Definitivt skulle RIBT vara mer exakt.

Denna studie används för att dubbelkolla ELISA-resultat om de är tveksamma.

Men om vi jämför dessa två metoder har RIBT också nackdelar:

1. Metoden är inte särskilt informativ i ett tidigt skede av sjukdomsutveckling. Det blir positivt endast 2 månader efter infektion. Medan ELISA kan vara positiv redan från 3 veckor.

2. Dyrt och arbetsintensivt. Medan ELISA är en enkel metod som låter dig undersöka ett stort antal personer på kort tid. Det kräver inte mycket tid från laboratorieassistenten och är billigt för patienten.

3. Metoden är inte informativ under perioden för att ta antibiotika, såväl som under en viss period efter avslutad antibakteriell terapi. Patientens användning av antibiotika gör RIBT negativ.

Därför är det tillrådligt att utföra forskning:

tidigast 1 vecka efter utsättning av vattenlösliga penicilliner;
tidigast 25 dagar efter avslutad administrering av varaktiga (långverkande) antibiotika.

Med tanke på de uppräknade nackdelarna är RIBT en metod som används mycket sällan för att diagnostisera syfilis. Men den största fördelen med studien är dess höga tillförlitlighet. Därför kan RIBT användas i svåra diagnostiska fall för att bekräfta eller utesluta infektion.

Huvudapplikationer:

differentialdiagnos från andra tester för syfilis;
diagnos av neurosyfilis;
bedöma möjligheten att ta bort patienten från venerologens register om uppgifterna från andra studier är tveksamma;
upptäckt av latent syfilis;
bestämning av den viscerala formen av sjukdomen;
upptäcka patologi hos gravida kvinnor när andra studier är oinformativa eller vid misstänkta falskt positiva resultat.

ELISA är en screeningsmetod. Det kan bara bekräftas om en annan studie redan har utförts (till exempel ett antikardiolipintest).

Till skillnad från ELISA är RIBT en självförsörjande studie.

Närvaron av ett positivt resultat är en anledning att fastställa en diagnos utan ytterligare diagnostiska metoder. Dessutom används RIBT, som det mest exakta sättet att upptäcka treponema pallidum, inom rättsmedicin för retrospektiv diagnos av syfilis.

Syfilis: RIF, RIBT - akut

Om du behöver testas för syfilis, inklusive RIF eller RIBT, kontakta vår klinik. Vi samarbetar med flera stora laboratorier i Moskva.

Därför har vi breda diagnostiska möjligheter som gör att vi kan utföra nästan vilken forskning som helst. Det ska dock förstås att RIBT inte är en diagnostisk metod där man kan räkna med brådska.

Själva forskningen och att få fram dess resultat kommer inte att ta mycket tid. Men för att säkerställa dess noggrannhet kommer en del förberedelser att krävas.

Patienten måste:

vänta 2 månader från ögonblicket för misstänkt infektion (annars kommer resultatet troligen att vara negativt);
vänta 1 månad från det att du tar antibiotika (de förvränger studiedata, vilket gör resultatet falskt negativt).

Om de nödvändiga villkoren är uppfyllda kan du ta RIBT. Du kommer att få dess resultat inom 1-2 dagar. Om det visar sig vara positivt kan du genomgå behandling för syfilis på vår klinik.

Vi har erfarna venerologer som hjälper dig att bli av med denna farliga sjukdom.

Om du behöver ta RIBT och andra tester för syfilis, kontakta behöriga venerologer.

Syfilis åtföljs av många symtom och har ett stort antal kliniska former. Dess erkännande baseras på en omfattande klinisk och laboratorieundersökning av patienten. Ett allmänt blodprov för syfilis ger lite information, så det används inte för att diagnostisera sjukdomen.

Följande material kan tas för analys:

blod från ett finger och en ven;
cerebrospinalvätska - cerebrospinalvätska;
flytning av hård chancre (sår);
områden av regionala lymfkörtlar.

Valet av material och diagnostisk metod beror på sjukdomsstadiet. Vi kommer att prata om vilka tester som tas för syfilis i nästa avsnitt.

