Určite by bol presnejší RIBT.

Táto štúdia sa používa na dvojitú kontrolu výsledkov ELISA, ak sú na pochybách.

Ak však porovnáme tieto dve metódy, RIBT má aj nevýhody:

1. Metóda nie je veľmi informatívna v počiatočnom štádiu vývoja ochorenia. Pozitívne sa stáva až 2 mesiace po infekcii. Zatiaľ čo ELISA môže byť pozitívna už od 3 týždňov.

2. Drahé a náročné na prácu. Zatiaľ čo ELISA je jednoduchá metóda, ktorá umožňuje vyšetriť veľké množstvo ľudí v krátkom čase. Nevyžaduje veľa času od laboratórneho asistenta a je pre pacienta lacný.

3. Metóda nie je informatívna počas obdobia užívania antibiotík, ako aj počas určitého obdobia po ukončení antibakteriálnej terapie. Užívanie antibiotík pacientom spôsobuje, že RIBT je negatívny.

Preto sa odporúča vykonať výskum:

• nie skôr ako 1 týždeň po vysadení vo vode rozpustných penicilínov;
• najskôr 25 dní po ukončení podávania trvanlivých (dlhodobo pôsobiacich) antibiotík.

Vzhľadom na uvedené nevýhody je RIBT metóda, ktorá sa na diagnostiku syfilisu používa veľmi zriedka. Ale hlavnou výhodou štúdie je jej vysoká spoľahlivosť. Preto sa RIBT môže použiť v zložitých diagnostických prípadoch na potvrdenie alebo vylúčenie infekcie.

Hlavné aplikácie:

• diferenciálna diagnostika z iných testov na syfilis;
• diagnostika neurosyfilisu;
• posúdenie uskutočniteľnosti vyradenia pacienta z registra venerológov, ak sú údaje získané z iných štúdií pochybné;
• detekcia latentného syfilisu;
• určenie viscerálnej formy ochorenia;
• zisťovanie patológie u tehotných žien, keď sú iné štúdie neinformatívne alebo v prípade podozrenia na falošne pozitívne výsledky.

ELISA je skríningová metóda. Môže to byť len potvrdzujúce, ak už bola vykonaná iná štúdia (napríklad antikardiolipínový test).

Na rozdiel od ELISA je RIBT sebestačná štúdia.

Prítomnosť pozitívneho výsledku je dôvodom na stanovenie diagnózy bez ďalších diagnostických metód. Okrem toho sa RIBT, ako najpresnejší spôsob detekcie Treponema pallidum, používa vo forenznej praxi na retrospektívnu diagnostiku syfilisu.

Syfilis: RIF, RIBT - naliehavo

Ak potrebujete test na syfilis, vrátane RIF alebo RIBT, kontaktujte našu kliniku. Spolupracujeme s niekoľkými veľkými laboratóriami v Moskve.

Preto máme široké diagnostické možnosti, ktoré nám umožňujú vykonávať takmer akýkoľvek výskum. Malo by sa však pochopiť, že RIBT nie je diagnostická metóda, pri ktorej sa môžete spoľahnúť na naliehavosť.

Samotný výskum a získanie jeho výsledkov nezaberie veľa času. Aby sa však zabezpečila jeho presnosť, bude potrebná určitá príprava.

Pacient bude musieť:

• počkajte 2 mesiace od okamihu podozrenia na infekciu (inak bude výsledok s najväčšou pravdepodobnosťou negatívny);
• počkajte 1 mesiac od momentu užívania antibiotík (skresľujú údaje štúdie, takže jej výsledky sú falošne negatívne).

Ak sú splnené potrebné podmienky, môžete si vziať RIBT. Jeho výsledky dostanete za 1-2 dni. Ak vyjde pozitívne, liečbu syfilisu môžete absolvovať v našej ambulancii.

Máme skúsených venerológov, ktorí vám pomôžu zbaviť sa tohto nebezpečného ochorenia.

Ak potrebujete urobiť RIBT a iné testy na syfilis, kontaktujte kompetentných venerológov.

Syfilis je sprevádzaný mnohými príznakmi a má veľké množstvo klinických foriem. Jeho rozpoznanie je založené na komplexnom klinickom a laboratórnom vyšetrení pacienta. Všeobecný krvný test na syfilis poskytuje málo informácií, takže sa nepoužíva na diagnostiku ochorenia.

Na analýzu je možné použiť tieto materiály:

• krv z prsta a žily;
• cerebrospinálny mok - cerebrospinálny mok;
• výtok tvrdého chancre (vredy);
• oblasti regionálnych lymfatických uzlín.

Výber materiálu a diagnostická metóda závisí od štádia ochorenia. O tom, aké testy sa robia na syfilis, si povieme v ďalšej časti.

Klasifikácia metód laboratórnej diagnostiky chorôb

V počiatočnom štádiu môžete použiť bakterioskopickú metódu založenú na identifikácii patogénu - Treponema pallidum - pod mikroskopom. V budúcnosti sú široko používané sérologické testy založené na stanovení mikrobiálnych antigénov a protilátok produkovaných telom v biologickom materiáli.

Bakteriologické štúdie sa nevykonávajú, pretože pôvodca syfilisu rastie na živných médiách v umelých podmienkach veľmi zle.

Všetky metódy na detekciu treponému, to znamená typy testov na syfilis, sú rozdelené do dvoch veľkých skupín:

1. Priame, ktoré priamo detegujú samotný mikrób:

• mikroskopia v tmavom poli (detekcia treponémov na tmavom pozadí);
• RIT test – infekcia králikov testovaným materiálom;
• polymerázová reťazová reakcia (PCR), ktorá deteguje úseky genetického materiálu mikroorganizmu.

2. Nepriame (sérologické), založené na detekcii protilátok proti mikróbom, ktoré telo produkuje ako odpoveď na infekciu.

Sérologické testy sú rozdelené do dvoch skupín

Netreponém:

• reakcia fixácie komplementu s kardiolipínovým antigénom (CCk);
• mikroprecipitačná reakcia (MPR);
• test rýchlej reaginácie plazmy (RPR);
• test s toluidínovou červenou.

