För närvarande gör nya diagnostiska tekniker det möjligt att identifiera de etiologiska och patogenetiska orsakerna till många sjukdomar och radikalt påverka resultaten av behandlingen. De kanske mest imponerande resultaten av att introducera dessa teknologier i klinisk praxis har uppnåtts inom området immunologi och diagnostik av infektionssjukdomar.
Testsystem baserade på enzymkopplade immunosorbent- och kemiluminescensimmunanalyser kan detektera antikroppar av olika klasser, vilket avsevärt ökar informationsinnehållet i kliniska och analytiska sensitivitets- och specificitetsmetoder för att diagnostisera infektionssjukdomar. Det bör noteras att de mest betydande framstegen i diagnostisering av infektioner är förknippade med införandet i laboratoriepraxis av polymeraskedjereaktionsmetoden, som anses vara "guldstandarden" för att diagnostisera och bedöma effektiviteten av behandling för ett antal smittsamma. sjukdomar.
Olika biologiska material kan användas för forskning: serum, blodplasma, skrapning, biopsi, pleural eller cerebrospinalvätska (CSF). Först och främst syftar metoder för laboratoriediagnostik av infektioner till att identifiera sjukdomar som viral hepatit B, C, D, cytomegalovirusinfektion, sexuellt överförbara infektioner (gonorré, klamydia, mykoplasma, ureaplasma), tuberkulos, HIV-infektion, etc.
HIV-infektion är en sjukdom som orsakas av humant immunbristvirus (HIV), som kvarstår under lång tid i lymfocyter, makrofager och nervvävnadsceller, vilket leder till utveckling av långsamt progressiva skador på kroppens immun- och nervsystem, manifesterad av sekundära infektioner, tumörer, subakut encefalit och andra patologiska tillstånd.
De orsakande medlen för infektion - humana immunbristvirus typ 1 och 2 (HIV-1, HIV-2) - tillhör familjen retrovirus, en underfamilj av långsamma virus. Virioner är sfäriska partiklar med en diameter på 100-140 nm. Viruspartikeln har ett yttre fosfolipidhölje, vilket inkluderar glykoproteiner (strukturproteiner) med en viss molekylvikt, mätt i kilodalton. I HIV-1 är dessa gpl60, gpl20, gp41. Virusets inre skal, som täcker kärnan, representeras också av proteiner med en känd molekylvikt - p17, p24, p55 (HIV-2 innehåller gpl40, gpl05, gp36, p16, p25, p55).
HIV-genomet innehåller RNA och enzymet omvänt transkriptas (revertas). För att genomet av ett retrovirus ska kunna kopplas till värdcellens genom, syntetiseras DNA först på en viral RNA-mall med användning av reversease. Det provirala DNA:t integreras sedan i värdcellens genom. HIV har uttalad antigen variabilitet, som avsevärt överstiger influensavirusets.
I människokroppen är det huvudsakliga målet för HIV T-lymfocyter, som bär det största antalet CD4-receptorer på sin yta. Efter att HIV kommit in i cellen med hjälp av reversease, syntetiserar viruset DNA baserat på dess RNA-prov, som är integrerat i värdcellens genetiska apparat (CD4-lymfocyter) och förblir där livet ut i tillståndet av ett provirus. Förutom T-lymfocythjälpare påverkas makrofager, B-lymfocyter, neurogliaceller, tarmslemhinnan och några andra celler. Orsaken till minskningen av antalet T-lymfocyter (CD4-celler) är inte bara den direkta cytopatiska effekten av viruset, utan också deras fusion med oinfekterade celler. Tillsammans med skador på T-lymfocyter upplever patienter med HIV-infektion polyklonal aktivering av B-lymfocyter med en ökning av syntesen av immunglobuliner av alla klasser, särskilt IgG och IgA, och efterföljande utarmning av denna del av immunsystemet. Dysreglering av immunprocesser manifesteras också av en ökning av nivån av α-interferon, β2-mikroglobulin och en minskning av nivån av IL-2. Som ett resultat av dysfunktion i immunsystemet, särskilt när antalet T-lymfocyter (CD4) minskar till 400 celler i 1 μl blod eller mindre, uppstår tillstånd för okontrollerad replikering av HIV med en signifikant ökning av antalet virioner i olika kroppens miljöer. Som ett resultat av skador på många delar av immunsystemet blir en person som är infekterad med hiv försvarslös mot patogener av olika infektioner.
Mot bakgrund av ökande immunsuppression utvecklas allvarliga progressiva sjukdomar som inte förekommer hos en person med ett normalt fungerande immunsystem. Det är sjukdomar som Världshälsoorganisationen (WHO) har definierat som AIDS-märkande eller AIDS-definierande sjukdomar.
AIDS-definierande sjukdomar
Den första gruppen - sjukdomar som är inneboende endast till allvarlig immunbrist (CD4-nivå<200). Клинический диагноз ставится при отсутствии анти-ВИЧ-антител или ВИЧ-антигенов.
Den andra gruppen är sjukdomar som kan utvecklas både mot bakgrund av allvarlig immunbrist, och i vissa fall utan det.
Därför, i dessa fall, är laboratoriebekräftelse av diagnosen nödvändig.
Första gruppen:
- candidiasis i matstrupen, luftstrupen, bronkierna;
- extrapulmonell kryptokokkos;
- kryptosporidios med diarré i mer än 1 månad;
- cytomegaloviruslesioner av olika organ andra än levern, mjälten eller lymfkörtlarna hos en patient över 1 månads ålder;
- infektion orsakad av herpes simplex-virus, manifesterad av sår på huden och slemhinnan som kvarstår i mer än 1 månad, såväl som bronkit, lunginflammation eller esofagit av vilken varaktighet som helst, som påverkar en patient över 1 månads ålder;
- generaliserat Kaposis sarkom hos patienter under 60 år;
- hjärnlymfom (primärt) hos patienter under 60 år;
- lymfocytisk interstitiell pneumoni och/eller pulmonell lymfoid dysplasi hos barn under 12 år;
- spridd infektion orsakad av atypiska mykobakterier (mykobakterier av M. aviumintracellulare-komplexet) med extrapulmonell lokalisering eller lokalisering (utöver lungorna) i huden, cervikala lymfkörtlar, lymfkörtlar i lungrötterna;
- Pneumocystis pneumoni;
- progressiv multifokal leukoencefalopati;
- cerebral toxoplasmos hos patienter över 1 månads ålder.
Andra gruppen:
- bakteriella infektioner, kombinerade eller återkommande, hos barn under 13 år (mer än två fall över 2 års observation): sepsis, lunginflammation, meningit, skador på ben eller leder, bölder orsakade av Haemophilus influenzae, streptokocker;
- spridd coccidioidomycosis (extrapulmonell lokalisering);
- HIV-encefalopati (HIV-demens, AIDS-demens);
- histoplasmos med diarré som kvarstår i mer än 1 månad;
- isosporos med diarré som kvarstår i mer än 1 månad;
- Kaposis sarkom i alla åldrar;
- hjärnlymfom (primärt) hos människor i alla åldrar;
- andra B-cellslymfom (förutom Hodgkins sjukdom) eller lymfom av okänd immunfenotyp: småcelliga lymfom (såsom Burkitts lymfom, etc.); immunoblastiska sarkom (immunoblastiska, storcelliga, diffusa histiocytiska, diffusa odifferentierade lymfom);
- spridd mykobakterios (ej tuberkulos) med skador på huden, livmoderhalsen eller hilar lymfkörtlar förutom lungorna;
- extrapulmonell tuberkulos (påverkar andra inre organ än lungorna);
- Salmonella septikemi, återkommande;
- HIV-dystrofi (avmagring, plötslig viktminskning).
