Скрининг – установяване на честотата на неразпознатите заболявания чрез бързи тестове. В масовата практика на изследване и скрининг най-често се използват имуноензимни методи, които могат да дадат както фалшиво положителни, така и фалшиво отрицателни резултати. Тези тестове са разработени с цел изследване на донорска кръв и поради това са с висока чувствителност, така че дори евентуална грешка при тяхното изследване дава положителен резултат. В този случай кръвта трябва да бъде унищожена, а самият донор се подлага на контролно изследване. Фалшивите отрицателни резултати зависят от факта, че инкубационният период на HIV инфекцията е 1-3 месеца. През този период човекът е вирусоносител, който тестът за антитела срещу ХИВ не открива.
Всеки трябва да има възможност да се изследва за антитела срещу ХИВ. Тестването може да бъде доброволно или задължително. При доброволно анонимно изследване пациентът се регистрира под номер, като в документа не се вписва нито адресът, нито фамилията на пациента. При поверителното тестване информацията за самоличността на пациента се отразява в неговата медицинска документация. Тестът за ХИВ трябва да бъде придружен от консултиране на пациента както преди, така и след тестването. Адекватното информиране на пациента става най-добрата психотерапия. Пациентите се информират окончателно за резултатите от теста само след потвърждение на положителните резултати от теста. Това се прави, за да се избегнат трагични случаи като този, който се случи в Рига през 1998 г.: двойката, след като научи за положителните резултати от теста на един от тях, се самоуби; Посмъртните изследвания не разкриват доказателства за HIV инфекция. Въпросът за задължителното изследване и скрининг за ХИВ е много спорен. В САЩ от 1985 г. е въведен задължителен тест в армията. В някои щати тестването за СПИН е задължително преди брака, а през 1997 г. щат Ню Йорк започна да изисква тестване за ХИВ на всички новородени.
Много чуждестранни експерти смятат, че практиката на задължителното изследване за ХИВ не само нарушава правата на човека, но и се оказва неефективна като бариера пред разпространението на епидемията, поради което нейното прилагане трябва да бъде ограничено.
У нас задължителната регистрация на заболяванията от СПИН е въведена през 1985 г., от момента на идентифициране на първия случай на заболяването. През 1987 г. по инициатива на епидемиолози Всесъюзното радио излъчи съобщение за откриването на анонимен кабинет за изследване на СПИН в Москва. Няколко дни по-късно този офис започна да работи, приемайки до хиляда души на месец. В резултат на това от 1987 до 1992г. Проведени са над 85 милиона теста за ХИВ.
В Русия широко се използва „методът на епидемиологичното изследване“. Епидемиологичното изследване е идентифициране на източника на инфекция във всеки случай на инфекция, ако е възможно, възстановяване на цялата „верига“ на предаване на инфекцията и същевременно предприети мерки за предотвратяване на разпространението на инфекцията. Във Федералния закон „За предотвратяване на разпространението на болести, причинени от вируса на човешката имунна недостатъчност в Руската федерация“, приет през 1995 г., изискването за задължително изследване за СПИН на „партньори“ беше премахнато. Премахнато е и задължителното профилактично наблюдение на ХИВ-инфектирани в лечебните заведения. Според закона на задължително изследване за СПИН подлежат само донорите на кръв, биологични течности, органи и тъкани, както и представителите на определени професии.
Често срещан диагностичен метод днес е скринингът. ХИВ може лесно да бъде открит с този метод дори в ранните етапи. С помощта на такова изследване е възможно да се определи наличието на антитела срещу това опасно заболяване в кръвта на пациента. Каква диагностика за скрининг на ХИВ се използва в съвременната медицина и какво трябва да знаете за нея?