Treponém:

• reakcia fixácie komplementu s treponémovým antigénom (RSCT);
• Treponémová imobilizačná reakcia (RTI alebo RIBT);
• imunofluorescenčná reakcia (RIF);
• pasívna hemaglutinačná reakcia (RPHA);
• enzýmová imunoanalýza (ELISA);
• imunoblotovanie.

Metódy týchto analýz sú pomerne zložité, preto sa zameriame najmä na to, kedy sa vykonávajú a nakoľko presné informácie poskytujú.

Povedzme hneď, že základom diagnostiky syfilisu sú sérologické metódy. Ako sa nazýva test na syfilis: v každom prípade môže vyšetrenie zahŕňať rôzne techniky. Nižšie o nich budeme hovoriť podrobnejšie.

Priame testy

Ich detekcia pod mikroskopom presvedčivo dokazuje prítomnosť treponém. Pravdepodobnosť syfilisu dosahuje 97%. Mikróby sa však dajú zistiť len u 8 z 10 pacientov, takže negatívny test ochorenie nevylučuje.

Diagnóza sa vykonáva v obdobiach, keď sa vyskytuje škrečok alebo kožná vyrážka. Práve vo vypúšťaní týchto infekčných elementov hľadajú pôvodcov ochorenia.

Efektívnejšou, no zároveň nákladnejšou a komplexnejšou analýzou je detekcia treponémov po predliečení fluorescenčnými protilátkami. Sú to látky, ktoré sa „lepia“ na mikróby a vytvárajú „žiaru“ v poli mikroskopu.

Citlivosť metód klesá s dlhým trvaním ochorenia, liečbou vredov a vyrážok antiseptikami a tiež po liečbe.

Biologická metóda diagnostiky RIT je vysoko špecifická, ale nákladná a výsledok sa dosiahne až po dlhšom čase, keď sa u infikovaného zvieraťa choroba rozvinie. V súčasnosti sa metóda prakticky nepoužíva, aj keď je prakticky najpresnejšia zo všetkých. Vynikajúci krvný test na syfilis na zistenie genetického materiálu treponémov je PCR. Jeho jediným obmedzením sú relatívne vysoké náklady na diagnostiku.

Sérologické metódy

Netreponemálne testy

RSKk a RMP

Najznámejším z týchto testov je Wassermanova reakcia. Ide o metódu rýchlej diagnostiky (expresný test na syfilis), založenú na podobnej reakcii protilátok z krvi chorého človeka na samotný treponém a na kardiolipín získaný z hovädzieho srdca. V dôsledku tejto interakcie protilátok a kardiolipínu sa tvoria vločky.

V Rusku sa táto analýza prakticky nepoužíva. Nahradila ju mikroprecipitačná reakcia. Nevýhodou metódy je jej nízka špecifickosť. Falošne pozitívny krvný test na syfilis sa vyskytuje pri tuberkulóze, krvných ochoreniach, systémovom lupus erythematosus, počas tehotenstva, po narodení dieťaťa, pri menštruačnom krvácaní a v mnohých ďalších prípadoch. Preto sa pri pozitívnom RW používajú presnejšie diagnostické metódy.

Po infekcii sa reakcia stáva pozitívnou po dvoch mesiacoch. So sekundárnym syfilisom je pozitívny takmer u všetkých pacientov.

Mikroprecipitačná reakcia, ktorá nahradila Wassermanovu reakciu, má podobný mechanizmus. Je lacný, ľahko sa implementuje, rýchlo sa vyhodnocuje, ale môže poskytnúť aj falošne pozitívny výsledok. Tieto dva testy sa používajú ako skríningové testy.

RMP sa stáva pozitívnym mesiac po objavení sa chancre. Na jeho vykonanie sa používa krv z prsta.

Môže byť test na syfilis nesprávny? Samozrejme áno, najmä pri použití netreponémových testov.

Príčiny akútnych falošne pozitívnych vzoriek pri použití RMP:

• akútne infekčné choroby;
• zápal pľúc;
• infarkt myokardu;
• mŕtvica;
• zranenia a otravy.

Chronické falošne pozitívne výsledky sa často vyskytujú pri nasledujúcich ochoreniach:

• tuberkulóza;
• brucelóza;
• leptospiróza;
• sarkoidóza;
• reumatické ochorenia;
• Infekčná mononukleóza;
• zhubné nádory;
• cukrovka;
• cirhóza pečene a iné.

Ak vzniknú kontroverzné testy, na objasnenie diagnózy sa použijú treponemálne sérologické testy.

RPR a test toluidínovej červene

Rýchly plazmatický reagin test (syfilis rpr test) je ďalším typom reakcie s kardiolipínovým antigénom. Používa sa v nasledujúcich prípadoch:

• skríning populácie;
• podozrenie na syfilis;
• vyšetrenie darcu.

Spomeňme aj test s toluidínovou červenou. Všetky tieto metódy sa používajú na hodnotenie účinnosti liečby. Sú semikvantitatívne, to znamená, že sa znižujú s zotavením a zvyšujú sa s relapsom infekcie.

Negatívne výsledky netreponemálnych testov s najväčšou pravdepodobnosťou naznačujú, že subjekt nemá syfilis. Preto sa na posúdenie vyliečenia používajú netreponemálne testy. Prvá takáto analýza by sa mala vykonať 3 mesiace po ukončení liečby.

Treponemálne testy

Treponemové testy sú založené na použití treponemálnych antigénov, čo výrazne zvyšuje ich diagnostickú hodnotu. Používajú sa v nasledujúcich situáciách:

• pozitívny skríningový test (reakcia mikroprecipitácie);
• rozpoznávanie falošne pozitívnych výsledkov skríningu;
• podozrenie na syfilis;
• diagnostika latentných foriem;
• retrospektívna diagnóza, keď pacient predtým trpel ochorením.