Tabell 1 (se källlänk ovan) listar AIDS-definierande sjukdomar och deras etiologiska agens.
Det finns många klassificeringar av AIDS.
Enligt den nya klassificering som föreslagits av Center for Disease Control i USA (tabell 2 - se länken till källan ovan) fastställs diagnosen AIDS för personer med ett CD4-lymfocytantal på mindre än 200/μl, även i frånvaron av AIDS-definierande sjukdomar.
Kategori B inkluderar olika syndrom, varav de viktigaste är bacillär angiomatos, orofaryngeal candidiasis, återkommande vulvovaginal candidiasis, svår att behandla, cervikal dysplasi, cervikal karcinom, idiopatisk trombocytopen purpura, listerios, perifer neuropati.
Antikroppar mot HIV-1 och HIV-2 i blodet
Antikroppar mot HIV-1 och HIV-2 saknas normalt i blodserumet.
Bestämning av antikroppar mot HIV är den huvudsakliga metoden för laboratoriediagnostik av HIV-infektion. Metoden är baserad på en enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA) - känsligheten är mer än 99,5%, specificiteten är mer än 99,8%. Antikroppar mot HIV uppträder hos 90-95% av de smittade inom 1 månad efter infektion, hos 5-9% - efter 6 månader, hos 0,5-1% - vid ett senare tillfälle. Under AIDS-stadiet kan antalet antikroppar minska tills de försvinner helt.
Resultatet av studien uttrycks kvalitativt: positivt eller negativt.
Ett negativt testresultat indikerar frånvaron av antikroppar mot HIV-1 och HIV-2 i blodserumet. Laboratoriet ger ett negativt resultat direkt när det är klart. Om ett positivt resultat erhålls - detektering av antikroppar mot HIV - för att undvika falskt positiva resultat i laboratoriet, upprepas analysen ytterligare 2 gånger.
Immunblotting för antikroppar mot HIV-virusproteiner i blodserum
Antikroppar mot HIV-virusproteiner saknas normalt i blodserum.
ELISA-metoden för att bestämma antikroppar mot HIV är en screeningsmetod. När ett positivt resultat erhålls, för att bekräfta dess specificitet, används immunoblottingmetoden - Western-blot - motfällning i en gel av antikroppar i patientens blodserum med olika virala proteiner, utsätts för separation efter molekylvikt med hjälp av elektrofores och appliceras till nitrocellulosa. Antikroppar mot virala proteiner gp41, gpl20, gpl60, p24, pi8, p17, etc. bestäms.
Enligt rekommendationerna från det ryska centret för förebyggande och kontroll av AIDS bör detektering av antikroppar mot ett av glykoproteinerna gp41, gpl20, gpl60 betraktas som ett positivt resultat. Om antikroppar mot andra virala proteiner detekteras anses resultatet vara tveksamt, en sådan patient bör undersökas två gånger - efter 3 och 6 månader.
Frånvaron av antikroppar mot specifika HIV-proteiner gör att enzymimmunoanalysmetoden gav ett falskt positivt resultat. Samtidigt, i praktiskt arbete, när man bedömer resultaten av immunoblottingmetoden, är det nödvändigt att följa instruktionerna som tillhandahålls av företaget till "Immunoblotting Kit" som används.
Immunblottingmetoden används för laboratoriediagnostik av HIV-infektion.
Antigen p24 i blodserum
P24-antigenet saknas normalt i blodserum.
p24-antigenet är ett nukleotidväggsprotein från HIV. Stadiet av primära manifestationer efter HIV-infektion är en konsekvens av början av replikationsprocessen. P24-antigenet uppträder i blodet 2 veckor efter infektion och kan detekteras med ELISA inom en period av 2 till 8 veckor. Efter 2 månader från infektionsögonblicket försvinner p24-antigenet från blodet. Därefter, i det kliniska förloppet av HIV-infektion, observeras en andra ökning av nivån av p24-protein i blodet. Det faller under bildandet av AIDS. Befintliga ELISA-testsystem för att detektera p24-antigenet används för tidig upptäckt av HIV hos blodgivare och barn, för att bestämma prognosen för AIDS-förloppet och övervaka terapi hos patienter med AIDS. ELISA har hög analytisk känslighet, vilket gör det möjligt att detektera HIV-1 p24-antigen i blodserum vid en koncentration av 5-10 pkg/ml och HIV-2 - mindre än 0,5 ng/ml, samt specificitet. Det bör dock noteras att nivån av p24-antigen i blodet är föremål för individuella variationer, vilket innebär att endast 20-30% av patienterna kan detekteras med detta test i den tidiga perioden efter infektion (Rose N.R. et al., 1997).
Antikroppar mot p24-antigenet i IgM- och IgG-klasserna uppträder i blodet från och med 2:a veckan, når en topp inom 2-4 veckor och förblir på denna nivå under olika tider: IgM-klassantikroppar - i flera månader, försvinner inom ett år efter infektion och IgG-antikroppar kan kvarstå i åratal.
Algoritmen för att diagnostisera HIV-infektion beror på sjukdomsfasen och kännetecknas av förändringar i dynamiken hos detektionsantikroppar av olika klasser (Fig. 1, 2 - se länken till källan ovan).
Resultatet av studien uttrycks kvalitativt - positivt eller negativt. Ett negativt testresultat indikerar frånvaron av antikroppar mot HIV-1 och HIV-2 och p24-antigen i blodserumet.
Laboratoriet ger ett negativt resultat direkt när det är klart. Om ett positivt resultat erhålls - detektering av antikroppar mot HIV-1 och HIV-2 och/eller p24-antigen - för att undvika falskt positiva resultat i laboratoriet, upprepas analysen ytterligare 2 gånger.
Oavsett resultaten av studien skickas patientens blodprov och resultaten från 3 studier av laboratoriet till det regionala AIDS-centret för att bekräfta ett positivt resultat eller verifiera ett obestämt resultat. I sådana fall utfärdas det slutliga svaret på denna studie av det regionala AIDS-centret.
Detektion av HIV genom polymeraskedjereaktion (kvalitativ)
HIV-detektering genom polymeraskedjereaktion - PCR (kvalitativ) utförs i syfte att:
- upplösning av tvivelaktiga immunoblottingresultat;
- för tidig diagnos av HIV-infektion;
- övervakning av effektiviteten av antiviral behandling;
- bestämma stadiet av AIDS (övergång av infektion till sjukdom).
Vid primär HIV-infektion kan PCR-metoden detektera HIV-RNA i blodet 10-14 dagar efter infektion.
Resultatet av studien uttrycks kvalitativt: positivt eller negativt. Ett negativt testresultat indikerar frånvaron av HIV-RNA i blodet.