Метод за скрининг за диагностициране на HIV инфекция: описание
Днес се използват различни реактиви за скринингови изследвания, с помощта на които е възможно да се диагностицира вирусът на имунната недостатъчност. Преди няколко години за това бяха използвани ензими от трето поколение. Тяхната ефективност и чувствителност не бяха достатъчно високи. Използваните в момента реактиви от четвърто поколение показват по-добри резултати. С тяхна помощ е възможно да се открият антитела и антитела срещу HIV 1, 2 (скринингът се извършва в лабораторни условия). Основното предимство на този вид изследване е възможността за откриване не само на антитела, но и на антигени. Това позволява на медицинските специалисти да определят с какъв тип вирус на имунна недостатъчност е заразен човек. С помощта на такъв скрининг за ХИВ инфекция също е възможно да се идентифицират носители на вируса, при които той не се проявява, но може да се предава на други хора.
Най-често срещаният тест, използван за идентифициране на това заболяване в обществени и частни институции, е тестът ELISA. Препоръчително е да се извърши три до четири седмици след заразяването. Говорим за незащитени контакти с нов партньор, кръвопреливане и т.н.
Какво друго трябва да знаете за скрининговите тестове за ХИВ?
Важно е да знаете, че такова изследване се извършва чрез добавяне на кръвта на пациента към индикатор със специални реактиви. Вземането на кръв се извършва на празен стомах. От последното хранене до изследването трябва да минат поне осем часа.
Скрининговият тест играе важна роля при диагностицирането на HIV инфекцията. Може да се използва за определяне на наличието или отсъствието на вируса на имунната недостатъчност в ранните етапи.
Резултатите от такова изследване могат да бъдат положителни, отрицателни или съмнителни. Последните са изключително редки. Съмнителен резултат показва, че процедурата е извършена неправилно или реагентите са с лошо качество. Ако резултатът е положителен, се извършват допълнителни изследвания. Говорим за имуноблотинг. Отрицателният резултат не изисква потвърждение.
Първите са предназначени за идентифициране на всички лица, заразени с ХИВ, вторите - за идентифициране на лица, които не са заразени с ХИВ, но са дали положителна реакция по време на скринингово изследване. Поради това скрининговите тестове са силно чувствителни, т.е. почти не дават фалшиво отрицателни резултати, а потвърдителните тестове са силно специфични, т.е. почти не дават фалшиво положителни резултати. Когато се комбинират, тези тестове дават точни и надеждни резултати, които могат да открият замърсени кръвни продукти и да поставят диагноза ХИВ инфекция. Съществуват обаче биологични фактори, които намаляват точността на тези тестове; Възможни са и лабораторни грешки. Следователно всяка лаборатория, извършваща тестове за антитела срещу ХИВ, трябва да има отлична програма за контрол на качеството на тези тестове. Не бива да забравяме, че надеждността на лабораторните изследвания никога не е стопроцентова и резултатите от тях винаги трябва да се разглеждат като допълнение към клиничната диагноза.
Период на прозорец и откриване на HIV инфекция в ранните етапи на инфекцията:
Антителата срещу ХИВ започват да се произвеждат скоро след инфекцията, но времето на появата им зависи от много фактори, по-специално от състоянието на имунната система на пациента и свойствата на вируса. Важно е да се отбележи, че антителата могат да присъстват в кръвта рано след инфекцията, но тяхната концентрация е под границата на чувствителност на някои методи (период на прозореца). Първите тестови системи откриват антитела при почти всички ХИВ-инфектирани хора 6-12 седмици след заразяването. Най-новите системи за тестване, включително трето поколение капан ELISA, откриват антитела 3-4 седмици след заразяването. Времето между заразяването и диагностицирането на HIV инфекцията може да бъде намалено с няколко дни, като се използват методи за откриване на HIV антигени, и с още няколко дни, като се използват методи за откриване на HIV RNA. Ако използвате всички описани методи, диагнозата HIV инфекция при повечето пациенти може да бъде установена в рамките на 2-3 седмици след заразяването. Наличните в търговската мрежа тестови системи за скрининг на HIV антитела имат много висока и приблизително еднаква чувствителност, достатъчна за откриване на повечето заразени с ХИВ хора (така наречената епидемиологична чувствителност). Различните системи за тестване обаче се различават по аналитична чувствителност, т.е. по способността им да откриват ниски нива на антитела, които възникват преди завършване на сероконверсията.
