Sifilio rifo analizė. Visapusiška diagnostika naudojant rifo metodą Kas yra rifo kraujo tyrimas

Be abejo, RIBT būtų tikslesnis.

Šis tyrimas naudojamas ELISA rezultatams dar kartą patikrinti, jei kyla abejonių.

Tačiau jei palyginsime šiuos du metodus, RIBT taip pat turi trūkumų:

1. Metodas nėra labai informatyvus ankstyvoje ligos vystymosi stadijoje. Jis tampa teigiamas tik praėjus 2 mėnesiams po užsikrėtimo. Nors ELISA gali būti teigiamas jau nuo 3 savaičių.

2. Brangus ir daug darbo reikalaujantis. Nors ELISA yra paprastas metodas, leidžiantis per trumpą laiką ištirti daug žmonių. Tai nereikalauja daug laiko iš laboranto ir yra nebrangi pacientui.

3. Metodas nėra informatyvus antibiotikų vartojimo laikotarpiu, taip pat tam tikrą laikotarpį po antibakterinio gydymo pabaigos. Pacientas, vartojantis antibiotikus, daro RIBT neigiamą.

Todėl patartina atlikti tyrimus:

  • ne anksčiau kaip po 1 savaitės po vandenyje tirpių penicilinų vartojimo nutraukimo;
  • ne anksčiau kaip po 25 dienų po ilgalaikių (ilgai veikiančių) antibiotikų vartojimo nutraukimo.

Atsižvelgiant į išvardytus trūkumus, RIBT yra labai retai naudojamas metodas sifiliui diagnozuoti. Tačiau pagrindinis tyrimo pranašumas yra didelis jo patikimumas. Todėl RIBT gali būti naudojamas sunkiais diagnostikos atvejais, siekiant patvirtinti arba paneigti infekciją.

Pagrindinės programos:

  • diferencinė diagnozė nuo kitų sifilio tyrimų;
  • neurosifilio diagnozė;
  • įvertinti pacientą iš venerologo įskaitos, jei kitų tyrimų duomenys kelia abejonių;
  • latentinio sifilio nustatymas;
  • visceralinės ligos formos nustatymas;
  • nėščiųjų patologijų nustatymas, kai kiti tyrimai yra neinformatyvūs arba įtariami klaidingai teigiami rezultatai.

ELISA yra atrankos metodas. Tai gali būti patvirtinama tik tuo atveju, jei jau buvo atliktas kitas tyrimas (pavyzdžiui, antikardiolipino tyrimas).

Skirtingai nuo ELISA, RIBT yra savarankiškas tyrimas.

Teigiamas rezultatas yra priežastis nustatyti diagnozę be papildomų diagnostikos metodų. Be to, RIBT, kaip tiksliausias būdas nustatyti Treponema pallidum, yra naudojamas teismo medicinos praktikoje retrospektyviai sifilio diagnozei nustatyti.

Sifilis: RIF, RIBT – skubiai

Jei jums reikia išsitirti dėl sifilio, įskaitant RIF ar RIBT, susisiekite su mūsų klinika. Bendradarbiaujame su keliomis didelėmis laboratorijomis Maskvoje.

Todėl turime plačias diagnostikos galimybes, leidžiančias atlikti beveik bet kokius tyrimus. Tačiau reikia suprasti, kad RIBT nėra diagnostikos metodas, kai galima tikėtis skubos.

Pats tyrimas ir jo rezultatų gavimas neužims daug laiko. Tačiau norint užtikrinti jo tikslumą, reikės tam tikro pasiruošimo.

Pacientas turės:

  • palaukite 2 mėnesius nuo įtariamos infekcijos momento (kitaip rezultatas greičiausiai bus neigiamas);
  • palaukite 1 mėnesį nuo antibiotikų vartojimo momento (jie iškraipo tyrimo duomenis, todėl jo rezultatai yra klaidingi neigiami).

Jei tenkinamos būtinos sąlygos, galite priimti RIBT. Jo rezultatus gausite per 1-2 dienas. Jei paaiškėja, kad jis teigiamas, galite gydytis nuo sifilio mūsų klinikoje.

Turime patyrusių venerologų, kurie padės jums atsikratyti šios pavojingos ligos.

Jei jums reikia atlikti RIBT ir kitus sifilio tyrimus, kreipkitės į kompetentingus venerologus.

Sifilis yra lydimas daugybe simptomų ir turi daug klinikinių formų. Jo atpažinimas grindžiamas išsamiu klinikiniu ir laboratoriniu paciento ištyrimu. Bendras kraujo tyrimas dėl sifilio suteikia mažai informacijos, todėl jis nenaudojamas diagnozuojant ligą.

Analizei gali būti paimtos šios medžiagos:

  • kraujas iš piršto ir venos;
  • cerebrospinalinis skystis – smegenų skystis;
  • kietojo šankro (opų) išsiskyrimas;
  • regioninių limfmazgių sritys.

Medžiagos ir diagnostikos metodo pasirinkimas priklauso nuo ligos stadijos. Apie tai, kokie tyrimai atliekami dėl sifilio, kalbėsime kitame skyriuje.

Laboratorinės ligos diagnostikos metodų klasifikacija

Pradiniame etape galite naudoti bakterioskopinį metodą, pagrįstą patogeno - Treponema pallidum - nustatymu mikroskopu. Ateityje plačiai naudojami serologiniai tyrimai, pagrįsti mikrobų antigenų ir organizmo gaminamų antikūnų biologinėje medžiagoje nustatymu.

Bakteriologiniai tyrimai neatliekami, nes dirbtinėmis sąlygomis sifilio sukėlėjas labai prastai auga maistinėse terpėse.

Visi treponemos nustatymo metodai, ty sifilio tyrimų tipai, yra suskirstyti į dvi dideles grupes:

1. Tiesioginis, kuris tiesiogiai aptinka patį mikrobą:

  • tamsaus lauko mikroskopija (treponemų aptikimas tamsiame fone);
  • RIT testas – triušių užkrėtimas tiriamąja medžiaga;
  • polimerazės grandininė reakcija (PGR), kuri aptinka mikroorganizmo genetinės medžiagos dalis.

2. Netiesioginis (serologinis), pagrįstas antikūnų prieš mikrobą, kuriuos organizmas gamina reaguodamas į infekciją, aptikimu.