Ett positivt resultat - upptäckt av HIV RNA - indikerar att patienten är infekterad.
HIV-detektering genom polymeraskedjereaktion (kvantitativ)
Det finns normalt ingen HIV i blodet.
Direkt kvantifiering av HIV RNA med hjälp av PCR gör det möjligt att mer exakt förutsäga utvecklingshastigheten för aids hos personer som är infekterade med HIV än att bestämma antalet CD4-celler och därför mer exakt bedöma deras överlevnad. Höga nivåer av viruspartiklar korrelerar vanligtvis med allvarlig immunförsämring och lågt antal CD4-celler. Låga nivåer av viruspartiklar korrelerar i allmänhet med bättre immunstatus och högre CD4-cellantal. Innehållet av viralt RNA i blodet gör att vi kan förutsäga övergången av sjukdomen till det kliniska stadiet. När innehållet av HIV RNA-1 är >74 100 kopior/ml utvecklar nästan alla patienter den kliniska bilden av AIDS (Senior D., Holden E., 1996).
Sannolikheten för att utveckla AIDS är 10,8 gånger högre hos individer med blodnivåer av HIV-1 >10 000 kopior/ml än hos individer med blodnivåer av HIV-1<10 000 копий/мл. При ВИЧ-инфекции прогноз непосредственно определяется уровнем виремии. Снижение уровня виремии при лечении улучшает прогноз заболевания.
En grupp amerikanska experter har tagit fram indikationer för behandling av patienter med HIV. Behandling är indicerad för patienter med lågt antal CD4-celler i blodet<300/мкл или уровнем РНК ВИЧ в сыворотке >20 000 kopior/ml (PCR). Resultaten av antiretroviral terapi hos personer som är infekterade med HIV bedöms genom att minska nivån av serum HIV RNA.
Med effektiv behandling bör nivån av viremi minska 10 gånger under de första 8 veckorna och vara under metodens känslighetsgräns (PCR) (<500 копий/мл) через 4-6 месяцев после начала терапии.
Således har många forskningsmetoder idag introducerats och använts i klinisk praxis för att diagnostisera HIV-infektion, som för alla andra virusinfektioner. Bland dem ges den ledande rollen till serologiska studier. De huvudsakliga metoderna för att diagnostisera HIV-infektioner presenteras i tabell 3 (se källlänk ovan), där de är indelade i fyra nivåer beroende på hur viktigt varje metod är för att upptäcka virus:
- A - test används vanligtvis för att bekräfta diagnosen;
- B - test är användbart under vissa omständigheter för att diagnostisera vissa former av infektion;
- C - test används sällan i diagnostiska syften, men är av stor betydelse för epidemiologiska undersökningar;
- D-testet används vanligtvis inte av laboratorier för diagnostiska ändamål.
Eftersom för diagnostisering av virusinfektioner, förutom att välja den optimala analysmetoden, korrekt identifiering och insamling av biomaterial för forskning är lika viktigt, ger tabell 4 (se länken till källan ovan) rekommendationer för val av det optimala biomaterialet för att studera HIV-infektion.
För att övervaka HIV-infekterade personer bör man använda möjligheterna till en omfattande studie av immunstatus - kvantitativ och funktionell bestämning av alla dess länkar: humoral, cellulär immunitet och ospecifik resistens i allmänhet.
I moderna laboratorieförhållanden inkluderar flerstegsprincipen för att bedöma den immunologiska statusen att bestämma subpopulationen av lymfocyter och blodimmunoglobuliner. Vid bedömning av indikatorer bör man ta hänsyn till att HIV-infektion kännetecknas av en minskning av CD4/CD8 T-cellkvoten på mindre än 1. CD4/CD8-indexet på 1,5-2,5 indikerar ett normergiskt tillstånd, mer än 2,5 indikerar hyperaktivitet, mindre 1,0 - indikerar immunbrist. Dessutom kan CD4/CD8-förhållandet vara mindre än 1 i allvarliga fall av den inflammatoriska processen.
Detta förhållande är av grundläggande betydelse vid bedömning av immunsystemet hos patienter med AIDS, eftersom HIV selektivt infekterar och förstör CD4-lymfocyter, vilket resulterar i att CD4/CD8-förhållandet minskar till värden betydligt mindre än 1.
Bedömning av den immunologiska statusen baseras också på att identifiera allmänna eller "grova" defekter i det cellulära och humorala immunsystemet: hypergammaglobulinemi (ökade koncentrationer av IgA, IgM, IgG) eller hypogammaglobulinemi i terminalstadiet; ökad koncentration av cirkulerande immunkomplex; minskad produktion av cytokiner; försvagning av lymfocyternas respons på antigener och mitogener.
Brott mot förhållandet mellan populationer i den allmänna poolen av B-lymfocyter är karakteristiskt för otillräcklig humoral immunitet. Dessa förändringar är dock inte specifika för HIV-infektion och kan förekomma vid andra sjukdomar. Vid en omfattande bedömning av ett antal andra laboratorieparametrar bör det beaktas att HIV-infektion också kännetecknas av: anemi, lymfo- och leukopeni, trombocytopeni, ökade nivåer av β2-mikroglobulin och C-reaktivt protein samt ökat transaminas aktivitet i blodserumet.
Förebyggande av HIV-infektion
Sanitära och epidemiologiska regler
SP 3.1.5. 2826-10
I. Tillämpningsområde
1.1. Dessa sanitära och epidemiologiska regler (nedan kallade sanitära regler) fastställer de grundläggande kraven för en uppsättning organisatoriska, behandlings- och förebyggande, sanitära och anti-epidemiåtgärder, vars genomförande säkerställer förebyggande av förekomst och spridning av HIV-infektion.
1.2. Efterlevnad av sanitära regler är obligatoriskt för medborgare, enskilda företagare och juridiska personer.
1.3. Övervakningen av genomförandet av dessa sanitära och epidemiologiska regler utförs av de organ som utövar statlig sanitär och epidemiologisk övervakning.
II. Använda förkortningar
| ARV-läkemedel | antiretrovirala läkemedel |
| KONST | antiretroviral terapi |
| AG | antigener |
| PÅ | antikroppar |
| HAART | högaktiv antiretroviral terapi |
| nosokomial infektion | nosokomial infektion |
| VG | viral hepatit |
| HIV | AIDS-virus |
| WHO | Världshälsoorganisationen |
| DI | konfidensintervall |
| ÄR | immunblotting |
| IP | HIV-proteashämmare |
| STI | sexuellt överförbara infektioner |
| ELISA | kopplad immunosorbentanalys |
| KSR | kommersiella sexarbetare |
| LIA | linje blotting |
| LPO | behandling och förebyggande organisation |
| MSM | män som har sex med män |
| NRTI | HIV-nukleosid omvänt transkriptashämmare |
| NNRTI | icke-nukleosid HIV omvänt transkriptashämmare |
| NAT | nukleinsyraamplifiering |
| OI | opportunistiska infektioner |
| PCR | polymeraskedjereaktion |
| STIFT | injektionsmissbrukare |
| RNA | ribonukleinsyra |
| AIDS | förvärvat immunbristsyndrom |
| CD4 | celler som bär CD4-cellreceptorn på sin yta |
III. Allmänna bestämmelser
3.1. HIV-infektion– sjukdomen orsakad av humant immunbristvirus är en antroponotisk infektionssjukdom som kännetecknas av en specifik skada i immunsystemet, vilket leder till dess långsamma förstörelse fram till bildandet av förvärvat immunbristsyndrom (AIDS), åtföljt av utvecklingen av opportunistiska infektioner och sekundära maligna infektioner neoplasmer.