Има тестови системи, предназначени за откриване на IgM антитела срещу ХИВ, но те не са намерили широко приложение в ранната диагностика на ХИВ инфекцията, тъй като IgM антителата не винаги се произвеждат рано след инфекцията. Някои тест системи от трето поколение откриват едновременно IgM и IgG антитела срещу HIV и имат по-висока аналитична чувствителност.
Вижте също:Разкриване на ХИВ статус без съжаление, Изкривена носна преграда, Съдова аневризма: скрита заплаха за здравето, Пренатален скрининг; хромозомни аномалии, латентен страбизъм (Strabismus latenta, Heterophoria), скрит риск: жени и сърдечни заболявания, латентен сифилис (Syphilis latens), CDC Realtime RT-PCR протокол за откриване и изследване на грипен вирус A (H1N1), скърцане със зъби (бруксизъм) , Внимание: скрити алергени
|
Лабораторна диагностика на HIV инфекция
При диагностицирането на HIV инфекцията се използват 4 групи методи:
1. Определяне на наличието на вируса, неговите антигени или РНК копия в материали от пациент или HIV-инфектиран човек
Серологична диагноза, базирана на откриване на специфични антитела към повърхностни (gp 120 и gp 41) и вътрешни (p 18 и p 24) HIV протеини.
3. Идентифициране на патогномонични (специфични) промени в имунната система за HIV инфекция.
Лабораторна диагностика на опортюнистични инфекции (СПИН-асоциирани заболявания).
1. Вирусологична диагностика.Материалът за изолиране на ХИВ са кръвни Т-лимфоцити, левкоцити от костен мозък, лимфни възли, мозъчна тъкан, слюнка, сперма, цереброспинална течност и кръвна плазма.
Полученият материал се използва за заразяване на непрекъсната култура от Т-лимфоцити (Н9). Индикацията за ХИВ в клетъчна култура се извършва чрез CPD (образуване на симпласти), както и чрез имунофлуоресценция, електронна микроскопия и изразена активност на обратната транскриптаза.
Съвременните методи на изследване позволяват да се открие един заразен лимфоцит на 1000 клетки.
Откриването на вирусни антигени в инфектирани Т-лимфоцити се извършва с помощта на моноклонални антитела
През последните години определянето на броя на копията на ХИВ РНК в кръвната плазма с помощта на метода на полимеразна верижна реакция (PCR) - така нареченият вирусен товар - е от решаващо значение за определяне на прогнозата и тежестта на ХИВ инфекцията.
Ако при пациенти, които не получават терапия, вирусният товар е под границата на откриване (по-малко от 5000 копия на ХИВ РНК в 1 ml плазма), това показва липса на прогресия или бавна прогресия. Степента на заразяване е минимална. Високият вирусен товар (повече от 10 000 РНК копия в 1 ml плазма) при пациенти с брой CO4 лимфоцити под 300 в 1 μl винаги показва прогресия на заболяването.
Серологична диагностика. В момента е най-разпространено.
Материал за изследване: 5 мл. хепаринизирана кръв, която може да се съхранява в хладилник, но не и замразена, 6-8 часа преди доставката в лабораторията.
За целите на серологичната диагностика на СПИН се използват предимно методи за ензимен имуноанализ със стандартни системи за ензимен имуноанализ (ELISA).
Това е скрининг метод. Принципът на работа се основава на класическия принцип на директния ELISA. Имуносорбентът е полистиренови таблетки с имобилизиран инактивиран вирус-специфичен антиген, получен от HIV или синтетично.
След това се добавя разреденият тестов серум. Инкубацията се извършва в ямки с антиген. След свързването на AG към AT, несвързаните протеини се промиват три пъти и след това към ямките се добавя конюгат от антитела към човешки имуноглобулини с ензимен етикет.
