Определено RIBT би бил по-точен.

Това изследване се използва за двойна проверка на резултатите от ELISA, ако те са съмнителни.

Въпреки това, ако сравним тези два метода, RIBT има и недостатъци:

1. Методът не е много информативен в ранния стадий на развитие на заболяването. Става положителен само 2 месеца след заразяването. Докато ELISA може да бъде положителен вече от 3 седмици.

2. Скъп и трудоемък. Докато ELISA е прост метод, който ви позволява да изследвате голям брой хора за кратко време. Не изисква много време от лаборанта и е евтино за пациента.

3. Методът не е информативен по време на приема на антибиотици, както и за определен период след края на антибактериалната терапия. Употребата на антибиотици от пациента прави RIBT отрицателен.

Ето защо е препоръчително да се проведат изследвания:

не по-рано от 1 седмица след спиране на водоразтворимите пеницилини;
не по-рано от 25 дни след спиране на приема на трайни (продължително действащи) антибиотици.

Имайки предвид изброените недостатъци, РИБТ е метод, който се използва много рядко за диагностициране на сифилис. Но основното предимство на изследването е неговата висока надеждност. Следователно RIBT може да се използва в трудни диагностични случаи за потвърждаване или отхвърляне на инфекция.

Основни приложения:

диференциална диагноза от други тестове за сифилис;
диагностика на невросифилис;
оценка на осъществимостта на отстраняването на пациента от регистъра на венеролога, ако данните, получени от други изследвания, са съмнителни;
откриване на латентен сифилис;
определяне на висцералната форма на заболяването;
откриване на патология при бременни жени, когато други изследвания са неинформативни или в случай на съмнение за фалшиво положителни резултати.

ELISA е метод за скрининг. То може да бъде потвърждаващо само ако вече е проведено друго изследване (например антикардиолипинов тест).

За разлика от ELISA, RIBT е самостоятелно изследване.

Наличието на положителен резултат е причина за установяване на диагноза без допълнителни диагностични методи. В допълнение, RIBT, като най-точен начин за откриване на Treponema pallidum, се използва в съдебната практика за ретроспективна диагностика на сифилис.

Сифилис: РИФ, РИБТ - спешно

Ако трябва да се изследвате за сифилис, включително RIF или RIBT, моля, свържете се с нашата клиника. Ние си сътрудничим с няколко големи лаборатории в Москва.

Поради това имаме широки диагностични възможности, които ни позволяват да провеждаме почти всякакви изследвания. Трябва обаче да се разбере, че RIBT не е диагностичен метод, при който можете да разчитате на спешност.

Самото изследване и получаването на резултатите от него няма да отнеме много време. Но за да се гарантира неговата точност, ще е необходима известна подготовка.

Пациентът ще трябва:

изчакайте 2 месеца от момента на съмнение за инфекция (в противен случай резултатът най-вероятно ще бъде отрицателен);
изчакайте 1 месец от момента на приема на антибиотици (те изкривяват данните от изследването, което прави резултатите му фалшиво отрицателни).

Ако са изпълнени необходимите условия, можете да вземете RIBT. Резултатите ще получите след 1-2 дни. Ако се окаже положителен, можете да се подложите на лечение за сифилис в нашата клиника.

Имаме опитни венеролози, които ще ви помогнат да се отървете от това опасно заболяване.

Ако трябва да вземете RIBT и други тестове за сифилис, свържете се с компетентни венеролози.

Сифилисът е придружен от множество симптоми и има голям брой клинични форми. Разпознаването му се основава на цялостно клинично и лабораторно изследване на пациента. Общият кръвен тест за сифилис дава малко информация, така че не се използва за диагностициране на заболяването.

Следните материали могат да бъдат взети за анализ:

кръв от пръст и вена;
цереброспинална течност - цереброспинална течност;
отделяне на твърд шанкър (язви);
области на регионалните лимфни възли.

Изборът на материал и диагностичен метод зависи от стадия на заболяването. Ще говорим за това какви тестове се вземат за сифилис в следващия раздел.

Класификация на методите за лабораторна диагностика на заболявания

В началния етап можете да използвате бактериоскопския метод, базиран на идентифицирането на патогена - Treponema pallidum - под микроскоп. В бъдеще широко се използват серологични тестове, базирани на определяне на микробни антигени и антитела, произведени от тялото в биологичен материал.

Бактериологичните изследвания не се провеждат, тъй като причинителят на сифилис расте много слабо върху хранителни среди при изкуствени условия.

Всички методи за откриване на трепонема, т.е. видове тестове за сифилис, са разделени на две големи групи:

1. Директен, който директно открива самия микроб:

микроскопия в тъмно поле (откриване на трепонеми на тъмен фон);
RIT тест – заразяване на зайци с изследвания материал;
полимеразна верижна реакция (PCR), която открива участъци от генетичния материал на микроорганизма.

2. Непряко (серологично), основаващо се на откриването на антитела срещу микроба, които се произвеждат от тялото в отговор на инфекция.

Серологичните тестове се разделят на две групи

Нетрепонемни:

реакция на фиксиране на комплемента с кардиолипинов антиген (CCk);
реакция на микропреципитация (MPR);
бърз тест за плазмен реагин (RPR);
тест с толуидиново червено.