RIT a RIF

Najkvalitnejšie (vysoko citlivé a vysoko špecifické) sú RIT a RIF. Nevýhodou týchto metód je zložitosť, čas a potreba moderného vybavenia a vyškoleného personálu. U väčšiny vyliečených pacientov zostávajú treponémové testy pozitívne po mnoho rokov, a preto ich nemožno použiť ako kritérium vyliečenia.

RIF sa stáva pozitívnym dva mesiace po infekcii. Ak je negatívny, pacient je zdravý, ak je pozitívny, pravdepodobnosť ochorenia je vysoká.

RIT sa obzvlášť často používa v prípade pozitívnych výsledkov rakoviny močového mechúra na vylúčenie alebo potvrdenie ochorenia. Je vysoko citlivý a umožňuje vám s veľkou presnosťou povedať, či má pacient syfilis alebo nie. Test sa však stane pozitívnym až tri mesiace po infekcii.

Imunoblotting

Imunoblotting je ešte citlivejší ako RIF, ale menej citlivý ako RPGA. Používa sa zriedkavo, hlavne na diagnostiku syfilisu u novorodencov.

Uvedené metódy nie sú vhodné na skríning, teda rýchlu detekciu ochorenia, pretože sa stanú pozitívnymi neskôr ako mikroprecipitačná reakcia.

ELISA a RPGA

Moderné vysoko informatívne štandardizované metódy diagnostiky syfilisu - ELISA a RPGA. Sú lacné, rýchlo sa inštalujú a testujú vo veľkých množstvách. Tieto testy sa môžu použiť na potvrdenie diagnózy.

Analýza RPGA sa stáva pozitívnou s primárnym séropozitívnym syfilisom, to znamená s objavením sa chancre (mesiac po infekcii). Je cenný najmä pri diagnostike neskorých a vrodených foriem ochorenia. Pre presnosť diagnostiky však musí byť RPGA doplnený aspoň jedným netreponemálnym a jedným treponémovým testom. Tento trojitý test je najspoľahlivejším testom na syfilis. Nevýhodou RPGA je pretrvávanie pozitívnej reakcie po dlhú dobu, čo neumožňuje použiť test ako kritérium na vyliečenie.

Test ELISA na syfilis je pozitívny tri týždne po ochorení. Nevýhodou ELISA je, že môže byť falošná. Falošne pozitívna reakcia sa vyskytuje pri systémových ochoreniach, metabolických poruchách a tiež u detí narodených chorým matkám.

Nedostatky sérologických metód viedli k vývoju najmodernejších metód, ktoré neprodukujú chyby, ale sú stále drahé a zriedka používané - plynová chromatografia a hmotnostná spektrometria.

Algoritmus na diagnostiku syfilitickej infekcie v rôznych štádiách

V primárnom séronegatívnom období (do 2 mesiacov po infekcii) sa hľadá treponém v tmavom poli alebo pomocou fluorescenčných protilátok.

Pre primárny séropozitívny, sekundárny a latentný syfilis sa používajú RMP a ELISA a ako potvrdzujúci test sa používa RPGA.

U pacientov s relapsmi sekundárneho syfilisu sa skúmajú prvky vyrážky, snažiac sa z nich izolovať treponémy na mikroskopické vyšetrenie.

V terciárnom období je rakovina močového mechúra negatívna u tretiny pacientov. ELISA a RPGA sú pozitívne, ale nemusia naznačovať terciárny syfilis, ale predchádzajúce ochorenie. Slabo pozitívny test naznačuje skôr zotavenie ako terciárny syfilis.

Pri stanovení diagnózy „vrodeného syfilisu“ sa berie do úvahy prítomnosť ochorenia u matky, rozdiel v miere rakoviny prsníka u matky a dieťaťa, pozitívna ELISA a RPGA u novorodenca a imunoblotting.

Tehotné ženy musia byť vyšetrené na syfilis, najmä tie, ktoré už mali mŕtve narodenie, nevyvinuté tehotenstvo alebo predčasné potraty. Vykonávajú RMP, ELISA, RPGA. Pred ukončením tehotenstva sa vyšetrujú na prítomnosť ochorenia.

Pravidlá pre získanie testu na syfilis

Ak chcete získať odporúčanie do laboratória, musíte navštíviť miestneho lekára. Ak sa chcete otestovať rýchlejšie, môžete to urobiť v súkromnom laboratóriu bez odporúčania (napríklad laboratóriá Invitro robia test na syfilis rýchlo a anonymne).

Ako sa otestovať na syfilis? Krv sa daruje ráno, nalačno. Môžete piť iba čistú vodu.

Príprava: Dva dni pred testom musíte zo stravy vylúčiť mastné jedlá a najmä alkohol.

Ako prebieha analýza? obvyklým spôsobom z prsta alebo lakťovej žily.

Ako dlho trvá testovanie na syfilis? Výsledok testu je zvyčajne pripravený nasledujúci deň. Prepis možno získať od lekára alebo laboratória.

Ako dlho je analýza platná? Až tri mesiace.

Analýza cerebrospinálnej tekutiny

V niektorých prípadoch sa na diagnostiku neurosyfilisu vykoná test cerebrospinálnej tekutiny.

Toto vyšetrenie je predpísané všetkým pacientom s latentným syfilisom, ak majú príznaky patológie nervového systému, ako aj s latentným a neskorým neurosyfilisom.

Okrem toho sa analýza vykonáva u všetkých pacientov po zotavení, ak majú pozitívne sérologické reakcie. O tom, že sa tento jav stáva pomerne často, sme už písali v našom článku.

Rozbor cerebrospinálnej tekutiny na syfilis predpisuje a vykonáva iba lekár.

Cerebrospinálny mok sa získava punkciou medzi dvoma bedrovými stavcami. Odoberá sa po 4 ml do dvoch skúmaviek. Potom sa miesto vpichu ošetrí jódom a prekryje sterilným obväzom. Po punkcii by mal pacient ležať na bruchu so zdvihnutým koncom lôžka najmenej 3-4 hodiny, potom môže ležať na boku. Pokoj na lôžku po punkcii je indikovaný dva dni.