3.2. Diagnosen av HIV-infektion fastställs på basis av epidemiologiska, kliniska och laboratoriedata.
3.3. AIDS är ett tillstånd som utvecklas mot bakgrund av HIV-infektion och kännetecknas av uppkomsten av en eller flera sjukdomar som klassificeras som AIDS-indikativa. AIDS är ett epidemiologiskt begrepp och används för epidemiologisk övervakning av HIV-infektion.
3.4. Det orsakande medlet för HIV-infektion, humant immunbristvirus, tillhör lentivirusunderfamiljen i retrovirusfamiljen. Det finns två typer av virus: HIV-1 och HIV-2.
3.5. Källan till HIV-infektion är personer som är infekterade med HIV i alla stadier av sjukdomen, inklusive under inkubationsperioden.
3.6. Mekanism och överföringsfaktorer.
3.6.1. HIV-infektion kan överföras genom både naturliga och artificiella överföringsmekanismer.
3.6.2. Den naturliga mekanismen för HIV-överföring inkluderar:
3.6.2.1. Kontakt, som sker främst vid samlag (både homo- och heterosexuella) och när slem- eller sårytan kommer i kontakt med blod.
3.6.2.2. Vertikal (infektion av ett barn från en HIV-smittad mamma: under graviditet, förlossning och amning.)
3.7.3. Artificiella överföringsmekanismer inkluderar:
3.7.3.1. Konstgjord för icke-medicinska invasiva procedurer, inklusive intravenös läkemedelsadministrering (användning av sprutor, nålar, annan injektionsutrustning och material), tatuering , när du utför kosmetiska, manikyr- och pedikyrprocedurer med icke-sterila instrument .
3.7.3.2. Konstgjord för invasiva ingrepp i vårdinrättningar. HIV-infektion kan uppstå genom transfusion av blod, dess komponenter, organ- och vävnadstransplantation, användning av donatorspermier, donatorbröstmjölk från en HIV-infekterad donator, såväl som genom medicinska instrument för parenterala ingrepp, medicinska produkter kontaminerade med HIV och inte behandlas i enlighet med kraven i regeldokument.
3.8. Huvudfaktorerna för överföring av patogenen är mänskliga biologiska vätskor (blod, blodkomponenter, sperma, vaginal flytning, bröstmjölk).
3.9. De huvudsakliga befolkningsgrupperna som är sårbara för HIV-infektion är: injektionsmissbrukare (IDU), kommersiella sexarbetare (CSW), män som har sex med män (MSM). Gruppen som löper ökad risk att insjukna i hiv inkluderar klienter till sexarbetare, sexuella partners till injektionsmissbrukare, fångar, gatubarn, personer med ett stort antal sexuella partners, migrerande delar av befolkningen (lastbilschaufförer, säsongsarbetare, inklusive utländska medborgare som arbetar på en rotationsbas och andra) , personer som missbrukar alkohol och icke-injicerande droger, eftersom de under påverkan av psykoaktiva ämnen är mer benägna att engagera sig i farligare sexuellt beteende.
3.10. Kliniskt förlopp av HIV-infektion utan användning av antiretroviral terapi.
3.10.1. Inkubationsperiod
Inkubationstiden för HIV-infektion är perioden från infektionsögonblicket tills kroppens svar på introduktionen av viruset (uppkomsten av kliniska symtom eller produktion av antikroppar) är vanligtvis 2-3 veckor, men kan vara upp till 3- 8 månader, ibland upp till 12 månader. Under denna period upptäcks inte antikroppar mot HIV hos den infekterade personen, vilket ökar risken för överföring av infektion från honom i nosokomiala foci, inklusive genom transfusion av blod och dess komponenter.
3.10.2. Akut HIV-infektion.
Hos 30–50% av de infekterade uppträder symtom på akut HIV-infektion, som åtföljs av olika manifestationer: feber, lymfadenopati, erytematös-makulopapulära utslag i ansiktet, bålen, ibland på extremiteterna, myalgi eller artralgi, diarré, huvudvärk, illamående och kräkningar, leverförstoring och mjälte, neurologiska symtom. Dessa symtom uppträder mot bakgrund av en hög virusmängd i olika kombinationer och har olika svårighetsgrad. I sällsynta fall kan allvarliga sekundära sjukdomar utvecklas redan i detta skede, vilket leder till att patienter dör. Under denna period ökar frekvensen av remisser av smittade personer till vårdinrättningar; risken för överföring av infektion är hög på grund av den stora mängden virus i blodet.
3.10.3. Subkliniskt stadium.
Varaktigheten av det subkliniska stadiet är i genomsnitt 5–7 år (från 1 till 8 år, ibland mer), det finns inga andra kliniska manifestationer än lymfadenopati. I detta skede, i avsaknad av manifestationer, förblir den infekterade personen en källa till infektion under lång tid. Under den subkliniska perioden fortsätter HIV att föröka sig och antalet CD4-lymfocyter i blodet minskar.
3.10.4. Stadium av sekundära sjukdomar.
Mot bakgrund av ökande immunbrist uppträder sekundära sjukdomar (infektiösa och onkologiska). Sjukdomar med infektioner av viral, bakteriell, svampnatur går initialt ganska gynnsamt och stoppas av konventionella terapeutiska medel. Inledningsvis är dessa till övervägande del lesioner i hud och slemhinnor, sedan organ- och generaliserade lesioner, vilket leder till patientens död.
3.11. Antiretroviral terapi (ART) är den etiotropiska behandlingen av HIV-infektion. För närvarande eliminerar ART inte HIV helt från patientens kropp, men det stoppar multiplikationen av viruset, vilket leder till återställande av immunitet, förhindrande av utveckling eller regression av sekundära sjukdomar, bevarande eller återställande av patientens arbetsförmåga och förebyggande av hans död. Effektiv antiretroviral behandling är också en förebyggande åtgärd som minskar risken för patienten som infektionskälla.
IV. Laboratoriediagnos av HIV-infektion
4.1. Laboratoriediagnostik av HIV-infektion baseras på detektering av antikroppar mot HIV och virala antigener, samt, i speciella fall, upptäckt av HIV-proviralt DNA och HIV-viralt RNA (hos barn under det första levnadsåret).
4.2. Laboratorietester för diagnos av hiv-infektion utförs i institutioner i det statliga, kommunala eller privata hälsovårdssystemet på grundval av en sanitär-epidemiologisk rapport och en licens som tillhandahålls på det sätt som fastställts i Rysslands lagstiftning.
4.3. Standardmetoden för laboratoriediagnostik av HIV-infektion är bestämning av antikroppar/antigener mot HIV med hjälp av ELISA. Bekräftande tester (immun, line blot) används för att bekräfta resultat angående HIV.