Образуването на специфичен комплекс AG+AT се открива чрез добавяне на субстрат за ензима (разтвор на ортофенилендиамин и водороден пероксид).
В резултат на това цветът на средата се променя пропорционално на количеството антитела. Резултатите от изследването се вземат предвид на спектрофотометър.
Кръвните серуми, които имат вирус-специфични антитела според данните от ELISA, трябва да бъдат допълнително изследвани чрез имуноблотинг.
Имунният блотинг е потвърждаващ тест, тъй като открива антитела срещу различни HIV протеини.
Базира се на предварително фракциониране по молекулно тегло (отделяне) на HIV протеини чрез електрофореза в полиакриламиден гел, последвано от трансфер на антигени към нитроцелулозна мембрана. След това тест серумът се нанася върху мембраната. В този случай специфичните антитела образуват комплекс със специфичен антиген (gp.120, gp.41, p.24, p.18). Последният етап от изследването е идентифицирането на антитела към различни HIV протеини.
За целта към системата се добавят антитела срещу човешки протеини, маркирани с ензимен или радиоизотопен етикет.
По този начин в серума на пациента се откриват (или не откриват) вирус-специфични антитела срещу всички или повечето HIV антигени.
3. Изследвания на имунния статус.Насочени към идентифициране на:
1) намаляване на съотношението на CD4/CD8 клетки (в N 2 и >, със СПИН - 0,5 и<);
2) намаляване на съдържанието на CD4 клетки (<200 клеток/мл.);
3) наличието на един от лабораторните признаци, включително анемия, левкопения, тромбопения, лимфопения;
4) повишаване на концентрацията на Ig A и Ig G в кръвния серум;
5) намаляване на реакцията на образуване на лимфоцитен бласт към митогени;
6) липса на кожна реакция на GTZ към няколко антигена;
7) повишаване нивото на циркулиращите имунни комплекси.
Предишен1234567891011Следващ
ВИЖ ПОВЕЧЕ:
Антитела срещу HIV 1/2– компоненти на кръвната плазма, протеинова природа, които предотвратяват разпространението на HIV инфекцията и напълно неутрализират отрицателното им въздействие.
Какво е тест за ХИВ антитела 1/2 (скрининг)
Скрининг тестът за антитела срещу HIV 1.2 е система от тестове, които могат да идентифицират лица, заразени с вируса на имунната недостатъчност. В допълнение към тях има така наречените потвърдителни (спомагателни) тестове, чиято задача е да идентифицират лица, които не са заразени с вируса, но имат положителна реакция към вируса по време на скрининга.
Същността на скрининговото изследване за HIV инфекция е да се определят антителата срещу вируса на имунната недостатъчност.
Неговата отличителна черта е повишената чувствителност - повече от 99,5%. Спецификата на изследването е, че скринингът може да даде фалшив положителен резултат, ако тялото на пациента съдържа автоантитела.
Идентичен резултат може да бъде открит при чернодробно заболяване на пациента, ваксинация срещу грип или наличие на остро вирусно заболяване. Въз основа на това, за да се получат точни резултати, заедно със скрининга, обикновено е обичайно да се прави потвърдителният тест, споменат по-горе.
Показания за анализ
В медицинската практика има доста широк спектър от показания за провеждане на скрининг преглед.
Пациентът може да се свърже с лабораторията, ако:
- подозрение за инфекция (ако е имало близък контакт с носител на HIV инфекция);
- със загуба на тегло, треска;
- пневмония, която не се повлиява от конвенционална терапия;
- хронични заболявания, които възникват по неизвестни причини;
- в процеса на подготовка за операция;
- кръвопреливане;
- бременност и семейно планиране;
- При възпалени лимфни възли;
- Случайни сексуални връзки.
Лица в особен риск: наркомани и хора, които водят безразборни връзки.