Klassificering av metoder för laboratoriediagnostik av sjukdom

I det inledande skedet kan du använda den bakterioskopiska metoden, baserad på att identifiera patogenen - Treponema pallidum - under ett mikroskop. I framtiden kommer serologiska tester baserade på bestämning av mikrobiella antigener och antikroppar som produceras av kroppen i biologiskt material att användas i stor utsträckning.

Bakteriologiska studier utförs inte, eftersom det orsakande medlet för syfilis växer mycket dåligt på näringsmedia under konstgjorda förhållanden.

Alla metoder för att upptäcka treponema, det vill säga typer av tester för syfilis, är indelade i två stora grupper:

1. Direkt, som direkt upptäcker själva mikroben:

mörkfältsmikroskopi (detektion av treponemes på en mörk bakgrund);
RIT-test – infektion av kaniner med testmaterialet;
polymeraskedjereaktion (PCR), som detekterar delar av det genetiska materialet i en mikroorganism.

2. Indirekt (serologiskt), baserat på detektering av antikroppar mot mikroben som produceras av kroppen som svar på infektion.

Serologiska tester är indelade i två grupper

Icke-treponemal:

reaktion av komplementfixering med kardiolipinantigen (CCk);
mikroutfällningsreaktion (MPR);
snabb plasmareagin (RPR) test;
testa med toluidinrött.

Treponemal:

reaktion av komplementfixering med treponemal antigen (RSCT);
Treponema immobiliseringsreaktion (RTI eller RIBT);
immunofluorescensreaktion (RIF);
passiv hemagglutinationsreaktion (RPHA);
enzymimmunanalys (ELISA);
immunblotting.

Metoderna för dessa analyser är ganska komplexa, så vi kommer främst att fokusera på när de genomförs och hur korrekt information de ger.

Låt oss genast säga att grunden för att diagnostisera syfilis är serologiska metoder. Vad kallas testet för syfilis: i varje fall kan undersökningen innehålla olika tekniker. Nedan kommer vi att prata om dem mer i detalj.

Direkta tester

Deras upptäckt under ett mikroskop bevisar övertygande närvaron av treponemes. Sannolikheten för syfilis når 97%. Däremot kan mikrober upptäckas hos endast 8 av 10 patienter, så ett negativt test utesluter inte sjukdomen.

Diagnos utförs under perioder då det finns chancre eller hudutslag. Det är i utsläppet av dessa smittsamma element som de letar efter orsakerna till sjukdomen.

En mer effektiv, men samtidigt dyrare och mer komplex analys är detektion av treponem efter förbehandling med fluorescerande antikroppar. Det här är ämnen som "fastnar" på mikrober och bildar ett "glöd" i mikroskopfältet.

Metodernas känslighet minskar med en lång varaktighet av sjukdomen, behandling av sår och utslag med antiseptika och även efter behandling.

Den biologiska metoden för att diagnostisera RIT är mycket specifik, men dyr, och resultatet erhålls först efter en lång tid, när det infekterade djuret har utvecklat sjukdomen. För närvarande används metoden praktiskt taget inte, även om den praktiskt taget är den mest exakta av alla. Ett utmärkt blodprov för syfilis för att upptäcka det genetiska materialet hos treponemes är PCR. Dess enda begränsning är den relativt höga kostnaden för diagnostik.

Serologiska metoder

Icke-treponemala tester

RSKk och RMP

Det mest kända av dessa test är Wasserman-reaktionen. Detta är en metod för snabb diagnos (expresstest för syfilis), baserad på en liknande reaktion av antikroppar från blodet hos en sjuk person till treponemes själva och till kardiolipin som erhålls från bovint hjärta. Som ett resultat av denna interaktion mellan antikroppar och kardiolipin bildas flingor.

I Ryssland används denna analys praktiskt taget inte. Den ersattes av mikroutfällningsreaktionen. Nackdelen med metoden är dess låga specificitet. Ett falskt positivt blodprov för syfilis förekommer vid tuberkulos, blodsjukdomar, systemisk lupus erythematosus, under graviditet, efter ett barns födelse, under menstruationsblödning och i många andra fall. Därför, med positiv RW, används mer exakta diagnostiska metoder.

