis; čerstvý, opakujúci sa, latentný, terciárny syfilis; aktívny, latentný, latentný syfilis; Séropozitívny skorý, séropozitívny neskorý, vrodený skorý syfilis, neskorý, latentný, neurosyfilis, viscerálny syfilis. Pôvodcom ochorenia je Treponema pallidum (Tgeropeta pallidum), špirálovitá, 4-14 mikrónov dlhá a 0,2-0,25 mikrónov v priemere, má 8-12 rovnomerných kučier, môže existovať v troch formách - špirálová, cystická a L- formulár . Najbežnejší (klasický) priebeh syfilisu je spôsobený prítomnosťou špirálovej formy patogénu, iné formy si pravdepodobne zachovávajú dlhý latentný priebeh. U neliečených pacientov trvá získaný syfilis mnoho rokov. V klasickom priebehu ochorenia sú 4 obdobia: inkubačné, primárne, sekundárne, terciárne. Osoba so syfilisom je priamym zdrojom infekcie. Hlavnou cestou infekcie je priamy kontakt (zvyčajne sexuálny) s chorým človekom. Pri vrodenom syfilise dochádza k infekcii in utero - cez cievy placenty. Treponema pallidum, ktoré sa dostali do tela, sa šíria lymfatickým systémom, aktívne sa množia a vstupujú do rôznych orgánov a tkanív, čo spôsobuje určité prejavy ochorenia. V priebehu času sa počet Treponema pallidum v tele pacienta znižuje, ale reakcia tkaniva na patogén je prudšia. Pripúšťajú možnosť dlhého (mnoho rokov) asymptomatického priebehu syfilisu od samého začiatku ochorenia s následným rozvojom poškodenia nervového systému a viscerálnych foriem ochorenia. Táto práca podrobne preskúma procesy spojené s príčinami a následkami ochorenia, diagnostikou, priebehom ochorenia a jeho liečbou z pohľadu mikrobiológie. 1. Obdobia choroby
1.1 Inkubačná doba
Inkubačná doba trvá od okamihu infekcie až do objavenia sa prvého klinického príznaku - chancre (v priemere - 20-40 dní). Niekedy sa skracuje na 10-15 dní s masívnou infekciou, ktorá je sprevádzaná mnohopočetným alebo bipolárnym chancrem, ako aj so superinfekciou. Predĺženie inkubačnej doby na 3-5 mesiacov sa často pozoruje pri závažných sprievodných ochoreniach alebo po liečbe malými dávkami antibiotík. .2 Primárny syfilis
Hard chancre (vredy), jeden alebo viac, sa najčastejšie nachádzajú na genitáliách, na miestach, kde sa zvyčajne vyskytujú mikrotraumy pri pohlavnom styku. U mužov je to hlava, predkožka a menej často driek penisu; niekedy môže byť vyrážka umiestnená vo vnútri močovej trubice. U homosexuálov sa nachádzajú v obvode konečníka, v hĺbke kožných záhybov, ktoré ho tvoria, alebo na sliznici konečníka. U žien sa zvyčajne objavujú na malých a veľkých pyskoch ohanbia, pri vchode do pošvy, na hrádzi a menej často na krčku maternice. V druhom prípade je možné vred vidieť iba pri gynekologickom vyšetrení na stoličke pomocou zrkadiel. Chancres sa môže objaviť prakticky kdekoľvek: na perách, v kútiku úst, na hrudi, v podbrušku, na ohanbí, v slabinách, na mandliach, v druhom prípade pripomínajú bolesť hrdla, pri ktorej sa hrdlo takmer nekoná. bolí a teplota nestúpa. U niektorých pacientov sa vyvinie zhrubnutie a opuch so silným začervenaním, dokonca aj zmodraním kože; u žien - v oblasti veľkých pyskov, u mužov - v predkožke. S pridaním „sekundárneho“, t.j. dodatočná infekcia, komplikácie sa vyvíjajú. U mužov ide najčastejšie o zápal a opuch predkožky (fimózu), kde sa zvyčajne hromadí hnis a niekedy si môžete nahmatať hrčku v mieste už existujúceho šantenia. Ak v období zväčšujúceho sa opuchu predkožky dôjde k jej posunutiu dozadu a otvoreniu hlavice penisu, spätný pohyb nie je vždy úspešný a hlavica skončí privretá zapečateným krúžkom. Napučí a ak sa neuvoľní, môže odumrieť. Príležitostne je takáto nekróza (gangréna) komplikovaná vredmi predkožky alebo lokalizovanými na hlave penisu. Asi týždeň po objavení sa chancroidu sa blízke lymfatické uzliny (najčastejšie v slabinách) bezbolestne zväčšujú a dosahujú veľkosť; hrášok, slivky alebo aj slepačie vajce. Na konci primárneho obdobia sa zvyšujú aj ďalšie skupiny lymfatických uzlín. .3 Sekundárny syfilis
Začína sa objavením sa hojnej vyrážky po celom tele, ktorej často predchádza zhoršenie zdravotného stavu a teplota sa môže mierne zvýšiť. Chancre alebo jeho zvyšky, ako aj zväčšené lymfatické uzliny, sú dodnes zachované. Vyrážka sa zvyčajne javí ako malé ružové škvrny, ktoré rovnomerne pokrývajú pokožku, nevystupujú nad povrch kože, nesvrbia ani sa neodlupujú. Tento druh škvrnitej vyrážky sa nazýva syfilitická roseola. Keďže ich nesvrbí, ľudia, ktorí sú k sebe nepozorní, to môžu ľahko prehliadnuť. Dokonca aj lekári môžu urobiť chybu, ak nemajú dôvod podozrievať pacienta zo syfilisu a diagnostikovať osýpky, rubeolu, šarlach, ktoré sa teraz často vyskytujú u dospelých. Okrem roseoly sa vyskytuje papulózna vyrážka pozostávajúca z uzlín veľkosti hlavičky zápalky až hrachu, jasne ružová, s modrastým, hnedastým odtieňom. Oveľa menej časté sú pustulózne alebo pustulózne vyrážky podobné bežnému akné alebo vyrážkam z ovčích kiahní. Rovnako ako iné syfilitické vyrážky, pustuly nebolí. Ten istý pacient môže mať škvrny, uzliny a pustuly. Vyrážky trvajú niekoľko dní až niekoľko týždňov a potom zmiznú bez liečby, len aby boli po viac či menej dlhom čase nahradené novými, čím sa otvára obdobie sekundárneho recidivujúceho syfilisu. Nové vyrážky spravidla nepokrývajú celú pokožku, ale nachádzajú sa v oddelených oblastiach, sú väčšie, bledšie (niekedy sotva viditeľné) a majú tendenciu zoskupovať sa, tvoria krúžky, oblúky a iné tvary. Vyrážka môže byť stále makulárna, nodulárna alebo pustulózna, ale s každým novým výskytom je počet vyrážok menší a väčší. Pre obdobie sekundárneho relapsu sú typické uzliny na vonkajších genitáliách, v perineálnej oblasti, v blízkosti konečníka a pod pazuchami. Zväčšujú sa, ich povrch mokvá, tvoria sa odreniny, plačlivé výrastky navzájom splývajú, vzhľadom pripomínajú karfiol. Takéto výrastky sprevádzané páchnucim zápachom sú málo bolestivé, ale môžu rušiť chôdzu. Pacienti so sekundárnym syfilisom majú takzvanú „syfilitickú angínu“, ktorá sa líši od bežnej v tom, že keď mandle sčervenajú alebo sa na nich objavia belavé fľaky, hrdlo nebolí a telesná teplota nestúpa. Na sliznici krku a pier sa objavujú belavé ploché útvary oválneho alebo bizarného tvaru. Na jazyku sú jasne červené oblasti oválnych alebo vrúbkovaných obrysov, v ktorých nie sú žiadne papily jazyka. V kútikoch úst môžu byť praskliny – takzvané syfilitické džemy. Na čele sa niekedy objavujú hnedočervené uzliny - „koruna Venuše“. Okolo úst sa môžu objaviť hnisavé kôry, ktoré simulujú bežnú pyodermiu. Vyrážka na dlaniach a chodidlách je veľmi častá. Ak sa v týchto oblastiach objavia nejaké vyrážky, určite by ste sa mali poradiť s venerológom, hoci kožné zmeny tu môžu byť aj iného pôvodu (napríklad plesňové). Niekedy sa na zadnej a bočnej strane krku tvoria malé (veľkosti malého nechtu) zaoblené svetlé škvrny, obklopené tmavšími oblasťami kože. „Náhrdelník Venuše“ sa neodlupuje a nebolí. Existuje syfilitická plešatosť (alopécia) vo forme buď rovnomerného rednutia vlasov (až výrazné) alebo malých početných škvŕn. Pripomína srsť ožratú moľami. Často vypadáva aj obočie a mihalnice. Všetky tieto nepríjemné javy sa vyskytujú 6 a viac mesiacov po infekcii. Skúsenému venerológovi stačí letmý pohľad na pacienta, aby mu na základe týchto znakov diagnostikoval syfilis. Liečba rýchlo vedie k obnoveniu rastu vlasov. U oslabených pacientov, ako aj u pacientov, ktorí zneužívajú alkohol, sa často vyskytujú viaceré vredy roztrúsené po celej koži, pokryté vrstvenými krustami (takzvaný „malígny“ syfilis). Ak sa pacient nelieči, potom niekoľko rokov po infekcii môže vstúpiť do terciárneho obdobia. .4 Terciárny syfilis