Serologiniai tyrimai skirstomi į dvi grupes

Ne treponeminis:

  • komplemento fiksavimo reakcija su kardiolipino antigenu (CCk);
  • mikroprecipitacijos reakcija (MPR);
  • greito plazmos reagino (RPR) testas;
  • bandymas su toluidino raudonu.

Treponemalis:

  • komplemento fiksavimo reakcija su treponeminiu antigenu (RSCT);
  • Treponemos imobilizacijos reakcija (RTI arba RIBT);
  • imunofluorescencinė reakcija (RIF);
  • pasyvi hemagliutinacijos reakcija (RPHA);
  • fermentinis imunologinis tyrimas (ELISA);
  • imunoblotingas.

Šių analizių metodai yra gana sudėtingi, todėl daugiausia dėmesio skirsime tam, kada jos atliekamos ir kiek tikslios informacijos jos pateikia.

Iš karto pasakykime, kad sifilio diagnozavimo pagrindas yra serologiniai metodai. Kaip vadinamas sifilio tyrimas: kiekvienu atveju tyrimas gali apimti skirtingus metodus. Žemiau apie juos kalbėsime išsamiau.

Tiesioginiai testai

Jų aptikimas mikroskopu įtikinamai įrodo treponemų buvimą. Tikimybė susirgti sifiliu siekia 97%. Tačiau mikrobų galima aptikti tik 8 iš 10 pacientų, todėl neigiamas testas neatmeta ligos.

Diagnozė atliekama tais laikotarpiais, kai yra šansų ar odos bėrimas. Būtent šių infekcinių elementų išskyrose jie ieško ligos sukėlėjų.

Veiksmingesnė, bet tuo pat metu brangesnė ir sudėtingesnė analizė yra treponemų aptikimas po išankstinio apdorojimo fluorescenciniais antikūnais. Tai medžiagos, kurios „prilimpa“ prie mikrobų ir sukuria „švytėjimą“ mikroskopo lauke.

Metodų jautrumas mažėja ilgai sergant, gydant opas ir bėrimus antiseptikais, taip pat po gydymo.

Biologinis RIT diagnostikos metodas yra labai specifinis, tačiau brangus, o rezultatas gaunamas tik po ilgo laiko, kai užsikrėtęs gyvūnas susirgo šia liga. Šiuo metu metodas praktiškai nenaudojamas, nors praktiškai pats tiksliausias iš visų. Puikus sifilio kraujo tyrimas treponemų genetinei medžiagai nustatyti yra PGR. Vienintelis jos apribojimas yra santykinai didelė diagnostikos kaina.

Serologiniai metodai

Ne treponeminiai testai

RSKk ir RMP

Garsiausias iš šių testų yra Wassermano reakcija. Tai greitosios diagnostikos metodas (ekspresinis sifilio testas), pagrįstas panašia antikūnų reakcija iš sergančio žmogaus kraujo į pačius treponemus ir į kardiolipiną, gautą iš galvijų širdies. Dėl šios antikūnų ir kardiolipino sąveikos susidaro dribsniai.

Rusijoje ši analizė praktiškai nenaudojama. Jis buvo pakeistas mikronusodinimo reakcija. Metodo trūkumas yra mažas jo specifiškumas. Klaidingai teigiamas kraujo tyrimas dėl sifilio įvyksta sergant tuberkulioze, kraujo ligomis, sistemine raudonąja vilklige, nėštumo metu, gimus vaikui, kraujavimo iš menstruacijų metu ir daugeliu kitų atvejų. Todėl esant teigiamam RW, naudojami tikslesni diagnostikos metodai.

Po užsikrėtimo reakcija tampa teigiama po dviejų mėnesių. Sergant antriniu sifiliu jis teigiamas beveik visiems pacientams.

Mikronusodinimo reakcija, kuri pakeitė Wassermano reakciją, turi panašų mechanizmą. Jis nebrangus, lengvai įgyvendinamas, greitai įvertinamas, tačiau gali duoti ir klaidingai teigiamą rezultatą. Šie du testai naudojami kaip atrankos testai.

RMP tampa teigiamas praėjus mėnesiui po šankro atsiradimo. Tam naudojamas kraujas iš piršto.

Ar sifilio testas gali būti klaidingas? Žinoma, taip, ypač naudojant ne treponeminius testus.

Ūmių klaidingai teigiamų mėginių priežastys naudojant RMP:

  • ūminės infekcinės ligos;
  • plaučių uždegimas;
  • miokardinis infarktas;
  • insultas;
  • traumų ir apsinuodijimų.

Lėtiniai klaidingai teigiami rezultatai dažnai atsiranda sergant šiomis ligomis:

  • tuberkuliozė;
  • bruceliozė;
  • leptospirozė;
  • sarkoidozė;
  • reumatinės ligos;
  • infekcinė mononukleozė;
  • piktybiniai navikai;
  • diabetas;
  • kepenų cirozė ir kt.

Jei atsiranda prieštaringų tyrimų, diagnozei patikslinti naudojami treponeminiai serologiniai tyrimai.

RPR ir toluidino raudonojo testas

Greitas plazmos reagino testas (sifilio rpr testas) yra dar vienas reakcijos su kardiolipino antigenu tipas. Jis naudojamas šiais atvejais:

  • gyventojų patikra;
  • įtarimas dėl sifilio;
  • donoro apžiūra.

Taip pat paminėkime testą su toluidino raudonuoju. Visi šie metodai naudojami gydymo veiksmingumui įvertinti. Jie yra pusiau kiekybiniai, tai yra, jų mažėja sveikstant ir didėja, kai infekcija atsinaujina.

Neigiami ne treponeminių tyrimų rezultatai greičiausiai rodo, kad tiriamasis neserga sifiliu. Todėl išgydymui įvertinti naudojami netreponeminiai testai. Pirmoji tokia analizė turėtų būti atlikta praėjus 3 mėnesiams po gydymo kurso pabaigos.

Treponeminiai tyrimai

Treponeminiai tyrimai yra pagrįsti treponeminių antigenų naudojimu, o tai žymiai padidina jų diagnostinę vertę. Jie naudojami šiose situacijose:

  • teigiamas atrankos testas (mikroprecipitacijos reakcija);
  • klaidingai teigiamų atrankos rezultatų atpažinimas;
  • įtarimas dėl sifilio;
  • latentinių formų diagnostika;
  • retrospektyvi diagnozė, kai pacientas anksčiau sirgo šia liga.