Efter infektion blir reaktionen positiv efter två månader. Med sekundär syfilis är det positivt hos nästan alla patienter.

Mikrofällningsreaktionen, som ersatte Wasserman-reaktionen, har en liknande mekanism. Det är billigt, enkelt att implementera, snabbt att utvärdera, men kan också ge ett falskt positivt resultat. Dessa två tester används som screeningtest.

RMP blir positiv en månad efter uppkomsten av chancre. För att utföra det används blod från ett finger.

Kan ett syfilistest vara fel? Naturligtvis ja, speciellt när man använder icke-treponemala tester.

Orsaker till akuta falskt positiva prover vid användning av RMP:

akuta infektionssjukdomar;
lunginflammation;
hjärtinfarkt;
stroke;
skador och förgiftning.

Kroniska falskt positiva resultat förekommer ofta i följande sjukdomar:

tuberkulos;
brucellos;
leptospiros;
sarkoidos;
reumatiska sjukdomar;
Körtelfeber;
maligna tumörer;
diabetes;
levercirros och andra.

Om kontroversiella tester uppstår används treponemal serologiska tester för att klargöra diagnosen.

RPR och toluidinrött test

Det snabba plasmareagintestet (syfilis rpr-test) är en annan typ av reaktion med kardiolipinantigen. Det används i följande fall:

befolkningsscreening;
misstanke om syfilis;
givarundersökning.

Låt oss också nämna testet med toluidinrött. Alla dessa metoder används för att utvärdera behandlingens effektivitet. De är semikvantitativa, det vill säga de minskar med återhämtning och ökar med återfall av infektion.

Negativa resultat av icke-treponemala tester indikerar troligen att patienten inte har syfilis. Därför används icke-treponemala tester för att bedöma botemedel. Den första sådan analysen bör göras 3 månader efter avslutad behandling.

Treponemala tester

Treponemala tester är baserade på användningen av treponemala antigener, vilket avsevärt ökar deras diagnostiska värde. De används i följande situationer:

positivt screeningtest (mikropercipitationsreaktion);
igenkännande av falskt positiva screeningsresultat;
misstanke om syfilis;
diagnos av latenta former;
retrospektiv diagnos då patienten tidigare lidit av sjukdomen.

RIT och RIF

Den högsta kvaliteten (mycket känslig och mycket specifik) är RIT och RIF. Nackdelarna med dessa metoder är komplexitet, tid och behovet av modern utrustning och utbildad personal. Hos de flesta botade patienter förblir treponemala tester positiva i många år och kan därför inte användas som ett botemedelskriterium.

RIF blir positivt två månader efter infektion. Om den är negativ är patienten frisk om den är positiv är sannolikheten för sjukdom hög.

RIT används särskilt ofta vid positiva resultat av blåscancer för att utesluta eller bekräfta sjukdomen. Det är mycket känsligt och låter dig säga med stor noggrannhet om en patient har syfilis eller inte. Testet blir dock positivt först tre månader efter infektion.

Immunblotting

Immunblotting är ännu känsligare än RIF, men mindre känslig än RPHA. Det används sällan, främst för diagnos av syfilis hos nyfödda.

De listade metoderna är inte lämpliga för screening, det vill säga snabb upptäckt av sjukdomen, eftersom de blir positiva senare än mikroutfällningsreaktionen.

ELISA och RPGA

Moderna mycket informativa standardiserade metoder för att diagnostisera syfilis - ELISA och RPGA. De är billiga, snabbt installerade och testade i stora mängder. Dessa tester kan användas för att bekräfta diagnosen.

RPGA-analysen blir positiv med primär seropositiv syfilis, det vill säga med uppkomsten av chancre (en månad efter infektion). Det är särskilt värdefullt för att diagnostisera sena och medfödda former av sjukdomen. RPGA måste dock kompletteras med minst ett icke-treponemalt och ett treponemalt test för diagnostisk noggrannhet. Detta trippeltest är det mest tillförlitliga testet för syfilis. Nackdelen med RPGA är att en positiv reaktion kvarstår under lång tid, vilket inte tillåter att testet används som ett kriterium för att bota.