Na koži sa objavujú jednotlivé veľké uzliny až do veľkosti vlašského orecha alebo dokonca kuracieho vajca (guma) a menšie (tuberkuly), ktoré sa spravidla nachádzajú v skupinách. Guma postupne rastie, koža sa stáva modročervenou, následne sa z jej stredu začne vylučovať viskózna tekutina a vytvorí sa dlhodobo nehojaci sa vred s charakteristickým žltkastým dnom „mastného“ vzhľadu. Gumózne vredy sa vyznačujú dlhou existenciou, trvajúcou mnoho mesiacov a dokonca rokov. Jazvy po zahojení zostávajú na celý život a z ich typického hviezdicového vzhľadu možno po dlhom čase pochopiť, že tento človek mal syfilis. Tuberkuly a ďasná sa najčastejšie nachádzajú na koži predného povrchu nôh, v oblasti lopatiek, predlaktí atď. Jedným z častých miest terciárnych lézií je sliznica mäkkého a tvrdého podnebia. . Ulcerácie sa tu môžu dostať až ku kosti a zničiť kostné tkanivo, mäkké podnebie, zvrásniť sa jazvami alebo vytvoriť diery vedúce z ústnej dutiny do nosovej dutiny, čím hlas získa typický nosový tón. Ak sa ďasná nachádzajú na tvári, môžu zničiť kosti nosa a ten „prepadne“. Vo všetkých štádiách syfilisu môžu byť ovplyvnené vnútorné orgány a nervový systém. V prvých rokoch ochorenia sa u niektorých pacientov vyvinie syfilitická hepatitída (poškodenie pečene) a prejavy „latentnej“ meningitídy. S liečbou rýchlo zmiznú. Oveľa menej často, po 5 alebo viacerých rokoch, sa v týchto orgánoch niekedy tvoria zhutnenia alebo gumy, podobné tým, ktoré sa objavujú na koži. Najčastejšie je postihnutá aorta a srdce. Vytvorí sa syfilitická aneuryzma aorty; v niektorej časti tejto životne dôležitej cievy sa jej priemer prudko zväčší a vznikne vak s veľmi tenkými stenami (aneuryzma). Prasknutie aneuryzmy vedie k okamžitej smrti. Patologický proces môže tiež „skĺznuť“ z aorty do ústia koronárnych ciev, ktoré zásobujú srdcový sval, a potom dochádza k záchvatom angíny, ktoré sa zvyčajne na to neuvoľňujú. V niektorých prípadoch spôsobuje syfilis infarkt myokardu. Už v skorých štádiách ochorenia sa môže vyvinúť syfilitická meningitída, meningoencefalitída, prudké zvýšenie intrakraniálneho tlaku, mozgové príhody s úplnou alebo čiastočnou paralýzou atď. Tieto závažné javy sú veľmi zriedkavé a našťastie celkom dobre reagujú na liečbu. syfilisový treponém diagnóza liečba 1.5 Neskoré prejavy syfilisu
Vyskytujú sa, ak osoba nebola liečená alebo bola liečená zle. Pri tabes dorsalis postihuje treponema pallidum miechu. Pacienti trpia záchvatmi akútnej neznesiteľnej bolesti. Koža stráca citlivosť natoľko, že nemusia cítiť pálenie a dávajú pozor len na poškodenie kože. Chôdza sa mení, stáva sa „kačacou“, najskôr sa objavia ťažkosti s močením a potom inkontinencia moču a stolice. Obzvlášť závažné je poškodenie zrakových nervov, ktoré v krátkom čase vedie k slepote. Môžu sa vyvinúť závažné deformity veľkých kĺbov, najmä kolien. Zisťujú sa zmeny veľkosti a tvaru zreníc a ich reakcia aj na zníženie alebo úplné vymiznutie šľachových reflexov, ktoré sú spôsobené úderom do kolennej šľachy (patelárny reflex) a cez pätu (Achillov reflex). Progresívna paralýza sa zvyčajne vyvíja po 15-20 rokoch. Ide o nezvratné poškodenie mozgu. Správanie človeka sa prudko mení: znižuje sa schopnosť pracovať, nálada kolíše, schopnosť sebakritiky klesá, objavuje sa podráždenosť, výbušnosť, alebo naopak neprimeraná veselosť a nedbalosť. Pacient zle spí, často ho bolí hlava, trasú sa mu ruky, šklbajú mu tvárové svaly. Po určitom čase sa stáva netaktným, hrubým, žiadostivým a prejavuje sklony k cynickému zneužívaniu a obžerstvu. Jeho mentálne schopnosti miznú, stráca pamäť, najmä pre nedávne udalosti, schopnosť správne počítať pri jednoduchých počtových operáciách „v hlave“, pri písaní mu chýbajú alebo opakuje písmená a slabiky, jeho rukopis je nerovnomerný, nedbalý, reč je pomalý, monotónny, akoby sa „potácal“. Ak sa liečba neuskutoční, úplne stráca záujem o svet okolo seba, čoskoro odmieta opustiť lôžko a s príznakmi celkovej paralýzy nastáva smrť. Niekedy s progresívnou paralýzou sa vyskytujú bludy vznešenosti, náhle záchvaty vzrušenia, agresivita, nebezpečné pre ostatných. .6 Vrodený syfilis
Dieťa sa môže nakaziť už v matkinom lone. Niekedy sa narodí mŕtve v 5-6 mesiaci tehotenstva alebo sa narodí predčasne živé. Donosené dieťa sa môže narodiť s klinickými prejavmi ochorenia alebo s latentnou infekciou. Prejavy vrodeného syfilisu sa väčšinou nevyskytujú hneď po narodení, ale počas prvých 3 mesiacov života. Vo vzhľade a správaní chorého dieťaťa, ktoré v „klasických“ prípadoch vyzerá ako „malý starček“, sú však už od začiatku badateľné isté črty. Ide o dystrofického človeka s veľkou hlavou a vychudnutým telom, bledou, žltkastou pokožkou. Je nepokojný, kričí bez zjavného dôvodu, zle sa vyvíja a málo priberá, napriek absencii gastrointestinálnych porúch. V prvých dňoch alebo týždňoch života sa mu na dlaniach a chodidlách môžu objaviť pľuzgiere (syfilitický pemfigus) obklopené fialovým lemom. Ich obsah je spočiatku priehľadný, potom sa stáva hnisavým a krvavým, potom sa kryty pľuzgierov zmršťujú do kôr. V okolí úst a na čele koža miestami zhrubne, leskne sa, fialová, pri plači alebo satí dieťaťa praská a zanechávajú jazvy umiestnené radiálne v kútikoch úst. Na trupe, zadku a končatinách sa často objavujú škvrny alebo uzliny. V miestach trenia a prirodzených záhybov sa niekedy namočia a vredy. V prvých týždňoch života sa objavuje takzvaný „syfilitický výtok z nosa“; nosové priechody sa prudko zužujú, dýchanie je ťažké a sanie je takmer nemožné, ak sa nos dieťaťa pred každým kŕmením dôkladne neprečistí. V ťažších prípadoch sa môžu vytvárať vredy – nielen na sliznici nosa, ale aj na chrupke a kosti nosnej priehradky. Zároveň sa ničí a mení sa tvar nosa („sedlový“, „tupý“, „kozí“ nos). Poškodenie vnútorných orgánov začína v maternici. Pečeň je zväčšená a hustá a následne sa môže vyvinúť cirhóza. Slezina je tiež zvyčajne zväčšená a zhrubnutá. Je možný ťažký zápal pľúc a potom dieťa zomrie buď pred narodením, alebo krátko po ňom. Menej často sú postihnuté obličky a iné orgány. Pri vrodenom syfilise sa kosti menia. Ruka alebo noha leží nehybne, ako keby bola paralyzovaná, pretože najmenší pohyb spôsobuje posunutie deformovaných kostí, čo spôsobuje akútnu bolesť. V mieste ich oddelenia sa odhalia všetky znaky zlomeniny: opuch, bolesť atď. Tieto zlomeniny dostali špeciálny názov podľa mena autora, ktorý ich opísal: pseudoparalýza (alebo falošná paralýza) papagája. Závažné zmeny sa môžu vyskytnúť aj v centrálnom nervovom systéme. „Nerozumný“ plač dieťaťa bez ohľadu na príjem potravy je jedným z príznakov syfilitickej meningitídy. Môžu sa vyskytnúť záchvaty kŕčov, ktoré zvyčajne prechádzajú bez stopy, ale niekedy zanechávajú strabizmus a poloparalýzu končatín, príznaky cerebrálneho hydrocefalu (hydrocefalus), čo vedie k zvýšenému intrakraniálnemu tlaku a zväčšeniu objemu lebky. V dnešnej dobe sa dieťa s vrodeným syfilisom najčastejšie rodí v termíne, s normálnou hmotnosťou a bez viditeľných prejavov ochorenia. Pri vyšetrení možno zistiť len zväčšenie pečene a sleziny, kostné zmeny (osteochondritída) a pozitívne reakcie krvi na syfilis. Niekedy sú tieto príznaky jediným znakom vrodenej choroby, ktorá sa potom nazýva vrodený latentný syfilis. Ochorenie možno prvýkrát zistiť vo vyššom veku – po 2 rokoch (neskorý vrodený syfilis). V tomto období je možné poškodenie zraku rýchlo vedúce k slepote, poškodenie ucha sprevádzané náhlou a nezvratnou hluchotou a zmenami tvaru horných zubov (rezákov). Charakteristická je špeciálna štruktúra predkolenia („šabľovité holene“). 2. Diagnóza syfilisu
Diagnostika slúži na potvrdenie klinickej diagnózy syfilisu, diagnostiku latentného syfilisu, sledovanie účinnosti liečby a ako jedno z kritérií vyliečenia pacientov so syfilisom na preventívne vyšetrenie určitých skupín populácie. Niektoré aspekty imunológie syfilisu. Na imunitnej odpovedi organizmu sa podieľajú bunkové (makrofágy, T-lymfocyty) aj humorálne mechanizmy (syntéza špecifických Ig). Výskyt antisyfilitových protilátok sa vyskytuje v súlade so všeobecnými vzormi imunitnej odpovede: najprv sa produkuje IgM, ako choroba postupuje, začína prevládať syntéza IgG; IgA sa tvorí v relatívne malom množstve. Problematika syntézy IgE a IgD nie je v súčasnosti dostatočne prebádaná. IgM sa objavuje 2-4 týždne po infekcii a u neliečených pacientov vymizne po približne 18 mesiacoch; pri liečbe skorého syfilisu - po 3-6 mesiacoch, neskoro - po 1 roku. IgG sa zvyčajne objavuje v 4. týždni po infekcii a zvyčajne dosahuje vyššie titre ako IgM. Protilátky tejto triedy môžu pretrvávať dlhú dobu aj po klinickom vyliečení pacienta. Antigénna štruktúra Treponema pallidum. Nasledujúce antigény boli najviac študované. Proteínové antigény Treponema pallidum. Obsahujú frakciu spoločnú pre patogénne treponémy a saprofytické treponémy, proti ktorým sa syntetizujú skupinové protilátky. Okrem toho existuje frakcia špecifická len pre patogénne treponémy. Proteínové antigény Treponema pallidum sú vysoko imunogénne, protilátky proti nim sa v organizme objavujú na konci inkubačnej doby alebo počas prvého týždňa po objavení sa chancre. Antigény polysacharidovej povahy. Sú slabo