4.4. Diagnostisk algoritm för att testa förekomsten av antikroppar mot HIV:
4.4.1. I det första steget (screeninglaboratorium).
Om ett positivt resultat erhålls i ELISA, utförs analysen sekventiellt 2 gånger till (med samma serum och i samma testsystem begärs det andra serumet endast om det är omöjligt att skicka det första serumet för vidare forskning) . Om två positiva resultat erhålls från tre ELISA-tester anses serumet vara primärt positivt och skickas till referenslaboratoriet (HIV Diagnostic Laboratory of the Center for Prevention and Control of AIDS) för vidare forskning.
4.4.2. Vid det andra steget (referenslaboratorium).
Det initialt positiva serumet testas om med ELISA i ett andra testsystem från en annan tillverkare, vilket skiljer sig från det första i sammansättningen av antigener, antikroppar eller testformat som valts för bekräftelse. Om ett negativt resultat erhålls testas serumet om i ett tredje testsystem från en annan tillverkare, vilket skiljer sig från det första och andra i sammansättningen av antigener, antikroppar eller testformat. Om ett negativt resultat erhålls (i det andra och tredje testsystemet), utfärdas en slutsats om frånvaron av antikroppar mot HIV. Om ett positivt resultat erhålls (i det andra och/eller tredje testsystemet) måste serumet undersökas i en immun eller linjär blöt. Resultaten som erhålls i det bekräftande testet tolkas som positivt, obestämt eller negativt.
4.4.2.1. För att säkerställa kontroll och redovisning av forskning bör referensdiagnostik utföras i samma ämne i Ryska federationen där screeningundersökningen utfördes i laboratoriet på en auktoriserad specialiserad hälsovårdsinrättning som utför organisatoriskt och metodiskt arbete med att utföra ut diagnostiska, terapeutiska, förebyggande och anti-epidemiåtgärder för HIV-infektion och relaterade sjukdomar.
Referensdiagnostik kan också utföras vid den federala statliga institutionen, på grundval av vilken de federala och distriktscentra för förebyggande och kontroll av AIDS fungerar, och vid Federal State Institution Republican Clinical Infectious Diseases Hospital (St. Petersburg).
4.4.3. Tester som innehåller antikroppar mot 2 av 3 HIV-glykoproteiner (env, gag, pol) anses vara positiva.
4.4.4. Serum anses vara negativa (negativa) där inga antikroppar detekteras mot något av HIV-antigenerna (proteinerna) eller det finns en svag reaktion med p 18-proteinet.
4.4.5. Sera som innehåller antikroppar mot ett HIV-glykoprotein och/eller något HIV-protein anses vara obestämda (tveksamt). Om ett obestämt resultat erhålls med en proteinprofil inklusive kärnproteiner (gag) p 25, utförs ett test för att diagnostisera HIV-2.
4.4.6. Om ett negativt och tveksamt resultat erhålls i en immun eller linjär blöt, rekommenderas att undersöka serumet i ett testsystem för att bestämma p24-antigenet eller HIV-DNA/RNA. Om p24-antigen eller HIV-DNA/RNA har detekterats, utförs omundersökning med en immun- eller linjeblot 2, 4, 6 veckor efter mottagandet av det första obestämda resultatet.
4.4.7. Om ett obestämt resultat erhålls, utförs upprepade tester för antikroppar mot HIV med en immun eller linjär blöt efter 2 veckor, 3 och 6 månader. Om negativa ELISA-resultat erhålls krävs ingen ytterligare forskning. Om 6 månader efter den första undersökningen återigen obestämda resultat erhålls, och patienten inte har riskfaktorer för infektion och kliniska symtom på HIV-infektion, betraktas resultatet som ett falskt positivt. (Om det finns epidemiologiska och kliniska indikationer utförs serologiska studier upprepade gånger enligt ordination av den behandlande läkaren eller epidemiologen).
4.5. För att diagnostisera HIV-infektion hos barn under 18 månader födda av HIV-infekterade mödrar, på grund av närvaron av moderns antikroppar, används andra tillvägagångssätt.
4.5.1. För att diagnostisera HIV-infektion hos barn under 12 månader födda av HIV-infekterade mödrar används metoder som syftar till att identifiera HIV genetiskt material (DNA eller RNA). Att få positiva testresultat för HIV-DNA eller HIV-RNA i två separata blodprover från ett barn äldre än en månad är laboratoriebekräftelse på diagnosen HIV-infektion. Att få två negativa provsvar för HIV-DNA eller HIV-RNA vid 1–2 månaders och 4–6 månaders ålder (vid amning saknas) tyder på att barnet har HIV-infektion, men barnet avförs från apoteksregistret p.g.a. intranatal och perinatal kontakt på grund av HIV-infektion kan inträffa efter 1 års ålder.
4.5.2. Borttagning från apoteksregistrering för HIV-infektion vid 18 månaders ålder utförs med samtidig närvaro av:
– två eller flera negativa resultat av testning för antikroppar mot HIV med hjälp av ELISA;
– frånvaro av uttalad hypogammaglobulinemi vid tidpunkten för blodprov för antikroppar mot HIV;
– frånvaro av kliniska manifestationer av HIV-infektion;
4.5.3. Diagnos av HIV-infektion hos barn födda av HIV-infekterade mödrar och som uppnår 18 månaders ålder görs på samma sätt som hos vuxna.
4.6. Laboratoriediagnos av HIV-infektion kan endast utföras med certifierade standardiserade diagnostiska testsystem (kit) godkända för användning på Ryska federationens territorium i enlighet med det fastställda förfarandet.
För att utföra inkommande kvalitetskontroll av de testsystem som används för att identifiera personer infekterade med humant immunbristvirus används standardserumpaneler (industristandardprover) godkända för användning på föreskrivet sätt.
4.7. Dokumentet som utfärdats av laboratoriet baserat på resultaten av studien anger testsystemets namn, dess utgångsdatum, serie, ELISA-resultat (positivt, negativt), immunoblotresultat, linjär blot (lista över identifierade proteiner och slutsats: positiv, negativ, obestämd). För konfidentiell forskning måste dokumentet innehålla passdata: fullständigt namn, fullständigt födelsedatum, bostadsadress, kontingentkod. Vid en anonym undersökning markeras handlingen med en särskilt fastställd kod.
4.7.1. Om ett tveksamt resultat erhålls i ett bekräftande test (immun, linjär blott) utfärdas en slutsats om ett osäkert resultat av studien och det rekommenderas att upprepa undersökningen av patienten tills statusen fastställts (efter 3, 6, 12 månader).
4.8. Enkla/snabba HIV-specifika antikroppstester är tester som kan utföras utan specialutrustning på mindre än 60 minuter . Blod, serum, blodplasma och saliv (skrapning från tandköttsslemhinnan) kan användas som testmaterial ).