Как да се направи скрининг за антитела срещу HIV 1/2
Провеждането на процедурата изисква спазването на редица необходими правила:
- пациентът трябва да дарява кръв изключително на празен стомах (питейната вода е разрешена);
- трябва да са изминали поне осем часа от последното хранене;
- лекарят трябва да бъде уведомен какви лекарства приема пациентът и да знае дозировката (ако няма възможност дори за краткотрайно оттегляне);
- ако пациентът е в състояние да отложи приема на лекарства, се препоръчва да го направи 10-15 дни преди деня на манипулацията;
- в деня преди изследването е препоръчително пациентът да спре да яде пържени или мазни храни; също така му е забранено да пие алкохолни напитки, да пуши и да ограничава тежката физическа активност.
Трябва да се отбележи, че лабораторните тестове за наличие на инфекция при деца, родени от майки, които са носители на вируса на имунната недостатъчност, имат свои собствени специфики.
Тъй като през първите месеци от живота на детето в кръвта му може да има майчини антитела срещу ХИВ, е невъзможно да се получи обективна картина на здравословното състояние на новороденото въз основа на резултатите от анализа и дори отрицателният резултат не означава че вирусът не е успял да проникне през плацентарната бариера.
За да получите точни данни, изследването трябва да се направи в рамките на 36 месеца от раждането на бебето.
Услуги в сферата на “Съвременна диагностика”
Клиники в областта на “Съвременна диагностика”
Тестването или скринингът за ХИВ антитела има две широки, но много ясно дефинирани цели – откриване на случаи и наблюдение. При идентифициране на случаи, първата стъпка е да се изясни ХИВ инфекциозният статус на всеки отделен индивид, за да се предпише подходящо лечение или за проследяване с подходящи мерки.
Целта на епидемиологичното наблюдение е да се оцени разпространението на ХИВ, разпределението на случаите на инфекция и нейните тенденции в група или популация.
Чувствителността на теста за HIV антитела е мярка за способността му да открива точно тези антитела в проба, а специфичността на теста е мярка за способността му точно да потвърди липсата на антитела, когато те не присъстват в пробата.
В идеалния случай чувствителността и специфичността на теста трябва да достигнат 100%. На практика нито един биологичен тест не отговаря на това изискване и все пак тестовете, използвани за HIV антитела, са сред най-чувствителните и специфични налични тестове
Лабораторната диагностика на СПИН се състои в провеждане на вирусологични, серологични и имунологични изследвания на материал от болни лица, за които се подозира, че имат това заболяване.
При вирусологични изследвания първичните култури от мононуклеарни кръвни клетки могат да се използват за изолиране на вируса.
Изолирането и идентифицирането на вируса са методически сложни и могат да се извършват в специализирани лаборатории. Най-ефективният диагностичен метод, използван в момента за рутинни масови прегледи, е откриването на антитела срещу вируса на човешката имунна недостатъчност. Антителата срещу ХИВ могат да се появят до края на първия месец от заразяването. Според редица автори развитието на сероконверсия изисква от 4-7 седмици до 6 месеца или повече. Наличието на антитела има диагностична стойност за СПИН или показва риск от неговото развитие.
Антителата не са само серологичен маркер на СПИН. Открити в предклиничната фаза на заболяването, те дават възможност за ранното му диагностициране. Наличието им е от особено значение за откриването на носители.
Антителата се откриват в продължение на много години, почти през целия живот. Изследователите са установили паралелизъм при идентифицирането на вируса и антителата към него, т.е. наличието на антитела срещу вируса на имунната недостатъчност показва висока вероятност човек да е носител на вируса.
Антителата срещу HIV антигена, появили се по време на инкубационния период, продължават да се произвеждат интензивно с развитието на болестта, тъй като антигенното дразнене се стимулира от вириони, освободени от заразени лимфоцити, и субвирионни компоненти, които навлизат в кръвния поток по време на разпадането на заразените клетки , и инфектирани лимфоцити.