RIT ir RIF

Aukščiausios kokybės (labai jautrios ir labai specifinės) yra RIT ir RIF. Šių metodų trūkumai yra sudėtingumas, laikas ir modernios įrangos bei apmokyto personalo poreikis. Daugumos išgydytų pacientų treponeminiai testai išlieka teigiami daugelį metų, todėl jų negalima naudoti kaip gydymo kriterijų.

RIF tampa teigiamas praėjus dviem mėnesiams po užsikrėtimo. Jei jis yra neigiamas, pacientas yra sveikas, jei jis teigiamas, susirgimo tikimybė yra didelė.

RIT ypač dažnai taikomas esant teigiamiems šlapimo pūslės vėžio rezultatams, siekiant atmesti arba patvirtinti ligą. Jis yra labai jautrus ir leidžia labai tiksliai pasakyti, ar pacientas serga sifiliu, ar ne. Tačiau testas tampa teigiamas tik praėjus trims mėnesiams po užsikrėtimo.

Imunoblotingas

Imunoblotavimas yra net jautresnis nei RIF, bet mažiau jautrus nei RPGA. Jis naudojamas retai, daugiausia naujagimių sifiliui diagnozuoti.

Išvardinti metodai netinka patikrai, tai yra greitam ligos nustatymui, nes teigiami tampa vėliau nei mikroprecipitacijos reakcija.

ELISA ir RPGA

Šiuolaikiniai labai informatyvūs standartizuoti sifilio diagnozavimo metodai – ELISA ir RPGA. Jie yra nebrangūs, greitai montuojami ir išbandomi dideliais kiekiais. Šie tyrimai gali būti naudojami diagnozei patvirtinti.

RPGA analizė tampa teigiama sergant pirminiu seropozityviu sifiliu, tai yra, atsiradus šankui (praėjus mėnesiui po užsikrėtimo). Jis ypač vertingas diagnozuojant vėlyvąsias ir įgimtas ligos formas. Tačiau RPGA turi būti papildyta bent vienu netreponeminiu ir vienu treponeminiu tyrimu, kad būtų nustatytas diagnostinis tikslumas. Šis trigubas testas yra patikimiausias sifilio testas. RPGA trūkumas yra teigiamos reakcijos išlikimas ilgą laiką, o tai neleidžia testo naudoti kaip gydymo kriterijų.

ELISA testas sifiliui nustatyti tampa teigiamas praėjus trims savaitėms po ligos. ELISA trūkumas yra tas, kad jis gali būti klaidingas. Klaidingai teigiama reakcija atsiranda sergant sisteminėmis ligomis, medžiagų apykaitos sutrikimais, taip pat vaikams, gimusiems sergančioms motinoms.

Serologinių metodų trūkumai paskatino sukurti pažangiausius metodus, kurie nesukelia klaidų, tačiau vis dar yra brangūs ir retai naudojami – dujų chromatografija ir masių spektrometrija.

Sifilinės infekcijos diagnozavimo skirtingais etapais algoritmas

Pirminiu seronegatyviu laikotarpiu (iki 2 mėnesių po užsikrėtimo) treponemos paieška atliekama tamsiame lauke arba naudojant fluorescencinius antikūnus.

Pirminiam seropozityviam, antriniam ir latentiniam sifiliui gydyti naudojami RMP ir ELISA, o RPGA – kaip patvirtinantis testas.

Sergantiesiems antrinio sifilio atkryčiais tiriami bėrimo elementai, bandant iš jų išskirti treponemus mikroskopiniam tyrimui.

Trečiuoju laikotarpiu šlapimo pūslės vėžys yra neigiamas trečdaliui pacientų. ELISA ir RPGA yra teigiami, tačiau jie gali rodyti ne tretinį sifilį, o ankstesnę ligą. Silpnai teigiamas testas rodo pasveikimą, o ne tretinį sifilį.

Diagnozuojant „įgimtą sifilį“, atsižvelgiama į motinos ligos buvimą, motinos ir vaiko krūties vėžio dažnio skirtumą, teigiamas ELISA ir RPGA naujagimiui bei imunoblotavimą.

Nėščios moterys turi būti ištirtos dėl sifilio, ypač tos, kurios jau pagimdė negyvai, nėštumas neišsivysčiusi arba persileidimas buvo ankstyvas. Jie atlieka RMP, ELISA, RPGA. Prieš nutraukiant nėštumą, jie tiriami dėl ligos.

Sifilio tyrimo atlikimo taisyklės

Norėdami gauti siuntimą į laboratoriją, turite apsilankyti pas vietinį gydytoją. Norintiems išsitirti greičiau, tai galima padaryti privačioje laboratorijoje be siuntimo (pavyzdžiui, Invitro laboratorijos greitai ir anonimiškai atlieka tyrimą dėl sifilio).

Kaip išsitirti dėl sifilio? Kraujas duodamas ryte, tuščiu skrandžiu. Galite gerti tik švarų vandenį.

Paruošimas: Likus dviem dienoms iki tyrimo, iš dietos turite pašalinti riebų maistą ir ypač alkoholį.

Kaip atliekama analizė?įprastu būdu iš piršto ar alkūnkaulio venos.

Kiek laiko užtrunka pasitikrinti dėl sifilio? Bandymo rezultatas paprastai yra paruoštas kitą dieną. Nuorašas gali būti paimtas iš gydytojo arba laboratorijos.

Kiek laiko galioja analizė? Iki trijų mėnesių.

Cerebrospinalinio skysčio analizė

Kai kuriais atvejais neurosifiliui diagnozuoti atliekamas smegenų skysčio tyrimas.

Šis tyrimas skiriamas visiems pacientams, sergantiems latentiniu sifiliu, jei yra nervų sistemos patologijos požymių, taip pat latentiniu ir vėlyvuoju neurosifiliu.

Be to, analizė atliekama visiems pacientams po pasveikimo, jei išlieka teigiamos serologinės reakcijos. Savo straipsnyje jau rašėme, kad šis reiškinys pasitaiko gana dažnai.

Smegenų skysčio analizę dėl sifilio skiria ir atlieka tik gydytojas.