4.8.1. Användningsområden för enkla/snabba tester:
- transplantologi – innan donatormaterial samlas in;
- donation – blodundersökning, i händelse av akut transfusion av blodprodukter och frånvaro av donatorblod som testats för HIV-antikroppar;
- vertikalt förebyggande – testning av gravida kvinnor med okänd HIV-status under prenatalperioden (för att föreskriva läkemedelsförebyggande av HIV-infektion under förlossningen);
- HIV-profylax efter exponering – HIV-testning i nödfall;
4.8.2. Varje HIV-test med enkla/snabbtester måste åtföljas av en obligatorisk parallell studie av samma portion blod med de klassiska metoderna ELISA och IB.
4.9. Det är inte tillåtet att dra en slutsats om förekomst eller frånvaro av HIV-infektion baserat enbart på resultaten av ett enkelt/snabbtest. Resultaten av enkla/snabbtester används endast för att fatta beslut i tid i nödsituationer.
I ett högspecialiserat laboratorium utförs följande:
A) bestämning av antikroppar, antigener och immunkomplex som cirkulerar i blodet; odla viruset, identifiera dess genomiska material och enzymer;
B) bedömning av funktionerna hos den cellulära delen av immunsystemet. Huvudrollen tillhör serologiska diagnostiska metoder som syftar till att bestämma antikroppar, såväl som patogena antigener i blodet och andra biologiska vätskor i kroppen.
HIV-antikroppstestning utförs för att:
A) säkerhet vid blodtransfusioner och transplantationer;
B) övervakning, testning för att övervaka prevalensen av HIV-infektion och studera dynamiken i dess prevalens i en viss population;
C) diagnos av HIV-infektion, dvs frivillig testning av blodserum från praktiskt taget friska personer eller patienter med olika kliniska tecken och symtom som liknar HIV-infektion eller AIDS.
Systemet för laboratoriediagnostik av HIV-infektion bygger på en princip i tre steg. Det första steget är screening, avsedd att utföra primära blodprover för förekomst av antikroppar mot HIV-proteiner. Det andra steget är refererande - det gör det möjligt att, med hjälp av speciella metodologiska tekniker, klargöra (bekräfta) det primära positiva resultatet som erhålls vid screeningsteget. Det tredje steget är expertstadiet, avsett för den slutliga verifieringen av närvaron och specificiteten hos markörer för HIV-infektion som identifierats i de tidigare stadierna av laboratoriediagnostik. Behovet av flera stadier av laboratoriediagnostik beror i första hand på ekonomiska överväganden.
I praktiken används flera tester som gör det möjligt att identifiera HIV-smittade personer med tillräcklig grad av tillförlitlighet:
ELISA-test (enzymkopplad immunosorbentanalys) för detektion av den första nivån kännetecknas av hög känslighet, även om mindre specificitet än följande;
Immunblot (Western-blot), ett mycket specifikt och mest använda test för att skilja mellan HIV-1 och HIV-2;
Antigenemi p25-test, effektivt i de inledande stadierna av infektion;
Polymeraskedjereaktion (PCR).
Vid massscreening av blodprov rekommenderas att testa blandningar av sera från en grupp försökspersoner, sammanställda på ett sådant sätt att den slutliga utspädningen av varje prov inte överstiger 1:100. Om en blandning av sera är positiv testas varje serum i den positiva blandningen. Denna metod leder inte till en förlust av känslighet i både ELISA och immunoblot, men minskar arbetskostnaderna och kostnaden för den första undersökningen med 60-80%.
Immunologiska metoder
1. antal T-hjälpare,
2. förhållandet mellan T4 och T8,
3. tillstånd av överkänslighet,
4. T-cellsystemets kompensatoriska funktion.
Det manifesteras av hyperproduktion av immunglobuliner, de har låg affinitet och kroppens material konsumeras ännu mer.
Nackdelar: visas sent, vissa immunologiska indikatorer kan finnas vid andra infektioner.
Kliniska metoder – m.b. liknar andra sjukdomar, de mest typiska manifestationerna registreras i senare skeden, så klinisk diagnos är inte särskilt effektiv
Den huvudsakliga metoden - serologisk - implementeras i två steg:
1 – screeningundersökning – provtagning för totala antikroppar mot alla proteiner i immunanalysen. Detta stadium ger 95 % sanna resultat och 5 % falskt positiva.
2 – konfirmationsmetod – alla prover undersöks med en konfirmationsmetod. Denna teknik låter dig upptäcka antikroppar mot virusproteinet. Ett positivt resultat är när antikroppar mot minst 3 virala proteiner detekteras, om till 1 eller 2 är resultatet tveksamt och kräver ytterligare undersökning.
Under den primära serodiagnosen av HIV-infektion bestäms totala antikroppar med hjälp av screeningtest - ELISA och agglutinationsreaktioner. I det andra (arbitration) skedet används ett mer komplext test - en immunoblot, som inte bara gör det möjligt att bekräfta eller avvisa den initiala slutsatsen, utan också att göra detta på nivån för att bestämma antikroppar mot enskilda proteiner av viruset.
Tolkning av testresultat för HIV-antikroppar
Ett ganska stort antal olika faktorer påverkar resultatet av ett HIV-antikroppstest, och bland dem är tidpunkten för testet efter eventuell infektion viktig.
I de flesta fall kan antikroppar mot hiv upptäckas 6–12 veckor efter infektion. Denna period från att viruset kommer in i kroppen tills en detekterbar mängd antikroppar dyker upp kallas perioden med positiv serokonversion eller "fönsterperioden". Det finns sällsynta fall av uppkomst av antikroppar 6 månader efter infektion, och rapporter om upptäckt av antikroppar först efter 1 år har inga bevis. För närvarande använder diagnostjänsten nya generationer av ELISA-metoder som gör det möjligt att upptäcka antikroppar mot HIV 3–4 veckor efter infektion, och vissa kombinationer av dessa metoder, de så kallade teststrategierna, reducerar ”fönster”-perioden till 2– 3 veckor, dvs. göra det möjligt att upptäcka antikroppar mot HIV så snart de börjar produceras i kroppen.
Ett negativt resultat innebär att inga antikroppar mot hiv upptäcktes i blodet på den som undersöks. Detta tillstånd kallas seronegativitet och innebär vanligtvis att personen inte är smittad.
Ett negativt resultat ger ingen garanti för framtiden. Han uppger endast tillståndet vid undersökningstillfället. Det finns en liten chans att undersökningen genomfördes under fönsterperioden. Därför, om en person tidigare har exponerats för hiv och testats negativt, bör de testas igen minst 6 månader efter riskhändelsen.
Ett positivt resultat betyder att antikroppar mot HIV hittades i patientens blod. Detta tillstånd kallas seropositivitet - en person är infekterad med HIV. Det är viktigt att förstå att ett positivt resultat endast indikerar HIV-infektion och inte AIDS. Det är dock extremt viktigt att kontakta en läkare efter att ha fått ett positivt resultat för råd och vid behov medicinsk hjälp, vilket gör att du kan behålla din livskvalitet på en bra nivå under lång tid.
Osäkert resultat. I sällsynta fall är resultatet av ett HIV-antikroppstest oklart. Laboratoriet kan inte svara på om en person är seropositiv eller seronegativ. Under sådana omständigheter är det nödvändigt att konsultera en läkare och testa sig igen.
