Čo je imunoblot? Toto je bežná metóda laboratórnej diagnostiky ľudských vírusových infekcií. Považuje sa za jeden z najpresnejších a najspoľahlivejších spôsobov na zistenie prítomnosti HIV. Vo svojej spoľahlivosti predčí aj výsledky imunoblotu sú považované za nevyvrátiteľné a konečné.
všeobecné informácie
Imunoblot - čo to je? Aby bolo možné u človeka rozpoznať infekciu HIV, je potrebné podstúpiť laboratórny test krvného séra na prítomnosť protilátok. Technika imunoblotovania sa tiež nazýva Western blot. Používa sa na detekciu ľudských vírusových infekcií ako doplnková expertná metóda. Je potrebné potvrdiť ELISA - laboratórny test, ktorý umožňuje určiť prítomnosť HIV protilátok v krvi. Pozitívny test ELISA sa dvakrát kontroluje imunoblotovaním. Považuje sa za najcitlivejšie, komplexné a drahé.
Účel
Čo je imunoblot? Ide o laboratórnu metódu testovania krvného séra na prítomnosť protilátok proti vírusu. Počas štúdie špecialista najprv oddelí vírusové proteíny v géli a prenesie ich na nitrocelulózovú membránu. Postup imunoblotovania je určený na detekciu HIV v rôznych štádiách. V prvej fáze sa purifikovaný vírus z jeho zložiek podrobí elektroforéze a antigény obsiahnuté v jeho zložení sa oddelia podľa molekulovej hmotnosti.
Rozmnožuje sa v živej bunke a vkladá do nej svoju genetickú informáciu. V tomto štádiu sa človek stáva nosičom vírusu HIV, ak bol infikovaný. Špecifikom choroby je, že sa nemusí prejaviť dlho. Vírus ničí lymfocyty, takže imunita človeka klesá a telo nie je schopné odolávať infekciám. Ak sa HIV lieči správne a včas, pacient sa dožije vysokého veku. Nedostatok terapie nevyhnutne vedie k smrti. Od okamihu infekcie, ale bez liečby, maximálna životnosť nie je dlhšia ako desať rokov.
Zvláštnosti
Imunoblotová analýza je spoľahlivá metóda, ktorá vám umožňuje určiť prítomnosť protilátok proti HIV antigénom prvého a druhého typu. Ak je človek infikovaný, do dvoch týždňov sa objavia protilátky, ktoré sa dajú zistiť oveľa neskôr. Zvláštnosťou HIV je, že množstvo protilátok sa rýchlo zvyšuje a zostáva v krvi pacienta. Aj keď sú prítomné, ochorenie sa nemusí prejaviť skôr ako dva a viac rokov. Metóda ELISA nie vždy presne určí prítomnosť ochorenia, preto je potrebné potvrdenie výsledkov pomocou imunoblottingu a PCR, ak enzýmový imunotest ukazuje pozitívny výsledok.
Indikácie na použitie
Čo je „imunoblot“ už bolo zistené, ale komu je táto štúdia predpísaná? Dôvodom na testovanie pomocou imunoblotingu je pozitívny výsledok testu ELISA. U pacientov, ktorí podstúpia operáciu, je potrebné podstúpiť enzýmový imunotest. Okrem toho by sa mali testovať ženy plánujúce tehotenstvo, ako aj každý, kto je promiskuitný. Imunoblotting je predpísaný pacientom s HIV, ak sú výsledky ELISA pochybné. Nasledujúce alarmujúce príznaky môžu byť dôvodom na konzultáciu s lekárom:
- náhla strata hmotnosti;
- slabosť, strata výkonu;
- črevná nevoľnosť (hnačka), ktorá trvá tri týždne;
- dehydratácia tela;
- horúčka;
- zväčšené lymfatické uzliny na tele;
- rozvoj kandidózy, tuberkulózy, pneumónie, toxoplazmózy, exacerbácie herpesu.
Pacient sa pred darovaním venóznej krvi nemusí pripravovať. 8-10 hodín pred testom by ste nemali jesť jedlo. Deň pred darovaním krvi sa neodporúča piť alkoholické alebo kávové nápoje, venovať sa namáhavému fyzickému cvičeniu alebo prežívať úzkosť.
Kde urobiť analýzu?
Kde sa môžem dať otestovať na HIV? ELISA a imunoblotové štúdie sa vykonávajú na mestských súkromných klinikách, výsledky sa poskytujú do 24 hodín. Je možná aj urgentná diagnóza. Vo verejných zdravotníckych zariadeniach sa testy ELISA a imunoblotting vykonávajú bezplatne v súlade s právnymi predpismi Ruskej federácie. Tehotné ženy, ako aj pacienti podstupujúci hospitalizáciu alebo operáciu, sú povinní podrobiť sa testovaniu na infekčné ochorenia.
Ako prebieha výskum?
Ako sa vykonáva analýza ELISA? Pozitívny/negatívny imunoblot potvrdzuje alebo vyvracia výsledky enzýmového imunotestu. Postup výskumu je pomerne jednoduchý. Špecialista odoberie venóznu krv, čo netrvá dlhšie ako päť minút. Po odbere vzoriek treba miesto vpichu dezinfikovať a prelepiť leukoplastom. Odber vzoriek sa vykonáva nalačno, takže po zákroku nezaškodí zjesť tabuľku tmavej čokolády alebo vypiť sladký horúci nápoj.
Aby ste dostali odporúčanie na bezplatný test vo verejnom zdravotníckom zariadení, musíte navštíviť praktického lekára. Vo všeobecnosti sa imunoblotting nelíši od iných krvných testov, pokiaľ ide o metódu odberu vzoriek. Metodológia výskumu je jednoduchá. Ak je v krvi človeka vírus, telo začne produkovať protilátky na jeho zničenie. Každý vírus má svoju vlastnú sadu antigénnych proteínov. Detekcia týchto protilátok je základom imunoblotovacej techniky.
cena
Koľko stojí analýza? Imunoblot na HIV nie je lacný test. V priemere stojí skríningové vyšetrenie pomocou metód enzýmovej imunoanalýzy od 500 do 900 rubľov. Imunoblotting je overovacia štúdia, ktorej náklady sú od troch do piatich tisíc rubľov. Zložitejšie metódy sú oveľa drahšie. Napríklad budete musieť zaplatiť asi 12 000 rubľov.
Interpretácia výsledku
Najbežnejšími metódami diagnostiky infekcie HIV sú enzýmové imunosorbentné testy a imunobloty. Používajú sa na stanovenie protilátok proti vírusu imunodeficiencie v krvnom sére. Prítomnosť infekcie je zvyčajne potvrdená dvoma testami: skríningovým a potvrdzujúcim. Interpretáciu výsledkov štúdie by mal vykonať lekár, ktorý tiež stanoví diagnózu a predpíše liečbu. Ak je imunoblot pozitívny, znamená to, že v ľudskom tele je prítomný vírus.
Pozitívny výsledok by nemal byť dôvodom na nezávislú liečbu, pretože každý pacient môže mať iný obraz choroby. Kvalitatívna analýza zahŕňa skríning a verifikáciu. Ak pacient nemá vírus, výsledok je označený ako „negatívny“. Ak sa zistí skríning, vykoná sa dodatočná overovacia štúdia. Imunoblot je test, ktorý potvrdzuje alebo vyvracia skríning. Ak sa na testovacom prúžku v určitých oblastiach (umiestnenia proteínov) objaví stmavnutie, vykoná sa diagnóza HIV. Ak sú výsledky pochybné, testy sa vykonajú do troch mesiacov.
Infekcii vírusom imunodeficiencie môžete zabrániť, ak budete dodržiavať určité pravidlá: vyhýbajte sa náhodnému sexu, počas kontaktu používajte kondóm, neužívajte drogy. Ak sa ochorenie zistí u tehotnej ženy, je dôležité prísne dodržiavať odporúčania ošetrujúceho lekára a nezabúdať na vyšetrenia na prítomnosť vírusu.
V praxi laboratórnej diagnostiky infekčných chorôb je niekedy potrebné stanoviť protilátky nie proti patogénu všeobecne, ale proti niektorým jeho proteínom (antigénom), teda spektru špecifických protilátok. Ak sa na tento účel použije metóda enzýmovej imunoanalýzy, potom je v tomto prípade potrebné najskôr izolovať a vyčistiť potrebné antigény z kultúry patogénu. Výsledné proteíny sa aplikujú oddelene na pevnú fázu. V prípade použitia 96-jamkovej platne sa do každej jamky umiestni jeden typ antigénu. Potom sa nepriamou metódou stanovia špecifické protilátky.
Na základe prítomnosti pozitívnej reakcie v jamke s konkrétnym antigénom je možné posúdiť prítomnosť zodpovedajúcich špecifických protilátok. Tieto typy imunoenzýmových testovacích systémov ponúkajú výrobné spoločnosti, ale metóda imunoblotovania (Western blot) sa rozšírila vďaka väčšiemu obsahu informácií a jednoduchosti vykonania samotnej štúdie.