imunogénne, pretože protilátky proti nim nedosahujú významné titre, takže úloha týchto protilátok v sérodiagnostike syfilisu je nevýznamná. Lipidové antigény Treponema pallidum. Tvoria asi 30% suchej hmotnosti bunky. Okrem lipidov Treponema pallidum sa v tele pacienta objavuje veľké množstvo látok lipidového charakteru v dôsledku deštrukcie tkanivových buniek, najmä lipidov mitochondriálnej membrány. Zrejme majú rovnakú štruktúru ako lipidové antigény Treponema pallidum a majú vlastnosti autoantigénov. Protilátky sa objavia v tele pacienta približne 5-6 týždňov po infekcii. Moderné metódy sérodiagnostiky syfilisu sú založené na identifikácii protilátok rôznych tried v tele pacienta. V závislosti od povahy detegovaných protilátok sú všetky sérologické reakcie na syfilis zvyčajne rozdelené na špecifické a nešpecifické. Nešpecifické sérologické reakcie (NSR). Reakcie tejto skupiny sú založené na detekcii antilipidových protilátok v tele pacienta. Všetky reakcie tejto skupiny sú založené na jednom z dvoch princípov. Reakcie založené na princípe fixácie komplementu. Wassermanova reakcia (WR) a jej početné modifikácie. Na účely sérodiagnostiky syfilisu sa táto reakcia používa v kvalitatívnych a kvantitatívnych verziách, keď sa vykonáva klasickou metódou a metódou studenej väzby. Reakcia sa uskutočňuje s dvoma antigénmi: kardiolipínom a treponémom, pripraveným z Reiterovho treponému zničeného ultrazvukom. V primárnom období syfilisu sa reakcia stáva pozitívnou 2-3 týždne po objavení sa chancre alebo 5-6 týždňov po infekcii, v sekundárnom - u takmer 100% pacientov, v terciárne aktívne - 70-75%, s tabes dorsalis - v 50 %, progresívna paralýza v 95-98 %. Wassermanova reakcia často dáva nešpecifické pozitívne výsledky pri bakteriálnych, vírusových a protozoálnych infekciách, u pacientov s malígnymi novotvarmi, ako aj u zdravých jedincov po požití alkoholu. Často sa falošne pozitívne výsledky Wassermanovej reakcie pozorujú u tehotných žien v ôsmom mesiaci a po pôrode. Reakcie založené na princípe aglutinácie kardiolipínu. Mikroreakcie s krvnou plazmou a inaktivovaným sérom sú metódami expresnej diagnostiky syfilisu. Mikroreakcie sú diagnostikované kvapkaním pomocou špeciálneho antigénu. Najcitlivejšou a celkom špecifickou reakciou je reakcia s plazmou. Na druhom mieste v citlivosti a na prvom mieste v špecifickosti je reakcia s inaktivovaným sérom. Tieto testy možno odporučiť len ako skríningové testy, po ktorých nasleduje skríning jedincov s pozitívnymi výsledkami pomocou špecifických testov. Špecifické sérologické reakcie. Reakcie tejto skupiny sú založené na detekcii protilátok proti pôvodcovi ochorenia – Treponema pallidum. Táto skupina zahŕňa nasledujúce reakcie. Imunofluorescenčná reakcia (RIF). Medzi špecifickými reakciami zaujíma ústredné postavenie. Jej princíp spočíva v tom, že testovacie sérum sa používa na spracovanie antigénu, ktorým je Treponema pallidum kmeňa Nichols, získaný z králičej orchitídy, vysušený na podložnom sklíčku a fixovaný acetónom. Po premytí sa liek ošetrí luminiscenčným sérom proti ľudským globulínom. Fluorescenčný komplex (anti-humánny globulín + fluoresceín tioizokyanát) sa viaže na ľudský globulín na povrchu Treponema pallidum a môže byť identifikovaný fluorescenčnou mikroskopiou. Na sérodiagnostiku syfilisu sa používa niekoľko modifikácií RIF. A. Imunofluorescenčná reakcia s absorpciou (RIF-absorbancia). Skupinové protilátky sa z testovaného séra odstránia pomocou kultúrnych treponém zničených ultrazvukom, čo dramaticky zvyšuje špecifickosť reakcie. A keďže testovacie sérum je riedené len 1:5, modifikácia si zachováva vysokú citlivosť. Pokiaľ ide o citlivosť a špecifickosť, RIF-abs nie je horší ako Nelsonova reakcia (RIT), ale je oveľa jednoduchšie vykonať. RIF-abs sa stáva pozitívnym na začiatku 3. týždňa po infekcii (pred objavením sa chancroidu alebo súčasne s ním) a je metódou včasnej sérodiagnostiky syfilisu. Sérum často zostáva pozitívne niekoľko rokov po úplnej liečbe skorého syfilisu a u pacientov s neskorým syfilisom - po celé desaťročia. Indikácie na vykonávanie RIF-ab: pozitívne výsledky Wassermanovej reakcie u tehotných žien pri absencii klinických a anamnestických údajov naznačujúcich syfilis; vyšetrenie osôb s rôznymi somatickými a infekčnými chorobami, ktoré dávajú pozitívne výsledky pri testovaní vo Wassermanovej reakcii; vyšetrenie osôb s klinickými prejavmi charakteristickými pre syfilis, ale s negatívnymi výsledkami vo Wassermanovej reakcii; včasná diagnostika syfilisu; ako kritérium úspešnosti antisyfilitickej liečby. Prechod pozitívneho RIF-abs na negatívny v dôsledku liečby je 100% kritériom na vyliečenie syfilisu. B. IgM-RIF-abs reakcia. Vyššie bolo spomenuté, že u pacientov so skorým syfilisom sa v prvých týždňoch ochorenia objavuje IgM, ktorý je v tomto období nositeľmi špecifických vlastností séra. V neskorších štádiách ochorenia začína prevládať IgG. Rovnaká trieda imunoglobulínov je tiež zodpovedná za falošne pozitívne výsledky, pretože skupinové protilátky sú výsledkom dlhodobej imunizácie saprofytickými treponémami (ústna dutina, pohlavné orgány atď.). Samostatná štúdia tried Ig je obzvlášť zaujímavá v sérodiagnostike vrodeného syfilisu, kde antitreponemálne protilátky syntetizované v tele dieťaťa budú reprezentované IgM a IgG budú materského pôvodu. Reakcia IgM-RIF-abs je založená na použití anti-IgM konjugátu v druhej fáze namiesto anti-humánneho fluorescenčného globulínu. Indikácie pre túto reakciu sú: sérodiagnostika kongenitálneho syfilisu, keďže reakcia nám umožňuje vylúčiť IgG materského pôvodu, ktorý prechádza placentou a môže spôsobiť falošne pozitívny výsledok RIF-ab v neprítomnosti aktívneho syfilisu u dieťaťa; odlíšenie reinfekcie (reinfekcie) od relapsu syfilisu, pri ktorom bude pozitívny RIF-abs, ale negatívny IgM-RIF-abs; hodnotenie výsledkov liečby včasného syfilisu: pri plnej liečbe je IgM-RIF-abs negatívny. Pri vykonávaní tejto reakcie môžu byť v zriedkavých prípadoch pozorované falošne pozitívne a falošne negatívne výsledky. B. Reakcia 19SIgM-RIF-a6c. Táto modifikácia RIF je založená na predbežnej separácii väčších molekúl 19SIgM od menších molekúl 7SIgM skúmaného séra. To je možné vykonať pomocou gélovej filtrácie. Vyšetrenie séra obsahujúceho iba frakciu 19SIgM v reakcii RIF-abs eliminuje všetky možné zdroje chýb. Reakčná technika, najmä frakcionácia testovacieho séra, je však zložitá a časovo náročná, čo výrazne obmedzuje možnosť jej praktického využitia. Treponema pallidum imobilizačná reakcia (TRE). Toto je prvá zo špecifických reakcií navrhovaných na sérodiagnostiku syfilisu. Jej princíp spočíva v tom, že keď sa sérum pacienta zmieša so suspenziou živého patogénneho Treponema pallidum v prítomnosti komplementu, pohyblivosť Treponema pallidum sa stratí, zatiaľ čo pri zmiešaní suspenzie Treponema pallidum so sérom osôb, ktoré nemajú syfilis, pohyblivosť Treponema pallidum je dlhodobo zachovaná. Protilátky proti imobilizínu zistené v tejto reakcii sú klasifikované ako neskoré protilátky; objavujú sa neskôr ako protilátky fixujúce komplement a maximálny titer dosahujú do 10. mesiaca ochorenia. Preto je reakcia nevhodná ako metóda včasnej diagnostiky. Pri sekundárnom neliečenom syfilise je však reakcia pozitívna v 95 % prípadov. V prípade terciárneho syfilisu poskytuje RIT pozitívne výsledky od 95 do 100 %. V prípade syfilisu vnútorných orgánov, centrálneho nervového systému, vrodeného syfilisu sa percento pozitívnych výsledkov RIT blíži k 100. Senzitivita a špecificita RIT je približne rovnaká ako u RIF-Abs, s výnimkou diagnózy včasného syfilisu. Negatívna RIT v dôsledku plnej liečby sa nie vždy vyskytuje; reakcia môže zostať pozitívna mnoho rokov. Indikácie pre reakcie sú rovnaké ako pre RIF-abs. Zo všetkých špecifických reakcií je RIT najkomplexnejšia a časovo najnáročnejšia, preto sa v zahraničí používa len na vyšetrenie v pochybných prípadoch. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Princíp metódy spočíva v tom, že povrch nosiča v tuhej fáze (jamky z polystyrénových alebo akrylových panelov) je senzibilizovaný antigénmi Treponema pallidum. Potom sa do takýchto jamiek pridá testovacie sérum. Ak sú v sére protilátky proti Treponema pallidum, vytvorí sa komplex antigén + protilátka, naviazaný na povrch nosiča. V ďalšej fáze sa do jamiek naleje protidruhové (proti ľudským globulínom) sérum označené enzýmom (peroxidáza alebo alkalická fosfatáza). Značené protilátky (konjugát) interagujú s komplexom antigén + protilátka a vytvárajú nový komplex. Na jeho identifikáciu sa do jamiek naleje roztok substrátu (kyselina 5-aminosalicylová). Pôsobením enzýmu substrát mení farbu, čo naznačuje pozitívny výsledok reakcie. Z hľadiska citlivosti a špecifickosti je metóda blízka RIF-abs. Indikácie pre ELISA sú rovnaké ako pre RIF-abs. Boli vyvinuté makro- a mikrovarianty ELISA. Odpoveď môže byť automatizovaná. Nepriama hemaglutinačná reakcia (RIHA). Princíp spočíva v tom, že ako antigén sa používajú formalinizované a opálené erytrocyty, na ktorých sú adsorbované antigény treponema pallidum. Keď sa takýto antigén pridá do séra pacienta, červené krvinky sa zlepia – hemaglutinácia. Špecifickosť a citlivosť reakcie je vyššia v porovnaní s inými metódami detekcie protilátok proti Treponema pallidum za predpokladu vysokej kvality antigénu. Reakcia sa stáva pozitívnou v 3. týždni po infekcii a zostáva toľko rokov po uzdravení. Počet falošne pozitívnych a falošne negatívnych výsledkov je malý. Pre túto reakciu bola vyvinutá mikrometóda, ako aj automatizovaná mikrohemaglutinačná reakcia. V zahraničí je analógom tejto reakcie TRHA (T. Pallidum hemaglutination). V tretej fáze sa do jamiek zavedie erytrocytárne diagnosticum. V pozitívnych prípadoch dochádza k hemaglutinácii - červené krvinky sú fixované na stenách jamiek, v negatívnych prípadoch sa červené krvinky usadzujú na dne jamiek vo forme disku. Reakcia môže byť dodaná v kvalitatívnych a kvantitatívnych verziách a je k dispozícii pre automatizáciu. 3. Zásady liečby a prevencie syfilisu
Nevyhnutnou podmienkou pre uzdravenie pacientov je včasná, rázna a zručne vykonaná liečba. Moderné princípy liečby syfilisu sú založené na mnohých teoretických princípoch, údajoch z experimentálnych štúdií a klinických pozorovaní. Pred pristúpením k špecifickej liečbe je potrebné diagnózu syfilisu klinicky podložiť a laboratórne potvrdiť. Malo by sa pamätať na to, k čomu táto diagnóza vedie, ako ovplyvňuje budúci osud človeka. Liečba syfilisu musí byť prísne individuálna na základe charakteristík tela pacienta, obdobia ochorenia, jeho formy, pracovných a životných podmienok, predchádzajúcich ochorení atď. Počas liečby musí pacient dodržiavať špeciálny režim. Dodržiavanie liečebného a zdravotného režimu do značnej miery určuje celkový stav pacienta a tým umožňuje plnú antisyfilitickú liečbu. Veľký význam má aj podporná liečba. Bez ohľadu na štádium ochorenia je potrebné uchýliť sa k všeobecnej posilňujúcej terapii (výživa, vitamíny atď.), Aby sa stimulovali ochranné a kompenzačné mechanizmy tela. Moderné špecifické činidlá majú silný účinok na pôvodcu ochorenia. Pri ich predpisovaní je však potrebné brať do úvahy kontraindikácie každého z antisyfilických liekov, ako aj celkový stav pacienta. V súčasnosti používajú venerológovia na liečbu syfilisu najmä tieto skupiny liekov: antibiotiká, bizmut a jódové prípravky. Použitie každého z týchto prostriedkov má svoje vlastné indikácie a kontraindikácie. Antibiotiká. Právom sa umiestnili na poprednom mieste vďaka vynikajúcej terapeutickej kvalite a dobrej znášanlivosti. Na liečbu pacientov s infekčnými formami syfilisu sa používajú lieky zo skupiny penicilínov: sodná soľ benzylpenicilínu, bicilín -1, bicilín -3, bicilín -5. Celková dávka liekov skupiny penicilínov závisí od obdobia ochorenia a určuje ju lekár v súlade s „Pokynmi na liečbu a prevenciu syfilisu“, ktoré boli u nás prijaté v roku 1988. Prípravky bizmutu V roku 1921 bol do liečby syfilisu pomocou Sazerac a Levaditi zavedený bizmut, ktorý rýchlo a pevne vstúpil do arzenálu antisyfilitických liekov. Najpriaznivejšie prípravky bizmutu sú: Biyokhinal, Bispoveral atď. Keď sa bizmutové prípravky zavádzajú do tela, je prenášaný krvným obehom, ukladaný a zadržiavaný po dlhú dobu vo vnútorných orgánoch, čo spôsobuje podráždenie ich nervových receptorových zón. Kontraindikácie používania liekov bizmutu sú: ochorenie obličiek, alveolárna pyorrhea, tuberkulóza, diabetes mellitus, srdcové choroby. Jódové prípravky. Jódové prípravky získali všeobecné uznanie ako špecifický liek na syfilis v roku 1830 vďaka práci Zollesa. Jódové prípravky sa teraz široko používajú pri liečbe pacientov s terciárnym syfilisom (na urýchlenie resorpcie syfilitických infiltrátov) medzi cyklami. Jód sa najčastejšie používa vo forme roztoku. jodid draselný
2-12% pre 2-3 polievkové lyžice. lyžice denne po jedle, najlepšie v mlieku. Menej často sa používa Lugolov roztok a tablety Sayodin. Dnes, žiaľ, neexistujú žiadne absolútne a spoľahlivé kritériá na vyliečenie, hoci lekári o liečiteľnosti tejto infekcie nepochybujú. V súčasnosti sa fakt vyliečenia stanovuje na základe dlhodobého pozorovania pacientov po ukončení špecifickej liečby počas 1-3-5 rokov klinického pozorovania. V súlade s existujúcimi pokynmi môžu byť osoby, ktoré podstúpili preventívnu liečbu, odhlásené po 6 mesiacoch klinického pozorovania. V prípade sekundárneho na 3 roky, v prípade terciárneho skrytého, 5 rokov lekárskej prehliadky. Pozostáva z včasnej diagnostiky syfilisu, komplexnej liečby, sanitárnej a výchovnej práce medzi obyvateľstvom, organizácie každodenného života a odstránenia nezamestnanosti a prostitúcie. Napriek tomu, že moderná medicína disponuje účinnými diagnostickými a terapeutickými metódami, syfilis sa stal epidémiou vo vyspelých aj rozvojových krajinách. Záver
Na záver je potrebné vyvodiť niekoľko záverov. V tejto práci v kurze sme skúmali jednu zo pohlavne prenosných chorôb, ktoré sa prenášajú pohlavným stykom aj z rodičov na deti. V našej práci sme zhodnotili históriu štúdia ochorenia, procesy spojené s jeho priebehom, dôsledky spojené s týmto typom ochorenia a metódy diagnostiky syfilisu a spôsoby jeho liečby. Pomocou prác ruských vedcov ako: Akovbyan V.A., Rezaikina A.V., Sokolovsky E.V., Belgesov N.V., Buzina T.S., Kolobova A.A. a ďalších sme boli schopní zvážiť súčasný stav tohto problému a určiť vyhliadky do budúcnosti. vývoj diagnostiky a liečby syfilisu. Podľa svedectiev mnohých odborníkov, teoretikov aj praktikov; Syfilis je jedným z najkomplexnejších typov ochorení a mikrobiológovia v súčasnosti nedokážu definitívne analyzovať všetky štádiá ochorenia a všetky možné účinné spôsoby jeho liečby. V posledných rokoch 20. a prvých rokoch 21. storočia sa ruským mikrobiológom sprístupnili skúsenosti zo západnej Európy a USA, čo prispelo aj k štúdiu syfilisu ruskými vedcami. Zoznam použitej literatúry
1. Akovbyan V.A., Rezaikina A.V., Tikhonova L.I. Charakteristika epidemiologických vzorcov, ktoré určujú šírenie pohlavne prenosných chorôb v Rusku // Vestn. dermatológie a venerológie. - 1998. - č. 1. - S.4-6. Antonev A.A., Romanenko G.F., Myskin V.S. Prostitúcia a sexuálne prenosné choroby // Vestn. dermatológie a venerológie. - 1997. - č. 6. - S.20-22. Arabský E.R., Sokolovský E.V. Sociálne a medicínsko-psychologické charakteristiky žien trpiacich syfilisom // Journal of dermatovenerology and cosmetology. - St. Petersburg. - 1999. - N 1. - S. 53-58. Belgesov N.V., Ivanov A.M., Sboychakov V.B., Verbov V.N. Kritériá pre výber enzýmovo viazaných imunosorbentných testovacích systémov na diagnostiku syfilisu v krvi // Materiály výročnej vedeckej konferencie venovanej 75. výročiu Katedry mikrobiológie vojenská lekárska akadémia. VMedA. - Petrohrad, 1998.- S.40-42. Buzina T.S. Fenomén „hľadania senzácie“ a problém prevencie AIDS pri drogovej závislosti // Problémy. Narkológia. - 1994. - č.2. - S.84-88. Verbov V.N., Ivanov A.M., Sboychakov V.B., Kolobov A.A. Kombinované použitie syntetických analógov antigénov T. pallidum v enzýmovom imunosorbentnom teste na diagnostiku syfilisu // Zborník z vedeckej konferencie s medzinárodnou účasťou "" Vírusové infekcie na on the. prah 21. storočia: epidemiológia a prevencia“. - Petrohrad, 1999.