трепонема:

реакция на фиксиране на комплемента с трепонемален антиген (RSCT);
реакция на обездвижване на Treponema (RTI или RIBT);
имунофлуоресцентна реакция (RIF);
реакция на пасивна хемаглутинация (RPHA);
ензимен имуноанализ (ELISA);
имуноблотинг.

Методите на тези анализи са доста сложни, затова ще се съсредоточим основно върху това кога се извършват и колко точна информация предоставят.

Да кажем веднага, че основата за диагностициране на сифилис са серологични методи. Как се нарича тестът за сифилис: във всеки случай изследването може да включва различни техники. По-долу ще говорим за тях по-подробно.

Директни тестове

Откриването им под микроскоп убедително доказва наличието на трепонеми. Вероятността от сифилис достига 97%. Микробите обаче могат да бъдат открити само при 8 от 10 пациенти, така че отрицателният тест не изключва заболяването.

Диагнозата се извършва в периоди, когато има шанкър или кожен обрив. Именно в отделянето на тези инфекциозни елементи те търсят причинителите на болестта.

По-ефективен, но в същото време по-скъп и сложен анализ е откриването на трепонемите след предварителна обработка с флуоресцентни антитела. Това са вещества, които се „залепват” за микробите и образуват „блясък” в полето на микроскопа.

Чувствителността на методите намалява при продължителна продължителност на заболяването, лечение на язви и обриви с антисептици, а също и след лечение.

Биологичният метод за диагностициране на РИТ е високоспецифичен, но скъп, а резултатът се получава едва след дълго време, когато заразеното животно е развило заболяването. В момента методът практически не се използва, въпреки че е практически най-точният от всички. Отличен кръвен тест за сифилис за откриване на генетичния материал на трепонемите е PCR. Единственото му ограничение е относително високата цена на диагностиката.

Серологични методи

Нетрепонемни тестове

RSKk и RMP

Най-известният от тези тестове е реакцията на Васерман. Това е метод за бърза диагностика (експресен тест за сифилис), базиран на подобна реакция на антитела от кръвта на болен човек към самите трепонеми и към кардиолипин, получен от говеждо сърце. В резултат на това взаимодействие на антитела и кардиолипин се образуват люспи.

В Русия този анализ практически не се използва. Тя беше заменена от реакцията на микроутаяване. Недостатъкът на метода е неговата ниска специфичност. Фалшиво положителен кръвен тест за сифилис се среща при туберкулоза, кръвни заболявания, системен лупус еритематозус, по време на бременност, след раждане на дете, по време на менструално кървене и в много други случаи. Следователно, при положителен RW се използват по-точни диагностични методи.

След заразяване реакцията става положителна след два месеца. При вторичен сифилис е положителен при почти всички пациенти.

Реакцията на микроутаяване, която замени реакцията на Васерман, има подобен механизъм. Той е евтин, лесен за изпълнение, бърз за оценка, но може да даде и фалшив положителен резултат. Тези два теста се използват като скрининг тестове.

RMP става положителен месец след появата на шанкра. За извършването му се използва кръв от пръст.

Може ли тестът за сифилис да е грешен? Разбира се, да, особено когато се използват нетрепонемни тестове.

Причини за остри фалшиво положителни проби при използване на RMP:

остри инфекциозни заболявания;
пневмония;
инфаркт на миокарда;
удар;
наранявания и отравяния.

Хроничните фалшиво положителни резултати често се появяват при следните заболявания:

туберкулоза;
бруцелоза;
лептоспироза;
саркоидоза;
ревматични заболявания;
Инфекциозна мононуклеоза;
злокачествени тумори;
диабет;
цироза на черния дроб и други.

Ако възникнат противоречиви тестове, за изясняване на диагнозата се използват трепонемни серологични тестове.

RPR и тест с толуидиново червено

Бързият плазмен реагин тест (тест за сифилис rpr) е друг вид реакция с кардиолипинов антиген. Използва се в следните случаи:

скрининг на населението;
подозрение за сифилис;
преглед на донора.

Нека споменем и теста с толуидиново червено. Всички тези методи се използват за оценка на ефективността на лечението. Те са полуколичествени, тоест намаляват с възстановяване и се увеличават с рецидив на инфекцията.

Отрицателните резултати от нетрепонемните тестове най-вероятно показват, че субектът няма сифилис. Следователно, нетрепонемни тестове се използват за оценка на излекуване. Първият такъв анализ трябва да се направи 3 месеца след приключване на курса на лечение.

Трепонемни тестове

Трепонемните тестове се основават на използването на трепонемни антигени, което значително повишава тяхната диагностична стойност. Те се използват в следните ситуации:

положителен скринингов тест (реакция на микропреципитация);
разпознаване на фалшиво положителни резултати от скрининг;
подозрение за сифилис;
диагностика на латентни форми;
ретроспективна диагноза, когато пациентът преди това е страдал от заболяването.