Imunitný blotting umožňuje stanoviť protilátky v krvnom sére súčasne a zároveň diferencovane na všetky diagnosticky významné proteíny patogénu. Preklad z angličtiny Western blot znamená Western transfer (doslova - blotting). História tohto neobvyklého termínu je nasledovná.
V roku 1975 vedec menom E. Southern prvýkrát navrhol spôsob prenosu elektroforeticky oddelených fragmentov DNA z gélu na membránu. Podľa autora sa metóda nazývala Southern blot, čo v preklade znamená „južný prenos“. Metóda prenosu molekúl RNA bola odborníkmi prezývaná Northern blot - „severný prenos“. Najprv zo žartu a potom sa tento názov udomácnil v oficiálnej vedeckej literatúre.
V roku 1979 publikoval G. Towbin výsledky prvých experimentov s proteínovým blotovaním. V nadväznosti na tradície „geografických“ názvov metód prenosu biologických makromolekúl sa táto metóda začala nazývať „západný“ transfer - Western blot.
Prvý krok tejto metódy zahŕňa elektroforetickú separáciu zmesi patogénnych proteínov v polyakrylamidovom géli v prítomnosti dodecylsulfátu sodného (SDS). SDS, ako povrchovo aktívna látka, rovnomerne obaľuje proteínové molekuly a dáva im všetkým záporný náboj približne rovnakej veľkosti. Preto sa molekuly pohybujú v elektrickom poli jedným smerom a rýchlosť pohybu závisí len od veľkosti molekuly (molekulová hmotnosť) proteínu.
V dôsledku elektroforetického postupu sa získa gélová platňa, v ktorej hrúbke sú proteíny umiestnené vo forme oddelených tenkých lineárnych zón. Podľa smeru pohybu sa delia v tomto poradí: bielkoviny s veľkou molekulovou hmotnosťou, asi 120-150 kDa, sú umiestnené bližšie k štartu a bielkoviny s hmotnosťou 5-10 kDa sa posunuli najďalej. cieľová čiara. V druhom stupni sa gélová platňa položí na dosku z nitrocelulózy a táto štruktúra sa umiestni medzi elektródy zdroja jednosmerného prúdu. Vplyvom elektrického poľa proteíny prúdia z pórovitého gélu do hustejšej membrány, kde sú pevne fixované.
Výsledný blot sa spracuje blokovacím roztokom obsahujúcim antigénne indiferentné proteíny a/alebo neiónové detergenty (Tween 20), ktoré blokujú miesta na membráne bez antigénu. Membránový list sa potom rozreže na úzke prúžky tak, aby každý prúžok obsahoval všetky antigénne frakcie. Popísané kroky vykonáva výrobca.
Komerčné testovacie systémy na stanovenie protilátok pomocou imunoblotovania obsahujú bloty (prúžky alebo prúžky), ktoré sú pripravené na testovanie. Nepriamou metódou používateľ stanoví celé spektrum špecifických protilátok proti proteínom patogénu. Na uskutočnenie farebnej (enzymatickej) reakcie sa ako chromogén používa rozpustná bezfarebná látka, ktorej produkt získava farbu, stáva sa nerozpustným a usadzuje sa (precipituje) na nitrocelulóze.
V dôsledku postupných imunitných a enzymatických reakcií sa v prítomnosti protilátok proti proteínom patogénu v testovanej vzorke objavia na škvrne tmavé priečne pruhy, ktorých umiestnenie je v zóne určitých proteínov patogénu. Každý takýto pás označuje prítomnosť špecifických protilátok proti zodpovedajúcemu antigénu. Výsledok štúdie uskutočnenej imunoblotovaním je uvedený vo forme zoznamu protilátok proti špecifickým proteínom patogénu. Napríklad: "Boli zistené protilátky proti proteínom p17 a p24."
Nitrocelulózové bloty sa môžu skladovať vysušené po dlhú dobu po vyvinutí. Intenzita farby však výrazne zoslabne. Mokré škvrny je možné fotografovať alebo ich grafické obrázky vkladať do pamäte osobných počítačov pomocou skenerov. Špeciálne počítačové programy umožňujú spracovať výsledky a rýchlo sledovať dynamiku protilátkového spektra pri dynamickom pozorovaní
Keď som bol testovaný na pohlavne prenosné choroby, rozhodol som sa dať sa otestovať na HIV. Na druhý deň mi prišli hotové testy na ifa okrem HIV a nakoniec mi zistili chlamýdie. Herpes a mikroplazmóza. Ale HIV nikdy neprišiel. O 3 dni mi volali a povedali mi, že musíte prísť do AIDS centra, aby vám preniesli krv. Odobral som imunoblot a ten ukázal pozitívny. Môže byť imunablot falošne pozitívny na choroby chlamýdie mikraplazmóza HPV herpes
Experti Woman.ru
Zistite si názor odborníka na vašu tému
Anastasia Šesteriková
Rusina Irina Vladimirovna
Psychológ, úľava od stresu. Špecialista zo stránky b17.ru
Oľga Yurievna Diganaeva
Psychologička. Špecialista zo stránky b17.ru
Oľga Borisenko
Psychológ, Gestalt terapeut. Špecialista zo stránky b17.ru
Dmitrij Valerijevič Tišakov
Psychológ, supervízor, systemický rodinný terapeut. Špecialista zo stránky b17.ru
Shiyan Olga Vasilievna
Psychológ, psychológ-poradca. Špecialista zo stránky b17.ru
Oksana Lushankina
Psychológ, rodinné vzťahy. Špecialista zo stránky b17.ru
Anna Dashevskaya
Psychológ, Skype konzultácie. Špecialista zo stránky b17.ru
Irina Bukina
Psychologička. Špecialista zo stránky b17.ru
Aksenová Anna Mikhailovna
Psychológ, kandidát na skupinovú analýzu. Špecialista zo stránky b17.ru
Nechcem ťa strašiť, ale keď ťa zavolajú do AIDS centra, je to takmer vždy pozitívne, nepreberaj to, nech sa ti darí, hlavná vec je brať terapiu a dlho žiť
Jeden kamarát žije s HIV už desať rokov a stará sa o seba.
Hovoria, že o tri roky možno nájdu liek.
V každom prípade nezúfajte a nešírte to, dajte sa liečiť
Nie, IB nemôže byť falošne pozitívna a žiadne pohlavne prenosné choroby neovplyvňujú tento test, ak je pozitívny, potom, bohužiaľ, máte HIV, musíte sledovať svoje imunitné bunky a začať liečbu včas.
bohužiaľ, nie ((ak vás zavolali do centra, potom je to určite HIV
Pokiaľ viem, prvé a dokonca aj následné výsledky imunoblotu môžu byť otázne. nie falošne pozitívne, ale skôr pochybné. a potom je predpísaná opakovaná analýza. Citujem text zo stránky:
„Imunitný blotting sa najčastejšie používa na potvrdenie diagnózy infekcie HIV. WHO považuje za pozitívne séra, v ktorých sa imunoblotovaním detegujú protilátky proti ktorýmkoľvek dvom obalovým proteínom HIV. Podľa týchto odporúčaní, ak dôjde k reakcii len s jedným z obalových proteínov (gp160, gp120, gp41) v kombinácii alebo bez reakcie s inými proteínmi, výsledok sa považuje za pochybný a odporúča sa opätovné testovanie pomocou súpravy od z inej série alebo od inej spoločnosti. Ak aj potom zostane výsledok pochybný, štúdie pokračujú každé 3 mesiace.
môžeš si to vygoogliť. Ak áno, dúfam, že sa nepotvrdí, že si HIV pozitívny. ale ak sa to potvrdí, vedzte, že dnes ľudia žijú s touto diagnózou a žijú tak dlho ako zdraví ľudia a rodia deti. Hlavnou podmienkou je disciplína v liečbe. zdravie pre vás!
Antiretrovírusová terapia online
Kalkulačky
Stránka je určená pre zdravotníckych a farmaceutických pracovníkov vo veku 18+
Vysvetlenie analýzy - imunoblot
Prosím, pomôžte mi rozlúštiť analýzu
ENV(GP160)+
ENV(GP110/120)+
ENV(GP41)+
GAG(P55)+
GAG(P40)+
GAG(P25)+
POL(P68)+
POL(P52)+
POL(P34)+
Ahoj! Pred 2,5 rokmi som si urobil test na HIV a bol tam tento imunoblot:
Gp-160+, Gp-110/120+, Gp-41+, p17+, p25+, p31+, p34+, p52+, p55+, p68+. A tu je imunoblot z 30.5.2018: Gp-160+, Gp-41+, GAG 1 -, poll+, env2-. Nie je jasné, čo znamená roll+? Je tam jediný alebo sa neprezradil? A kam sa podel zvyšok veveričiek?