- S.185-186. Golovanova E. A., Verbov V. N., Menshikova A. Yu., Makarova M. A., Kaftyreva L. A. Použitie latexového diagnostika na identifikáciu enterohemoragickej séroskupiny Escherichia O157 // Materiály celoruskej vedeckej a praktickej konferencie „Detské choroby v poradí 21. storočie: súčasnosť a budúcnosť." - Petrohrad, 1999. - S.26-27. Gurvich I.N. Sociálna psychológia zdravia. Petrohrad: Petrohradská štátna univerzita, 1999. - 1023 Kolobov A. A., Ivanov A. M., Verbov V. N., Shevyakova L. A., Ismagulova G. D. Charakteristika syntetických analógov antigénov patogénu syfilisu v enzýmovom imunoteste // Zborník zo 7. medzinárodnej konferencie AIDS, rakovina a súvisiace problémy." - Ruský žurnál HIV/AIDS a súvisiace problémy. - 1999. - T.3, N1. - S.108. Kubanova A.A., Loseva O.K. Základy primárnej prevencie sexuálne prenosných infekcií (STI) v skupinách so zvýšeným behaviorálnym rizikom // Russian Journal. kožné a pohlavné choroby. - 2000. - č. 5. - S. 4-7. Kungurov N.V., Gerasimova N.M., Sirneva T.A. a kol. O zlepšovaní foriem boja proti syfilisu // Materials of the X Scientific and Practical Conf. dermatológovia a venerológovia regiónu Amur s celoruskou účasťou Aktuálne problémy dermatológie a venerológie. - Blagoveščensk, 1998. - S. 100-101. Lichtshangof A.Z., Arapenkov D.A. Moderné medicínske, sociálne a organizačné problémy poskytovania zdravotnej starostlivosti pacientom so syfilisom a kvapavkou. - Petrohrad: Vydavateľstvo GPMA, 1999. - 68 s. Luzan N.V., Kamaldinov D.O., Lukyanyuk E.V., Yashina E.Yu. Prevencia HIV/AIDS, pohlavne prenosných chorôb. Peerovi pomôže metodická príručka práce s mládežníckym publikom pre mládežníckych vedúcich a inštruktorov Peer programu. - Novosibirsk: Sibírsky chronograf, 1999. - 72 s. Mylyueva V.A., Ryumshina T.A., Degtyar Yu.S. Klinické a epidemiologické aspekty kvapavky u dospievajúcich // Bulletin dermatológie a venerológie. - 1990. - Číslo 8. - S.49-51. Raznatovský IM, Sokolovskij EV, Krasnoselskikh TV a kol. Príčiny a faktory prispievajúce k rozvoju sérologickej rezistencie po modernej liečbe syfilisu // Journal. dermatovenerol. a kozmetol. - 1996. - č. 1. - S.60-66. Rodionov AN. Syfilis: príručka pre lekárov. Petrohrad: Peter, 1997 Sboychakov V. B., Ivanov A. M., Verbov V. N., Krutetskaya I. Yu., Ismagulova G. D., Kolobov A. A. Zlepšenie enzýmového imunosorbentného testovacieho systému na diagnostiku syfilisu na základe štúdia spektra špecifických protilátok proti T. pallidum. Zborník príspevkov z vedeckej konferencie s medzinárodnou účasťou "Vírusové infekcie na prahu 21. storočia: epidemiológia a prevencia." - Petrohrad, 1999.- S.278-279. Sboychakov V. B., Ivanov A. M., Verbov V. N., Kolobov A. A., Ismagulova G. D., Bakuradze E. F. Použitie modifikovaného enzýmovo viazaného imunosorbentného testu na diagnostiku syfilisu // Materiály XXXI vedeckej a praktickej konferencie dermatovenerológovia, gynekológovia a pôrodníci v Petrohrade. - Petrohrad, 1996.- S.25. Sokolovsky E.V., Karapetyan A.F., Ostrovsky D.V. Drogovo závislé prostitútky: lekárske a sociálne charakteristiky vysokorizikových skupín // Journal of Dermatovenereology and Cosmetology. - 1999. - N 1. - S.49-52. Syrneva T. A., Zilberg N. V. Hlavné trendy vo výskyte syfilisu v regióne Sverdlovsk // Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology. - 2001. - N 2. - S. 33-36 Taits B.M., Starchenko M.E., Smirnova T.S. Problémy dermatovenerologickej služby pre prevenciu STI v Petrohrade // Mat. XXXU vedecko-praktické conf. dermatovenerológov a lekárov príbuzných odborov v Petrohrade. - Petrohrad, 2000. - S.4-5. Tichonova L.I., Privalova N.K. Prognóza výskytu rôznych foriem syfilisu v Ruskej federácii // Mat. XXXU vedecko-praktické conf. dermatovenerológov a lekárov príbuzných odborov v Petrohrade. - Petrohrad, 2000. - S.5-6. Chuchelin G.N., Vinokurov I.N., Skuratovič A.A. Sociálne a epidemiologické charakteristiky pacientov so syfilisom a kvapavkou, ktorí opakovane trpia sexuálne prenosnými chorobami // Bulletin dermatológie a venerológie. - 1983. - Číslo 10. - S.27-30.
Všeobecná charakteristika spirochét.
Spirochetózy je skupina infekčných ochorení spôsobených baktériami v tvare špirály, vyznačujúca sa všeobecnou intoxikáciou a druhovo špecifickou cyklikou vývoja.
Taxonómia:
Poradie: Spirochaetales (z gréckeho speira - kučera, chaite - vlasy)
Čeľaď: Spirochaetaceae, Leptospiraceae
Rod: Spirochaeta Leptospira
Morfológia: dlhé, tenké, špirálovito zakrivené mikroorganizmy, veľkosti 0,1-0,3x5-250 mikrónov. Centrálnou štruktúrou je protoplazmatický valec, ktorý obsahuje cytoplazmu, nukleoid, 70 S ribozómy a enzýmy, obklopený cytoplazmatickou membránou a bunkovou stenou. Protoplazmatický valec má vďaka peptidoglykánu stály špirálovitý tvar, ktorý vytvára primárne kučery. Ich počet, typ, sklon a uhol sklonu sa medzi rôznymi druhmi líšia. Sekundárne kučery sú výsledkom zakrivenia celého tela. Okolo špirálovitého cytoplazmatického valca je periplazmatický bičík (bičík), ktorého jeden koniec je pripojený k jednému z pólov protoplazmatického valca a druhý k druhému približne v strede bunky, počet bičíkov je od 2 do 100 (jedna polovica je pripevnená k jednému pólu a druhá k druhému pólu). Periplazmatické bičíky sa špirálovito ovíjajú okolo protoplazmatického valca a vytvárajú axiálne vlákno, na vrchu ktorého je viacvrstvová vonkajšia membrána (vonkajší obal spirochéty); bičík sa nachádza medzi ním a valcom (periplazmatický bičík alebo endoflagellum).
Rozdiely od enzoflagella:
neustále ovíjať telo bunky;
úplne umiestnené vo vnútri bunky;
kontrakcia rotáciou okolo svojej osi, translačné a ohybové;
zachovať mobilitu v médiu s relatívne vysokou viskozitou.
Netvoria spóry ani tobolky. Za nepriaznivých podmienok vznikajú cysty následkom stočenia do klbka.
Tintoriálne vlastnosti: sú slabo zafarbené anime farbivami, okrem borélií, gramnegatívne, používa sa metóda Morozovho striebrenia.
Kultúrne vlastnosti: náročné na nutričné médiá, je potrebné pridať natívne bielkoviny, sacharidy a mastné kyseliny. Na základe spôsobu uchovávania energie sa delia na anaeróby, fakultatívne anaeróby, mikroaerofily a aeróby. Optimálna teplota pre leptospiry a borélie je 28-30 C.
Biochemické vlastnosti : kataláza-, ureáza-, oxidáza-negatívna, Voiges-Proskauerova reakcia „-“, neznižuje dusičnany.
Odolnosť: závisí od rodu a druhu.
Úloha v patológii .
Treponéma sú pôvodcami syfilisu, yaws, pinta, bejel;
borélie– epidemická a endemická recidivujúca horúčka prenášaná kliešťami, lymská borelióza;
Leptospira- leptospiróza.
Všeobecné príznaky spirochetózy:
cyklický kurz;
detekcia patogénov v krvi a tkanivách;
hlavné metódy mikrobiologickej diagnostiky: bakterioskopické a sérologické.
2. Mikrobiológia syfilisu.
syfilis - chronické infekčné pohlavné ochorenie charakterizované zvlneným priebehom, striedaním období aktívnych klinických prejavov ochorenia s dlhými latentnými obdobiami.
História objavovania.
Pôvodcu syfilisu identifikovali v roku 1905 Schaudin a Hoffman a pomenovali ho bledá spirochéta. Wasserman spolu s Keisserom a Brooke navrhli sérologický test na diagnostiku syfilisu.
Taxonómia.
Objednajte si Spirochaetales
Čeľaď: Spirochaetaceae
Rod: Treponema
Druh: Treponema pallidum
Morfológia: špirálovité baktérie s rozmermi 6-14x0,2-0,3 mikrónov, počet primárnych kučier je od 8 do 12 umiestnených v rovnakej vzdialenosti od seba; Z koncov bunky sa rozprestierajú tri periplazmatické bičíky. Netvoria spóry ani tobolky, ale v tele pokusných zvierat si dokážu syntetizovať puzdrový obal mukopolysacharidového charakteru. Za nepriaznivých podmienok sa môžu zmeniť na cysty, zrnité a cystám podobné guľovité telieska.
Tintoriálne vlastnosti: slabo zafarbené anilínovými farbivami, gramnegatívne, podľa Romanovského-Giemsa - v slabo ružovej farbe (pallidum - bledé), používajú metódu Morozovho striebrenia a negatívne kontrastné farbenie podľa Burriho, najúčinnejšia štúdia je v tm- poľný alebo fázovo kontrastný mikroskop.
Kultúrne vlastnosti : obligátne anaeróby, chemoorganoheterotrofy, optimálna teplota - 35°C, pri teplotách nad 40°C strácajú životaschopnosť. Veľmi náročné na živné médiá; je potrebné doplnenie obličiek, mozgového tkaniva alebo ascitickej tekutiny. Treponémy pestované na živných médiách („kultivované“ kmene) sa stávajú hrubšími, kratšími, polymorfnými a strácajú svoju imunogenicitu a patogenitu. Treponémy rastú dobre bez straty svojich imunogénnych a patogénnych vlastností v semenníkoch králikov a v kuracích embryách - „tkanivových“ kmeňoch, ktoré sa používajú na izoláciu a štúdium patogénu od pacientov.
Biochemické vlastnosti : neaktívne, rozkladajú glukózu, galaktózu, sacharózu, maltózu, manitol za vzniku kyseliny; tvorí indol a sírovodík, skvapalňuje želatínu; redukovať dusičnan strieborný na kovové striebro, ktoré dáva látkam čiernu alebo tmavohnedú farbu.