Ett ELISA-test för syfilis blir positivt tre veckor efter sjukdomen. Nackdelen med ELISA är att den kan vara falsk. En falsk positiv reaktion inträffar med systemiska sjukdomar, metabola störningar och även hos barn födda av sjuka mödrar.

Bristerna med serologiska metoder har lett till utvecklingen av de mest avancerade metoderna som inte ger fel, men som fortfarande är dyra och sällan används - gaskromatografi och masspektrometri.

Algoritm för att diagnostisera syfilitisk infektion i olika stadier

I den primära seronegativa perioden (upp till 2 månader efter infektion) utförs en sökning efter treponema i ett mörkt fält eller med hjälp av fluorescerande antikroppar.

För primär seropositiv, sekundär och latent syfilis används RMP och ELISA och RPGA används som bekräftande test.

Hos patienter med återfall av sekundär syfilis undersöks delar av utslaget och försöker isolera treponemes från dem för mikroskopisk undersökning.

Under tertiärperioden är blåscancer negativ hos en tredjedel av patienterna. ELISA och RPGA är positiva, men de kanske inte indikerar tertiär syfilis, utan en tidigare sjukdom. Ett svagt positivt test indikerar återhämtning snarare än tertiär syfilis.

När man ställer diagnosen "medfödd syfilis", beaktas förekomsten av sjukdomen hos modern, skillnaden i frekvensen av bröstcancer hos modern och barnet, positiv ELISA och RPGA hos den nyfödda samt immunblotting.

Gravida kvinnor måste undersökas för syfilis, särskilt de som redan har haft en dödfödsel, en outvecklad graviditet eller tidiga missfall. De utför RMP, ELISA, RPGA. De undersöks med avseende på förekomsten av sjukdomen innan graviditeten avslutas.

Regler för att få ett test för syfilis

För att få en remiss till laboratoriet behöver du besöka din lokala läkare. Om du vill testa dig snabbare kan detta göras på ett privat laboratorium utan remiss (till exempel gör Invitro-laboratorier ett test för syfilis snabbt och anonymt).

Hur testas man för syfilis? Blod doneras på morgonen, på fastande mage. Du kan bara dricka rent vatten.

Förberedelse: Två dagar före testet måste du utesluta fet mat och särskilt alkohol från din kost.

Hur tas analysen? på vanligt sätt från ett finger eller ulnarven.

Hur lång tid tar det att testa för syfilis? Testresultatet är vanligtvis klart dagen efter. Utskriften kan tas från läkare eller laboratorium.

Hur länge är analysen giltig? I upp till tre månader.

Cerebrospinalvätska analys

I vissa fall tas ett cerebrospinalvätsketest för att diagnostisera neurosyfilis.

Denna undersökning ordineras till alla patienter med latent syfilis om de har tecken på patologi i nervsystemet, såväl som med latent och sen neurosyfilis.

Dessutom utförs analysen på alla patienter efter återhämtning om de upprätthåller positiva serologiska reaktioner. Vi har redan skrivit i vår artikel att detta fenomen inträffar ganska ofta.

En cerebrospinalvätskaanalys för syfilis ordineras och utförs endast av en läkare.

Cerebrospinalvätska erhålls genom punktering mellan två ländkotor. Den samlas i 4 ml i två provrör. Därefter behandlas punkteringsstället med jod och täcks med ett sterilt bandage. Efter punkteringen ska patienten ligga på mage med sängens fotända upphöjd i minst 3-4 timmar, sedan kan han ligga på sidan. Sängvila efter punktering indikeras i två dagar.

Cerebrospinalvätskan från det första provröret undersöks med allmänt accepterade reaktioner för proteinhalt, celler och bestämning av tecken på hjärnhinneinflammation (inflammation i hjärnhinnan).

Cerebrospinalvätska från det andra röret undersöks med avseende på innehållet av antikroppar mot treponema med hjälp av Wasserman-reaktionen, RMP, RIF och RIBT, som vi diskuterade ovan.

Beroende på svårighetsgraden av störningarna särskiljs fyra typer av förändringar i cerebrospinalvätskan. Genom att analysera dem kan läkaren dra slutsatser om förekomsten av olika former av skador på nervsystemet (vaskulär neurosyfilis, syfilitisk meningit, meningovaskulär syfilis, tabes dorsalis, sen mesenkymal neurosyfilis), såväl som om patientens återhämtning med positiv serologisk tester.