Pol a Env sú gény, ktoré kódujú skupiny proteínov. Považujte to len za inú nahrávku. Otázka je iná. na čo čakáme? Prečo uvažujeme o škvrne? Všetko je celkom jasné. Je potrebné niečo urobiť.
Už som si zvykol, že mám HIV. A pripravený na terapiu.
Len ma zaujíma váš názor. Je to nedávna infekcia alebo mi niečo chýba? Alebo sa niekedy stane, že sa imunoblot otvára veľmi pomaly?
Dnes som si pozrel svoje testy v mojom osobnom spise (vykonané na SC):
ELISA na prvom testovacom systéme - pozitívny
ELISA na druhom testovacom systéme - negatívny (ako je to?)
Ďalej je IB (vykonaná in vitro a SC pred mesiacom):
imunoblot na prvom testovacom systéme: gp 160+, gp 41+
imunoblot na inom testovacom systéme: gp41+, p24+, p17+
imunoblot na treťom testovacom systéme: gp160+, gp120+, gp41+, p24+
Podľa mojich predpovedí som sa mohol nakaziť pred rokom (akútne štádium bolo niekde v apríli), alebo pred 9 mesiacmi, ale vo všeobecnosti neviem kedy) vždy som používal ochranu a sex bez kondómov som mal len raz na jeseň roku 2017.
Dnes som opäť absolvovala testy VN a IS. Začnem tera o mesiac, keď príde objednávka.
K spomínaným testom pridajte dátumy.
Prvý blot pred testom ELISA? Nebije. Nie je tu žiadny bod, ktorý by nám umožnil povedať, že čerstvá infekcia alebo opak je vysoko pravdepodobný.
Zostane záhadou, pokiaľ náhodou nenájdete zdroj a neporovnáte ho.
Aby som to teda objasnil
Vzal som to do Invitro.
Prvý test ELISA je 11. mája.
Potom sa to isté sérum odsalo a vrátil sa pozitívny test, kde boli zistené dva proteíny.
gp 160+, gp 41+
Potom som to znova zobral do SC.
Krv som daroval 29. mája.
A tam ho prešli niekoľkými testovacími systémami, kde prvý ukázal negatívny, druhý pozitívny. Negatívna ELISA je stále vtipná.
Ďalej to isté sérum ide na blot, odkiaľ pochádzajú údaje:
Prvý testovací systém: gp41+, p24+, p17+
Druhý testovací systém: gp160+, gp120+, gp41+, p24+
Ale o to nejde.
Prišla nová analýza IP - 754. To je povzbudivé. VN ešte nie je pripravený. Hneď ako to príde, pravdepodobne to už začnem drhnúť.
Som si na 80% istý, že infekcia sa stala pred rokom. Ale skutočnosť, že blot sa otvára pomaly a test ELISA je negatívny, je zvláštny. Alebo je to v medziach normy?
Negatívna ELISA je stále vtipná. Kiežby som vedel názov systému, aby som si ho mohol zapísať do čierneho zošita. Aj keď tento moment, ak neberiete teóriu s manželstvom, výrazne podporuje skorú infekciu.
Som si na 80% istý, že infekcia sa stala pred rokom. Blot je na to obdobie dosť chudobný. Nie nemožné, ale nepravdepodobné.
V určitom okamihu som dokonca začal pochybovať o výsledkoch testov HIV - takže čakám na VN.
Tu je položený posledný bod v otázke.
Považuje sa za normálny rozsah aj fakt, že IP narástla za mesiac bez tera o 200 kópií? Teraz beriem Ursosan na polyp v žlčníku - v príbalovom letáku je napísané, že liek zlepšuje imunitu.
Je potrebné hodnotiť oboje s relatívnym obsahom a brať do úvahy údaje jedného laboratória pomocou jednej metódy výpočtu. Pretože Boh vie, čo sa deje s CD4.
Vo všeobecnosti je CD4 780 buniek/μl. VN - 250 kópií/ml.
Toto je bez terapie. To znamená, že CD4 zo 486 vyskočilo na 780 za mesiac.
VN klesli z 550 na 250 kópií.
Napriek tomu, nie je to zvláštne alebo sú takéto skoky v normálnom rozsahu? Je čas, aby Teru začal?)
Ahoj! Trikrát som si dal IFA, zakaždým +, imunoblot p24+ p18+ prišiel z SC. Potenciálne riziko bolo pred viac ako šiestimi mesiacmi. p24 naznačuje, že je to stále HIV?
Blot je pochybný, zopakujte ho o 6-8 týždňov. S najväčšou pravdepodobnosťou ide o falošný poplach.
Dobrý deň!
Prišli výsledky testu vrátane blotu:
Nebezpečný kontakt: 24.04.2018
HIV ELISA test 23.05.2018 (4 týždne od nebezpečného kontaktu alebo 29 dní) výsledok „+“
HIV ELISA test 28.05.2018 (5 týždňov od nebezpečného kontaktu alebo 34 dní) výsledok „opätovného odberu“
HIV ELISA test 06.01.2018 (5 týždňov od nebezpečného kontaktu alebo 38 dní) výsledok „+“
Blot prišiel z prvej analýzy (23.5.18):
GP160 sl.
P24 nasl.
V miestnom AIDS centre boli dňa 6.6.2018 urobené nové testy ELISA a HIV RNA PCR. Stále čakáme na výsledky.
Otázky o blote:
1. Ak je prítomný P24, je to nevyhnutne antigén HIV alebo je možné takýto proteín zistiť aj pri iných ochoreniach?
2. Čo znamená skratka „sl“ vedľa proteínu? Popísané bloty zvyčajne obsahujú + alebo –
3. Čo určuje nasadenie blotu? Závisí to od obdobia alebo od individuálnych charakteristík tela?
4. Pri takejto škvrne v 4. týždni z nebezpečného kontaktu je šanca, že to nie je HIV?
Prajem pekný deň a ďakujem.
1. nie, môže to byť len podobný proteín iného charakteru. 2. slabý. tie. pochybný. 3. termíny a realizovať jednotlivé charakteristiky, ale v priemere je všetko veľmi blízko. 4. Otázka je zlá, vždy je šanca, kým sa nestanoví diagnóza.
Ahoj!
Prosím, pomôžte mi orientovať sa vo výsledkoch testov a pochopiť, ako sa správne správať, aby opakované testy boli správne.
Testy sa uskutočnili 25. mája 2018
IB HIV
NEW LAV BLOT 1 – nedefinované. zo dňa 29.05.2018
IB HIV markery
gp 160+
gp 120 -
gp 41 -
p55+
p40 —
p24+
p18 —
s. 68 —
str. 52 —
s. 34 —
HIV ELISA
ADVIA Centaur HIV Ag-Ab ELISA reaktivita 12,00 pozitívny. (28.05.2018)
Po 2 týždňoch sa odporúča analýzu zopakovať.
V novembri 2017 prebehla legálna registrácia, po ktorej som absolvoval testy pomocou testovacieho systému HIV Ag\Ab Combo Abbott Architect, potom bol výsledok negatívny.
Zároveň som absolvoval všeobecný krvný test. Lymfocyty su mierne zvysene, eozinofily presne 0 (ale podobne hladiny eozinofilov som mala aj predtym.
Hlavná otázka znie:
Aké lieky sa môžu a nemôžu užívať počas týchto dvoch týždňov? (Nechcem, aby bolo niečo „faulované“)
Pravidelne mám alergické záchvaty, zvyčajne užívam Tavegil. Malo by sa to opustiť?
Môžem pred testom užívať antibiotiká? (ak to predpísal lekár na liečbu iných infekcií a chorôb)
Imunitný blotting pri diagnostike HIV
Imunoblotovanie (imunoblot, western blot, western blot)— kombinuje enzýmovú imunoanalýzu (ELISA) s predbežným elektroforetickým prenosom vírusových antigénov na nitrocelulózový prúžok (prúžok).
V tomto krásnom vedeckom názve sa „blot“ s najväčšou pravdepodobnosťou prekladá ako „škvrna“ a „západný“ ako „západný“ odráža smer distribúcie tejto „škvrny“ na papieri zľava doprava, teda na geografickom mapa to zodpovedá smeru zo západu na východ. Podstatou metódy „imunitného blotu“ je, že imunoenzýmová reakcia sa neuskutočňuje so zmesou antigénov, ale s antigénmi HIV, ktoré sa predtým rozdelili imunoforézou do frakcií umiestnených podľa molekulovej hmotnosti na povrchu nitrocelulózovej membrány. Výsledkom je, že hlavné proteíny HIV, nosiče antigénnych determinantov, sú distribuované po povrchu vo forme oddelených prúžkov, ktoré sa objavujú počas enzýmovo viazanej imunosorbentnej reakcie.
Imunoblot zahŕňa niekoľko fáz:
Príprava pásu. Vírus imunodeficiencie (HIV), predtým purifikovaný a zničený na svoje základné zložky, sa podrobí elektroforéze a antigény, ktoré tvoria HIV, sa oddelia podľa molekulovej hmotnosti. Potom sa pomocou blotovacej metódy (analogicky s vytlačením prebytočného atramentu na saciu podložku) antigény prenesú na prúžok nitrocelulózy, ktorý teraz obsahuje spektrum antigénových pásov charakteristických pre HIV, ktoré je okom stále neviditeľné.