RIT и RIF

Най-висококачествени (високо чувствителни и силно специфични) са RIT и RIF. Недостатъците на тези методи са сложността, времето и необходимостта от модерно оборудване и обучен персонал. При повечето излекувани пациенти трепонемните тестове остават положителни в продължение на много години и следователно не могат да се използват като критерий за излекуване.

RIF става положителен два месеца след заразяването. Ако е отрицателен, пациентът е здрав, ако е положителен, вероятността от заболяване е голяма.

RIT се използва особено често в случай на положителни резултати от рак на пикочния мехур, за да се изключи или потвърди заболяването. Той е много чувствителен и ви позволява да разберете с голяма точност дали пациентът има сифилис или не. Тестът обаче става положителен само три месеца след заразяването.

Имуноблотинг

Имуноблотингът е дори по-чувствителен от RIF, но по-малко чувствителен от RPGA. Използва се рядко, главно за диагностика на сифилис при новородени.

Изброените методи не са подходящи за скрининг, тоест бързо откриване на заболяването, тъй като стават положителни по-късно от реакцията на микропреципитация.

ELISA и RPGA

Съвременни високоинформативни стандартизирани методи за диагностика на сифилис - ELISA и RPGA. Те са евтини, бързо инсталирани и тествани в големи количества. Тези тестове могат да се използват за потвърждаване на диагнозата.

Анализът на RPGA става положителен при първичен серопозитивен сифилис, т.е. при появата на шанкър (месец след инфекцията). Особено ценен е при диагностицирането на късни и вродени форми на заболяването. Въпреки това, RPGA трябва да бъде допълнен от поне един нетрепонемален и един трепонемален тест за диагностична точност. Този троен тест е най-надеждният тест за сифилис. Недостатъкът на RPGA е запазването на положителна реакция за дълго време, което не позволява тестът да се използва като критерий за излекуване.

Тестът ELISA за сифилис става положителен три седмици след заболяването. Недостатъкът на ELISA е, че може да бъде фалшив. Фалшиво положителна реакция възниква при системни заболявания, метаболитни нарушения, както и при деца, родени от болни майки.

Недостатъците на серологичните методи доведоха до разработването на най-модерните методи, които не дават грешки, но все още са скъпи и рядко използвани - газова хроматография и масспектрометрия.

Алгоритъм за диагностициране на сифилитична инфекция на различни етапи

В първичния серонегативен период (до 2 месеца след инфекцията) търсенето на трепонема се извършва в тъмно поле или с помощта на флуоресцентни антитела.

За първичен серопозитивен, вторичен и латентен сифилис се използват RMP и ELISA, а RPGA се използва като потвърждаващ тест.

При пациенти с рецидиви на вторичен сифилис се изследват елементи от обрива, като се опитват да изолират трепонемите от тях за микроскопско изследване.

В третичния период ракът на пикочния мехур е отрицателен при една трета от пациентите. ELISA и RPGA са положителни, но те може да не показват третичен сифилис, а предишно заболяване. Слабо положителен тест показва възстановяване, а не третичен сифилис.

При поставяне на диагнозата „вроден сифилис“ се вземат предвид наличието на заболяването при майката, разликата в честотата на рак на гърдата при майката и детето, положителни ELISA и RPGA при новороденото и имуноблотинг.

Бременните жени трябва да бъдат изследвани за сифилис, особено тези, които вече са имали мъртво раждане, неразвита бременност или ранни спонтанни аборти. Те извършват RMP, ELISA, RPGA. Те се изследват за наличие на заболяване преди прекъсване на бременността.

Правила за получаване на тест за сифилис

За да получите направление за лабораторията, трябва да посетите местния лекар. Ако искате да се изследвате по-бързо, това може да стане в частна лаборатория без направление (например лабораториите Инвитро правят тест за сифилис бързо и анонимно).

Как да се изследваме за сифилис?Кръвта се дарява сутрин, на празен стомах. Можете да пиете само чиста вода.

Приготвяне:Два дни преди теста трябва да изключите от диетата си мазни храни и особено алкохол.

Как се прави анализът?по обичайния начин от пръст или лакътна вена.

Колко време отнема изследването за сифилис?Резултатът от теста обикновено е готов на следващия ден. Преписът може да бъде взет от лекар или лаборатория.

Колко дълго е валиден анализът?До три месеца.

Анализ на цереброспиналната течност

В някои случаи за диагностициране на невросифилис се взема изследване на цереброспиналната течност.

Този преглед се предписва на всички пациенти с латентен сифилис, ако имат признаци на патология на нервната система, както и с латентен и късен невросифилис.

В допълнение, анализът се извършва на всички пациенти след възстановяване, ако поддържат положителни серологични реакции. Вече писахме в нашата статия, че това явление се случва доста често.

Анализът на цереброспиналната течност за сифилис се предписва и извършва само от лекар.

Цереброспиналната течност се получава чрез пункция между два лумбални прешлена. Събира се по 4 ml в две епруветки. След това мястото на пункцията се третира с йод и се покрива със стерилна превръзка. След пункцията пациентът трябва да лежи по корем с повдигнат крачен край на леглото поне 3-4 часа, след което може да легне настрани. Почивка в леглото след пункцията е показана за два дни.

Цереброспиналната течност от първата епруветка се изследва с помощта на общоприети реакции за съдържание на протеини, клетки и определяне на признаци на менингит (възпаление на менингите).