Cerebrospinalinis skystis gaunamas punkcija tarp dviejų juosmens slankstelių. Jis surenkamas po 4 ml dviejuose mėgintuvėliuose. Tada punkcijos vieta apdorojama jodu ir uždengiama steriliu tvarsčiu. Po punkcijos pacientas bent 3-4 valandas turi gulėti ant pilvo, pakėlus lovos kojos galą, tada gali gulėti ant šono. Po punkcijos nurodytas lovos režimas dvi dienas.

Smegenų skystis iš pirmojo mėgintuvėlio tiriamas taikant visuotinai priimtas reakcijas į baltymų kiekį, ląsteles ir nustatant meningito (smegenų dangalų uždegimo) požymius.

Smegenų skystis iš antrojo mėgintuvėlio tiriamas, ar nėra antikūnų prieš treponemą, naudojant Wassermano reakciją, RMP, RIF ir RIBT, kurias aptarėme aukščiau.

Pagal sutrikimų sunkumą išskiriami keturi smegenų skysčio pakitimų tipai. Išanalizavęs juos, gydytojas gali daryti išvadą apie įvairių formų nervų sistemos pažeidimus (kraujagyslių neurosifilį, sifilinį meningitą, meningovaskulinį sifilį, tabes dorsalis, vėlyvąjį mezenchiminį neurosifilį), taip pat apie paciento, kurio serologinis tyrimas teigiamas, pasveikimą. bandymai.

Imunofluorescencinė reakcija (RIF) – tai serologinė reakcija, leidžianti aptikti antikūnus prieš žinomus antigenus. Metodas apima dažytų tepinėlių mikroskopiją.

Ši reakcija naudojama imunologijoje, virusologijoje ir mikrobiologijoje. Tai leidžia nustatyti virusų, bakterijų, grybelių, pirmuonių ir ICC buvimą. RIF labai plačiai naudojamas diagnostikos praktikoje virusų ir bakterijų antigenams aptikti infekcinėje medžiagoje. Metodas pagrįstas fluorochromo gebėjimu prisijungti prie baltymų nepažeidžiant jų imunologinio specifiškumo. Daugiausia naudojamas šlapimo takų infekcijoms diagnozuoti.

Imunofluorescencinei reakcijai atlikti yra šie metodai: tiesioginis, netiesioginis, su komplementu. Tiesioginis metodas apima medžiagos dažymą fluorochromais. Dėl mikrobų arba audinių antigenų gebėjimo švytėti fluorescencinio mikroskopo UV spinduliuose, jie apibrėžiami kaip ląstelės su ryškiai žaliu kraštu.

Netiesioginis metodas apima antigeno + antikūno komplekso nustatymą. Tam eksperimentinė medžiaga apdorojama antikūnais iš antimikrobinio triušio serumo, skirto diagnostikai. Antikūnams prisijungus prie mikrobų, jie atskiriami nuo nesusijungusių ir apdorojami fluorochromu pažymėtu anti-triušio serumu. Po to mikrobų + animikrobinių antikūnų + anti-triušio antikūnų kompleksas nustatomas ultravioletiniu mikroskopu taip pat, kaip ir tiesioginiu metodu.

Imunofluorescencinė reakcija yra būtina sifilio diagnozei. Fluorochromo įtakoje sifilio sukėlėjas identifikuojamas kaip ląstelė su geltonai žaliu kraštu. Liuminescencijos nebuvimas reiškia, kad pacientas nėra užsikrėtęs sifiliu. Šis testas dažnai skiriamas teigiamai Wasserman reakcijai. Šis metodas yra labai efektyvus diagnozuojant, nes leidžia nustatyti patogeną ankstyvose ligos stadijose.

Be to, kad RIF leidžia diagnozuoti sifilį, jis taip pat naudojamas nustatyti patogenų, tokių kaip chlamidijos, mikoplazmos, trichomonai, taip pat gonorėjos ir lytinių organų pūslelinės sukėlėjai, buvimą.

Analizei naudojami tepinėliai arba veninis kraujas. Tepinėlio paėmimo procedūra yra visiškai neskausminga ir nekelia jokio pavojaus. Šiai analizei būtina pasiruošti. Prieš dvylika valandų nerekomenduojama naudoti higienos priemonių, tokių kaip malo ar geliai. Taip pat kartais, gydytojo nurodymu, atliekama provokacija. Tam rekomenduojama vartoti aštrų maistą ar alkoholį arba suleisti provokuojančių medžiagų, pavyzdžiui, gonovakciną ar pirogenalą. Be to, intervalas tarp antibakterinių vaistų vartojimo ir tyrimo atlikimo turi būti ne trumpesnis kaip keturiolika dienų.

Vertinant rezultatus, reikia atsižvelgti į tai, kad liuminescencija stebima ne tik gyvose, bet ir negyvose bakterijose, ypač tai pasakytina apie chlamidijas. Po antibiotikų kurso švyti ir negyvos chlamidijų ląstelės.

Tinkamai paruošus pacientą ir laikantis tepinėlio technikos, ši analizė leidžia nustatyti ligas ankstyvosiose stadijose, o tai labai svarbu laiku gydyti. Teigiami šio metodo aspektai yra trumpas laikas gauti rezultatus, paprastas įgyvendinimas ir nedidelės analizės kainos.

Trūkumai apima tai, kad analizei atlikti reikia gana daug bandomosios medžiagos. Be to, rezultatus turėtų įvertinti tik patyręs specialistas.

RIF, RIBT, RPGA

RIF – imunofluorescencinė reakcija- treponeminis testas. Tai vienas jautriausių sifilio tyrimų. RIF tampa teigiamas praėjus 10-20 dienų po užsikrėtimo, todėl jis klasifikuojamas kaip ankstyvo sifilio nustatymo metodas.

Indikacijos atlikti RIF:

  • RIF atliekamas asmenims, turintiems sifilio simptomų, turintiems neigiamų reakcijų – RMP, RV;
  • kaip diferencinė reakcija asmenims, turintiems teigiamų RW reakcijų, mikroreakcijų ir simptomų nebuvimo;
  • nėščioms moterims, nesant klinikinių apraiškų ir sifilio anamnezėje.