Ukážkové vyšetrenie. Testovaný materiál (sérum, krvná plazma pacienta a pod.) sa nanesie na prúžok nitrocelulózy a ak sú vo vzorke špecifické protilátky, naviažu sa na striktne zodpovedajúce (komplementárne) antigénne pásy. V dôsledku následných manipulácií sa výsledok tejto interakcie vizualizuje – zviditeľní.
Interpretácia výsledku. Prítomnosť pásov v určitých oblastiach nitrocelulózovej platne potvrdzuje prítomnosť protilátok proti presne definovaným HIV antigénom v testovanom sére.
V súčasnosti je imunoblotovanie (imunoblot) hlavnou metódou na potvrdenie prítomnosti vírusovo špecifických protilátok v testovacom sére. V niektorých prípadoch infekcie HIV, skôr ako dôjde k sérokonverzii, sú špecifické protilátky účinnejšie detegované imunoblotovaním ako testom ELISA. Pri štúdiu metódou imunoblotovania sa zistilo, že protilátky proti gp 41 sa najčastejšie detegujú v sére pacientov s AIDS a detekcia p24 u ľudí vyšetrených na preventívne účely si vyžaduje ďalší výskum, aby sa zistilo, či majú infekciu HIV. Imunoblotovacie testovacie systémy založené na geneticky upravených rekombinantných proteínoch sa ukázali byť špecifickejšie ako konvenčné systémy založené na purifikovanom vírusovom lyzáte. Pri použití rekombinantného antigénu sa nevytvorí difúzny, ale jasne definovaný úzky prúžok antigénu, ktorý je ľahko dostupný pre záznam a vyhodnotenie.
Séra jedincov infikovaných HIV-1 odhalili protilátky proti nasledujúcim hlavným proteínom a glykoproteínom - štruktúrne obalové proteíny (env) - gp160, gp120, gp41; jadro (gag) - p17, p24, p55, ako aj vírusové enzýmy (pol) - p31, p51, p66. Protilátky proti env sú typické pre HIV-2 - gp140, gp105, gp36; gag - p16, p25, p56; pol - p68.
Spomedzi laboratórnych metód potrebných na stanovenie špecifickosti reakcie je najrozšírenejšia detekcia protilátok proti obalovým proteínom HIV-1 - gp41, gp120, gp160 a HIV-2 - gp36, gp105, gp140.
WHO považuje za pozitívne séra, v ktorých sa imunoblotovaním detegujú protilátky proti ktorýmkoľvek dvom HIV glykoproteínom. Podľa týchto odporúčaní, ak dôjde k reakcii len s jedným z obalových proteínov (gp 160, gp 120, gp 41) v kombinácii alebo bez reakcie s inými proteínmi, výsledok sa považuje za pochybný a odporúča sa opätovné testovanie pomocou súprava z inej série alebo od inej spoločnosti. Ak aj potom zostane výsledok pochybný, odporúča sa pozorovanie 6 mesiacov (výskum po 3 mesiacoch).
Prítomnosť pozitívnej reakcie s antigénom p24 môže naznačovať obdobie sérokonverzie, pretože protilátky proti tomuto proteínu sa niekedy objavia ako prvé. V tomto prípade sa odporúča, v závislosti od klinických a epidemiologických údajov, zopakovať štúdiu so vzorkou séra odobratou najmenej o 2 týždne neskôr, a to je presne ten prípad, keď je testovanie párových sér potrebné pri infekcii HIV.
Pozitívne reakcie s proteínmi gag a pol bez reakcie s proteínmi env môžu odrážať skorú sérokonverziu a môžu tiež naznačovať infekciu HIV-2 alebo nešpecifickú reakciu. Jedinci s týmito výsledkami po testovaní na HIV-2 sú opätovne testovaní po 3 mesiacoch (do 6 mesiacov).
Otázka: Opakovaný test na HIV?
Bol som vyšetrený na sexuálne prenosné infekcie (bez príznakov - chcel som mať dôveru vo vzťah so ženou). HIV test bol pozitívny. Ďalej ultrazvuk ukázal nádor na obličke, ktorý bol odstránený (ukázalo sa, že je zhubný).
Čítal som knihu I. M. Sazonovej, v ktorej sa píše, že zhubný nádor môže dať pozitívny výsledok testu na HIV.
Môže to byť presne tento prípad, alebo niet v čo dúfať?
Musíte vykonať kontrolný test na HIV. Ak bol prvý test HIV určený pomocou ELISA, potom môže byť výsledok falošne pozitívny. Jeho spoľahlivosť možno overiť citlivejšou diagnostickou metódou – PCR (polymerázová reťazová reakcia), ktorá zisťuje DNA vírusu v krvi.
Pomoc. 12/16/10 ELISA (+) IB(+), potom od 23. 3. 11 do 19. 5. 2011 deväť negatívnych ELISA (-) a kvantitatívna PCR. nebude určená. v roku 2002 počas tehotenstva je ELISA buď (+) alebo (-), ale IB je vždy (-). od 2004 do 2008 som brala ELISA (-) 2x do roka, ale 30.4.2008 IFA (+) a IB bola neurčitá. potom znova každé 2 mesiace som si robil test ELISA vždy (-). a od decembra 2010 sa to pise vyssie zaroven som si nikdy nepichala, manzel ma vzdy ELISA (-). CD4 980 bunky. a tiež krvný test na syfilis 29. apríla dal 3+++ a potom trikrát. negatívne každých 10 dní. hepatitída všetky (-). mal niekto nieco taketo? Ďakujem.
Objasnite, či ste podstúpili RIBT (reakcia imobilizácie treponema pallidum), a ak áno, aké sú výsledky tejto štúdie.
nie, nikto mi nenavrhol urobiť taký rozbor, čo to ukáže? Dúfam, že chápete, že som hovoril o testoch na HIV. Ďakujem. Vyskytli sa podobné prípady vo vašej praxi? Mimochodom, informačná bezpečnosť bola v roku 2008 nejasná, pretože... bol tam proteín p24/25. v roku 2010 IB(+) proteíny gp160.41.120 p24.17.31. potom ked bola IFA zase 3x (-) poslali ma do IB 4.4. výsledok bol pozitívny, ale bielkoviny gp 120 a 41. ostatné sú prečiarknuté červenou pastou a dole červenou IB REPEAT. ale PCR popiera rovnaké číslo. Po 4. apríli som si urobila test ELISA a už bol 4x zamietnutý. všetko v rýchlostnom centre vrátane testovania antigénov a protilátok. Teraz čakám na opakovanú IB a kvalitnú PCR. to je všetko. SOM VEĽMI UNAVENÝ Z MYSLENIA A ČAKANIA. Dúfajúc v to najlepšie. ĎAKUJEM. NAOZAJ sa teším na tvoju odpoveď.
Ak máte nejakú otázku, skúste ju nabudúce sformulovať konkrétnejšie a objasniť diagnózu. RIBT sa používa na potvrdenie diagnózy syfilisu. Na presnú diagnostiku infekcie HIV sa protilátky proti HIV v krvi stanovujú testom ELISA a imunoblotom. Diagnóza je potvrdená iba vtedy, ak sú oba tieto výsledky pozitívne.
Ospravedlňujem sa za nepresnú formuláciu otázky. Napísal som, že v decembri ELISA a Imunoblot testy na HIV vyšli pozitívne. ale od marca bola IFA 9-krát negatívna na HIV. Ak som bol zaregistrovaný v rýchlostnom centre, tak sa to skutočne deje? HIV je buď vždy pozitívny alebo negatívny. a ako sa dá použiť imunoblot, ak je výsledok HIV ELISA negatívny? potom každý popiera ifa, treba skontrolovať imunoblot, tak čo sa stane? Naše rýchlostné centrum mi nevie nič odpovedať. Tak som sa obrátil na vás. Ďakujem.
Bohužiaľ, ELISA aj imunoblot môžu poskytnúť falošne pozitívne výsledky. Preto sa diagnóza HIV považuje za konečnú až pri súčasnej detekcii HIV pomocou ELISA a metódy imunoblot.
Dobry den, dnes mi prisli vysledky kvalitneho PCR testu na HIV - virus nebol zisteny a opakovany imunoblot na HIV vysledok neurčity kvoli proteinu 41. AIDS CENTRUM povedali, ze s najvacsou pravdepodobnostou neexistuje HIV, ale v r. v mojom tele sú telá podobné štruktúre ako HIV. Čo si však myslíte, berúc do úvahy moje otázky z 15. a 16. júna (pozri vyššie), existuje alebo nie je HIV? ĎAKUJEM.
V tomto prípade je diagnóza infekcie HIV pochybná.