Цереброспиналната течност от втората тръба се изследва за съдържанието на антитела срещу трепонема, като се използва реакцията на Васерман, RMP, RIF и RIBT, които обсъдихме по-горе.

Според тежестта на нарушенията се разграничават четири вида промени в цереброспиналната течност. Анализирайки ги, лекарят може да заключи за наличието на различни форми на увреждане на нервната система (съдов невросифилис, сифилитичен менингит, менинговаскуларен сифилис, tabes dorsalis, късен мезенхимен невросифилис), както и за възстановяването на пациента с положителни серологични резултати. тестове.

Имунофлуоресцентната реакция (RIF) е серологична реакция, която позволява откриването на антитела срещу известни антигени. Методът включва микроскопия на оцветени петна.

Тази реакция се използва в имунологията, вирусологията и микробиологията. Позволява ви да определите наличието на вируси, бактерии, гъбички, протозои и ICC. RIF се използва много широко в диагностичната практика за откриване на вирусни и бактериални антигени в инфекциозен материал. Методът се основава на способността на флуорохрома да се свързва с протеини, без да нарушава тяхната имунологична специфичност. Използва се главно при диагностика на инфекции на пикочните пътища.

Има следните методи за провеждане на реакцията на имунофлуоресценция: директен, индиректен, с комплемент. Директният метод включва оцветяване на материала с флуорохроми. Поради способността на микробните или тъканните антигени да светят в UV лъчите на флуоресцентен микроскоп, те се определят като клетки с ярко оцветена зелена граница.

Индиректният метод включва определяне на комплекса антиген + антитяло. За целта експерименталният материал се третира с антитела от антимикробен заешки серум, предназначен за диагностика. След като антителата се свържат с микробите, те се отделят от тези, които не са се свързали и се третират с белязан с флуорохром анти-заешки серум. След това комплексът от микроби + анимикробни антитела + анти-заешки антитела се определя с ултравиолетов микроскоп по същия начин, както при директния метод.

Реакцията на имунофлуоресценция е незаменима при диагностицирането на сифилис. Под въздействието на флуорохром, причинителят на сифилис се идентифицира като клетка с жълто-зелена граница. Липсата на луминесценция означава, че пациентът не е заразен със сифилис. Този тест често се предписва за положителна реакция на Васерман. Този метод е много ефективен при диагностицирането, тъй като ви позволява да идентифицирате патогена в ранните стадии на заболяването.

В допълнение към факта, че RIF ви позволява да диагностицирате сифилис, той се използва и за определяне на наличието на патогени като хламидия, микоплазма, трихомонада, както и патогени на гонорея и генитален херпес.

За анализ се използват цитонамазки или венозна кръв. Процедурата по вземане на цитонамазка е напълно безболезнена и не представлява никаква опасност. Необходимо е да се подготвите за този анализ. Дванадесет часа преди това не се препоръчва използването на хигиенни продукти като мало или гелове. Също така понякога, според показанията на лекаря, се извършва провокация. За да направите това, се препоръчва да се консумират пикантни храни или алкохол или да се инжектира провокиращо вещество, като гоновакцин или пирогенал. Освен това интервалът между приема на антибактериални лекарства и вземането на теста трябва да бъде най-малко четиринадесет дни.

При оценката на резултатите трябва да се вземе предвид фактът, че луминесценцията се наблюдава не само при живи бактерии, но и при мъртви, особено за хламидиите. След курс на антибиотици мъртвите клетки на хламидиите също светят.

При правилна подготовка на пациента и спазване на техниката за вземане на намазка, този анализ ви позволява да идентифицирате заболяванията в ранните етапи, което е много важно за навременното лечение. Положителните страни на този метод са краткото време за получаване на резултати, лекотата на прилагане и ниската цена на анализа.

Недостатъците включват факта, че за извършване на анализа е необходимо доста голямо количество тестов материал. Освен това само опитен специалист трябва да оцени резултатите.

RIF, RIBT, RPGA

RIF - реакция на имунофлуоресценция- тест за трепонема. Това е един от най-чувствителните тестове за сифилис. RIF става положителен 10-20 дни след заразяването, което го класифицира като метод за ранно откриване на сифилис.

Показания за провеждане на RIF:

RIF се извършва при лица със симптоми на сифилис, с отрицателни реакции - RMP, RV;
като диференциална реакция при лица с положителни RW реакции, микрореакции и липса на симптоми;
при бременни жени при липса на клинични прояви и анамнеза за сифилис.

Методика за провеждане на RIF:

При провеждане на реакцията към серума на пациента се добавя заешка кръв, заразена с Treponema pallidum (причинителят на сифилис) и флуоресцентен (светещ) серум. Изследването се състои в наблюдение на светенето на комплексите под флуоресцентен микроскоп. Резултатите от реакцията се интерпретират в зависимост от интензивността на блясъка от 1+ до 4+, което показва наличието на сифилис. Липса на блясък - отрицателен резултат от RIF означава, че изследваното лице е здраво. Фалшивите резултати от анализа са изключително редки по време на системни процеси, бременност и др.
Реакцията се провежда в модификации RIF-200 и RIF-avs (абсорбция).
Чувствителността на реакцията за първичен сифилис е около 85%
за вторичен сифилис - 100%
с третичен сифилис - 98-100%.