Vid diagnos av HIV-infektion används fyra grupper av metoder:
1. Bestämning av närvaron av viruset, dess antigener eller RNA-kopior i material från en patient eller HIV-infekterad person
2. Serologisk diagnos, baserad på detektion av specifika antikroppar mot yt- (gp 120 och gp 41) och interna (p 18 och p 24) HIV-proteiner.
3. Identifiering av patognomoniska (specifika) förändringar i immunsystemet för HIV-infektion.
4. Laboratoriediagnos av opportunistiska infektioner (AIDS-associerade sjukdomar).
1. Virologisk diagnos. Materialet för att isolera HIV är blod T-lymfocyter, benmärgsleukocyter, lymfkörtlar, hjärnvävnad, saliv, spermier, cerebrospinalvätska, blodplasma. Det resulterande materialet används för att infektera en kontinuerlig odling av T-lymfocyter (H9). Indikation av HIV i cellkultur utförs genom CPD (bildning av symplaster), såväl som genom immunfluorescens, elektronmikroskopi och uttryckt omvänt transkriptasaktivitet. Moderna forskningsmetoder gör det möjligt att detektera en infekterad lymfocyt per 1000 celler.
Detektion av virala antigener i infekterade T-lymfocyter utförs med användning av monoklonala antikroppar
De senaste åren har bestämning av antalet kopior av HIV-RNA i blodplasman med hjälp av polymeraskedjereaktionsmetoden (PCR) – den så kallade virusbelastningen – varit avgörande för att bestämma prognosen och svårighetsgraden av HIV-infektion. Om hos patienter som inte får behandling är virusmängden under detektionsgränsen (mindre än 5000 kopior av HIV RNA i 1 ml plasma), indikerar detta frånvaro av progression eller långsam progression. Graden av smitta är minimal. En hög virusmängd (mer än 10 000 kopior av RNA i 1 ml plasma) hos patienter med ett antal CO4-lymfocyter mindre än 300 på 1 μl tyder alltid på att sjukdomen utvecklas.
2. Serologisk diagnos. För närvarande är det mest utbrett.
Material för forskning: 5 ml. hepariniserat blod, som kan förvaras kylt, men inte fryst, i 6-8 timmar innan leverans till laboratoriet.
För syftet med serologisk diagnos av AIDS används i första hand enzymimmunanalysmetoder med standardenzymimmunanalyssystem (ELISA). Detta är en screeningmetod. Funktionsprincipen är baserad på den klassiska principen för direkt ELISA. Immunosorbenten är polystyrentabletter med immobiliserat inaktiverat virusspecifikt antigen erhållet från HIV eller syntetiskt. Därefter tillsätts det utspädda testserumet. Inkubation utförs i brunnar med antigen. Efter bindningen av AG till AT tvättas obundna proteiner tre gånger, och sedan tillsätts ett konjugat av antikroppar mot humana immunglobuliner med en enzymmärkning till brunnarna. Bildandet av ett specifikt AG+AT-komplex detekteras genom att tillsätta ett substrat för enzymet (en lösning av ortofenylendiamin och väteperoxid). Som ett resultat ändras mediets färg i proportion till mängden antikroppar. Resultaten av studien beaktas på en spektrofotometer. Blodserum som har virusspecifika antikroppar enligt ELISA-data måste undersökas ytterligare genom immunblotting.
Immunblotting är ett bekräftande test eftersom det upptäcker antikroppar mot olika HIV-proteiner. Den är baserad på preliminär fraktionering efter molekylvikt (separation) av HIV-proteiner genom elektrofores i en polyakrylamidgel, följt av överföring av antigener till ett nitrocellulosamembran. Testserumet appliceras sedan på membranet. I detta fall bildar specifika antikroppar ett komplex med ett specifikt antigen (gp.120, gp.41, s.24, s.18). Det sista steget i studien är identifieringen av antikroppar mot olika HIV-proteiner. För att göra detta läggs antikroppar mot humana proteiner märkta med en enzym- eller radioisotopmärkning till systemet. Således detekteras (eller detekteras inte) virusspecifika antikroppar mot alla eller de flesta HIV-antigener i patientens serum.
3. Studier av immunstatus. Syftar till att identifiera:
1) minska förhållandet mellan CD4/CD8-celler (i N2 och >, med AIDS - 0,5 och<);
2) minska innehållet i CD4-celler (<200 клеток/мл.);
3) närvaron av ett av laboratorietecknen, inklusive anemi, leukopeni, trombopeni, lymfopeni;
4) öka koncentrationen av Ig A och Ig G i blodserumet;
5) reducering av responsen av lymfocytblastbildning på mitogener;
6) frånvaro av hudreaktion av GTZ mot flera antigener;
7) öka nivån av cirkulerande immunkomplex.
... diagnosen av någon infektionssjukdom baseras på en jämförelse av epidemiologiska, kliniska och laboratoriedata, och överdrift av betydelsen av en av grupperna av dessa data kan leda till diagnostiska fel.
Diagnos av HIV-infektion omfattar två steg:
jag skede - fastställa det faktiska faktumet av HIV-infektion
;
II skede - bestämma sjukdomsstadiet
.
ATT FASTSTÄLLA FAKTUMET OM HIV-INFEKTION
Att fastställa det faktiska faktumet av HIV-infektion (det vill säga att identifiera HIV-infekterade personer) inkluderar i sin tur också två steg:
Steg I- kopplad immunosorbentanalys(ELISA): ELISA-metoden är en screeningsmetod (selektion) - urvalet av förmodligen infekterade individer, det vill säga dess mål är att identifiera misstänkta individer och eliminera friska individer; Antikroppar mot HIV detekteras med hjälp av andra antikroppar mot de önskade antikropparna (antikroppar mot andra antikroppar). Dessa "hjälpar" antikroppar är märkta med ett enzym. Alla screeningtester måste vara högkänsliga för att inte missa en patient. På grund av detta är deras specificitet inte särskilt hög, det vill säga ELISA kan ge ett positivt svar ("förmodligen sjuka") hos oinfekterade personer (till exempel hos patienter med autoimmuna sjukdomar: reumatism, systemisk lupus erythematosus, etc.). Frekvensen av falskt positiva resultat vid användning av olika testsystem varierar från 0,02 till 0,5 %. Om en persons ELISA-test ger ett positivt resultat, är ytterligare undersökning nödvändig för att bekräfta faktumet av HIV-infektion. När du utför ELISA är falska negativa resultat möjliga i 3-5% av fallen - om infektionen inträffade relativt nyligen och nivån av antikroppar fortfarande är mycket låg, eller i det terminala stadiet av sjukdomen, kännetecknad av allvarlig skada på immunsystemet med en djupgående störning av processen för antikroppsbildning. Om det finns tecken på kontakt med personer som är infekterade med HIV, utförs därför upprepade studier vanligtvis efter 2 - 3 månader.