RIF vykdymo metodika:

  • Atliekant reakciją, į paciento serumą pridedamas triušio kraujas, užkrėstas Treponema pallidum (sifilio sukėlėja) ir fluorescencinis (šviečiantis) serumas. Tyrimas susideda iš kompleksų švytėjimo stebėjimo fluorescenciniu mikroskopu. Reakcijos rezultatai interpretuojami priklausomai nuo švytėjimo intensyvumo nuo 1+ iki 4+, kas rodo sifilio buvimą. Švytėjimo nebuvimas – neigiamas RIF rezultatas reiškia, kad tiriamasis yra sveikas. Klaidingi analizės rezultatai yra itin reti sisteminių procesų, nėštumo ir kt.
  • Reakcija vykdoma modifikacijomis RIF-200 ir RIF-avs (absorbcija).
  • Pirminio sifilio reakcijos jautrumas yra apie 85 proc.
  • antriniam sifiliui - 100 proc.
  • su tretiniu sifiliu – 98-100 proc.

RIF neigiamas poveikis pasireiškia per kelerius metus po sifilio gydymo. Po antisifilinio gydymo būtina stebėti rodiklius laikui bėgant.

RIBT– Treponema pallidum imobilizacijos reakcija yra specifiškiausias kraujo tyrimas dėl sifilio. RIBT – tai kokybiškas, brangus kraujo tyrimas, kurį gali atlikti gerai įrengti laboratoriniai kompleksai. RIBT yra pagrindinė latentinės sifilio, neurosifilio ir viscerosifilio formų reakcija. Leidžia atskirti klaidingai teigiamas reakcijas nuo tikrojo sifilio.

Reakcija pagrįsta sifilio sukėlėjo imobilizavimu (imobilizavimu) su rūšiai būdingais antikūnais. Mikroskopiniu tyrimu nuskaitomas reakcijos rezultatas: 0-20% - neigiama, 21-30% - abejotina, 31-50% - silpnai teigiama, 51-100% - teigiama reakcija. Tai reiškia, kad teigiami sifilio rezultatai apima tuos, kai RIBT yra daugiau nei 50%. Sergant sifiliu, RIBT teigiamas tampa gana lėtai: pirminiu sifilio periodu vis dar yra neigiamas, antriniu šviežiu periodu – 50 proc., antrinio atkryčio periodu – 90-100 proc. tretiniu laikotarpiu jis yra teigiamas 99-100%.

RIBT negatyvumas buvo vykdomas dešimtmečius, todėl nėra teisėta jį naudoti kaip gydymo patikimumo kriterijų, tačiau būtinas dinaminis stebėjimas po antisifilinio gydymo.

RIBT reakciją patartina atlikti ne anksčiau kaip po 30 dienų po gydymo pabaigos. RPHA – pasyvi hemagliutinacijos reakcija – reiškia treponeminius tyrimus ir atliekama kartu su ne treponeminiais tyrimais. Naudojamas sifilio diagnozei patvirtinti bet kuriame etape.

Reakciją patartina atlikti praėjus 4 savaitėms po numatomos infekcijos. Vykdant reakciją, į paciento kraujo serumą pridedamas vaistas, pagamintas iš gyvūninės kilmės raudonųjų kraujo kūnelių, įjautrintų Treponema pallidum antigenu, sifilio sukėlėju.

RPHA reakcijos esmė – klijavimas (agliutinacija) esant antikūnams prieš treponemą ir agliutinato susidarymas – figūrą, kurią stebi laborantė. Reakcija vertinama skaičiumi +: 4+ - labai teigiamas rezultatas, 3+ - teigiamas, 2+ - silpnai teigiamas, 1+ - abejotinas, - - neigiamas rezultatas. Jei reakcija teigiama, atliekamas kiekybinis antikūnų koncentracijos (titro) įvertinimas. Sifiliui progresuojant, antikūnų titras nuolat didėja.

RPGA išlieka teigiamas dešimtmečius po gydymo nuo sifilio, todėl negali būti naudojamas kaip išgydymo tikrumo kriterijus. Tačiau būtina stebėti RPHA antikūnų titrą laikui bėgant.

Metodas yra labai jautrus. RPGA rezultatai gali būti klaidingai teigiami. Tokius analizės rezultatus gali lemti jungiamojo audinio ligos, kai kurios infekcijos ir kt.

Tiesą sakant, yra ne viena analizė – jų yra keletas. Norint nustatyti sifilį, kraujas tiriamas keliais būdais. Be kraujo, laboratorinėje šios ligos diagnostikoje naudojama ir kita biologinė medžiaga, kurioje yra patogenas spirochete pallidum (sin. – treponema pallidum).

Tai išskyros iš sifilidų (specifinių opų ir bėrimų ant odos ir gleivinių), sergant neurosifiliu – smegenų skystis (CSF).

Visi sifilio diagnozavimo metodai gali būti suskirstyti į tiesioginius ir netiesioginius. Tiesioginiai metodai yra skirti tiesiogiai nustatyti Treponema pallidum. Kalbant apie netiesioginius, jie yra pagrįsti antikūnų prieš spirochetą aptikimu. Yra antikūnų, o tai reiškia, kad yra pati spirocheta. Netiesioginiai sifilio diagnozavimo metodai yra ne kas kita, kaip serologinės reakcijos, kurių metu kaip tiriamoji medžiaga naudojamas kraujo serumas.

Antikūnai aptinkami, kai jie sąveikauja su antigenais. Serologinėms reakcijoms atlikti naudojami preparatai, kurių sudėtyje yra tam tikro antigeno. Priklausomai nuo šio antigeno tipo, serologinės reakcijos gali būti treponeminės arba netreponeminės. Treponema pallidum specifinis antigenas dalyvauja treponeminėse reakcijose.

Treponeminės reakcijos apima:

  • RSK – komplemento fiksacijos reakcija su treponeminiu antigenu
  • RPHA – pasyvi hemagliutinacijos reakcija
  • ELISA – fermentinis imunologinis tyrimas
  • RIF – imunofluorescencinė reakcija
  • RIBT – Treponema pallidum imobilizacijos reakcija

Ne treponeminės serologinės reakcijos apima komplemento fiksacijos testą su kardiolipino antigenu ir mikroprecipitacijos testą arba greitą plazmos atkūrimo testą.

Šiose reakcijose naudojamas kardiolipino antigenas nėra spirochete pallidum antigenas. Tai ekstraktas iš galvijų širdies, savo struktūra panaši į spirochetų ląstelių membranos kardiolipino-fosfolipidinį antigeną.

Todėl antikūnai, gaminami pasirodžius sifilio sukėlėjui, taip pat reaguos į šį antigeną.