Cerebrospinálny mok z prvej skúmavky sa vyšetruje pomocou všeobecne uznávaných reakcií na obsah bielkovín, buniek a stanovenie príznakov meningitídy (zápal mozgových blán).

Cerebrospinálny mok z druhej skúmavky sa vyšetruje na obsah protilátok proti treponému pomocou Wassermanovej reakcie, RMP, RIF a RIBT, o ktorej sme hovorili vyššie.

Podľa závažnosti porúch sa rozlišujú štyri typy zmien v likvore. Ich analýzou môže lekár dospieť k záveru o prítomnosti rôznych foriem poškodenia nervového systému (vaskulárny neurosyfilis, syfilitická meningitída, meningovaskulárny syfilis, tabes dorsalis, neskorý mezenchymálny neurosyfilis), ako aj o uzdravení pacienta s pozitívnym sérologickým testy.

Imunofluorescenčná reakcia (RIF) je sérologická reakcia, ktorá umožňuje detekciu protilátok proti známym antigénom. Metóda zahŕňa mikroskopiu zafarbených náterov.

Táto reakcia sa využíva v imunológii, virológii a mikrobiológii. Umožňuje určiť prítomnosť vírusov, baktérií, húb, prvokov a ICC. RIF je veľmi široko používaný v diagnostickej praxi na detekciu vírusových a bakteriálnych antigénov v infekčnom materiáli. Metóda je založená na schopnosti fluorochrómu viazať sa na proteíny bez narušenia ich imunologickej špecifickosti. Používa sa hlavne pri diagnostike infekcií močových ciest.

Existujú nasledujúce metódy na uskutočnenie imunofluorescenčnej reakcie: priama, nepriama, s komplementom. Priama metóda zahŕňa farbenie materiálu fluorochrómmi. Vďaka schopnosti mikrobiálnych alebo tkanivových antigénov žiariť v UV lúčoch fluorescenčného mikroskopu sú definované ako bunky s jasne sfarbeným zeleným okrajom.

Nepriama metóda zahŕňa stanovenie komplexu antigén+protilátka. Na tento účel sa experimentálny materiál ošetrí protilátkami z antimikrobiálneho králičieho séra určeného na diagnostiku. Keď sa protilátky naviažu na mikróby, oddelia sa od tých, ktoré sa nenaviazali, a ošetria sa fluorochrómom označeným protikráličím sérom. Potom sa pomocou ultrafialového mikroskopu stanoví komplex mikrób + animikrobiálne protilátky + protilátky proti králikom rovnakým spôsobom ako pri priamej metóde.

Imunofluorescenčná reakcia je pri diagnostike syfilisu nevyhnutná. Pod vplyvom fluorochrómu je pôvodca syfilisu identifikovaný ako bunka so žltozeleným okrajom. Neprítomnosť luminiscencie znamená, že pacient nie je infikovaný syfilisom. Tento test sa často predpisuje na pozitívnu Wassermanovu reakciu. Táto metóda je veľmi účinná pri diagnostike, pretože umožňuje identifikovať patogén v počiatočných štádiách ochorenia.

Okrem toho, že RIF umožňuje diagnostikovať syfilis, používa sa aj na stanovenie prítomnosti patogénov, ako sú chlamýdie, mykoplazmy, trichomóny, ako aj patogénov kvapavky a genitálneho herpesu.

Na analýzu sa používajú nátery alebo venózna krv. Postup pri odbere náteru je úplne bezbolestný a nepredstavuje žiadne nebezpečenstvo. Na túto analýzu je potrebné sa pripraviť. Dvanásť hodín predtým sa neodporúča používať hygienické výrobky, ako sú malo alebo gély. Niekedy sa podľa pokynov lekára vykonáva aj provokácia. K tomu sa odporúča konzumovať korenené jedlá alebo alkohol, prípadne si vpichnúť provokujúcu látku, ako je gonovakcína alebo pyrogenal. Okrem toho interval medzi užitím antibakteriálnych liekov a vykonaním testu musí byť najmenej štrnásť dní.

Pri hodnotení výsledkov je potrebné vziať do úvahy skutočnosť, že luminiscencia sa pozoruje nielen u živých baktérií, ale aj u mŕtvych, čo platí najmä pre chlamýdie. Po kurze antibiotík žiaria aj mŕtve bunky chlamýdií.

Pri správnej príprave pacienta a dodržiavaní techniky odberu náteru vám táto analýza umožňuje identifikovať choroby v počiatočných štádiách, čo je veľmi dôležité pre včasnú liečbu. Pozitívnymi aspektmi tejto metódy sú krátky čas na získanie výsledkov, jednoduchá implementácia a nízke náklady na analýzu.

Medzi nevýhody patrí skutočnosť, že na vykonanie analýzy je potrebné pomerne veľké množstvo testovacieho materiálu. Okrem toho by mal výsledky hodnotiť iba skúsený odborník.

RIF, RIBT, RPGA

RIF - imunofluorescenčná reakcia- treponemálny test. Je to jeden z najcitlivejších testov na syfilis. RIF sa stáva pozitívnym 10-20 dní po infekcii, čo ho klasifikuje ako metódu včasnej detekcie syfilisu.

Indikácie na vykonávanie RIF:

• RIF sa vykonáva u osôb s príznakmi syfilisu, s negatívnymi reakciami - RMP, RV;
• ako diferenciálna reakcia u jedincov s pozitívnymi RW reakciami, mikroreakciami a absenciou symptómov;
• u tehotných žien pri absencii klinických prejavov a syfilisu v anamnéze.

Metodika vykonávania RIF:

• Pri uskutočňovaní reakcie sa do pacientovho séra pridá králičia krv infikovaná Treponema pallidum (pôvodca syfilisu) a fluorescenčné (svetelné) sérum. Štúdia pozostáva z pozorovania žiary komplexov pod fluorescenčným mikroskopom. Výsledky reakcie sa interpretujú v závislosti od intenzity žiary od 1+ do 4+, čo naznačuje prítomnosť syfilisu. Absencia žiary – negatívny výsledok RIF znamená, že vyšetrovaná osoba je zdravá. Falošné výsledky analýzy sú extrémne zriedkavé počas systémových procesov, tehotenstva atď.
• Reakcia sa uskutočňuje v modifikáciách RIF-200 a RIF-avs (absorpcia).
• Citlivosť reakcie na primárny syfilis je asi 85 %
• na sekundárny syfilis - 100%
• s terciárnym syfilisom - 98-100%.