Негативността на RIF се проявява в рамките на няколко години след лечението на сифилис. След антисифилитична терапия е необходимо проследяване на показателите във времето.

РЕБРА- Имобилизиращата реакция на Treponema pallidum е най-специфичният кръвен тест за сифилис. RIBT е висококачествен, скъп кръвен тест, който може да се извърши от добре оборудвани лабораторни комплекси. RIBT е основна реакция при латентни форми на сифилис, невросифилис и висцеросифилис. Позволява ви да разграничите фалшиво положителните реакции от истинския сифилис.

Реакцията се основава на обездвижване (имобилизиране) на патогена на сифилис с видоспецифични антитела. Чрез микроскопско изследване се отчита резултатът от реакцията: 0-20% - отрицателна, 21-30% - съмнителна, 31-50% - слабо положителна, 51-100% - положителна реакция. Тоест положителните резултати за сифилис включват тези, при които RIBT е повече от 50%. При сифилис RIBT става положителен доста бавно: в първичния период на сифилис той все още е отрицателен, във вторичния пресен период е положителен в 50% от случаите, във вторичния период на рецидив е положителен в 90-100%, в третичен период е положителен в 99-100%.

Негативността на RIBT се провежда от десетилетия, следователно не е легитимно да се използва като критерий за надеждност на излекуване; въпреки това е необходимо динамично наблюдение след антисифилитично лечение.

Препоръчително е реакцията на RIBT да се извърши не по-рано от 30 дни след края на лечението. RPHA - реакция на пасивна хемаглутинация - се отнася до трепонемните тестове и се провежда в комбинация с нетрепонемни тестове. Използва се за потвърждаване на диагнозата сифилис на всеки етап.

Препоръчително е реакцията да се извърши 4 седмици след очакваната инфекция. При провеждане на реакцията към кръвния серум на пациента се добавя лекарство, приготвено от червени кръвни клетки от животински произход, сенсибилизирано с антигена на Treponema pallidum, причинителя на сифилис.

Същността на RPHA реакцията е залепване (аглутинация) в присъствието на антитела срещу трепонема и образуването на аглутинат - фигура, която се наблюдава от лаборант. Реакцията се оценява по броя на +: 4+ - силно положителен резултат, 3+ - положителен, 2+ - слабо положителен, 1+ - съмнителен, - - отрицателен резултат. Ако реакцията е положителна, се извършва количествена оценка за определяне на концентрацията (титъра) на антителата. С напредването на сифилиса титърът на антителата постоянно се увеличава.

RPGA остава положителен десетилетия след лечението на сифилис и следователно не може да се използва като критерий за сигурност на излекуване. Въпреки това е необходимо да се наблюдава титърът на RPHA антителата във времето.

Методът е много чувствителен. Резултатите от RPGA може да са фалшиво положителни. Заболявания на съединителната тъкан, някои инфекции и др. могат да доведат до такива резултати от анализа.

Всъщност анализът не е само един – те са няколко. За откриване на сифилис кръвта се изследва по няколко начина. В допълнение към кръвта, при лабораторната диагностика на това заболяване се използва друг биологичен материал, който съдържа патогена, spirochete pallidum (син. - treponema pallidum).

Това е отделяне от сифилиди (специфични язви и обриви по кожата и лигавиците), с невросифилис - цереброспинална течност (CSF).

Всички методи за диагностициране на сифилис могат да бъдат разделени на директни и косвени. Директните методи са насочени към директно откриване на Treponema pallidum. Що се отнася до непреките, те се основават на откриването на антитела срещу спирохета. Има антитела, което означава, че има самата спирохета. Непреките методи за диагностициране на сифилис не са нищо повече от серологични реакции, при които кръвният серум се използва като материал за изследване.

Антителата се откриват, когато взаимодействат с антигени. За провеждане на серологични реакции се използват препарати, съдържащи даден антиген. В зависимост от вида на този антиген, серологичните реакции могат да бъдат трепонемни и нетрепонемни. Антиген, специфичен за Treponema pallidum, участва в трепонемните реакции.

Трепонемните реакции включват:

RSK - реакция на фиксиране на комплемента с трепонемален антиген
RPHA - реакция на пасивна хемаглутинация
ELISA - ензимен имуноанализ
RIF – реакция на имунофлуоресценция
RIBT – Имобилизираща реакция на Treponema pallidum

Нетрепонемните серологични реакции включват тест за фиксиране на комплемента с кардиолипинов антиген и тест за микропреципитация или бърз плазмен реагин тест.

Кардиолипиновият антиген, използван в тези реакции, не е антигенът на spirochete pallidum. Това е екстракт от говеждо сърце, подобен по структура на кардиолипин-фосфолипидния антиген на клетъчната мембрана на спирохетите.

Следователно антителата, произведени при появата на причинителя на сифилис, също ще реагират на този антиген.