Immunofluorescensreaktion (RIF) är en serologisk reaktion som möjliggör detektering av antikroppar mot kända antigener. Metoden innebär mikroskopi av fläckade utstryk.

Denna reaktion används inom immunologi, virologi och mikrobiologi. Det låter dig bestämma närvaron av virus, bakterier, svampar, protozoer och ICC. RIF används i mycket stor utsträckning i diagnostisk praxis för detektion av virala och bakteriella antigener i infektiöst material. Metoden är baserad på förmågan hos en fluorokrom att binda till proteiner utan att störa deras immunologiska specificitet. Används främst vid diagnos av urinvägsinfektioner.

Det finns följande metoder för att utföra immunfluorescensreaktionen: direkt, indirekt, med komplement. Den direkta metoden innebär färgning av materialet med fluorokromer. På grund av förmågan hos mikrobiella antigener eller vävnadsantigener att lysa i UV-strålarna i ett fluorescerande mikroskop, definieras de som celler med en ljust grön kant.

Den indirekta metoden involverar bestämning av antigen+antikroppskomplexet. För att göra detta behandlas det experimentella materialet med antikroppar från antimikrobiellt kaninserum avsett för diagnostik. Efter att antikropparna binder till mikroberna separeras de från de som inte har bundits och behandlas med ett fluorokrommärkt anti-kaninserum. Därefter bestäms komplexet av mikrob + animikrobiella antikroppar + anti-kanin antikroppar med hjälp av ett ultraviolett mikroskop på samma sätt som med den direkta metoden.

Immunofluorescensreaktionen är oumbärlig vid diagnos av syfilis. Under påverkan av fluorokrom identifieras det orsakande medlet för syfilis som en cell med en gulgrön kant. Frånvaron av luminescens gör att patienten inte är infekterad med syfilis. Detta test ordineras ofta för en positiv Wasserman-reaktion. Denna metod är mycket effektiv vid diagnos, eftersom den låter dig identifiera patogenen i de tidiga stadierna av sjukdomen.

Förutom det faktum att RIF låter dig diagnostisera syfilis, används det också för att bestämma förekomsten av patogener som klamydia, mykoplasma, trichomonas, såväl som patogener av gonorré och genital herpes.

För analys används utstryk eller venöst blod. Förfarandet för att ta ett utstryk är helt smärtfritt och utgör ingen fara. Det är nödvändigt att förbereda sig för denna analys. Tolv timmar innan det rekommenderas inte att använda hygienprodukter som malo eller geler. Ibland, enligt läkarens indikationer, utförs provokation. För att göra detta rekommenderas det att konsumera kryddig mat eller alkohol, eller att injicera ett provocerande ämne, såsom gonovaccine eller pyrogenal. Dessutom måste intervallet mellan att ta antibakteriella läkemedel och ta testet vara minst fjorton dagar.

När man bedömer resultaten bör man ta hänsyn till att luminescens observeras inte bara hos levande bakterier, utan även hos döda, detta gäller särskilt klamydia. Efter en antibiotikakur lyser även döda klamydiaceller.

Med korrekt förberedelse av patienten och överensstämmelse med utstrykstekniken, gör denna analys att du kan identifiera sjukdomar i de tidiga stadierna, vilket är mycket viktigt för snabb behandling. De positiva aspekterna av denna metod är den korta tiden för att uppnå resultat, enkel implementering och låg analyskostnad.

Till nackdelarna hör att det krävs en ganska stor mängd testmaterial för att genomföra analysen. Dessutom bör endast en erfaren specialist utvärdera resultaten.

RIF, RIBT, RPGA

RIF - immunfluorescensreaktion- treponemal test. Det är ett av de mest känsliga testerna för syfilis. RIF blir positivt 10-20 dagar efter infektion, vilket klassar det som en metod för tidig upptäckt av syfilis.