Antigénna štruktúra : komplex, proteíny vonkajšej membrány (tepelne labilné, zničené pri 76-80°C, polysacharidy (termostabilné); lipoproteíny, čo sú skrížene reagujúce antigény bežné u ľudí a dobytka, napr. kardiolipínový antigén je extrakt lipoproteínov zo srdca hovädzí dobytok, používaný v sérologických reakciách v diagnostike.
Faktory patogenity :
a) toxíny:
endotoxín (LPS bunkovej steny);
b) enzýmy patogenity neboli identifikované;
c) štrukturálne a chemické zložky bunky:
pohyblivosť v dôsledku bičíkov;
adhezíny;
proteíny vonkajšej membrány.
Odolnosť: citlivé na faktory prostredia, UV žiarenie, sušenie, vysoké teploty (pri 40°C na 1 hodinu strácajú patogénne vlastnosti, pri 48°C odumierajú po 10 minútach); dis. roztoky v pracovných koncentráciách majú škodlivý účinok; odoláva nízkym teplotám (vydrží v chlade až 50 dní, pri zmrazení až 1 rok), v plnej krvi a sére pri 4°C zostávajú životaschopné 24 hodín; citlivé na soli ťažkých kovov a antibiotiká (penicilín, erytromycín, karbenicilín atď.)
Epidemiológia.
Zdrojom nákazy je chorý človek. Neexistuje žiadny bakteriálny nosič so syfilisom.
Prenosová cesta:
1) kontakt: a) priamy; b) nepriame.
2) transplacentárne (od matky po novorodenca);
3) transfúzia.
Vstupná brána: sliznice pohlavných orgánov, ústna dutina atď., koža s narušenou celistvosťou.
Úloha a patológie
Na syfilis ochorejú len ľudia. Experimentálne môžete infikovať opice, králiky a škrečky. U opíc sa chancroid vyvíja u králikov a škrečkov, dochádza k generalizovanej chronickej infekcii.
Strana 63 z 91
PATOGÉNNE SPIROCHÉTY
Spirochety na rozdiel od baktérií tvoria menej bežnú skupinu mikroorganizmov.
Všetky spirochéty netvoria spóry ani kapsuly. Nefarbia sa na Gram (gram negatívny). Náročné na pestovanie na živných pôdach. Spirochety - saprofyty sa nachádzajú vo vodných útvaroch bohatých na organický odpad, v kaloch, v ľudskej ústnej dutine a črevách. Na základe morfologických charakteristík sa patogénne spirochéty delia do troch skupín.
- Treponéma, ktorá má tvar pravidelnej špirály. To zahŕňa syfilisovú spirochétu.
- Borélie, tvarované ako zvlnená niť s ohybmi a širšími závitmi. Do tejto skupiny patria spirochéty s recidivujúcou horúčkou a Vincentova spirochéta.
- Leptospira, ktorá má početné malé kučery a charakteristické háčikovité zakončenia (infekčná žltačka Leptospira).
SPIROCHETE SYFILIS
Pôvodcom syfilisu je svetlá spirochéta Spirochaeta pallida, ktorú prvýkrát opísali F. Schaudin a E. Hoffmann v roku 1905. O 2 roky skôr pri pokusoch na opiciach objavil syfilisovú spirochétu D.K.
Morfológia a farbiace vlastnosti. Svetlá spirochéta je veľmi jemná, tenká, slabo lámavá niť s malými, rovnomernými, pravidelnými ohybmi (obr. 104 a 105 na vložke).
Ryža. 104. Treponema pallidum v tmavom poli.
V priemere je to od 6 do 14 mikrónov na dĺžku a 0,25 mikrónov na hrúbku. Pomenovanie bledá dostala vďaka zlej natierateľnosti anilínovými farbivami a zlej viditeľnosti v živom stave. Tieto vlastnosti sú spôsobené nízkym obsahom nukleoproteínov a bohatosťou lipoidov v tele spirochéty. Na zafarbenie použite metódu Romanovského (obr. 105) alebo namaľte po prvom vystavení nejakému moridlu. Najlepšou metódou na detekciu spirochéty pallidum je vyšetrenie v tmavom poli. V čerstvom materiáli pri skúmaní v ultramikroskope so stmaveným zorným poľom vykazuje bledá spirochéta aktívne pohyby okolo pozdĺžnej osi, ako aj translačné a rotačné pohyby.
Kultivácia. Syfilisová spirochéta sa na bežných živných pôdach nerozmnožuje. V. M. Aristovsky a A. A. Geltser úspešne použili tekuté živné médium pozostávajúce z králičieho séra s prídavkom kúska mozgového tkaniva. Po zasiatí sa povrch média naplní vazelínou. V kultúrach sú spirochéty hrubšie, kratšie a líšia sa polymorfizmom. Výsledné kultúry nemajú patogénne vlastnosti a nazývajú sa „kultúrne“ na rozdiel od „tkanivových“, ktoré si zachovávajú patogénne
vlastnosti a udržiavajú sa v laboratóriách pasážami na králikoch.
Odpor. Svetlá spirochéta zle odoláva vysychaniu a vysokej teplote. Zahriatie na 45-48° ho zabije do hodiny, na 55° za 15 minút. Menej citlivý na nízke teploty. Pri 10 °C zostáva životaschopná až niekoľko dní. Dezinfekčné prostriedky majú deštruktívny účinok. Z chemikálií má najsilnejší účinok 1-2% roztok fenolu.
Patogenita pre zvieratá. I. I. Mečnikov a D. K. Zabolotny boli prví, ktorí získali experimentálny syfilis u ľudoopov. Králiky sa môžu infikovať injekciou patologického materiálu do rohovky, prednej očnej komory, kože, sliznice atď. .
Patogenéza a klinický obraz syfilisu. Jediným zdrojom nákazy je človek so syfilisom. Choroba sa môže prenášať ako priamym kontaktom (najčastejšie sexuálnym), tak aj prostredníctvom predmetov kontaminovaných syfilitovým sekrétom. Jedenie zo spoločného riadu, používanie spoločnej lyžice atď. (nepriamy kontakt) môže prispieť k šíreniu syfilisu v domácnosti.
Svetlá spirochéta sa do tela dostáva cez poškodené sliznice a kožu. Po 3-4 týždňoch sa v mieste vstupnej brány - chancre (vred s hustými okrajmi a dnom - odtiaľ názov chancre) objavuje primárna skleróza, ktorá charakterizuje primárne obdobie syfilisu.
Následne mikrób preniká do tela lymfatickými a obehovými cestami a šíri sa po tele – začína druhé obdobie. Toto obdobie je charakterizované poškodením kože a slizníc, na ktorých sa objavuje roseola, papuly, vezikuly a pustuly – syfilidy. Druhé obdobie trvá od 2-3 mesiacov do niekoľkých rokov. Ak syfilis nebol dostatočne liečený, začína tretie obdobie - gumovité. Gumy (granulómy) sú bunkové akumulácie pozostávajúce z lymfocytov, epiteloidných a plazmatických buniek. Môžu byť v hrúbke kože, slizníc, vnútorných
ďasná niekedy dosahujú veľké veľkosti, malé cievy okolo nich postupne ubúdajú v lúmene a nakoniec sa uzatvárajú. V tomto ohľade je výživa ďasien narušená a dochádza k ich hlbokej deštrukcii s tvorbou vredov a jaziev v akýchkoľvek tkanivách a orgánoch.
V niektorých prípadoch sa syfilis dostáva do štvrtého obdobia, ktoré je charakterizované léziami centrálneho nervového systému vo forme progresívnej paralýzy a tabes dorsalis. Klinické prejavy syfilisu sa vyznačujú tým, že vo väčšine prípadov sú vznikajúce lézie kože a slizníc bezbolestné, miznú aj bez terapeutického zásahu, opakujú sa a nakoniec spôsobujú vážne lézie tretieho a štvrtého obdobia.
Imunita. Vrodená imunita voči syfilisu u ľudí neexistuje. Prenesená choroba tiež nezanecháva ten typ získanej imunity, ktorý charakterizuje väčšinu infekčných chorôb. Počas sekundárnej infekcie pacienta so syfilisom spirochéty nezomrú, ale pretrvávajú a šíria sa po tele, infikujú orgány a tkanivá spolu s prežívajúcimi spirochétami primárnej infekcie. Pri sekundárnej infekcii syfilisom však chýba primárna forma reakcie - chancre. Tento imunologický stav sa nazýva "shanker imunita".
„Imunitou“ pri syfilise rozumieme imunologickú reštrukturalizáciu tela, v dôsledku ktorej sa mení povaha patologických zmien a samotný klinický obraz. Mechanizmus tejto „imunity“ nie je spôsobený humorálnymi faktormi, hoci protilátky (lyzíny, aglutiníny) sa v sére pacientov nachádzajú.
Laboratórna diagnostika. V prvom období syfilisu sa diagnóza robí pomocou bakterioskopického vyšetrenia v tmavom poli alebo v zafarbených náteroch materiálu z chancre.
Pre výskum je potrebné extrahovať tkanivový mok z hlbokých častí lézie, obsahujúci väčší počet spirochét. Za týmto účelom najskôr dôkladne utrite povrch chancre sterilným tampónom namočeným vo fyziologickom roztoku, potom z neho ľahkým stlačením dna vredu vytlačte malé množstvo tkanivového moku. Ak sa to nepodarí, spodná časť vredu sa podráždi miernym škrabaním skalpelom alebo ostrou lyžicou. Vzniknutá kvapalina sa odsaje Pasteurovou pipetou.
Kvapka kvapaliny sa najlepšie skúma v tmavom poli, kde je dobre viditeľná morfológia jasne osvetlených spirochét a ich charakteristické pohyby.
Saprofytické spirochéty nachádzajúce sa na genitáliách a v ústnej dutine (na genitáliách - Sp. refringens, v ústnej dutine - Sp. microdentium) sa od svetlej spirochéty líšia svojou morfológiou a vzorom pohybu. Sp. refringens má hrubšie telo s veľkými kučerami, nemá pohyb vpred, Sp. microdentium sa líši od svetlej spirochéty povahou svojho pohybu.
Môžete tiež pripraviť šmuhy s atramentom Burri (pozri stranu 51), kde je na čiernom pozadí jasne viditeľný tvar sivobielych spirochét a ich kučery.