Píšete, že až pri súčasnej detekcii HIV pomocou IFA a imunoblotu sa diagnóza HIV považuje za konečnú. Ale čo potom v mojom prípade? veď PCR budú všetci popierať. a blot a ifa neustále poskakujú. na 9 rokov. Povedz mi, ak by bol vírus v mojej krvi, jeho RNA a DNA by sa po toľkých rokoch dali presne určiť. a môže inkubačná doba alebo „okno“ trvať toľko rokov? Existujú nejaké falošne negatívne výsledky PCR pre HIV počas takého časového obdobia? Áno, zabudol som povedať, že expresné testy na HIV, ktoré robím na CVD, sú vždy negatívne alebo sa na ne nemôžete spoľahnúť? Ďakujem.
V tomto prípade nie je diagnostika PCR hlavnou metódou na identifikáciu dynamiky procesu - sérologické metódy sú informatívnejšie. V tomto prípade je pravdepodobnosť falošne negatívnych výsledkov vysoká. Expresné testy na HIV majú vysoký prah citlivosti, takže môžu poskytnúť aj falošne negatívny výsledok.
Prepáč. Určite som to napísal na nesprávne miesto. prosím odpovedzte v téme HIV alebo nie HIV. Ďakujem.
V prípade, že na váš e-mail nebolo doručené upozornenie, že ste dostali odpoveď, odpoveď na vašu otázku si môžete pozrieť na tejto adrese http://tiensmed.ru/news/answers/vich-ili-ne-vich-. html
Ahoj! Prosím, povedzte mi, ako sa zaregistrovať na LCD (momentálne som v 10. týždni tehotenstva), robila som si testy na HIV, pred pár dňami mi zavolal lekár a povedal, že predbežné testy na HIV sú pozitívne (prvý bol vykonaný v Kirovograde, ale ešte nie je oficiálny výsledok z Kyjeva ), v ten istý deň sme v našom mestskom laboratóriu robili dva rýchle testy od Pharmaco firmy CITO TEST HIV 1/2, oba výsledky boli negatívne, laborantka povedala, že tieto testy su spolahlive a nemusim sa bat, kedze sa to deje v tehotenstve a tie testy by sa mohli jednoducho pomiesat. Lekár mi povedal, aby som znova daroval krv a dal som si krv ešte dvakrát otestovať v rôznych nemocniciach (stále nemám ani jeden z troch výsledkov). Veľmi sa bojím, nie som narkoman, nemal som žiadne sporné sexuálne vzťahy, a aj keď ochoriem, ochoriem veľmi zriedka, ostatné testy sú v norme. Dá sa rýchlym testom dôverovať? Naozaj sa to deje počas tehotenstva? Doktor ma príliš vystrašil. Ďakujem
V prvom rade sa treba upokojiť a nemyslieť na to zlé. Niekedy počas tehotenstva sú falošne pozitívne výsledky. Je potrebné znovu otestovať krv na HIV a počkať na výsledky vyšetrenia.
Ahoj! Faktom je, že pred 2 mesiacmi som mal sexuálny kontakt s dievčaťom (stále spolu chodíme). po 1,5 týždni teplota stúpla na 37,4. Čoskoro zaspala. Pre istotu sme si urobili test IFA po 2 týždňoch a znova po 1,5 mesiaci. Obe odpovede sú negatívne. Ale stále mám horúčku a kašeľ, s premenlivým zlepšením. Povedz mi, prosím, existuje nejaké riziko? Okrem toho som dlho pracoval bez dní voľna a pred týždňom som bol na nemocenskej (so SARS). Krvné a pľúcne testy sú normálne. Ďakujem.
Táto teplota môže súvisieť s vírusovým ochorením, telo sa ešte nespamätalo alebo chronickou únavou. V prípade, že je vylúčená organická patológia, všeobecný test krvi a moču je v normálnych medziach, ako aj údaje z fluorografického vyšetrenia sú tiež v normálnych medziach, potom je potrebné vylúčiť sexuálne prenosné choroby: chlamýdie, mykoplazmóza, ureaplazmóza, ktoré môžu spôsobiť zápal malých orgánov panvy a močovej trubice a v dôsledku toho zvýšenie telesnej teploty. Prečítajte si viac o príčinách zvýšenej telesnej teploty kliknutím na odkaz: Vysoká teplota.
Ahoj. Tu je vec: Pred viac ako rokom som mal nechránený sexuálny kontakt s dievčaťom, ktoré išlo okolo. Trvala na tom, že nie je chorá, ale nemohol som jej na 100 percent dôverovať. Taktiež ubezpečila, že pred uchádzaním sa o prácu absolvovala lekársku prehliadku (pracovala ako predavačka) a všetko je v poriadku. 7 mesiacov po kontakte som si ešte v laboratóriu citylab urobil test na HIV, výsledok bol negatívny. Ale v poslednej dobe som často chorý, už 3 týždne ma bolí hrdlo a neviem to vyliečiť. Zase som sa začala báť, čo keby som to potom chytila? Povedzte mi, je to možné a mali by sme dôverovať analýze od CityLab? Bojím sa to dať znova, moje nervy to nevydržia...
Ak je výsledok negatívny, potom s najväčšou pravdepodobnosťou nie ste chorý alebo infikovaný HIV/AIDS. Na objasnenie diagnózy sa však odporúča vykonať druhý test v špecializovaných laboratóriách v štátnych inštitúciách, toto vyšetrenie sa vykonáva anonymne. Ak samoliečba neprinesie požadovaný výsledok, odporúča sa konzultovať s otolaryngológom, aby vykonal primerané vyšetrenie a predpísal vhodnú liečbu. Prečítajte si viac o testovaní na HIV v sérii článkov kliknutím na odkaz: HIV.
Povedzte mi, môžete uviesť nejaké charakteristiky laboratória v mestskom laboratóriu? Napriek tomu nie je vždy možné nechať sa otestovať vo vládnej agentúre. A aká je percentuálna šanca, že sa muž nakazí pri nechránenom kontakte?
Žiaľ, neposkytujeme porovnávacie hodnotenia laboratórií a súkromných zdravotníckych zariadení. Ak máte pochybnosti o spoľahlivosti výsledkov, vykonajte vyšetrenie v inom centre a požiadajte najskôr o licenciu na poskytovanie týchto zdravotných služieb, či má toto centrum právo vykonávať toto vyšetrenie a či všetko zodpovedá prijatým štandardom. Riziko nákazy pri nechránenom pohlavnom styku je u oboch pohlaví rovnaké. Prečítajte si viac o testovaní na HIV v sérii článkov kliknutím na odkaz: HIV.
Dobrý deň Dieťa má 8 mesiacov, bolo testované na HIV pomocou ELISA, v krvi boli nájdené gp160 + a p25 +, zvyšok je všetko negatívne, záver pochybný. Súdiac podľa týchto testov sa ukazuje, že dieťa je +? gp160 + gp110/120 - p68 - p55 - p52 - gp41 - p34 - p25 + p18 -
Žiaľ, na základe získaných údajov nie je možné stanoviť diagnózu so 100-percentnou pravdepodobnosťou, pretože nemožno vylúčiť falošne pozitívny výsledok. Na stanovenie presnej diagnózy budete musieť podstúpiť množstvo vyšetrení, vrátane opakovania tejto analýzy metódou ELISA, ako aj vykonania testu pomocou metódy PCR. Potom by ste sa mali obrátiť na špecializovanú lekársku inštitúciu, kde bude odborník na infekčné choroby schopný komplexne vyhodnotiť získané výsledky. Viac o prejavoch infekcie HIV sa dozviete v tematickej časti našej webovej stránky po kliknutí na odkaz: HIV
Môže ukázať falošne pozitívny výsledok pre akútne respiračné infekcie alebo akútnejšie infekčné ochorenia? Niekde som čítal, že pri 58 ochoreniach alebo aj vyššie sa môže ukázať „+“ vrátane očkovania proti hepatitíde B, ak sú postihnuté obličky atď.?
Je tu možnosť falošne pozitívneho výsledku, preto Vám odporúčam urobiť nasledovné: urobiť test ešte raz - metódou ELISA a metódou PCR a následne opäť navštíviť infektológa. Viac o diagnostike HIV infekcie sa dozviete v tematickej sekcii: HIV
Dobrý deň Imunoblot je neurčitý kvôli proteínu p25. Aká je pravdepodobnosť HIV?
V tejto situácii je potrebné starostlivo preštudovať protokoly štúdie v kombinácii s inými ukazovateľmi, pretože na základe týchto údajov nie je možné urobiť predpoklad. Výsledok možno pravdepodobne považovať za sporný a po 3 mesiacoch je potrebná opakovaná štúdia. Prečítajte si viac v sekcii našej webovej stránky: HIV
Dobrý deň.
Môžete sa vyjadriť k testu HIV ELISA?