Negativita RIF sa vyskytuje v priebehu niekoľkých rokov po liečbe syfilisu. Po antisyfilitickej liečbe je potrebné sledovanie ukazovateľov v priebehu času.

RIBT- Treponema pallidum imobilizačná reakcia je najšpecifickejším krvným testom na syfilis. RIBT je vysoko kvalitný, drahý krvný test, ktorý môžu vykonávať dobre vybavené laboratórne komplexy. RIBT je základná reakcia pre latentné formy syfilisu, neurosyfilisu a viscerosyfilisu. Umožňuje rozlíšiť falošne pozitívne reakcie od skutočného syfilisu.

Reakcia je založená na imobilizácii (imobilizácii) patogénu syfilisu druhovo špecifickými protilátkami. Mikroskopickým vyšetrením sa odčíta výsledok reakcie: 0-20% - negatívny, 21-30% - pochybný, 31-50% - slabo pozitívny, 51-100% - pozitívna reakcia. To znamená, že pozitívne výsledky pre syfilis zahŕňajú tie, kde je RIBT viac ako 50%. Pri syfilise sa RIBT stáva pozitívnym pomerne pomaly: v primárnom období syfilisu je stále negatívny, v sekundárnom čerstvom období je pozitívny v 50% prípadov, v období sekundárneho relapsu je pozitívny v 90-100%, v terciárnom období je pozitívny v 99-100%.

Negativita RIBT sa vykonáva už desaťročia, preto nie je legitímne používať ju ako kritérium spoľahlivosti liečby, napriek tomu je potrebné dynamické pozorovanie po antisyfilitickej liečbe.

Reakciu RIBT je vhodné vykonať najskôr 30 dní po ukončení liečby. RPHA – pasívna hemaglutinačná reakcia – sa týka treponemálnych testov a vykonáva sa v kombinácii s netreponemálnymi testami. Používa sa na potvrdenie diagnózy syfilisu v ktorejkoľvek fáze.

Reakciu je vhodné vykonať 4 týždne po podozrení na infekciu. Pri reakcii sa do krvného séra pacienta pridá liek pripravený z červených krviniek živočíšneho pôvodu, senzibilizovaný antigénom Treponema pallidum, pôvodcom syfilisu.

Podstatou RPHA reakcie je lepenie (aglutinácia) za prítomnosti protilátok proti treponému a tvorba aglutinátu – obrazca, ktorý pozoruje laborant. Reakcia sa hodnotí počtom +: 4+ - silne pozitívny výsledok, 3+ - pozitívny, 2+ - slabo pozitívny, 1+ - pochybný, - - negatívny výsledok. Ak je reakcia pozitívna, vykoná sa kvantitatívne hodnotenie na stanovenie koncentrácie (titra) protilátok. S progresiou syfilisu sa titer protilátok neustále zvyšuje.

RPGA zostáva pozitívny po celé desaťročia po liečbe syfilisu, a preto nemôže byť použitý ako kritérium pre istotu vyliečenia. Je však potrebné sledovať titer RPHA protilátok v priebehu času.

Metóda je vysoko citlivá. Výsledky RPGA môžu byť falošne pozitívne. K takýmto výsledkom analýzy môžu viesť ochorenia spojivového tkaniva, niektoré infekcie atď.

V skutočnosti nejde len o jednu analýzu – je ich niekoľko. Na zistenie syfilisu sa krv vyšetruje niekoľkými spôsobmi. Okrem krvi sa pri laboratórnej diagnostike tohto ochorenia používa aj ďalší biologický materiál, ktorý obsahuje patogén, spirochétu pallidum (syn. - treponema pallidum).

Ide o výtok zo syfilidov (špecifické ulcerácie a vyrážky na koži a slizniciach), s neurosyfilisom – cerebrospinálnym mokom (CSF).

Všetky metódy diagnostiky syfilisu možno rozdeliť na priame a nepriame. Priame metódy sú zamerané na priamu detekciu Treponema pallidum. Pokiaľ ide o nepriame, sú založené na detekcii protilátok proti spirochéte. Existujú protilátky, čo znamená, že existuje samotná spirochéta. Nepriame metódy diagnostiky syfilisu nie sú nič iné ako sérologické reakcie, pri ktorých sa ako testovací materiál používa krvné sérum.

Protilátky sa detegujú, keď interagujú s antigénmi. Na uskutočnenie sérologických reakcií sa používajú prípravky obsahujúce daný antigén. V závislosti od typu tohto antigénu môžu byť sérologické reakcie treponémové alebo netreponémové. Antigén špecifický pre Treponema pallidum sa podieľa na treponémových reakciách.

Treponemálne reakcie zahŕňajú:

• RSK – reakcia fixácie komplementu s treponemálnym antigénom
• RPHA - pasívna hemaglutinačná reakcia
• ELISA – enzýmová imunoanalýza
• RIF – imunofluorescenčná reakcia
• RIBT – imobilizačná reakcia Treponema pallidum

Netreponemálne sérologické reakcie zahŕňajú komplement fixačný test s kardiolipínovým antigénom a mikroprecipitačný test alebo rýchly plazmatický reagin test.

Kardiolipínový antigén použitý v týchto reakciách nie je antigén spirochéty pallidum. Ide o extrakt z hovädzieho srdca, ktorý má podobnú štruktúru ako kardiolipín-fosfolipidový antigén bunkovej membrány spirochét.

Preto protilátky produkované, keď sa objaví pôvodca syfilisu, budú tiež reagovať na tento antigén.