Steg II - immunblotting(modifierad Western blot, western blot): är en mer komplex metod och tjänar till att bekräfta infektionen. Denna metod detekterar inte komplexa antikroppar mot HIV, utan antikroppar mot dess individuella strukturella proteiner (p24, gp120, gp41, etc.). Resultaten av immunoblotting anses vara positiva om antikroppar mot minst tre proteiner detekteras, varav en kodas av env-generna, den andra av gag-generna och den tredje av pol-generna. Om antikroppar mot ett eller två proteiner detekteras anses resultatet tveksamt och kräver bekräftelse. I de flesta laboratorier ställs diagnosen HIV-infektion om antikroppar mot proteinerna p24, p31, gp4l och gpl20/gp160 samtidigt detekteras. Kärnan i metoden: viruset förstörs till komponenter (antigener), som består av joniserade aminosyrarester, och därför har alla komponenter ett annat ursprung från varandra; sedan, med hjälp av elektrofores (elektrisk ström), fördelas antigenerna på ytan av remsan - om testserumet innehåller antikroppar mot HIV, kommer de att interagera med alla grupper av antigener, och detta kan detekteras.
Det bör kommas ihåg att antikroppar mot hiv uppträder hos 90-95 % av de smittade inom 3 månader efter infektion, hos 5-9 % av de smittade uppträder antikroppar mot hiv efter 6 månader och hos 0,5-1 % av de smittade uppträder antikroppar mot hiv senare deadlines. Under AIDS-stadiet kan antalet antikroppar minska tills de försvinner helt.
Inom immunologi finns ett sådant koncept som "serologiskt fönster" - perioden från infektion tills en sådan mängd antikroppar uppträder som kan detekteras. För hiv varar denna period vanligtvis från 2 till 12 veckor, i sällsynta fall längre. Under det "serologiska fönstret", enligt tester, är en person frisk, men i själva verket är han infekterad med HIV. Det har fastställts att HIV-DNA kan finnas kvar i det mänskliga genomet i minst tre år utan tecken på aktivitet och antikroppar mot HIV (markörer för HIV-infektion) förekommer inte.
Under denna period ("serologiskt fönster") är det möjligt att identifiera en HIV-smittad person och även 1-2 veckor efter infektion med hjälp av polymeraskedjereaktion(PCR). Detta är en extremt känslig metod - teoretiskt sett kan 1 DNA per 10 ml medium detekteras. Kärnan i metoden är som följer: med hjälp av polymeraskedjereaktionen erhålls många kopior av en nukleinsyra (ett virus är en nukleinsyra - DNA eller RNA - i ett proteinskal), som sedan identifieras med hjälp av märkta enzymer eller isotoper , såväl som genom deras karakteristiska struktur. PCR är en dyr diagnostisk metod, så den används inte för screening eller rutinmässigt.
BESTÄMNING AV SJUKDOMENS STAD
Utvecklingen av AIDS bygger på, först av allt, förstörelsen av T-lymfocyter-hjälpare, märkta av monoklonala antikroppar - differentieringskluster - som CD4. I detta avseende är det omöjligt att diagnostisera och övervaka sjukdomens fortskridande utan att övervaka subpopulationen av T-hjälparceller, vilket är lämpligast att utföra med hjälp av en lasercellsorterare.
För mild HIV-infektion Antalet T-lymfocyter är en extremt varierande indikator. I allmänhet finns en minskning av antalet CD4-celler (absolut och relativ) hos individer vars HIV-infektion inträffade för minst ett år sedan. Å andra sidan finns det i de tidiga stadierna av infektion ofta ett kraftigt ökat antal suppressor T-celler (CD8) både i det perifera blodet och i förstorade lymfkörtlar.
Med svår AIDS Den absoluta majoriteten av patienterna har ett minskat totalt antal T-lymfocyter (mindre än 1000 i 1 μl blod, inklusive CD4-lymfocyter - mindre än 22 i 1 μl, medan det absoluta värdet av CD8-innehållet håller sig inom normala gränser). Följaktligen minskar CD4/CD8-förhållandet kraftigt. T-cellssvar in vitro på standardantigener och mitogener reduceras i strikt överensstämmelse med det relativt reducerade CD4-talet.
För sena stadier av AIDS Kännetecknas av allmän lymfopeni, neutropeni, trombocytopeni (respektive en minskning av antalet lymfocyter, neutrofiler och blodplättar), anemi. Dessa förändringar kan vara en konsekvens av central hämning av hematopoiesen på grund av skada på de hematopoetiska organen av viruset, såväl som autoimmun förstörelse av cellsubpopulationer i periferin. Dessutom kännetecknas AIDS av en måttlig ökning av mängden gammaglobuliner med en dominerande ökning av halten av IgG. Patienter med svåra AIDS-symtom har ofta förhöjda IgA-nivåer. I vissa stadier av sjukdomen ökar nivån av AIDS-markörer som 1-mikroglobulin, syrastabilt interferon, 1-tymosin signifikant. Samma sak händer med utsöndringen av fritt neopterin, en metabolit av makrofager. Det är ännu inte möjligt att bedöma den relativa betydelsen av vart och ett av de listade testerna, vars antal ständigt ökar. Därför bör de övervägas i interaktion med markörer för HIV-infektion, både immunovirologiska och cytologiska. Ett kliniskt blodprov kännetecknas av leukopeni, lymfopeni (respektive en minskning av antalet leukocyter och lymfocyter).
Steg 1 - " inkubationsstadiet»
- antikroppar mot HIV har ännu inte upptäckts; diagnosen HIV-infektion i detta skede görs på grundval av epidemiologiska data och måste laboratoriebekräftas genom upptäckt av humant immunbristvirus, dess antigener och HIV-nukleinsyror i patientens blodserum;
Steg 2 -" stadium av primära manifestationer»
- under denna period finns det redan produktion av antikroppar:;
Steg 2A - " asymtomatisk»
- HIV-infektion manifesteras endast genom produktion av antikroppar;
Steg 2B - " akut HIV-infektion utan sekundära sjukdomar»
- breda plasmalymfocyter - "mononukleära celler" kan detekteras i blodet hos patienter, och en övergående minskning av nivån av CD4-lymfocyter observeras ofta (akut klinisk infektion observeras hos 50-90% av infekterade individer under de första 3 månader efter infektion; början av perioden med akut infektion föregår som regel serokonversion, dvs. uppkomsten av antikroppar mot HIV);
Steg 2B - " akut HIV-infektion med sekundära sjukdomar»
- mot bakgrund av en minskning av nivån av CD4-lymfocyter och den resulterande immunbrist, uppträder sekundära sjukdomar av olika etiologier (angina, bakteriell och Pneumocystis lunginflammation, candidiasis, herpetisk infektion, etc.);
Steg 3 -" latent»
- som svar på utvecklingen av immunbrist sker en modifiering av immunsvaret i form av överdriven reproduktion av CD4-celler, följt av en gradvis minskning av nivån av CD4-lymfocyter, i genomsnitt med en hastighet av 0,05-0,07x109/l per år; antikroppar mot HIV detekteras i blodet;
Steg 4 -" stadium av sekundära sjukdomar»
- utarmning av lymfocyter i CD4-populationen, koncentrationen av antikroppar mot viruset minskar signifikant (beroende på svårighetsgraden av sekundära sjukdomar, särskiljs steg 4A, 4B, 4B);
Steg 5 -" terminalsteg»
- vanligtvis en minskning av antalet CD4-celler under 0,05x109/l; koncentrationen av antikroppar mot viruset minskar avsevärt eller antikroppar kanske inte detekteras.