Когато хората говорят за изследване за сифилис, те най-често имат предвид този метод, реакцията на Васерман

Реакция на Васерман (RW)

Когато хората говорят за изследване за сифилис, те най-често имат предвид този метод, реакцията на Васерман. Тази реакция е разработена за диагностика на сифилис от немския имунолог Васерман преди повече от век, в самото начало на миналия век. Въпреки това, той се изпълнява и днес, макар и със значителни промени.

По същество RW в сегашната си версия се отнася до RSK. В имунологията комплементът се отнася до системата от плазмени протеини, които формират вродената имунна система. RW се основава на реакцията на антигени с антитела с участието на комплемента. Антитела срещу Treponema pallidum присъстват в серума на пациент със сифилис. Ако към такъв серум се добавят антигени, антителата ще реагират с тях.

За RW се използват готови набори от специфични и неспецифични антигени. Специфични антигени са изолирани от култури на Treponema pallidum, отглеждани върху хранителни среди.

Неспецифичните антигени са представени от говежди сърдечен кардиолипин. По този начин RW може да се класифицира като трепонемни и нетрепонемни изследвания.

Реакцията на специфични и неспецифични антигени с антитела на тестовия серум не се вижда външно. За индикацията му се използват овчи червени кръвни клетки.

Като част от хемолитичния серум на имунизиран заек, те се добавят към тестовия материал. Какво се случва накрая?

Ако субектът е здрав, тогава в неговия серум няма антитела срещу трепонема. В същото време, под въздействието на комплемента, овчи еритроцити се хемолизират (унищожават) и това е ясно видимо в епруветка, чието съдържание е равномерно оцветено без утайка („лакова кръв“).

По този начин хемолизата показва липсата на антитела. В този случай реакцията е отрицателна.

При пациентите със сифилис е обратното. В тях целият комплемент е свързан по време на образуването на имунни комплекси от антигени с антитела и, просто казано, няма достатъчно от него, за да унищожи червените кръвни клетки.

Следователно липсата на хемолиза показва наличието на антитела срещу спирохети и, съответно, сифилис. В този случай реакцията е положителна и се обозначава със знак плюс.

По-точно, може да има няколко предимства, тъй като забавянето на хемолизата има различна степен на тежест:

1 плюс – реакцията е съмнителна
2 плюса - реакцията е слабо положителна
3 плюса – положителна реакция
4 плюса - реакцията е рязко положителна.

На медицински жаргон плюсовете в този случай се наричат кръстове и резултатът се обозначава съответно: +, ++, +++ или ++++.

RW техниката е доста проста, евтина, отнема малко време и не изисква сложно лабораторно оборудване. Следователно, тази реакция се прибягва навсякъде, а не само при наличие на специфични показания (подозрение за сифилис, наличие на характерни симптоми).

Провежда се като скрининг метод при рутинни медицински прегледи, при бременни жени при регистрация и при всички пациенти при хоспитализация.

Междувременно техниката не е лишена от значителни недостатъци. Първо, не винаги дава положителен резултат в случай на съществуващ сифилис. В крайна сметка антителата не се образуват веднага, а след известно време.

Този период от време, когато няма антитела, се нарича серонегативен период на сифилис и продължава 5-8 седмици. от момента на заразяване.

И серопозитивният период на сифилис започва още в края на първичния сифилис. Вторичният сифилис е почти винаги серопозитивен, а третичният усложнен сифилис може да бъде серонегативен. В този случай това изобщо не означава, че Treponema pallidum не е в тялото. Просто имунната система се е изтощила в продължение на много години и антителата са престанали да се освобождават.

От друга страна, в някои случаи, дори след успешно лечение на сифилис, 1-2 кръста в анализа могат да се запазят в продължение на много години, а понякога и за цял живот.

По този начин броят на кръстосванията в RW не зависи от активността на Treponema pallidum и тежестта на сифилиса. За целта се използва друг показател - титър на антитела. Това е максималната степен на разреждане на серума, при която настъпва рязко положителна реакция.

Друг недостатък на RW е неговата ниска специфичност с чести фалшиво положителни резултати, когато хемолизата е забавена при липса на сифилис.

Сред причините за фалшиво положителни резултати са други бактериални и вирусни инфекции, системни колагенози, бременност, алкохолизъм, наркомания, лекарства, диетични грешки и много други. Ето защо е много важно правилно да се подготвите за анализа.

Спрете приема на антибиотици 7-10 дни преди вземане на кръв. През последните 24 часа трябва да се въздържате от консумация на големи, мазни храни и алкохол.

Кръвта за анализ се взема от вената на празен стомах. Отрицателните резултати при липса на характерни клинични прояви под формата на шанкър показват с висока степен на сигурност липсата на сифилис. Ако има поне един от кръстовете, те прибягват до други диагностични методи.

Реакцията на пасивна хемаглутинация се състои в слепване или аглутинация на червени кръвни клетки.

Реакция на пасивна хемаглутинация (RPHA)

Реакцията на пасивна хемаглутинация се състои в слепване или аглутинация на червени кръвни клетки. Трепонемните антигени се фиксират върху червените кръвни клетки, използвани в тази реакция. След това тестовият серум се добавя към този материал.