Keď ľudia hovoria o testovaní na syfilis, najčastejšie majú na mysli túto metódu, Wassermanovu reakciu

Wassermanova reakcia (RW)

Keď ľudia hovoria o testovaní na syfilis, najčastejšie majú na mysli túto metódu, Wassermanovu reakciu. Túto reakciu na diagnostiku syfilisu vyvinul nemecký imunológ Wasserman pred viac ako storočím, na samom začiatku minulého storočia. Vykonáva sa však dodnes, aj keď s výraznými zmenami.

V podstate RW vo svojej súčasnej verzii odkazuje na RSK. V imunológii komplement označuje systém plazmatických proteínov, ktoré tvoria vrodený imunitný systém. RW je založená na reakcii antigénov s protilátkami za účasti komplementu. V sére pacienta so syfilisom sú prítomné protilátky proti Treponema pallidum. Ak sa do takéhoto séra pridajú antigény, protilátky s nimi budú reagovať.

Pre RW sa používajú hotové sady špecifických a nešpecifických antigénov. Špecifické antigény boli izolované z kultúr Treponema pallidum pestovaných na živnom médiu.

Nešpecifické antigény predstavuje bovinný srdcový kardiolipín. RW teda možno klasifikovať ako treponémové aj netreponémové štúdie.

Reakcia špecifických a nešpecifických antigénov s protilátkami testovacieho séra nie je zvonka viditeľná. Na jeho indikáciu sa používajú ovčie červené krvinky.

Ako súčasť hemolytického séra imunizovaného králika sa pridávajú do testovaného materiálu. Čo sa stane na konci?

Ak je subjekt zdravý, potom v jeho sére nie sú žiadne protilátky proti treponému. Zároveň pod vplyvom komplementu dochádza k hemolýze (deštrukcii) ovčích erytrocytov, čo je dobre viditeľné v skúmavke, ktorej obsah je rovnomerne sfarbený bez sedimentu („laková krv“).

Hemolýza teda indikuje neprítomnosť protilátok. V tomto prípade je reakcia negatívna.

U pacientov so syfilisom je opak pravdou. V nich sa pri tvorbe imunitných komplexov antigénov s protilátkami viaže všetok komplement a, zjednodušene povedané, je ho málo na zničenie červených krviniek.

Neprítomnosť hemolýzy teda naznačuje prítomnosť protilátok proti spirochétám, a teda aj syfilisu. V tomto prípade je reakcia pozitívna a je označená znamienkom plus.

Presnejšie povedané, môže existovať niekoľko výhod, pretože oneskorenie hemolýzy má rôzne stupne závažnosti:

• 1 plus – reakcia je otázna
• 2 plusy – reakcia je slabo pozitívna
• 3 plusy – pozitívna reakcia
• 4 plusy – reakcia je ostro pozitívna.

V lekárskom slangu sa plusy v tomto prípade nazývajú krížiky a podľa toho sa označuje aj výsledok: +, ++, +++ alebo ++++.

Technika RW je pomerne jednoduchá, lacná, trvá málo času a nevyžaduje zložité laboratórne vybavenie. Preto sa táto reakcia uchyľuje všade, a to nielen v prítomnosti špecifických indikácií (podozrenie na syfilis, prítomnosť charakteristických symptómov).

Vykonáva sa ako skríningová metóda pri bežných lekárskych prehliadkach, u tehotných žien pri registrácii a u všetkých pacientov počas hospitalizácie.

Medzitým táto technika nie je bez významných nedostatkov. Po prvé, nie vždy dáva pozitívny výsledok v prípade existujúceho syfilisu. Koniec koncov, protilátky sa nevytvoria okamžite, ale po určitom čase.

Toto obdobie, keď neexistujú žiadne protilátky, sa nazýva séronegatívne obdobie syfilisu a trvá 5-8 týždňov. od okamihu infekcie.

A séropozitívne obdobie syfilisu začína už na konci primárneho syfilisu. Sekundárny syfilis je takmer vždy séropozitívny a terciárny komplikovaný syfilis môže byť séronegatívny. V tomto prípade to vôbec neznamená, že Treponema pallidum sa v tele nenachádza. Ide len o to, že imunitný systém sa v priebehu mnohých rokov vyčerpal a protilátky sa prestali uvoľňovať.

Na druhej strane, v niektorých prípadoch, aj po úspešnej liečbe syfilisu, môžu 1-2 kríženia v analýze pretrvávať mnoho rokov a niekedy aj celý život.

Počet krížení v RW teda nezávisí od aktivity Treponema pallidum a závažnosti syfilisu. Na tento účel sa používa ďalší indikátor - titer protilátok. Toto je maximálny stupeň zriedenia séra, pri ktorom dochádza k výrazne pozitívnej reakcii.

Ďalšou nevýhodou RW je jej nízka špecificita s častými falošne pozitívnymi výsledkami, keď je hemolýza oneskorená pri absencii syfilisu.

Medzi dôvody falošne pozitívnych výsledkov patria iné bakteriálne a vírusové infekcie, systémová kolagenóza, tehotenstvo, alkoholizmus, drogová závislosť, lieky, diétne chyby a mnohé ďalšie. Preto je veľmi dôležité správne sa pripraviť na analýzu.

7-10 dní pred odberom krvi prestaňte užívať antibiotiká. Počas posledných 24 hodín by ste sa mali zdržať jedenia veľkých, mastných jedál a alkoholu.

Krv na analýzu sa odoberá zo žily na prázdny žalúdok. Negatívne výsledky pri absencii charakteristických klinických prejavov vo forme chancre naznačujú s vysokou mierou istoty absenciu syfilisu. Ak je prítomný aspoň jeden z krížov, uchýlia sa k iným diagnostickým metódam.

Pasívna hemaglutinačná reakcia pozostáva z lepenia alebo aglutinácie červených krviniek.

Pasívna hemaglutinačná reakcia (RPHA)

Pasívna hemaglutinačná reakcia pozostáva z lepenia alebo aglutinácie červených krviniek. Treponemálne antigény sú fixované na červené krvinky použité v tejto reakcii. K tomuto materiálu sa potom pridá testovacie sérum.