Kalbėdami apie tyrimus dėl sifilio, jie dažniausiai turi omenyje šį metodą – Wassermano reakciją

Wassermano reakcija (RW)

Kalbėdami apie tyrimus dėl sifilio, jie dažniausiai turi omenyje šį metodą – Wassermano reakciją. Šią reakciją sifiliui diagnozuoti sukūrė vokiečių imunologas Wassermanas daugiau nei prieš šimtmetį, pačioje praėjusio amžiaus pradžioje. Tačiau ji vykdoma ir šiandien, nors ir su reikšmingais pakeitimais.

Iš esmės RW dabartinėje versijoje reiškia RSK. Imunologijoje komplementas reiškia plazmos baltymų, sudarančių įgimtą imuninę sistemą, sistemą. RW yra pagrįstas antigenų reakcija su antikūnais, dalyvaujant komplementui. Sifiliu sergančio paciento serume yra antikūnų prieš Treponema pallidum. Jei į tokį serumą dedama antigenų, antikūnai su jais sureaguos.

RW atveju naudojami paruošti specifinių ir nespecifinių antigenų rinkiniai. Specifiniai antigenai buvo išskirti iš Treponema pallidum kultūrų, auginamų maistinėse terpėse.

Nespecifinius antigenus atstovauja galvijų širdies kardiolipinas. Taigi RW galima priskirti tiek treponeminiams, tiek netreponeminiams tyrimams.

Specifinių ir nespecifinių antigenų reakcija su tiriamojo serumo antikūnais išoriškai nematoma. Jo indikacijai naudojami avių raudonieji kraujo kūneliai.

Kaip imunizuoto triušio hemolizinio serumo dalis, jie pridedami prie tiriamosios medžiagos. Kas nutinka galų gale?

Jei tiriamasis yra sveikas, jo serume nėra antikūnų prieš treponemą. Tuo pačiu metu, veikiant komplementui, avių eritrocitai hemolizuojami (sunaikinami), ir tai aiškiai matoma mėgintuvėlyje, kurio turinys yra vienodos spalvos be nuosėdų („lako kraujas“).

Taigi hemolizė rodo antikūnų nebuvimą. Tokiu atveju reakcija yra neigiama.

Pacientams, sergantiems sifiliu, yra atvirkščiai. Juose visas komplementas surišamas formuojantis imuniniams antigenų kompleksams su antikūnais ir, paprasčiau tariant, jo nepakanka raudoniesiems kraujo kūneliams sunaikinti.

Todėl hemolizės nebuvimas rodo, kad yra antikūnų prieš spirochetus ir atitinkamai sifilį. Tokiu atveju reakcija yra teigiama ir nurodoma pliuso ženklu.

Tiksliau, gali būti keletas privalumų, nes hemolizės uždelsimas yra įvairaus sunkumo:

  • 1 pliusas – reakcija abejotina
  • 2 pliusai – reakcija silpnai teigiama
  • 3 pliusai – teigiama reakcija
  • 4 pliusai – reakcija labai teigiama.

Medicinos slenge pliusai šiuo atveju vadinami kryžiais, o rezultatas nurodomas atitinkamai: +, ++, +++ arba ++++.

RW technika yra gana paprasta, nebrangi, užima mažai laiko ir nereikalauja sudėtingos laboratorinės įrangos. Todėl šios reakcijos griebiamasi visur, ir ne tik esant specifinėms indikacijoms (įtarus sifilį, esant būdingiems simptomams).

Ji atliekama kaip atrankos metodas įprastų medicininių apžiūrų metu, nėščiosioms registracijos metu ir visiems pacientams hospitalizacijos metu.

Tuo tarpu technika nėra be reikšmingų trūkumų. Pirma, tai ne visada duoda teigiamą rezultatą esamo sifilio atveju. Juk antikūnai susidaro ne iš karto, o po kurio laiko.

Šis laikotarpis, kai nėra antikūnų, vadinamas seronegatyviu sifilio periodu ir trunka 5-8 savaites. nuo užsikrėtimo momento.

O seropozityvus sifilio periodas prasideda pirminio sifilio pabaigoje. Antrinis sifilis beveik visada yra seropozityvus, o tretinis komplikuotas sifilis gali būti seronegatyvus. Šiuo atveju tai visiškai nereiškia, kad Treponema pallidum organizme nėra. Tiesiog imuninė sistema per daugelį metų išseko, o antikūnai nustojo išsiskirti.

Kita vertus, kai kuriais atvejais, net ir sėkmingai išgydžius sifilį, 1-2 kryželiai analizėje gali išlikti daugelį metų, o kartais ir visą gyvenimą.

Taigi, kryžių skaičius RW nepriklauso nuo Treponema pallidum aktyvumo ir sifilio sunkumo. Tam naudojamas kitas indikatorius – antikūnų titras. Tai yra didžiausias serumo praskiedimo laipsnis, kuriam esant pasireiškia ryškiai teigiama reakcija.

Kitas RW trūkumas yra mažas jo specifiškumas, dažnai gaunami klaidingai teigiami rezultatai, kai hemolizė uždelsta, nesant sifilio.

Tarp klaidingai teigiamų rezultatų priežasčių yra kitos bakterinės ir virusinės infekcijos, sisteminė kolagenozė, nėštumas, alkoholizmas, narkomanija, vaistai, mitybos klaidos ir daug daugiau. Todėl labai svarbu tinkamai pasiruošti analizei.

Nutraukite antibiotikų vartojimą 7-10 dienų prieš kraujo paėmimą. Per paskutines 24 valandas turėtumėte susilaikyti nuo didelio, riebaus maisto ir alkoholio.

Kraujas analizei imamas iš venos tuščiu skrandžiu. Neigiami rezultatai, kai nėra būdingų klinikinių apraiškų šankrao pavidalu, labai tiksliai rodo, kad nėra sifilio. Jei yra bent vienas iš kryžių, jie griebiasi kitų diagnostikos metodų.

Pasyvioji hemagliutinacijos reakcija susideda iš raudonųjų kraujo kūnelių klijavimo arba agliutinacijos.

Pasyvi hemagliutinacijos reakcija (RPHA)

Pasyvioji hemagliutinacijos reakcija susideda iš raudonųjų kraujo kūnelių klijavimo arba agliutinacijos. Treponeminiai antigenai fiksuojami ant šioje reakcijoje naudojamų raudonųjų kraujo kūnelių. Tada į šią medžiagą pridedamas tiriamasis serumas.