Ако съдържа антитела, те взаимодействат с антигените на червените кръвни клетки, което води до тяхната аглутинация. По този начин аглутинацията показва положителен RPHA и съществуващ сифилис, а липсата на аглутинация и отрицателен RPHA показват, че субектът е здрав. Тук също има 4 степени на положителни резултати с различни титри на антитела.

Чувствителността на RPGA е по-висока в сравнение с RW. Този тест обаче е отрицателен в самото начало на заболяването, през първите 2-4 седмици, а понякога и 6 седмици. Впоследствие, във вторичния и третичния период, RPGA винаги е положителен, както при латентния сифилис.

Поради това може да се използва за диагностициране на заболяване без ясни клинични прояви. Подобно на други трепонемни изследвания, RPHA остава положителен за цял живот, дори след пълно възстановяване. Следователно не може да се използва за оценка на адекватността на лечението на сифилис.

Може да стане отрицателен само в случаите, когато мерките за лечение са започнали веднага след като пациентът се е разболял от сифилис.

RPGA също дава фалшиво положителни резултати при някои заболявания и патологични състояния. Фалшивите положителни резултати се различават от истинските положителни резултати по това, че стават отрицателни много бързо, след няколко седмици или месеци.

Освен това това се случва спонтанно, дори без специфично лечение. RPGA също се отнася до скринингови диагностични методи. При положителен резултат се правят други трепонемни изследвания.

Ензимният имуноанализ също се основава на реакцията антиген-антитяло.

Ензимен имуноанализ ELISA

Ензимният имуноанализ също се основава на реакцията антиген-антитяло. Трепонемните антигени са фиксирани върху повърхността на всеки твърд материал.

Като правило това е полистирол, от който се произвеждат съвременни тестови системи, които приличат на плочи с ямки. Тестовият серум се добавя към тези ямки. Ако този серум съдържа антитела, те образуват комплекси с антигените на тестовите системи.

Жълтото оцветяване на тестовия материал показва наличието на антитела. Колкото повече от тези антитела, толкова по-интензивно е оцветяването.

Антителата принадлежат към имуноглобулините (Ig) и са представени от няколко разновидности - IgA, IgM и IgG. Техният брой не е еднакъв в различните периоди на заболяването. Следователно по разпространението на един или друг Ig може да се съди за продължителността на заболяването.

ELISA става положителен още след 3 седмици и може да остане такъв до края на живота. Тук обаче често се срещат и фалшиво положителни резултати, което е съществен недостатък.

Сред предимствата на ELISA са наличието на метода и възможността за провеждане на голям брой изследвания за относително кратък период от време.

Имунофлуоресцентната реакция се основава на светлинна индикация на комплекса антиген-антитяло

Имунофлуоресцентна реакция (RIF)

Имунофлуоресцентната реакция се основава на светлинна индикация на комплекса антиген-антитяло. Съществуващият антиген се смесва с тестовия серум. Ако има антитела, те образуват имунни комплекси с антигени.

След това към диагностичния материал се добавя антивидов заешки серум, съдържащ флуоресцеин, вещество, което свети в ултравиолетова светлина. Сиянието се открива, когато се гледа през флуоресцентен микроскоп.

В зависимост от интензивността на сиянието, чийто цвят варира от едва забележимо до жълто-зелено, има 4 степени на положителен RIF.

Предимствата на този метод са неговата специфичност и чувствителност. При съществуващ сифилис RIF дава положителен резултат в самото начало на заболяването, още в края на 1 седмица. инфекция, дори преди появата на шанкра.

Фалшивите положителни резултати практически не се откриват. Недостатъците на този метод включват технически трудности и необходимостта от специално оборудване.

Затова към РИФ се прибягва, когато резултатите от други изследвания, които се нуждаят от уточняване, са положителни.

Реакцията на имобилизация на Treponema pallidum се основава на феномена на имобилизация, обездвижване на патогена в присъствието на тестов серум.

Treponema pallidum имобилизираща реакция (TPI)

Реакцията на имобилизация на Treponema pallidum се основава на феномена на имобилизация, обездвижване на патогена в присъствието на тестов серум. Серумът на пациент със сифилис съдържа имуноглобулинови антитела, които се наричат имобилини поради способността им да обездвижват спирохетите.

Имобилизините се освобождават много по-късно от другите антитела, а RIBT дава положителен резултат само след 3 месеца. след заразяване.

Методът е надежден, високочувствителен и може да се използва при фалшиво положителни резултати при други изследвания. Той обаче е технически сложен, завършването му отнема много време и изисква скъпо оборудване и специално обучен персонал.

Следователно RIBT, разработен в средата на миналия век, в момента не се използва в клиничната практика. Извършва се само за изследователски цели.

Микрореакцията на утаяване има друго име - тест за бърз плазмен реагин

Микрореакция на утаяване на MP

Микрореакцията на утаяване има друго име - тест за бърз плазмен реагин. В отговор на увредените компоненти на мембраните на тъканните клетки или на компонентите на мембраните на самите трепонеми, имунната система освобождава антитела, наречени реагини.

Този диагностичен метод се основава на откриването на тези реагини. Частиците въглен се добавят към даден антиген, който включва холестерол, кардиолипин и лецитин, за индикация.