Indikationer för att genomföra RIF:

RIF utförs hos personer med symtom på syfilis, med negativa reaktioner - RMP, RV;
som en differentiell reaktion hos individer med positiva RW-reaktioner, mikroreaktioner och frånvaro av symtom;
hos gravida kvinnor i frånvaro av kliniska manifestationer och en historia av syfilis.

Metod för att genomföra RIF:

När reaktionen utförs tillsätts kaninblod infekterat med Treponema pallidum (orsakande medlet för syfilis) och fluorescerande (lysande) serum till patientens serum. Studien består av att observera glöden från komplexen under ett fluorescensmikroskop. Resultaten av reaktionen tolkas beroende på intensiteten av glöden från 1+ till 4+, vilket indikerar närvaron av syfilis. Frånvaro av glöd - ett negativt RIF-resultat betyder att den som undersöks är frisk. Falska analysresultat är extremt sällsynta under systemiska processer, graviditet etc.
Reaktionen utförs i modifikationer RIF-200 och RIF-avs (absorption).
Reaktionens känslighet för primär syfilis är cirka 85 %
för sekundär syfilis - 100%
med tertiär syfilis - 98-100%.

Negativitet av RIF uppstår inom flera år efter behandling av syfilis. Efter antisyfilitisk terapi är övervakning av indikatorer över tid nödvändig.

RIBT- Treponema pallidum immobiliseringsreaktion är det mest specifika blodprovet för syfilis. RIBT är ett högkvalitativt, dyrt blodprov, som kan utföras av välutrustade laboratoriekomplex. RIBT är en grundläggande reaktion för latenta former av syfilis, neurosyfilis och viscerosyfilis. Gör att du kan skilja falskt positiva reaktioner från sann syfilis.

Reaktionen baseras på immobilisering (immobilisering) av syfilispatogenen med artspecifika antikroppar. Genom mikroskopisk undersökning avläses resultatet av reaktionen: 0-20% - negativ, 21-30% - tveksam, 31-50% - svagt positiv, 51-100% - positiv reaktion. Det vill säga positiva resultat för syfilis inkluderar de där RIBT är mer än 50 %. Med syfilis blir RIBT positiv ganska långsamt: i den primära perioden av syfilis är den fortfarande negativ, i den sekundära färska perioden är den positiv i 50% av fallen, i den sekundära återfallsperioden är den positiv i 90-100%, i tertiärperioden är den positiv i 99-100%.

Negativitet av RIBT har utförts i årtionden, därför är det inte legitimt att använda det som ett kriterium för tillförlitligheten av botemedel, men dynamisk observation efter antisyfilitisk behandling är nödvändig.

Det är tillrådligt att utföra RIBT-reaktionen tidigast 30 dagar efter avslutad behandling. RPHA – passiv hemagglutinationsreaktion – hänvisar till treponemala tester och utförs i kombination med icke-treponemala tester. Används för att bekräfta diagnosen syfilis i vilket skede som helst.

Det är tillrådligt att utföra reaktionen 4 veckor efter den misstänkta infektionen. När reaktionen utförs läggs ett läkemedel framställt av röda blodkroppar av animaliskt ursprung, sensibiliserat med antigenet från Treponema pallidum, det orsakande medlet för syfilis, till patientens blodserum.

Kärnan i RPHA-reaktionen är limning (agglutination) i närvaro av antikroppar mot treponema och bildandet av ett agglutinat - en figur som observeras av en laboratorieassistent. Reaktionen bedöms med antalet +: 4+ - starkt positivt resultat, 3+ - positivt, 2+ - svagt positivt, 1+ - tveksamt, - - negativt resultat. Om reaktionen är positiv görs en kvantitativ bedömning för att bestämma koncentrationen (titer) av antikroppar. När syfilis fortskrider ökar antikroppstitern konstant.

RPGA förblir positivt i årtionden efter behandling av syfilis, och kan därför inte användas som ett kriterium för säkerhet om botemedel. Det är dock nödvändigt att observera titern för RPHA-antikroppar över tid.

Metoden är mycket känslig. RPGA-resultat kan vara falskt positiva. Bindvävssjukdomar, vissa infektioner etc. kan leda till sådana analysresultat.