Ak obsahuje protilátky, interagujú s antigénmi na červených krvinkách, čo vedie k ich aglutinácii. Aglutinácia teda indikuje pozitívnu RPHA a existujúci syfilis a neprítomnosť aglutinácie a negatívna RPHA naznačuje, že subjekt je zdravý. Tu sú tiež 4 stupne pozitívnych výsledkov s rôznymi titrami protilátok.

Citlivosť RPGA je vyššia v porovnaní s RW. Tento test je však negatívny na samom začiatku ochorenia, počas prvých 2-4 týždňov, niekedy aj 6 týždňov. Následne v sekundárnom a terciárnom období je RPGA vždy pozitívny, ako pri latentnom syfilise.

Preto sa môže použiť na diagnostiku ochorenia bez jasných klinických prejavov. Rovnako ako iné treponémové štúdie, RPHA zostáva pozitívny po celý život, dokonca aj po úplnom zotavení. Preto sa nemôže použiť na posúdenie primeranosti liečby syfilisu.

Môže sa stať negatívnym iba v prípadoch, keď sa liečebné opatrenia začali hneď, ako pacient ochorel na syfilis.

RPGA tiež poskytuje falošne pozitívne výsledky pri niektorých chorobách a patologických stavoch. Falošne pozitívne výsledky sa líšia od skutočne pozitívnych v tom, že sa stanú negatívnymi veľmi rýchlo, po niekoľkých týždňoch alebo mesiacoch.

Navyše sa to deje spontánne, dokonca aj bez špeciálnej liečby. RPGA sa vzťahuje aj na skríningové diagnostické metódy. Ak je výsledok pozitívny, vykonajú sa ďalšie treponémové testy.

Enzýmová imunoanalýza je tiež založená na reakcii antigén-protilátka.

Enzýmová imunoanalýza ELISA

Enzýmová imunoanalýza je tiež založená na reakcii antigén-protilátka. Treponemálne antigény sú fixované na povrchu akéhokoľvek pevného materiálu.

Spravidla ide o polystyrén, z ktorého sa vyrábajú moderné testovacie systémy, ktoré vyzerajú ako platne s jamkami. Do týchto jamiek sa pridá testovacie sérum. Ak toto sérum obsahuje protilátky, tvoria komplexy s antigénmi testovacích systémov.

Žlté sfarbenie testovaného materiálu indikuje prítomnosť protilátok. Čím viac týchto protilátok, tým intenzívnejšie je farbenie.

Protilátky patria k imunoglobulínom (Ig) a sú zastúpené niekoľkými druhmi - IgA, IgM a IgG. Ich počet nie je rovnaký v rôznych obdobiach ochorenia. Prevalencia jedného alebo druhého Ig sa preto môže použiť na posúdenie trvania ochorenia.

ELISA sa stáva pozitívnym už po 3 týždňoch a môže to tak zostať po zvyšok života. Časté sú tu však aj falošne pozitívne výsledky, čo je značný nedostatok.

Medzi výhody ELISA patrí dostupnosť metódy a možnosť realizovať veľké množstvo štúdií v relatívne krátkom čase.

Imunofluorescenčná reakcia je založená na svetelnej indikácii komplexu antigén-protilátka

Imunofluorescenčná reakcia (RIF)

Imunofluorescenčná reakcia je založená na svetelnej indikácii komplexu antigén-protilátka. Existujúci antigén sa zmieša s testovacím sérom. Ak sú prítomné protilátky, tvoria imunitné komplexy s antigénmi.

Potom sa do diagnostického materiálu pridá protidruhové králičie sérum obsahujúce fluoresceín, látku žiariacu v ultrafialovom svetle. Žiara sa deteguje pri pohľade cez fluorescenčný mikroskop.

V závislosti od intenzity žiary, ktorej farba sa mení od sotva viditeľnej po žltozelenú, existujú 4 stupne pozitívneho RIF.

Výhodou tejto metódy je jej špecifickosť a citlivosť. S existujúcim syfilisom dáva RIF pozitívny výsledok na samom začiatku ochorenia, už do konca 1 týždňa. infekcia, ešte predtým, ako sa objaví chancre.

Falošne pozitívne výsledky sa prakticky nezistia. Nevýhody tejto metódy zahŕňajú technické ťažkosti a potrebu špeciálneho vybavenia.

Preto sa k RIF uchýli, keď sú výsledky iných testov, ktoré je potrebné objasniť, pozitívne.

Imobilizačná reakcia Treponema pallidum je založená na fenoméne imobilizácie, imobilizácie patogénu v prítomnosti testovaného séra.

Treponema pallidum imobilizačná reakcia (TPI)

Imobilizačná reakcia Treponema pallidum je založená na fenoméne imobilizácie, imobilizácie patogénu v prítomnosti testovaného séra. Sérum pacienta so syfilisom obsahuje imunoglobulínové protilátky, ktoré sa nazývajú imobilíny kvôli ich schopnosti imobilizovať spirochéty.

Imobilizíny sa uvoľňujú oveľa neskôr ako iné protilátky a RIBT dáva pozitívny výsledok až po 3 mesiacoch. po infekcii.

Metóda je spoľahlivá, vysoko citlivá a môže byť použitá v prípade falošne pozitívnych výsledkov v iných štúdiách. Je však technicky zložitý, jeho dokončenie trvá dlho a vyžaduje si drahé vybavenie a špeciálne vyškolený personál.

Preto sa RIBT, vyvinutý v polovici minulého storočia, v súčasnosti v klinickej praxi nepoužíva. Vykonáva sa len na výskumné účely.

Precipitačná mikroreakcia má iný názov - rýchly plazmový reagin test

Mikroreakcia MP precipitácie

Precipitačná mikroreakcia má iný názov - rýchly plazmatický reagin test. V reakcii na poškodené zložky membrán tkanivových buniek alebo na zložky membrán samotných treponémov imunitný systém uvoľňuje protilátky nazývané reaginy.