След това антигенът се смесва с тестовия серум. Ако съдържа реагини, възниква реакция на флокулация с образуване на флокулираща утайка, която е черна на цвят поради наличието на въглищни частици.

Положителен резултат от MP може да се наблюдава не по-рано от 4-5 седмици по-късно. след заразяване. Както при другите серологични реакции, може да има различни степени на тежест и различни титри на реагиновите антитела.

С развитието на патологичния процес титърът на антителата се увеличава, но в по-късните етапи намалява и реакцията става слабо положителна или съмнителна. В допълнение, този метод на изследване също има много фалшиви положителни резултати.

Предимствата включват факта, че въз основа на бързия тест за плазмен реагин може да се прецени хода на заболяването и ефективността на неговото лечение. В края на краищата тук се използва нетрепонемален антиген и след унищожаването на трепонемата резултатът от MP става отрицателен, докато при други серологични реакции с трепонемни антигени той може да продължи цял живот.

Този метод комбинира електрофореза и ELISA. Treponema pallidums се разделят на антигенни фракции чрез електрофореза. След това полученият материал се третира със серум на пациента, който в случай на сифилис съдържа специфични имуноглобулини IgM и IgG. След това се добавя серум с антитела към тези имуноглобулини, белязани с радиоизотопи или ензими.

В този случай областите, съдържащи тези имуноглобулини, са под формата на характерни ивици. Имуноблотингът е модерен метод за диагностициране на сифилис, който е разработен сравнително наскоро. Той е чувствителен и надежден, но изисква скъпо оборудване и следователно не е евтин.

Понастоящем имуноблотингът се използва главно за диагностициране на вроден сифилис.

Микроскопия

При стандартна микроскопия спирохетите са трудни за разграничаване, т.к цапат много зле. Ето защо спирохетата беше наречена бледа. Микроскопията се извършва най-добре с помощта на микроскоп с тъмно поле.

За разлика от конвенционалния микроскоп, страничното осветление тук е фокусирано така, че да подчертава светещите трепонеми на тъмен фон.

Материалът за изследването е отделяне на шанкър и елементи на кожен обрив. Следователно микроскопията в тъмно поле се използва главно за диагностициране на първичен и вторичен сифилис.

На етапа на третичен сифилис, усложнен от невросифилис, трепонемите могат да бъдат намерени в цереброспиналната течност, а при вроден сифилис - в тъканта на пъпната връв.

Визуалното откриване на трепонеми е надежден признак за сифилис. Въпреки това, патогенът не винаги може да бъде открит, а само в 80% от случаите.

При дългосрочен сифилис със специфично лечение и лечение на патологични участъци от кожата и лигавиците с антисептици, вероятността за откриване на трепонеми в микроскоп с тъмно поле се намалява.

За по-ефективна диагностика трепонемите могат да бъдат третирани с флуоресцентни антитела, които се фиксират върху тях и допълнително засилват блясъка. Но този метод изисква допълнителни материални разходи.

Полимеразна верижна реакция (PCR)

Полимеразната верижна реакция се основава на откриването на микробен патоген (в този случай трепонема) чрез неговата ДНК. Целият генетичен материал се умножава многократно с участието на ензима ДНК полимераза. След това с помощта на електрофореза се открива ДНК на Treponema.

Чувствителността на PCR е максимална, тъй като откриването на микробна ДНК верига показва сифилис. PCR може да се използва за диагностициране на всеки стадий на сифилис.

В зависимост от стадия на заболяването и неговите усложнения, ролята на биологичен материал може да бъде кръв, урина, гръбначно-мозъчна течност, тъкан на лимфни възли и изхвърляне на сифилис. Чувствителността на тези материали към PCR може да варира.

Повечето от трепонемите се намират в изхвърлянето на сифилиди, а в уретралната или вагиналната намазка те може изобщо да не бъдат открити. Освен това, след успешно лечение, фрагменти от мъртви трепонеми често остават в тялото за известно време, чиято ДНК също се идентифицира чрез PCR.

Следователно с помощта на този метод не винаги е възможно да се определи дали има активна фаза на заболяването или вече е в етап на излекуване. PCR обаче е най-ефективният метод за диагностициране на сифилис. Използването му е затруднено от сложността на изпълнение и необходимостта от скъпо оборудване.

Кой анализ е най-добрият?

Всичко зависи от стадия на заболяването. За първичен серонегативен сифилис микроскопията в тъмно поле и RIF са най-предпочитани. Освен това, за първичен серопозитивен и вторичен сифилис се извършват RW и ELISA и за изключване на фалшиво положителни резултати те се допълват с RPGA.

В третичния период RW е отрицателен, а RPG и ELISA са положителни. За да се изключат фалшивите положителни резултати, те се допълват с RIF. За диагностициране на вроден сифилис се изследват както майката, така и новороденото. Жената се изследва за RW, RPGA и RIF. При новородено диагнозата може да бъде допълнена чрез имуноблотинг. Във всички спорни случаи се използва PCR.

Уважаеми посетители на сайта Farmamir. Тази статия не представлява медицински съвет и не трябва да служи като заместител на консултация с лекар.