Jei jame yra antikūnų, jie sąveikauja su raudonųjų kraujo kūnelių antigenais, o tai sukelia jų agliutinaciją. Taigi, agliutinacija rodo teigiamą RPHA ir esamą sifilį, o agliutinacijos nebuvimas ir neigiamas RPHA rodo, kad tiriamasis yra sveikas. Čia taip pat yra 4 laipsnių teigiami rezultatai su skirtingais antikūnų titrais.

RPGA jautrumas yra didesnis, palyginti su RW. Tačiau šis testas yra neigiamas pačioje ligos pradžioje, pirmąsias 2-4 savaites, o kartais ir 6 savaites. Vėliau antriniu ir tretiniu laikotarpiu RPGA visada yra teigiamas, kaip ir latentinio sifilio atveju.

Todėl juo galima diagnozuoti ligą be aiškių klinikinių apraiškų. Kaip ir kiti treponeminiai tyrimai, RPGA išlieka teigiamas visą gyvenimą, net ir visiškai pasveikus. Todėl jis negali būti naudojamas vertinant sifilio gydymo tinkamumą.

Jis gali tapti neigiamas tik tais atvejais, kai gydymo priemonės buvo pradėtos vos tik ligoniui susirgus sifiliu.

RPGA taip pat duoda klaidingai teigiamus rezultatus kai kurių ligų ir patologinių būklių atveju. Klaidingi teigiami rezultatai skiriasi nuo tikrų teigiamų rezultatų tuo, kad jie tampa neigiami labai greitai, po kelių savaičių ar mėnesių.

Be to, tai atsitinka spontaniškai, net ir be specialaus gydymo. RPGA taip pat reiškia atrankos diagnostikos metodus. Jei rezultatas teigiamas, atliekami kiti treponeminiai tyrimai.

Fermentinis imunologinis tyrimas taip pat pagrįstas antigeno ir antikūno reakcija.

Fermentinis imunologinis ELISA tyrimas

Fermentinis imunologinis tyrimas taip pat pagrįstas antigeno ir antikūno reakcija. Treponeminiai antigenai fiksuojami ant bet kokios kietos medžiagos paviršiaus.

Paprastai tai yra polistirenas, iš kurio gaminamos modernios bandymo sistemos, kurios atrodo kaip plokštės su šuliniais. Į šias duobutes pilamas tiriamasis serumas. Jei šiame serume yra antikūnų, jie sudaro kompleksus su tiriamųjų sistemų antigenais.

Geltona tiriamosios medžiagos spalva rodo antikūnų buvimą. Kuo daugiau šių antikūnų, tuo intensyvesnis dažymas.

Antikūnai priklauso imunoglobulinams (Ig) ir yra atstovaujami keliomis atmainomis - IgA, IgM ir IgG. Skirtingais ligos laikotarpiais jų skaičius nėra vienodas. Todėl pagal vieno ar kito Ig paplitimą galima spręsti apie ligos trukmę.

ELISA testas tampa teigiamas jau po 3 savaičių ir gali išlikti visą likusį gyvenimą. Tačiau čia taip pat dažnai pasitaiko klaidingų teigiamų rezultatų, o tai yra reikšmingas trūkumas.

Tarp ELISA privalumų galima paminėti metodo prieinamumą ir galimybę atlikti daugybę tyrimų per gana trumpą laiką.

Imunofluorescencinė reakcija pagrįsta šviesa antigeno-antikūno komplekso indikacija

Imunofluorescencinė reakcija (RIF)

Imunofluorescencinė reakcija pagrįsta šviesa antigeno-antikūno komplekso indikacija. Esamas antigenas sumaišomas su tiriamuoju serumu. Jei yra antikūnų, jie sudaro imuninius kompleksus su antigenais.

Po to į diagnostinę medžiagą pridedamas priešrūšinis triušio serumas, kuriame yra fluoresceino, ultravioletinėje šviesoje švytinčios medžiagos. Švytėjimas aptinkamas žiūrint pro fluorescencinį mikroskopą.

Priklausomai nuo švytėjimo, kurio spalva svyruoja nuo vos pastebimos iki geltonai žalios, intensyvumo, yra 4 teigiamo RIF laipsniai.

Šio metodo pranašumai yra jo specifiškumas ir jautrumas. Esant sifiliui, RIF duoda teigiamą rezultatą pačioje ligos pradžioje, jau 1 savaitės pabaigoje. infekcija, net prieš pasirodant šankui.

Klaidingai teigiami rezultatai praktiškai neaptinkami. Šio metodo trūkumai yra techniniai sunkumai ir specialios įrangos poreikis.

Todėl RIF kreipiamasi, kai kitų tyrimų, kuriuos reikia patikslinti, rezultatai yra teigiami.

Treponema pallidum imobilizacijos reakcija pagrįsta imobilizacijos reiškiniu, patogeno imobilizavimu, esant tiriamam serumui.

Treponema pallidum imobilizacijos reakcija (TPI)

Treponema pallidum imobilizacijos reakcija pagrįsta imobilizacijos reiškiniu, patogeno imobilizavimu, esant tiriamam serumui. Sifiliu sergančio paciento serume yra imunoglobulino antikūnų, kurie dėl gebėjimo imobilizuoti spirochetas vadinami imobilinais.

Imobilizinai išsiskiria daug vėliau nei kiti antikūnai, o RIBT teigiamą rezultatą duoda tik po 3 mėnesių. po užsikrėtimo.

Metodas yra patikimas, labai jautrus ir gali būti naudojamas, jei kituose tyrimuose gaunami klaidingi teigiami rezultatai. Tačiau jis yra techniškai sudėtingas, užtrunka daug laiko ir reikalauja brangios įrangos bei specialiai apmokytų darbuotojų.

Todėl praėjusio amžiaus viduryje sukurtas RIBT šiuo metu klinikinėje praktikoje nenaudojamas. Tai atliekama tik tyrimo tikslais.

Kritulių mikroreakcija turi kitą pavadinimą – greitas plazmos reagino testas

MP kritulių mikroreakcija

Kritulių mikroreakcija turi kitą pavadinimą – greitas plazmos reagino testas. Reaguodama į pažeistus audinių ląstelių membranų komponentus arba į pačių treponemų membranų komponentus, imuninė sistema išskiria antikūnus, vadinamus reaginais.