В същото време провирусът, интегриран в генома на заразените клетки, остава недостъпен за специфични антитела. Това обяснява привидно парадоксалния факт: колкото повече антитела срещу вируса на човешката имунна недостатъчност има в кръвния серум, толкова по-лесно е да се изолира самият вирус от пациента.
Това се случва, защото антителата, произведени в отговор на вирусна инфекция, не са неутрализиращи и в резултат на това нямат забележим ефект върху вируса, а просто присъстват в тялото заедно с него. За откриване на антитела (AT) срещу вируса на СПИН са разработени редица тестове, които позволяват провеждането на изследвания с достатъчно високо ниво на специфичност и чувствителност. Това са методи на твърдофазов радиоимуноанализ, радиоимунопреципитация, имунофлуоресценция, ензимно-свързан имуноанализ и имуноблотинг.
Най-широко използваните методи в практиката са ензимно-свързаният имуносорбентен анализ (ELISA), който се характеризира с висока чувствителност, възможност за количествено и визуално регистриране на резултатите от реакцията, което прави метода достъпен за лаборатории от всяко ниво.
ELISA използва чужди и местни тестови системи.
Клинично протичане на HIV инфекция и СПИН
Трябва да се внимава по отношение на деца, родени от заразени майки. При липса на клиника, детето се счита за заразено, ако AT към ХИВ продължава след една година. При получаване на положителен резултат в ELISA е необходимо да се тестват серуми, които са дали единични положителни резултати три пъти и да се потвърди положителният резултат в независима система - имуноблотинг
Откриването на AT в ELISA реакция не предоставя достатъчно информация, тъй като не показва състоянието на лицето, което се тества, а само показва инкубация, заболяване или наличие на асимптоматична инфекция.
Имунният блотинг предоставя повече информация, тъй като наличието на AT към много HIV антигени е характерно за тежко заболяване, докато реакцията с 1-2 антигена е по-типична за лек инфекциозен процес
Информативно е да се преброи броят на Т (хелперите) и съотношението на Т4 към Те (супресорните) лимфоцити, определени с помощта на антитела на едно тяло.
Важен критерий за заболяването може да бъде рязкото увеличение на количеството имуноглобулини, особено А и V. В общ клиничен кръвен тест заболяването може да бъде показано чрез лимфопения, левкопения, еритропения, тромбоцитопения и еозинофилия.
Не е необходимо тестовете за ХИВ, използвани за епидемиологично наблюдение, да бъдат толкова точни, колкото тези, които се изискват за клинични цели.
Въпреки това, ако разпространението на ХИВ сред популацията е много ниско, всички положителни проби трябва да бъдат повторно изследвани с допълнителни тестове.
Вземането на кръв за тест за ХИВ антитела или за скрининг може да бъде придружено от регистриране на имената на субектите (вземане на име) или да се извърши без регистриране на имена или индивидуална идентификационна информация (анонимно вземане) (Таблица
Анонимният скрининг без идентифициране има следните характеристики: използва кръвни проби, събрани за други цели; Анонимността е гарантирана поради факта, че идентификационните данни не се събират или вземат предвид; няма изискване за получаване на съгласието на субектите; не е необходим контакт с консултантски и социални служби; И накрая, и най-важното, грешките в статистическите оценки в зависимост от нивото на участие на населението са сведени до минимум.
Въпреки че анонимното тестване за ХИВ може да осигури по-точни данни, този метод има следните недостатъци: не може да елиминира потенциални отклонения при избора; данни за високорисково поведение и други важни променливи не са налични и не могат да бъдат събрани ретроспективно; невъзможно е да се свържете с хора, засегнати от ХИВ, за да ги информирате за тяхното състояние; Изследването може да се извършва само при групи от хора, от които се взема кръв за други цели.
В райони, където разпространението на ХИВ инфекциите се счита за много ниско, наблюдението на общественото здраве трябва да се съсредоточи предимно върху лица или популации с най-рисково поведение на сексуални партньори
Кръв за изследване на ХИВ в тази рискова група се взема най-лесно в центрове, специализирани в лечението на болести, предавани по полов път, или подобни институции.