Faktum är att det inte bara finns en analys – det finns flera av dem. För att upptäcka syfilis undersöks blod på flera sätt. Förutom blod, i laboratoriediagnosen av denna sjukdom, används ett annat biologiskt material som innehåller patogenen, spirochete pallidum (syn. - treponema pallidum).

Detta är en flytning från syfilider (specifika sår och utslag på hud och slemhinnor), med neurosyfilis - cerebrospinalvätska (CSF).

Alla metoder för att diagnostisera syfilis kan delas in i direkt och indirekt. Direkta metoder syftar till att direkt detektera Treponema pallidum. När det gäller indirekta är de baserade på detektering av antikroppar mot spiroketen. Det finns antikroppar, vilket betyder att det finns själva spiroketen. Indirekta metoder för att diagnostisera syfilis är inget annat än serologiska reaktioner där blodserum används som testmaterial.

Antikroppar detekteras när de interagerar med antigener. För att utföra serologiska reaktioner används preparat som innehåller ett givet antigen. Beroende på typen av detta antigen kan serologiska reaktioner vara treponemala eller icke-treponemala. Ett antigen specifikt för Treponema pallidum är involverat i treponemala reaktioner.

Treponemala reaktioner inkluderar:

RSK – reaktion av komplementfixering med treponemal antigen
RPHA - passiv hemagglutinationsreaktion
ELISA – enzymimmunanalys
RIF – immunfluorescensreaktion
RIBT – Treponema pallidum immobiliseringsreaktion

Icke-treponemala serologiska reaktioner inkluderar komplementfixeringstestet med kardiolipinantigen och mikroprecipitationstestet eller snabbt plasmareagintest.

Kardiolipinantigenet som används i dessa reaktioner är inte spirochete pallidum-antigenet. Detta är ett extrakt från nötkreaturshjärta, som i struktur liknar kardiolipin-fosfolipidantigenet i spiroketernas cellmembran.

Därför kommer antikroppar som produceras när det orsakande medlet av syfilis uppträder också att reagera på detta antigen.

När folk pratar om att testa för syfilis menar de oftast den här metoden, Wasserman-reaktionen

Wasserman reaktion (RW)

När folk pratar om att testa för syfilis menar de oftast den här metoden, Wasserman-reaktionen. Denna reaktion utvecklades för diagnosen syfilis av den tyska immunologen Wasserman för mer än ett sekel sedan, i början av förra seklet. Det genomförs dock än idag, om än med betydande förändringar.

I huvudsak hänvisar RW i sin nuvarande version till RSK. Inom immunologi hänvisar komplement till systemet av plasmaproteiner som bildar det medfödda immunsystemet. RW är baserad på reaktionen av antigener med antikroppar med deltagande av komplement. Antikroppar mot Treponema pallidum finns i serumet hos en patient med syfilis. Om antigener tillsätts till sådant serum kommer antikropparna att reagera med dem.

För RW används färdiga uppsättningar av specifika och ospecifika antigener. Specifika antigener isolerades från Treponema pallidum-kulturer odlade på näringsmedia.

Ospecifika antigener representeras av kardiolipin från bovint hjärta. Således kan RW klassificeras som både treponemala och nontreponemala studier.

Reaktionen mellan specifika och ospecifika antigener med antikroppar i testserumet är inte synlig externt. Röda blodkroppar från får används för dess indikation.

Som en del av det hemolytiska serumet från en immuniserad kanin tillsätts de till testmaterialet. Vad händer i slutändan?

Om patienten är frisk finns det inga antikroppar mot treponema i hans serum. Samtidigt, under påverkan av komplement, hemolyseras (förstörs) fårerytrocyter, och detta är tydligt synligt i ett provrör, vars innehåll är enhetligt färgat utan sediment ("lackblod").

Således indikerar hemolys frånvaron av antikroppar. I detta fall är reaktionen negativ.

Hos patienter med syfilis är det motsatta. I dem är allt komplement bundet under bildandet av immunkomplex av antigener med antikroppar, och enkelt uttryckt finns det inte tillräckligt med det för att förstöra röda blodkroppar.

Därför indikerar frånvaron av hemolys närvaron av antikroppar mot spiroketer, och följaktligen syfilis. I det här fallet är reaktionen positiv och indikeras med ett plustecken.