1 sérum +3,559 k=13,3
+2,121 k=4,9
p 24 neg
2 sérum +3,696 k=13,9
+2,477 k=5,7
V tomto prípade nie je možné vylúčiť falošne pozitívny výsledok, vzhľadom na to, že metóda ELISA je nepriama, preto vám odporúčam otestovať sa inou, citlivejšou metódou – imunoblottingom. Podrobnejšie informácie o tejto problematike nájdete v príslušnej sekcii našej webovej stránky kliknutím na nasledujúci odkaz: HIV
Dobré popoludnie, povedzte mi, čo si mám naladiť? Pred rokom pri planovani dietatka sme s manzelom absolvovali vsetky vysetrenia vratane HIV (brali ich velmi vazne a spravne), bola som na vysetreni v Kr Rogu, manzel v Kyjeve, jeho odpoved bola negativna povedal, že nejaké činidlo nefungovalo, musím ho znova vziať v Centre AIDS v Kyjeve. Po vykonaní testu v Centre mi aj odpoveď vyšla negatívna. Teraz som na pozícii 14. týždeň t.j. Registrujem sa a prechádzam všetkými testami a opäť sa mi vrátila odpoveď, test HIV bol neurčitý, urobil som si ho znova na klinike a urobil som si expresný test v Dovire, aby ma upokojili, ale neupokojili ma, expresný test. ukázal pozitívny výsledok (druhá čiara bola menej výrazná), ihneď po tejto procedúre som nestrácal čas kontaktovaním AIDS centra a tiež som si urobil test a čakám na výsledok. (Neviem sa upokojiť) Povedzte mi, do akej miery môžete dôverovať expresným testom a prečo na prvý test na HIV neexistuje žiadna odpoveď? (s manželom vedieme zdravý životný štýl a máme sa radi). Ďakujem.
Netreba panikáriť vopred – expresná diagnostika nie je základom diagnostiky HIV, umožňuje identifikovať skupiny pacientov, ktorí si vyžadujú hlbší výskum. V takýchto situáciách sa odporúča vykonať imunitný blotting a osobne sa poradiť s odborníkom na infekčné choroby. Podrobnejšie informácie o tejto problematike sa dozviete v tematickej sekcii našej webovej stránky po kliknutí na odkaz: HIV. Ďalšie informácie môžete získať aj v nasledujúcej časti našej webovej stránky: Laboratórna diagnostika
Dobry den, bola som na infekcnom oddeleni, prave dnes ma prepustili pri odchode, lekarka mi volala a vysvetlila, ze mam pozitivnu IFA, najprv pri prijimani do nemocnice bola negativna, potom ked som znova testovala. stal sa pozitivny, poslali testy na imunoblot na horu Sokolniki povedali ze to bude hotove buduci tyzden, bol som v nemocnici s anginou a parainfluenzovymi virusmi, prisiel som v šoku, stale nechapem ako aby som to vyhodnotil, bol tiež vypracovaný výpis pre moju kliniku, ktorý naznačuje, že ak bola zistená a pod tým, že imunoblot funguje, ak budem prepustený na vašu kliniku, v tomto výpise bude všetko uvedené, aká je pravdepodobnosť výskytu HIV môže to byť preto, že som bol liečený na angínu z vírusu parainfluenzy, vykázali pozitívne výsledky na ifa?
Pravdepodobnosť falošne pozitívneho výsledku je veľmi vysoká. Prítomnosť jedného pozitívneho výsledku ešte nie je dôvodom na stanovenie diagnózy HIV, preto odporúčame počkať na výsledok imunoblottingu a následne osobne konzultovať ďalšie vyšetrenie a pozorovanie s infekčným lekárom. Angína, parainfluenza a iné prechladnutia nemajú významný vplyv na výsledky rozboru.
Chcem tomu veriť, ale koncom augusta mi prišlo zle, teplota stúpla, 37,5-38 riedku stolicu som mala asi 4 dni, bolo to na dovolenke, kde bolo veľa diskoték, pila som vodu z vodovodu ako mnohí iné, lebo čo bolo veľmi drahé, pohár vody stál 300 rubľov, riedku stolicu s takouto teplotou som si spájal s nejakou črevnou infekciou zachytenou vo vode, už si presne nepamätám, ale bola tam aj malá vyrážka v r. vrchnej casti tela, ked som prisla domov s teplotou volala som lekarku, napisala rotavirovu infekciu, po 5 dnoch choroby som sa dobrovolne prihlásila, že ho opustím a pôjdem do práce, kde som o pár dní ochorela na zápal dutín. (v tom období som kvôli pracovným povinnostiam potreboval byť vonku) pripisoval som to tomu, že veľký pokles teploty z dovolenky a otravy mi znížil imunitu a preto som opäť prechladol so zápalom dutín, takže toto je opäť nemocenská, podľa pokynov ORL som brala 10 dní Klacid SR 500, prešlo to, po 3 týždňoch som sa vrátila do práce, 3 dni som bola na služobnej ceste v horúcej krajine. Klimatizácie v doprave a hoteli boli nemilosrdné a po návrate domov, v lietadle som mala teplotu už 39,5 Tu som doma s teplotou 40, zavolala som doktorovi domov, napísala akútnu infekciu dýchacích ciest a povedala svoje. hrdlo bolo veľmi červené, mám chronický zápal mandlí a povedal som ORL špecialistovi, sám som napísal, aby som si vzal antibiotikum Levolet r, zavolal som sanitku, pretože som mal horúčku a frekvencia bola 40 a neklesla, hospitalizáciu neponúkli, na druhý deň ten istý príbeh - sanitka mi dala injekciu proti horúčke a odišla Tretí raz, keď som trval na hospitalizácii, ledva ma odviezli na infekčné, kde sa zistila zmiešaná infekcia parainfluenza a adenovírusová infekcia, ale pri prepustení. , povedala lekarka primarka ze mam diagnostikovanu HIV ifa pozitivnu a ze mi to urobili 2x som v soku neviem co mam robit nemozem jest ani pit .povedala ze Jasne mám akútnu infekciu HIV a na kontrolu poslali imunoblotový test mojej krvi do centra AIDS,
Teraz, keď som si nakreslil analógiu udalostí, ktoré sa mi stali za posledný čas, ako aj 3 nemocenské za sebou, vyskúšal som si všetky príznaky a bol som zhrozený tým, čo by to mohlo byť, po prepustení v ten istý deň išiel sa anonymne otestovať v invitro a na druhý deň bol výsledok IFA rovnaký +
Ospravedlňujem sa za také podrobné informácie, ale som zmätený a zabitý, pijem silné sedatíva a nemám chuť do jedla a prakticky nejem, výrazne som schudol
mam este otazku: lekar s prepustenim z nemocnice naznacil vysledok HIV zisteneho IFA a pod tym, ze na imunoblote sa pracuje, ale ako zavriem bl v mojej ambulancii na mieste kde bude vsetko napisane tam. Čo mám robiť? Toto už nebude dôverné. Požiadal som ošetrujúcu lekárku, aby tento rozbor nezapisovala do výpisu, čo mi odmietla, do akej miery sú rešpektované moje práva ohľadom nesprístupnenia informácií?
Výsledky štúdií vykonaných v nemocnici sú, žiaľ, súčasťou výpisu, pretože ošetrujúci miestny lekár musí mať úplné informácie o vašom zdravotnom stave. V tejto situácii nehovoríme o sprístupnení informácie, keďže tá sa prenáša iba na iného ošetrujúceho lekára, ktorý vás bude ďalej sledovať.
Ahoj! Urobil som si testy na HIV, pretože som potreboval certifikát na FMS, pár týždňov mi testy nedali, potom ma pozvali k manažérovi a dali mi pozitívny výsledok, zobrali kopu potvrdení a poslali do krajského AIDS centra na ďalšie vyšetrenie, ako je napísané na osvedčení. Chcem si to dať na inej klinike a potom ísť na krajskú, alebo to nemá zmysel preberať? Len nechapem, preco ich tak dlho nedavali, no, doktor povedal, ze vraj urobili nejaky rozbor a vraj im dlhujem dalsich 4 tisic rublov, lebo ak to urobili, tak asi navyse k potvrdeniu by dali podrobné informácie o chorobe?
V tejto situácii by ste nemali panikáriť vopred - získanie jedného pozitívneho výsledku vám neumožňuje spoľahlivo posúdiť možnú infekciu, pretože nie je možné vylúčiť falošne pozitívne výsledky. Odporúčame test zopakovať a v prípade pozitívneho výsledku je potrebné absolvovať ďalšie vyšetrenie – imunoblotting. Laboratórium spravidla neposkytuje podrobné informácie o výsledkoch, čo je bežná a bežná prax. Na prípadné otázky Vám môže odpovedať Váš ošetrujúci lekár po vyšetrení pri osobnej konzultácii.
Zabudla som dodať, že od začiatku júna do polovice septembra som absolvovala kúru anabolických steroidov a to Sustanon 250, zmes testosterónov a stanozololu s primabolanom, chcela som sa pripraviť na leto a dovolenku, či by sa dali dole moja imunita a vsetko co sa mi stalo.