Ако интравенозната употреба на наркотици също е често срещана, трябва да се вземат кръвни проби от употребяващите наркотици в специални институции.
Обикновено ще бъде достатъчно вземането на кръв веднъж на всеки 3 или 6 месеца в най-рисковите групи от географски райони, където такива групи са най-изобилни. Изключение могат да направят рискови групи като наркомани, които практикуват интравенозно приложение на наркотици, за които може да са необходими повече частни прегледи.
В момента СЗО разработва система за класифициране на болестта (стадиране) за клинични изпитвания, която може да се използва и при изпитвания за лечение, което също може да има прогностична стойност.
Такава система обаче не е предназначена да замени съществуващите дефиниции за СПИН, използвани в наблюдението на здравеопазването.
Понастоящем навсякъде се разработват планирани (рутинни) системи за наблюдение на ХИВ.
Тези системи трябва да бъдат адаптирани към съществуващата епидемиологична ситуация; По този начин методите за вземане на проби в популации с много ниско разпространение на вируса трябва задължително да се различават от тези, използвани в популации, където разпространението е умерено или високо.
Такова наблюдение включва рутинни прегледи на добре дефинирани и достъпни групи от населението.
Тя трябва да включва предимно онези групи, които са изложени на най-голям риск от инфекция, и от всяка от тези групи трябва да се избира постоянен предварително определен брой индивиди за изследване.
През последните години анонимният скрининг за самоличност става все по-често срещан като точен и рентабилен метод за наблюдение на ХИВ в здравните заведения.
Лабораторни диагностични методи за ХИВ
Във високоспециализирана лаборатория се извършват:
а) определяне на антитела, антигени и имунни комплекси, циркулиращи в кръвта; култивиране на вируса, идентифициране на неговия геномен материал и ензими;
б) оценка на функциите на клетъчната част на имунната система.
Основната роля принадлежи на серологичните диагностични методи, насочени към определяне на антитела, както и антигени на патогени в кръвта и други биологични течности на тялото.
Тестването за HIV антитела се извършва за:
а) безопасност на кръвопреливания и трансплантации;
б) наблюдение, тестване с цел проследяване на разпространението на ХИВ инфекцията и изследване на динамиката на разпространението й в определена популация;
в) диагноза ХИВ инфекция, т.е.
д. доброволно изследване на кръвен серум от привидно здрави хора или пациенти с различни клинични признаци и симптоми, подобни на ХИВ инфекция или СПИН.
Системата за лабораторна диагностика на HIV инфекция е изградена на тристепенен принцип.
Първият етап е скрининг, предназначен за извършване на първични кръвни изследвания за наличие на антитела срещу HIV протеини. Вторият етап е референтен - позволява, като се използват специални методологични техники, да се изясни (потвърди) първичният положителен резултат, получен на етапа на скрининга. Третият етап е експертният, предназначен за окончателна проверка на наличието и специфичността на маркерите на HIV инфекцията, идентифицирани на предишните етапи на лабораторната диагностика.
Необходимостта от няколко етапа на лабораторна диагностика се дължи преди всичко на икономически съображения.
На практика се използват няколко теста, които позволяват идентифициране на заразени с ХИВ хора с достатъчна степен на надеждност:
ELISA тест (ензимно-свързан имуносорбентен анализ) на първо ниво на откриване, се характеризира с висока чувствителност, въпреки че по-малко специфичност от следните;
Имунен блот (Western-blot), много специфичен и най-използван тест, който ви позволява да разграничите HIV-1 и HIV-2;
Антигенемичен р25 тест, ефективен в началните стадии на инфекцията;
Полимеразна верижна реакция (PCR).
В случаите на масов скрининг на кръвни проби се препоръчва да се тестват смеси от серуми от група субекти, съставени по такъв начин, че крайното разреждане на всяка проба да не надвишава 1:100.