Šis diagnostikos metodas pagrįstas šių reaginų nustatymu. Medžio anglies dalelės pridedamos prie tam tikro antigeno, kuris apima cholesterolį, kardiolipiną ir lecitiną.

Tada antigenas sumaišomas su tiriamuoju serumu. Jei jame yra reaginų, įvyksta flokuliacijos reakcija ir susidaro flokuliuojančios nuosėdos, kurios dėl anglies dalelių yra juodos spalvos.

Teigiamas MP rezultatas gali būti pastebėtas ne anksčiau kaip po 4-5 savaičių. po užsikrėtimo. Kaip ir kitų serologinių reakcijų atveju, gali būti skirtingo sunkumo laipsnio ir skirtingų reagino antikūnų titrų.

Vystantis patologiniam procesui, antikūnų titras didėja, tačiau vėlesnėse stadijose mažėja, reakcija tampa silpnai teigiama arba abejotina. Be to, šis tyrimo metodas taip pat turi daug klaidingai teigiamų rezultatų.

Privalumai yra tai, kad remiantis greito plazmos reagino testu galima spręsti apie ligos eigą ir gydymo efektyvumą. Juk čia naudojamas netreponeminis antigenas, o sunaikinus treponemą MP rezultatas tampa neigiamas, o kitose serologinėse reakcijose su treponeminiais antigenais gali išlikti visą gyvenimą.

Šis metodas sujungia elektroforezę ir ELISA. Treponema pallidums elektroforezės būdu išskiriamos į antigenines frakcijas. Tada gauta medžiaga apdorojama paciento serumu, kuriame, sergant sifiliu, yra specifinių imunoglobulinų, IgM ir IgG. Po to pridedamas serumas su antikūnais prieš šiuos imunoglobulinus, pažymėtus radioizotopais arba fermentais.

Šiuo atveju sritys, kuriose yra šių imunoglobulinų, yra būdingų juostelių pavidalu. Imunoblotavimas yra modernus sifilio diagnozavimo metodas, kuris buvo sukurtas palyginti neseniai. Jis jautrus ir patikimas, tačiau reikalauja brangios įrangos, todėl nėra pigus.

Šiuo metu imunoblotingas daugiausia naudojamas įgimtam sifiliui diagnozuoti.

Mikroskopija

Su standartine mikroskopija spirochetas sunku atskirti, nes jie labai prastai dažo. Štai kodėl spirocheta buvo vadinama blyškia. Mikroskopiją geriausia atlikti naudojant tamsaus lauko mikroskopą.

Skirtingai nuo įprasto mikroskopo, šoninis apšvietimas sufokusuotas taip, kad tamsiame fone būtų išryškinti šviečiantys treponemai.

Tyrimo medžiaga yra šanko išskyros ir odos bėrimo elementai. Todėl tamsaus lauko mikroskopija daugiausia naudojama pirminiam ir antriniam sifiliui diagnozuoti.

Tretinio sifilio, komplikuoto neurosifiliu, stadijoje treponemų galima rasti smegenų skystyje, o esant įgimtam sifiliui – virkštelės audinyje.

Vizualinis treponemų aptikimas yra patikimas sifilio požymis. Tačiau ligos sukėlėjas gali būti aptiktas ne visada, o tik 80 proc.

Sergant ilgalaikiu sifiliu, specifiniu gydymu ir odos bei gleivinių patologinių zonų gydymu antiseptikais, sumažėja treponemų aptikimo tikimybė tamsiojo lauko mikroskopu.

Siekiant efektyvesnės diagnostikos, treponemos gali būti gydomos fluorescenciniais antikūnais, kurie fiksuojami ant jų ir dar labiau sustiprina švytėjimą. Tačiau šis metodas reikalauja papildomų materialinių išlaidų.

Polimerazės grandininė reakcija (PGR)

Polimerazės grandininė reakcija (PGR)

Polimerazės grandininė reakcija pagrįsta mikrobinio patogeno (šiuo atveju treponemos) aptikimu pagal jo DNR. Visa genetinė medžiaga daug kartų padauginama dalyvaujant fermentui DNR polimerazei. Tada treponemos DNR randama naudojant elektroforezę.

PGR jautrumas yra maksimalus, nes mikrobinės DNR grandinės aptikimas rodo sifilį. PGR gali būti naudojamas diagnozuoti bet kurią sifilio stadiją.

Priklausomai nuo ligos stadijos ir jos komplikacijų, biologinės medžiagos vaidmuo gali būti kraujas, šlapimas, smegenų skystis, limfmazgių audinys, sifilio išskyros. Šių medžiagų jautrumas PGR gali skirtis.

Dauguma treponemų randama sifilidų išskyrose, o šlaplės ar makšties tepinėlyje jų gali ir visai neaptikti. Be to, po sėkmingo gydymo dažnai organizme kurį laiką lieka negyvų treponemų fragmentai, kurių DNR taip pat identifikuojama PGR būdu.

Todėl taikant šį metodą ne visada įmanoma nustatyti, ar yra aktyvi ligos fazė, ar ji jau gijimo stadijoje. Tačiau PGR yra veiksmingiausias sifilio diagnozavimo metodas. Jį naudoti trukdo vykdymo sudėtingumas ir brangios įrangos poreikis.

Kuri analizė yra geriausia?

Viskas priklauso nuo ligos stadijos. Pirminio seronegatyvaus sifilio atveju tinkamiausia yra tamsaus lauko mikroskopija ir RIF. Be to, pirminio seropozityvaus ir antrinio sifilio atveju atliekami RW ir ELISA, o norint pašalinti klaidingai teigiamus rezultatus, jie papildomi RPGA.

Tretiniame laikotarpyje RW yra neigiamas, o RPG ir ELISA – teigiami. Kad būtų išvengta klaidingų teigiamų rezultatų, jie papildomi RIF. Įgimtam sifiliui diagnozuoti tiriama ir mama, ir naujagimis. Moteris tiriama dėl RW, RPGA ir RIF. Naujagimiui diagnozę galima papildyti imunoblotingu. Visais ginčytinais atvejais naudojamas PGR.

Mieli Farmamir svetainės lankytojai. Šis straipsnis nėra medicininė konsultacija ir neturėtų pakeisti konsultacijos su gydytoju.