Zhoršená imunita, ako aj prítomnosť autoimunitných ochorení môžu poskytnúť falošne pozitívne výsledky testov na HIV. Preto sa v prípade získania 2 pozitívnych výsledkov metódou ELISA odporúča imunoblotting, ktorý nám umožní presne odpovedať na otázku, či ide o infekciu alebo nie.
Čo to znamená mať autoimunitné ochorenia?
Vo všeobecnosti môžem povedať, že som bol od raného detstva dosť často chorý a ešte pred pár rokmi som žiadal ošetrujúceho lekára, aby sa staral o moju imunitu, pretože som bol neustále unavený a často som chorý, hlavne ucho, hrdlo, nos , ale po celý čas boli negatívne výsledky na HIV, prešiel som nimi celkom ľahko, bez váhania.
Falošne pozitívny výsledok testu na HIV sa môže vyskytnúť po nedávnej vírusovej infekcii, očkovaní proti hepatitíde B, tuberkulóze, hepatitíde, herpesu, ako aj na pozadí autoimunitných ochorení, ako je reumatoidná artritída, systémový lupus erythematosus, dermatomyozitída, sklerodermia, spojivové tkanivo choroby a pod.
Chcel by som doplniť moju otázku, imunoblot mi vyšiel negatívny, ale lekár povedal, že keďže som mal dve IFA +, keď som bol na infekčnom, musím si urobiť znova test, ale o niečo neskôr
V tomto prípade je lekárska taktika oprávnená - odporúčame znova užívať imunoblot po 1,5-2 mesiacoch.
Aká je pravdepodobnosť: 2 IFA + rozdiel medzi odbermi krvi cca 2 dni, imunoblot - ; Bol som v nemocnici pre infekčné choroby s adenovírusovou infekciou a parainfluenzou, kde mi odobrali krv, imunoblot poslali do AIDS centra
Dobrý deň Zaregistroval som sa v bytovom komplexe, prešiel som všetkými testami, lekár povedal, že mám herpes v krvi, potom mi volali z AIDS centra a povedali, že sa musím znova otestovať, spýtal som sa a povedali mi, že som HIV pozitívny , v panike sme išli s manželom na pretestovanie Urobila som si test a dostala som IFA a imunoblot + manžel to dostal a po mesiaci som to dostala znova. Mám + môj manžel – teraz som v 23. týždni tehotenstva!
V tejto situácii, žiaľ, existuje možnosť infekcie HIV, ale konečnú diagnózu nemožno urobiť ani pri pozitívnom imunoblote, vzhľadom na stav tehotenstva. V tejto situácii je potrebné vylúčiť falošne pozitívne výsledky, preto odporúčame test zopakovať a osobne konzultovať s odborníkom na infekčné choroby.
Ak imunoblot ukazuje pozitívny výsledok na HIV, ale skríning je negatívny, akému výsledku by sme mali veriť?
Imunoblot je presnejší test, preto pri tejto štúdii, ak sa dosiahne pozitívny výsledok, musíte pokračovať v štúdii a osobne navštíviť špecialistu na infekčné choroby.
V Rusku je súčasný štandardný postup laboratórnej diagnostiky infekcie HIV detekcia protilátok proti HIVpomocou enzýmového imunotestu nasleduje potvrdenie ich špecifickosti v reakcii imunoblotovanie.
Protilátky proti HIV sa objavia u 90-95% infikovaných ľudí do 3 mesiacov po infekcii, u 5-9% - 6 mesiacov po infekcii a u 0,5-1% - neskôr. Najskorší čas na detekciu protilátok je 2 týždne od okamihu infekcie.
Detekcia protilátok proti HIV zahŕňa 2 fázy. V prvej fáze Celkové spektrum protilátok proti HIV antigénom sa identifikuje pomocou rôznych testov: enzýmovo viazaný imunosorbent, aglutinačný, kombinovaný, hrebeňový, membránovo-filtrapiónový alebo membránovo-difúzny test. V druhej fáze Imunoblotting sa používa na stanovenie protilátok proti jednotlivým vírusovým proteínom. Je povolené používať iba testovacie systémy, ktoré majú povolenie na použitie od Ministerstva zdravotníctva Ruskej federácie. Diagnostické postupy by sa mali vykonávať iba v súlade so schválenými pokynmi na použitie príslušných testov.
Odber krvi vyrobené z kubitálnej žily do čistej suchej skúmavky v množstve 3-5 ml. Novorodencom je možné odobrať pupočníkovú krv. Výsledný materiál (plná krv) sa neodporúča skladovať dlhšie ako 12 hodín pri izbovej teplote a dlhšie ako 1 deň v chladničke pri teplote 4-8°C. Prebiehajúca hemolýza môže ovplyvniť výsledky testu. Sérum sa oddelí centrifugáciou alebo cirkuláciou krvi pozdĺž steny skúmavky pomocou Pasteurovej pipety alebo sklenenej tyčinky. Separované sérum sa prenesie do čistej (najlepšie sterilnej) skúmavky, fľaštičky alebo plastovej nádoby a v tejto forme sa môže skladovať až 7 dní pri teplote 4-8°C. Pri práci by ste mali dodržiavať bezpečnostné pravidlá uvedené v „Pokynoch pre protiepidemický režim v diagnostických laboratóriách AIDS“ č.42-28/38-90 zo dňa 5.7.1990.
Stanovenie celkových protilátok proti HIV.
Keď sa získa prvý pozitívny výsledok, analýza sa vykoná ešte dvakrát (s rovnakým sérom a v rovnakom testovacom systéme). Ak sa získal aspoň jeden pozitívny výsledok (dva pozitívne výsledky z troch testov ELISA), sérum sa odošle do referenčného laboratória.
V referenčnom laboratóriu sa primárne pozitívne sérum (to znamená, ktoré poskytlo dva pozitívne výsledky v prvom testovacom systéme) opätovne testuje pomocou ELISA v druhom (inom) testovacom systéme zvolenom na potvrdenie.
Ak sa získa pozitívny výsledok testu v druhom testovacom systéme, sérum sa musí vyšetriť v IB.
Ak sa v druhom testovacom systéme získa negatívny výsledok, sérum sa znovu testuje v treťom testovacom systéme.
Ak sa získa negatívny výsledok testu v druhom aj treťom testovacom systéme, je vydaný záver o absencii protilátok proti HIV.
Ak sa dosiahne pozitívny výsledok v treťom testovacom systéme, sérum sa tiež odošle na testovanie imunoblotingom.
Imunitný blotting.
Princípom metódy je detekcia protilátok proti určitým vírusovým proteínom imobilizovaným na nitrocelulózovej membráne. Obalové proteíny (env) HIV-1 sa bežne označujú ako glykoproteíny ("gp" alebo "gp") s molekulovou hmotnosťou vyjadrenou v kilodaltonoch (kd): 160 kd, 120 kd, 41 kd. V HIV-2 majú glykoproteíny hmotnosť 140 kd, 105 kd, 36 kd. Jadrové proteíny (gag) (zvyčajne označované ako proteíny - „p“ alebo „p“) v HIV-1 majú molekulové hmotnosti 55 kd, 24 kd, 17 kd, v uvedenom poradí, a HIV-2 - 56 kd, 26 kd, 18 kd. Enzýmy HIV-1 (pol) majú molekulové hmotnosti 66 kd, 51 kd, 31 kd, HIV-2-68 kd.
Výsledky získané imunoblotovaním sa interpretujú ako pozitívne, nejednoznačné alebo negatívne.
Pozitívny(pozitívne) sa považujú vzorky, v ktorých sa zistia protilátky proti 2 alebo 3 glykoproteínom HIV.
Negatívne(negatívne) sa považujú za séra, v ktorých sa nezistili žiadne protilátky proti žiadnemu z HIV antigénov (proteínov).
Do úvahy sa berú vzorky, ktoré obsahujú protilátky proti jednému HIV glykoproteínu a/alebo akýmkoľvek HIV proteínom pochybný(nedefinované alebo neinterpretovateľné).
Ak sa pri imunoblotingu s antigénmi HIV-1 získa pochybný výsledok s protilátkami proti jadrovým proteínom (gag), vykoná sa štúdia s antigénmi HIV-2.
Ak sa získajú pozitívne výsledky imunoblotovania, urobí sa záver o prítomnosti protilátok proti HIV v testovanom materiáli.
Po prijatí negatívneho výsledku testu vydá oddelenie informačnej bezpečnosti záver o absencii protilátok proti HIV.
Ak sa získa neurčitý výsledok (ak nebol identifikovaný antigén p24), vykonajú sa opakované testy na protilátky HIV po 3 mesiacoch,
as neurčitými výsledkami zostávajúcimi po ďalších 3 mesiacoch. Ak bol zistený antigén p24, opätovné vyšetrenie sa vykoná 2 týždne po získaní prvého neurčitého výsledku.