Ако смес от серуми е положителна, всеки серум в положителната смес се тества. Този метод не води до загуба на чувствителност както при ELISA, така и при имуноблот, но намалява разходите за труд и цената на първоначалния преглед с 60-80%.
Имунологични методи
брой Т хелпери,
2. съотношение на Т4 и Т8,
3. състояние на свръхчувствителност,
4. компенсаторна функция на Т-клетъчната система.
Проявява се чрез хиперпродукция на имуноглобулини, те са с нисък афинитет и материалът на тялото се изразходва още повече.
Недостатъци: появяват се късно, някои имунологични показатели могат да присъстват при други инфекции.
Клинични методи – м.б. са подобни на други заболявания, най-типичните прояви се записват в по-късните етапи, така че клиничната диагноза не е много ефективна
Основният метод - серологичен - се прилага на 2 етапа:
1 – скринингово изследване – вземане на проби за общи антитела към всички протеини на имунологичния анализ.
Този етап дава 95% верни резултати и 5% фалшиви положителни резултати.
2 – потвърдителен метод – всички проби се изследват по потвърдителен метод. Тази техника ви позволява да откриете антитела срещу вирусния протеин.
Положителен резултат е, когато се открият антитела към поне 3 вирусни протеина, ако към 1 или 2 резултатът е съмнителен и изисква допълнително изследване.
По време на първичната серодиагностика на HIV инфекцията общите антитела се определят с помощта на скринингови тестове - ELISA и реакции на аглутинация.
На втория (арбитражен) етап се използва по-сложен тест - имуноблот, който позволява не само да се потвърди или отхвърли първоначалното заключение, но и да се направи това на ниво определяне на антитела към отделни протеини на вируса.
Тълкуване на резултатите от теста за антитела срещу HIV
Доста голям брой различни фактори влияят върху резултата от теста за антитела срещу ХИВ и сред тях е важен моментът на теста след евентуална инфекция.
В повечето случаи антителата срещу HIV могат да бъдат открити 6-12 седмици след заразяването.
Този период от навлизането на вируса в тялото до появата на откриваемо количество антитела се нарича период на положителна сероконверсия или период на „прозорец“. Има редки случаи на поява на антитела 6 месеца след инфекцията, а съобщенията за откриване на антитела само след 1 година нямат доказателства. Понастоящем диагностичната услуга използва нови поколения методи ELISA, които позволяват откриването на антитела срещу HIV 3-4 седмици след заразяването, а някои комбинации от тези методи, така наречените стратегии за тестване, намаляват периода на „прозореца“ до 2– 3 седмици, т.е.
правят възможно откриването на антитела срещу ХИВ веднага щом започнат да се произвеждат в тялото.
Отрицателен резултат означава, че в кръвта на изследваното лице не са открити антитела срещу ХИВ.
Това състояние се нарича серонегативност и обикновено означава, че лицето не е заразено.
Отрицателният резултат не дава гаранция за бъдещето. Само констатира състоянието към момента на прегледа. Има малка вероятност проучването да е проведено през периода на прозореца. Следователно, ако човек преди това е бил изложен на ХИВ и тестът е отрицателен, той трябва да бъде тестван отново поне 6 месеца след рисковото събитие.
Положителен резултат означава, че в кръвта на пациента са открити антитела срещу HIV.
Това състояние се нарича серопозитивност - човек е заразен с ХИВ. Важно е да се разбере, че положителният резултат показва само HIV инфекция, а не СПИН.
Въпреки това е изключително важно да се свържете с лекар след получаване на положителен резултат за съвет и, ако е необходимо, медицинска помощ, което ще ви позволи да поддържате качеството на живот на добро ниво за дълго време.
Несигурен резултат. В редки случаи резултатът от теста за ХИВ антитела е неясен.
Лабораторията не може да отговори дали дадено лице е серопозитивно или серонегативно. При такива обстоятелства е необходимо да се консултирате с лекар и да се подложите на повторно изследване.