Na vyšetrenie farebného preparátu sa pripravia tenké roztery: kvapka tekutiny sa nanesie na podložné sklíčko a okrajom druhého pohára sa rozotrie po povrchu (rovnako ako pri príprave rozteru z kvapky krvi). Nátery sa sušia na vzduchu, fixujú v metylalkohole a farbia 12-15 hodín podľa Romanovského (s. 52): bledá spirochéta sa sfarbí do ružova, čo umožňuje odlíšiť ju od iných saprofytických spirochét, ktoré sa sfarbujú do modra (viď. Obr. 105).
Ryža. 105. Bledá spirochéta vo výboji chancre. Farbenie podľa Romanovského.
Takéto dlhotrvajúce sfarbenie prípravku sa vysvetľuje tým, že bledá spirochéta dobre neprijíma anilínové farbivá.
V druhom období syfilisu, keď sa na koži a slizniciach objavia syfilidy, sa z postihnutých miest odoberá aj tkanivová šťava a vyšetruje sa na prítomnosť spirochét.
Po 4-5 týždňoch od začiatku infekcie je možné vykonať sérologické vyšetrenie, ktoré je najbežnejšou metódou diagnostiky syfilisu.
Sérodiagnostika syfilisu je založená na Wassermanovej reakcii a sedimentových reakciách.
Wassermanova reakcia. Wassermanova reakčná technika sa nelíši od reakčnej techniky fixácie komplementu. Významným rozdielom je spôsob prípravy antigénov, ako aj ich titrácia.
Lipoidné extrakty z patologických alebo normálnych tkanív sa používajú ako antigény pre Wassermannovu reakciu. Takzvané špecifické antigény pripravené zo syfilitických orgánov sa vyznačujú vyššou aktivitou, vďaka čomu ich titer zvyčajne dosahuje tisíciny mililitra (titer 0,007, 0,05 na 1 ml atď.). Nešpecifické antigény sú menej aktívne, preto je ich titer nižší a pohybuje sa v rámci stotín mililitra (napríklad titer 0,01, 0,02 na 1 ml).
Pri vykonávaní Wassermanovej reakcie sa používajú 3 antigény (č. 1, 2 a 3 kardiolipín). Antigén č. 1 špecifický. Obsahuje lipidy syfilitickej spirochéty získané extrakciou z tkaniva semenníkov králika infikovaného syfilisom. Antigény č. 2 a 3 sú nešpecifické a obsahujú normálne tkanivové lipidy (alkoholové extrakty zo srdcových svalov hovädzieho dobytka s prídavkom 0,25-0,3 % cholesterolu). Kardiolipínový antigén je čistený prípravok, musí sa rýchlo riediť a po zriedení by mal byť mierne opaleskujúci, ale nie zakalený. Titer antigénu sa vzťahuje na jeho množstvo, ktoré by malo byť v 1 ml fyziologického roztoku a ktoré neodďaľuje hemolýzu v prítomnosti hemolytického systému a komplementu.
Napríklad, ak je na ampulke uvedený titer antigénu 0,05 ml, znamená to, že počas prevádzky by sa mal antigén zriediť fyziologickým roztokom tak, aby na ml tekutiny bolo 0,05 ml antigénu.
Vzhľadom na to, že antigény môžu mať rôzne antikomplementárne vlastnosti, pred uskutočnením Wassermannovej reakcie sa komplement titruje nielen v čistej forme, ale aj v prítomnosti antigénov. Keďže Wassermanova reakcia sa uskutočňuje s 3 antigénmi, komplement by sa mal titrovať s každým antigénom samostatne.
Modifikácia Wassermanovej reakcie - Grigoriev-Rapoportova reakcia (tabuľka 25). Táto reakcia je založená na využití komplementárnej aktivity testovaného séra. Reakcia využíva (najneskôr 36 hodín po prijatí) aktívne (nezahriate) sérum pacienta. Na uskutočnenie reakcie sú potrebné antigény, hemolytické sérum a defibrinovaná, nepremytá ovčia krv prefiltrovaná cez dve vrstvy gázy.
Schéma Grigorievovej - Rapoportovej reakcie
Ingrediencie (v ml) | Skúmavky | ||
Aktívne testovacie sérum | |||
Fyziologický roztok | |||
Antigénovo špecifický, zriedený titer | |||
Antigén nešpecifický, zriedený podľa titra | |||
Izbová teplota 22 °C počas 25 minút |
|||
Hemolytický systém | |||
Izbová teplota 22 °C počas 25 minút. |
|||
V prípadoch, keď nedochádza k hemolýze v kontrolnom sére, sa reakcia opakuje a do 0,2 ml testovacieho séra sa pridá 0,2 ml zjavne aktívneho negatívneho séra, a preto sa objem pridaného fyziologického roztoku primerane zníži.
Výsledky experimentu sa berú do úvahy ihneď po ukončení reakcie na základe údajov z prvých dvoch skúmaviek obsahujúcich antigén. Pozitívny výsledok je charakterizovaný úplným oneskorením hemolýzy, negatívnym výsledkom je úplná hemolýza. V kontrolnom sére (3. skúmavka bez antigénu) by mala nastať úplná hemolýza.
Okrem týchto reakcií sa na sérodiagnostiku syfilisu široko používajú sedimentárne reakcie, ktorých podstatou je interakcia inaktivovaného séra pacienta s antigénom, v dôsledku čoho sa v skúmavke vytvorí zrazenina. Z nich sú najrozšírenejšie Kahnova a Sachs-Vitebského reakcia.
Kahnova reakcia. Na uskutočnenie Kahnovej reakcie sú potrebné tieto zložky: 1) inaktivované krvné sérum chorého človeka, 2) špeciálny Kahnov antigén a 3) fyziologický roztok.
Kahn antigén je extrakt lipoidov z ovčieho srdcového svalu, do ktorého sa pridáva cholesterol. Pred experimentom, v závislosti od titra uvedeného na štítku, sa antigén zriedi nasledujúcim spôsobom. Do jednej čistej a suchej skúmavky sa naleje antigén a do druhej sa naleje fyziologický roztok v množstve uvedenom na štítku (1-1,1-1,2). Potom sa fyziologický roztok z druhej skúmavky rýchlo naleje do prvej skúmavky obsahujúcej antigén (a nie naopak). Výsledná zmes sa mieša, prelieva sa zo skúmavky do skúmavky 6-8 krát a nechá sa 10 minút dozrieť pri teplote miestnosti.
Nastavenie experimentu. V stojane je nainštalovaných šesť aglutinačných trubíc. Prvé tri skúmavky (1., 2. a 3.) sú experimentálne, ďalšie tri (4., 5. a 6.) sú kontrolné (antigénová kontrola). Zriedený antigén sa po dozretí zavedie mikropipetou do 3 skúmaviek a 3 kontrolných skúmaviek. Mikropipeta s antigénom by sa mala spustiť na dno suchej skúmavky bez toho, aby sa dotkla jej stien, čím sa zabezpečí presné meranie antigénu. 0,5 ml sa naleje do 1. skúmavky, 0,025 ml do 2. a 0,0125 ml antigénu do 2. sa naleje rovnaké množstvo antigénu do 3 kontrolných skúmaviek, resp. Do všetkých skúmaviek sa pridá 0,15 ml testovacieho séra a do kontrolných skúmaviek sa pridá rovnaké množstvo fyziologického roztoku. Stojan so skúmavkami sa 3 minúty silno pretrepáva, aby sa sérum zmiešalo s antigénom, a umiestni sa do termostatu pri 37° na 10 minút. Po vybratí z termostatu pridajte 1 ml fyziologického roztoku do prvej experimentálnej a prvej kontrolnej skúmavky a 0,5 ml fyziologického roztoku do druhej a tretej experimentálnej a kontrolnej skúmavky. Obsah skúmaviek sa znova pretrepe a zohľadnia sa výsledky reakcií (schéma Kahnovej reakcie je uvedená v tabuľke 26).
Poznámka. Pre ľubovoľný počet testovacích sér sa vykoná jedna kontrola antigénu. V pozitívnych prípadoch reakcie sa vykoná kontrola séra. Za týmto účelom sa naleje do skúmavky v množstve 0,1 ml, pridá sa 0,3 ml fyziologického roztoku a tri minúty sa pretrepáva.
Reakcia sa zaznamenáva voľným okom, pomocou lupy alebo aglutinoskopu.
Tabuľka 26
Schéma Cahnovej reakcie 
Keď sa vezme do úvahy reakcia voľným okom, každá skúmavka sa vyberie zo stojana a mierne naklonená sa drží mierne nad úrovňou očí pred zdrojom svetla. Precipitácia vločiek (precipitátu) v skúmavkách s testovacím sérom slúži ako indikácia pozitívnej Kahnovej reakcie a je indikovaná plusmi. Ostro pozitívna reakcia je indikovaná štyrmi plusmi (+ + + +) - je charakterizovaná stratou jasne viditeľných vločiek vo všetkých skúmavkách a mierne opaleskujúcej kvapaliny. Pozitívna reakcia je označená tromi plusmi (+ + +) a je charakterizovaná menej výrazným zrážaním vločiek vo všetkých skúmavkách. Slabo pozitívna reakcia, označená dvoma plusmi (+ +), je charakterizovaná slabšou tvorbou sedimentu a prítomnosťou malých častíc v zakalenej kvapaline. Tvorba veľmi malých suspendovaných častíc v zakalenej kvapaline je označená jedným plus (+). Neprítomnosť sedimentu a voľne suspendovaných častíc v kvapaline je indikátorom negatívnej reakcie a je označená mínusom (-). V kontrolných skúmavkách by nemali byť pozorované žiadne vločky.
SEDIMENTÁRNA REAKCIA CYTOCHOLU (tabuľka 27) podľa Sachsa-Vitebského. Na túto reakciu je potrebné mať inaktivované testovacie sérum a Sachsov-Vitebského cytocholický antigén, čo je extrakt lipoidov zo svalov srdca dobytka, do ktorého sa pridáva cholesterol.
Tabuľka 27
Schéma cytocholickej Sachs-Vitebského reakcie
Pretrepte 1 minútu a nechajte 30 minút pri izbovej teplote
Fyziologický roztok I 0,5 I 0,5 I 0,5
Ak sa v antigéne vytvoria kryštály cholesterolu, treba ho zohriať vo vodnom kúpeli pri teplote 55-56° alebo v termostate. Titer antigénu je uvedený na ampulke. Antigén sa zriedi fyziologickým roztokom podľa uvedeného titra, 1 ml antigénu sa rýchlo pridá pipetou do 2 ml fyziologického roztoku, dobre sa premieša tou istou pipetou a nechá sa 10 minút dozrieť pri teplote miestnosti.