Ak sa po 6 mesiacoch od prvého vyšetrenia opäť získajú neurčité výsledky a pacient nemá rizikové faktory infekcie a klinické príznaky infekcie HIV, výsledok sa považuje za falošne pozitívny. (Ak existujú epidemiologické a klinické indikácie, sérologické štúdie sa opakujú podľa predpisu).
Imunitný prenos pomocou rekombinantných vírusovo špecifických polypeptidov „HIV Blot“ sa vyznačuje tým, že nepoužíva samotné vírusové proteíny, ale rekombinantné polypeptidy - analógy HIV antigénov („Env1“, „Gag1“, „Poll“, „Env2“ ). Rekombinantný polypeptid „Env1“ okamžite deteguje protilátky proti HIV-1 gp120 a gp41, polypeptid „Gag1“ proti antigénom p 17 a p24, polypeptid „Po11“ proti antigénu p51, polypeptid „Env2“ proti HIV-2 gp110 a gp38 antigény. Sérum, ktoré reaguje s Env1 alebo Env2 alebo oboma Env, sa považuje za pozitívne (duálna infekcia HIV typu 1 a 2). Reakcia len s Poll and Gag sa považuje za nejednoznačný výsledok, pričom v tomto prípade je sledovanie podobné ako v prípade nejednoznačných (neurčitých) výsledkov klasického imunoblotu s použitím lyzátu HIV.
Zvláštnosťou sérologickej diagnostiky infekcie HIV u detí narodených matkám infikovaným HIV je, že u infikovaných aj neinfikovaných detí sa v prvých 6-12 mesiacoch života zistia protilátky proti HIV materského pôvodu, ktoré potom môžu vymiznúť. Kritériom, ktoré naznačuje, že dieťa má infekciu HIV, je zistenie protilátok proti HIV vo veku 18 mesiacov alebo viac. Neprítomnosť protilátok proti HIV u dieťaťa vo veku 18 mesiacov narodeného matke infikovanej HIV je kritériom, ktoré argumentuje proti prítomnosti infekcie HIV.
Sada reagencií „MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2“ je určená na potvrdenie detekcie protilátok proti jednotlivým proteínom (antigénom) HIV-1 a/alebo HIV-1 skupiny O a/alebo HIV-2 v ľudské sérum alebo plazma metódou imunoblot.Charakteristické rysy:
- Súprava činidiel „MPBA – Blot – HIV-1, HIV-2“ obsahuje purifikované lyzátové vírusové proteíny HIV 1 a peptid – antigénny determinant gp36 HIV-2;
- Poskytuje detekciu protilátok proti HIV-1, HIV-1 skupiny O, HIV 2 na jednom prúžku;
- Jednoduchý postup prípravy a vykonania testov;
- Interná kontrola kvality reakcie*
- Maximálna rýchlosť analýzy (3 hodiny);
- Malý objem testovanej vzorky - 20 µl;
- Nevyžaduje dodatočné vybavenie na výskum;
- Kvalita súpravy je zaručená použitím ruských a medzinárodných štandardných vzoriek**
* Interná kontrola kvality je zabezpečená prítomnosťou:
- vnútorné kontrolné prúžky, poskytuje kontrolu nad zavedením vzorky séra alebo plazmy;
- kontrolné negatívne sérum (K-);
- kontrolné pozitívne sérum (K+), ktoré umožňuje identifikáciu pásikov detegovaných na prúžku;
- kontrolné slabo pozitívne sérum (K+cl), ktoré poskytuje kontrolu nad citlivosťou reagenčnej súpravy.
**Zabezpečenie kvality:
Charakteristiky reagenčnej súpravy MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 boli stanovené testovaním vzoriek z náhodnej vzorky darcov, pacientov s diagnostikovanou infekciou HIV, komerčných panelov sérokonverzie, štandardných panelov a vzoriek s „potenciálne zasahovaním do determinácie“.
Sada reagencií nedáva falošne pozitívne výsledky pri vyšetrovaní štandardných panelových sér, ktoré neobsahujú protilátky proti HIV 1,2 a HIV-1 antigénu („AT (-) HIV Standard“, č. FSR 2007/00953 zo dňa 25. 10. 2007 ). Špecifickosť - 100%.
Diagnostická špecificita bola stanovená štúdiom náhodnej vzorky 200 darcov z rôznych krvných centier a kliník s predtým potvrdenou absenciou infekcie HIV-1 a HIV-2. Špecifickosť pri štúdiu náhodnej vzorky darcov bola 100 %;
Špecifickosť reagenčnej súpravy bola stanovená testovaním 250 vzoriek, vrátane vzoriek séra alebo plazmy získaných od tehotných žien, hospitalizovaných pacientov, pacientov s hepatitídou C a E a vzoriek s „potenciálne interferujúcimi“ zložkami. Pri použití súpravy MPBA-Blot-HIV-1, HIV-2 pre tieto vzorky neboli zistené žiadne falošne pozitívne výsledky.
Diagnostická citlivosť bola stanovená pomocou:
- vzorky plazmy z panelu Boston Biomedica, Inc HIV-1 (WWRB 301) z rôznych oblastí obsahujúcich rôzne podtypy HIV-1: skupina M (podtypy A, B, C, D, E, F) a skupina O; citlivosť reagenčnej súpravy bola 100 %;
Citlivosť reagenčnej súpravy bola stanovená v štúdii medzinárodných sérokonverzných panelov Boston Biomedica, Inc (SeraCare Life Sciences), kat. č. PRB 903, PRB 904, PRB 909, PRB 912, PRB 916, PRB 917, PRB 918, PRB 919, PRB 921, PRB 923, PRB 924, PRB 927, PRB 928, PRB 932
Sada činidiel zisťuje protilátky proti HIV-1 v sére štandardného panelu obsahujúceho protilátky proti HIV-1 („AT (+) HIV-1 Standard“, č. FSR 2007/00953 z 25. októbra 2007), zisťuje protilátky proti HIV-2 v štandardných panelových sérach obsahujúcich protilátky proti HIV-2 („AT (+) HIV-2 štandard“, č. FSR 2007/00953 z 25. októbra 2007). Citlivosť - 100%.
Registračný list č. FSR 2010/07958 zo dňa 13. júla 2011 (platnosť neobmedzená)
zlúčenina:
- Imunosorbent. Prúžky bielej nitrocelulózovej membrány s jednotlivými HIV-1 proteínmi (gp160, gp120, p66, p55, p51, gp41, p31, p24, p17) na ne sorbované elektrotransferom a aplikované na prúžok so syntetickým HIV-2 peptidom, analógom proteínu gp36 a ľudskej anti-IgG (vnútorná kontrola) - 18 ks;
- K- - kontrolné negatívne sérum. Ľudské krvné sérum, ktoré neobsahuje protilátky proti HIV-1,2, HCV, HIV antigén, HBsAg, sa inaktivuje zahriatím na 560C; transparentná svetložltá kvapalina - 1 skúmavka (0,08 ml). Obsahuje konzervačné látky: timerosal a azid sodný;
- K+ - kontrolné pozitívne sérum. Ľudské krvné sérum obsahujúce protilátky proti HIV-1,2 (titer nie menší ako 1:10 000), neobsahujúce HBsAg, HIV antigén, protilátky proti HCV, sa inaktivuje zahrievaním na 56 °C; transparentná svetložltá kvapalina - 1 skúmavka (0,08 ml) Obsahuje konzervačné látky: thimerosal a azid sodný.
- K+sl - kontrolné slabo pozitívne sérum. Ľudské krvné sérum obsahujúce protilátky proti HIV-1,2 (titer nie viac ako 1:200), neobsahujúce HBsAg, HIV antigén, protilátky proti HCV, sa inaktivuje zahrievaním na 56 °C; transparentná svetložltá kvapalina - 1 skúmavka (0,08 ml). Obsahuje konzervačné látky: timerosal a azid sodný;
- RPOKk (x10) - roztok na riedenie vzoriek a konjugátu. Koncentrát - Tris pufor obsahujúci vopred upravené normálne kozie sérum; nepriehľadná šedá kvapalina - 1 fľaša (10 ml). Obsahuje konzervačnú látku: thimerosal;
- PRk (x20) - premývací roztok. Koncentrát - Tris pufor obsahujúci Tween-20; priehľadná bezfarebná kvapalina - 1 fľaša (70 ml). Obsahuje konzervačnú látku: timerosal;
- Konjugovať. kozie anti-humánne IgG protilátky konjugované s alkalickou fosfatázou; transparentná bezfarebná kvapalina - 1 skúmavka (0,06 ml);
- Substrát (farbiaci roztok). Roztok 5-bróm-4-fluórindolylfosfátu (BCIP) a nitrotetrazoliovej modrej (NBT); transparentná svetložltá kvapalina - 1 fľaša (50 ml);
- Prášok na imunoblotovanie. Sušené odstredené mlieko - amorfný biely alebo svetložltý prášok - 5 balení x 1g;
- Tableta s vekom na nastavenie reakcie - 2 kusy;
- Plastová pinzeta - 1 kus.