Táto diagnostická metóda je založená na detekcii týchto reaginov. Na indikáciu sa k danému antigénu, ktorý zahŕňa cholesterol, kardiolipín a lecitín, pridávajú častice aktívneho uhlia.

Antigén sa potom zmieša s testovaným sérom. Ak obsahuje reaginy, dochádza k flokulačnej reakcii s tvorbou vločkovitého sedimentu, ktorý je čiernej farby v dôsledku prítomnosti častíc uhlia.

Pozitívny výsledok MP možno pozorovať najskôr o 4-5 týždňov neskôr. po infekcii. Rovnako ako pri iných sérologických reakciách môžu existovať rôzne stupne závažnosti a rôzne titre reaginových protilátok.

S rozvojom patologického procesu sa titer protilátok zvyšuje, ale v neskorších štádiách klesá a reakcia sa stáva slabo pozitívnou alebo pochybnou. Okrem toho má táto výskumná metóda aj veľa falošne pozitívnych výsledkov.

Medzi výhody patrí skutočnosť, že na základe rýchleho plazmatického reagin testu je možné posúdiť priebeh ochorenia a účinnosť jeho liečby. Tu sa predsa používa netreponémový antigén a po zničení treponému je výsledok MP negatívny, pri iných sérologických reakciách s treponémovými antigénmi môže pretrvávať doživotne.

Táto metóda kombinuje elektroforézu a ELISA. Treponema pallidum sa elektroforézou rozdelí na antigénne frakcie. Potom sa výsledný materiál ošetrí sérom pacienta, ktoré v prípade syfilisu obsahuje špecifické imunoglobulíny IgM a IgG. Potom sa pridá sérum s protilátkami proti týmto imunoglobulínom, značené rádioizotopmi alebo enzýmami.

V tomto prípade majú oblasti obsahujúce tieto imunoglobulíny formu charakteristických pruhov. Imunoblotting je moderná metóda diagnostiky syfilisu, ktorá bola vyvinutá relatívne nedávno. Je citlivý a spoľahlivý, ale vyžaduje drahé vybavenie, a preto nie je lacný.

V súčasnosti sa imunoblotting používa najmä na diagnostiku vrodeného syfilisu.

Mikroskopia

Pri štandardnej mikroskopii je ťažké rozlíšiť spirochéty, pretože veľmi zle sa farbia. Preto sa spirochéta nazývala bledá. Mikroskopia sa najlepšie vykonáva pomocou mikroskopu v tmavom poli.

Na rozdiel od bežného mikroskopu je tu bočné osvetlenie zaostrené tak, aby zvýraznilo svietiace treponémy na tmavom pozadí.

Materiálom pre štúdiu je výtok chancre a prvky kožnej vyrážky. Mikroskopia v tmavom poli sa preto používa hlavne na diagnostiku primárneho a sekundárneho syfilisu.

V štádiu terciárneho syfilisu, komplikovaného neurosyfilisom, možno nájsť treponémy v mozgovomiechovom moku a pri vrodenom syfilise - v tkanive pupočníkovej šnúry.

Vizuálna detekcia treponémov je spoľahlivým znakom syfilisu. Patogén však nemusí byť zistený vždy, ale iba v 80% prípadov.

Pri dlhodobom syfilise so špecifickou liečbou a liečbou patologických oblastí kože a slizníc antiseptikami sa znižuje pravdepodobnosť detekcie treponémov v mikroskope v tmavom poli.

Pre efektívnejšiu diagnostiku je možné treponémy liečiť fluorescenčnými protilátkami, ktoré sa na ne fixujú a ešte viac zosilňujú žiaru. Táto metóda si však vyžaduje dodatočné náklady na materiál.

Polymerázová reťazová reakcia (PCR)

Polymerázová reťazová reakcia (PCR)

Polymerázová reťazová reakcia je založená na detekcii mikrobiálneho patogénu (v tomto prípade treponému) jeho DNA. Všetok genetický materiál sa mnohonásobne rozmnožuje za účasti enzýmu DNA polymerázy. DNA treponému sa potom nájde pomocou elektroforézy.

Citlivosť PCR je maximálna, pretože detekcia reťazca mikrobiálnej DNA indikuje syfilis. PCR možno použiť na diagnostiku akéhokoľvek štádia syfilisu.

V závislosti od štádia ochorenia a jeho komplikácií môže byť úlohou biologického materiálu krv, moč, likvor, tkanivo lymfatických uzlín, syfilisový výtok. Citlivosť týchto materiálov na PCR sa môže líšiť.

Väčšina treponémov sa nachádza vo výtoku syfilidov a v uretrálnom alebo vaginálnom nátere sa nemusia vôbec zistiť. Po úspešnej liečbe navyše v tele často nejaký čas zostávajú fragmenty mŕtvych treponémov, ktorých DNA sa identifikuje aj pomocou PCR.

Preto nie je vždy možné pomocou tejto metódy určiť, či je aktívna fáza ochorenia alebo či je už v štádiu hojenia. PCR je však najúčinnejšou metódou diagnostiky syfilisu. Jeho použitie je sťažené zložitosťou prevedenia a potrebou drahého vybavenia.

Ktorá analýza je najlepšia?

Všetko závisí od štádia ochorenia. Pre primárny séronegatívny syfilis je najvhodnejšia mikroskopia v tmavom poli a RIF. Ďalej sa pre primárny séropozitívny a sekundárny syfilis vykonávajú RW a ELISA a na vylúčenie falošne pozitívnych výsledkov sú doplnené RPGA.

V terciárnom období je RW negatívny a RPG a ELISA sú pozitívne. Aby sa vylúčili falošne pozitívne výsledky, sú doplnené RIF. Na diagnostiku vrodeného syfilisu sa vyšetruje matka aj novorodenec. Žena je vyšetrená na RW, RPGA a RIF. U novorodenca môže byť diagnóza doplnená imunoblotovaním. Vo všetkých kontroverzných prípadoch sa používa PCR.

Vážení návštevníci stránky Farmamir. Tento článok nepredstavuje lekársku pomoc a nemal by slúžiť ako náhrada konzultácie s lekárom.