Experiment sa uskutočňuje v troch aglutinačných skúmavkách. Do prvej skúmavky sa odmeria 0,1 ml testovacieho séra a pridá sa 0,05 ml zriedeného antigénu, do druhej skúmavky sa naleje 0,05 ml zriedeného antigénu a 0,1 ml fyziologického roztoku a naleje sa 0,1 ml testovacieho séra a 0,05 ml. do tretej skúmavky ml etylalkoholu. Všetky skúmavky sa pretrepávajú jednu minútu a nechajú sa 30 minút pri teplote miestnosti. Potom sa do každého z nich pridá 0,5 ml
fyziologický roztok, znova pretrepte a zohľadnite výsledky. Antigénna kontrola sa umiestni do jednej skúmavky na celý experiment. Sachsova-Vitebského reakcia sa berie do úvahy rovnakým spôsobom ako Kahnova reakcia.
Treponema pallidum imobilizačná reakcia. V súčasnosti sa na diagnostiku syfilisu využíva aj treponémová imobilizačná reakcia, ktorej podstata! spočíva v schopnosti krvného séra pacienta so syfilisom zastaviť pohyb spirochét. Antigénom pre túto reakciu sú živé treponémy získané z tkaniva semenníkov infikovaného králika. Antigén sa považuje za vhodný, ak mikroskopia odhalí veľké množstvo pohyblivých treponémov. Tri týždne pred reakciou by pacient nemal dostať antibiotiká ani iné antisyfiliká. Táto reakcia je špecifickejšia a citlivejšia v porovnaní s Wassermanovou a sedimentárnou reakciou.
Chemoterapia. Na liečbu syfilisu sa úspešne používajú prípravky z ortuti, bizmutu, arzénu (salvarsan, novarsenol, miarsenol) a penicilínu.
T. pallidum poddruh pallidum je špirálovitá baktéria s rozmermi 6-14x0,2-0,3 um; v plodinách môžu byť veľké. Špirálové kučery majú rovnakú výšku, môže ich byť až 14 schopných vytvárať tvary L.
Základné spôsob reprodukcie syfilisu- priečne delenie. Pôvodca syfilisu Vo vonkajšom prostredí nie je veľmi stabilný a pri vyschnutí odumiera, no v chlade vydrží až 50 dní. Zahriatie na teplotu 40 °C po dobu jednej hodiny vedie k strate patogénnych vlastností; pri 48 °C baktérie zahynú do 10 minút.
Pôvodca syfilisu nefarbí sa dobre anilínovými farbivami (odtiaľ názov „bledá spirochéta“). Baktérie syfilis redukovať dusičnan strieborný na kovové striebro, ktoré dáva látkam čiernu alebo tmavohnedú farbu.
V domácej praxi je rozšírená morozovská metóda striebrenia. Podľa Romanovského-Giemsa je sfarbený do ružova a je nepatogénny Treponéma- vo fialovej alebo modrej farbe. Používa sa aj Burri negatívny kontrast.
Kultúrne vlastnosti syfilisu. Kultúra pôvodcu syfilisu
Bledá spirochéta náročný na podmienky pestovania, zle rastie na umelých médiách; Metódy stabilnej produkcie kultúr stále chýbajú.
V našej krajine najväčší počet kmene syfilisu zdôraznili kazaňskí mikrobiológovia V.M. Aristovsky a P.P. Geltser.
Tieto "Kazan" kmene syfilisu spolu s kmeňom Reiter sa používa na produkciu Ag na sérodiagnostiku. Pri dlhodobom pestovaní baktérie syfilis prispôsobiť sa jednoduchšiemu prostrediu (napríklad Kitta-Tarozzi) a stratiť patogénne vlastnosti.
Kolónie syfilisu malé, objavujú sa na 3-5 deň kultivácie.
č. 23 Pôvodca syfilisu. Taxonómia. Charakteristický. Mikrobiologická diagnostika. Liečba.
treponema palladium; T. entericum
Morfológia: typické treponémy s 8-12 praslenmi, motorický aparát - 3 periplazmatické bičíky na každom póle bunky. Gramova škvrna nie je vnímaná, škvrna Romanovsky-Giemsa je slabo ružová, odhalená striebornou impregnáciou.
Kultúrne vlastnosti: virulentný kmeň na jamke. nerastie v prostredí, akumulácia kultúry nastáva infekciou králika v semenníku. Virulentné kmene sa kultivujú na médiu obsahujúcom mozgové a obličkové tkanivo.
Biochemické vlastnosti: mikroaerofilné
Antigénna štruktúra: komplex, má špecifické proteínové a lipoidné antigény, ktoré sú svojím zložením identické s kardiolipínom extrahovaným z hovädzieho srdca (difosfadylglycerol)
Faktory patogenity: adhezíny sa podieľajú na procese prichytenia, lipoproteíny sa podieľajú na vývoji imunopatologických procesov.
Odolnosť: citlivý na sušenie, slnečné žiarenie, zostáva na predmetoch až do zaschnutia. Za nepriaznivých podmienok sa premieňa na L-formy a tvorí cysty.
Patogenéza: Spôsobuje syfilis. Od vstupnej brány sa treponémy dostávajú do regionálnych lymfatických uzlín, kde sa množia. Ďalej T. preniká do krvného obehu, kde sa pripája k endotelovým bunkám, čo spôsobuje endarteritídu, čo vedie k vaskulitíde a nekróze tkaniva. Krvou sa T. šíri po celom tele, zasieva orgány: pečeň, obličky, kosti, kardiovaskulárny a nervový systém.
Imunita: ochranná imunita nie je vyvinutá. V reakcii na antigény patogénov sa vyvíja HRT a autoimunitné procesy. Humorálna imunita je produkovaná ako odpoveď na T. lipoidný antigén a je titrom IgA a IgM.
Mikroskopické vyšetrenie.
Vykonajte pre primárny syfilis počas objavenia sa chancre. Materiál pre výskum: chancre výtok, obsah regionálnych lymfatických uzlín, z ktorých sa pripravuje „rozdrvená“ kvapka a skúma sa v tmavom poli. Ak je výsledok pozitívny, sú viditeľné tenké zvlnené nite dlhé 6-14 mikrónov, ktoré majú 10-12 rovnomerných malých kučier pravidelného tvaru. Treponema pallidum je charakterizovaná kyvadlovými a translačno-flexnými pohybmi. S rozvojom lézií na sliznici úst počas sekundárneho syfilisu, ako aj s lokalizáciou chancroidu v ústnej dutine je potrebné odlíšiť Treponema pallidum od saprofytického Treponema, ktoré sú predstaviteľmi normálnej mikroflóry. V tomto prípade má rozhodujúci diagnostický význam detekcia typických treponémov v bodkovaní regionálnych lymfatických uzlín.
Sérodiagnostika. Wassermanova reakcia sa uskutočňuje súčasne s 2 antigénmi: 1) špecifický, obsahujúci antigén patogénu - treponémy zničené ultrazvukom; 2) nešpecifické - kardiolipín. Testovacie sérum sa zriedi v pomere 1:5 a RSC sa umiestni podľa všeobecne uznávanej metódy. Pri pozitívnej reakcii sa pozoruje oneskorenie hemolýzy, pri negatívnej reakcii dochádza k hemolýze červených krviniek; intenzita reakcie sa hodnotí podľa toho od (+ + + +) po (-). Prvé obdobie syfilisu je séronegatívne a je charakterizované negatívnou Wassermanovou reakciou. U 50% pacientov sa reakcia stáva pozitívnou najskôr 2-3 týždne po objavení sa chancre. V druhom a treťom období syfilisu dosahuje frekvencia pozitívnych reakcií 75-90%. Po ukončení liečby sa Wassermanova reakcia stáva negatívnou. Paralelne s Wassermanovou reakciou sa uskutočňuje mikroprecipitačná reakcia s nešpecifickým kardiolipínovým antigénom a testovaným inaktivovaným krvným sérom alebo plazmou. 3 kvapky séra sa aplikujú do jamky na doštičke z plexiskla (alebo obyčajného skla) a pridá sa 1 kvapka kardiolipínového antigénu. Zmes sa dôkladne premieša a zohľadnia sa výsledky. Pozitívna reakcia s krvným sérom pacienta so syfilisom je charakterizovaná tvorbou a stratou vločiek rôznych veľkostí; s negatívnym výsledkom sa pozoruje rovnomerná svetelná opalescencia.
RIF – nepriama imunofluorescenčná reakcia – je špecifická pre diagnostiku syfilisu. Ako antigén sa používa suspenzia tkanivových treponémov. Používa sa reakcia RIF_200. Sérum pacienta sa inaktivuje rovnakým spôsobom ako pri Wassermannovej reakcii a zriedi sa v pomere 1:200. Kvapky antigénu sa aplikujú na sklíčka, vysušia sa a fixujú sa v acetóne počas 5 minút. Potom sa na prípravok aplikuje sérum pacienta, po 30 minútach sa umyje a vysuší. Ďalším krokom je ošetrenie lieku fluorescenčným sérom proti ľudským globulínom. Prípravok sa študuje pomocou fluorescenčného mikroskopu, pričom sa zaznamenáva stupeň luminiscencie treponémov.
Špecifická je aj RIT reakcia imobilizácie treponémov. Živá kultúra Treponema sa získava kultiváciou v králičom semenníku. Semenník je rozdrvený v špeciálnom médiu, v ktorom treponémy zostávajú pohyblivé. Reakcia sa nastaví nasledovne: suspenzia tkanivových (pohyblivých) treponémov sa zmieša v skúmavke s testovaným sérom a pridá sa čerstvý komplement. V jednej kontrolnej skúmavke sa namiesto testovacieho séra pridáva sérum zdravého človeka, v druhej namiesto čerstvého komplementu inaktivovaný - neaktívny. Po udržiavaní pri 35 °C v anaeróbnych podmienkach (anaerostat) sa zo všetkých skúmaviek pripraví „rozdrvená“ kvapka a v tmavom poli sa stanoví počet mobilných a nehybných treponém.
Liečba: Penicilíny, tetracyklíny, lieky s obsahom bizmutu.