Mer exakt kan det finnas flera fördelar, eftersom fördröjningen i hemolys har olika svårighetsgrad:

1 plus – reaktionen är tveksam
2 plus – reaktionen är svagt positiv
3 plus – positiv reaktion
4 plus – reaktionen är starkt positiv.

I medicinsk slang kallas plusen i det här fallet kors, och resultatet betecknas därefter: +, ++, +++ eller ++++.

RW-tekniken är ganska enkel, billig, tar kort tid och kräver ingen komplex laboratorieutrustning. Därför tillgrips denna reaktion överallt, och inte bara i närvaro av specifika indikationer (misstanke om syfilis, närvaro av karakteristiska symtom).

Den utförs som en screeningmetod vid rutinmässiga medicinska undersökningar, för gravida kvinnor vid registrering och för alla patienter under sjukhusvistelse.

Samtidigt är tekniken inte utan betydande nackdelar. För det första ger det inte alltid ett positivt resultat vid befintlig syfilis. Antikroppar bildas trots allt inte omedelbart, utan efter en tid.

Denna tidsperiod då det inte finns några antikroppar kallas den seronegativa perioden av syfilis, och den varar i 5-8 veckor. från infektionsögonblicket.

Och den seropositiva perioden av syfilis börjar i slutet av primär syfilis. Sekundär syfilis är nästan alltid seropositiv, och tertiär komplicerad syfilis kan vara seronegativ. I det här fallet betyder det inte alls att Treponema pallidum inte finns i kroppen. Det är bara det att immunförsvaret har blivit utmattat under många år, och antikroppar har upphört att frigöras.

Å andra sidan, i vissa fall, även efter framgångsrik behandling av syfilis, kan 1-2 korsningar i analysen kvarstå i många år, och ibland livet ut.

Således beror antalet korsningar i RW inte på aktiviteten av Treponema pallidum och svårighetsgraden av syfilis. För detta ändamål används en annan indikator - antikroppstiter. Detta är den maximala graden av serumutspädning vid vilken en kraftigt positiv reaktion inträffar.

En annan nackdel med RW är dess låga specificitet med frekventa falskt positiva resultat när hemolys fördröjs i frånvaro av syfilis.

Bland orsakerna till falskt positiva resultat är andra bakteriella och virusinfektioner, systemisk kollagenos, graviditet, alkoholism, drogberoende, medicinering, kostfel och mycket mer. Därför är det mycket viktigt att förbereda sig ordentligt för analysen.

Sluta ta antibiotika 7-10 dagar innan du tar blod. Under de senaste 24 timmarna bör du avstå från att äta stor, fet mat och alkohol.

Blod för analys tas från en ven på fastande mage. Negativa resultat i frånvaro av karakteristiska kliniska manifestationer i form av chancre indikerar med hög grad av säkerhet frånvaron av syfilis. Om minst ett av korsningarna är närvarande, tillgriper de andra diagnostiska metoder.

Den passiva hemagglutinationsreaktionen består av limning eller agglutination av röda blodkroppar.

Passiv hemagglutinationsreaktion (RPHA)

Den passiva hemagglutinationsreaktionen består av limning eller agglutination av röda blodkroppar. Treponemala antigener fixeras på de röda blodkropparna som används i denna reaktion. Testserumet tillsätts sedan till detta material.

Om den innehåller antikroppar interagerar de med antigener på röda blodkroppar, vilket leder till att de agglutineras. Således indikerar agglutination en positiv RPHA och existerande syfilis, och frånvaron av agglutination och en negativ RPHA indikerar att patienten är frisk. Här finns även 4 grader av positiva resultat med olika antikroppstitrar.

Känsligheten för RPGA är högre jämfört med RW. Detta test är dock negativt i början av sjukdomen, under de första 2-4 veckorna, och ibland 6 veckorna. Därefter, i de sekundära och tertiära perioderna, är RPGA alltid positiv, som med latent syfilis.

Därför kan den användas för att diagnostisera en sjukdom utan tydliga kliniska manifestationer. Liksom andra treponemalstudier förblir RPHA positiv hela livet, även efter fullständig återhämtning. Därför kan den inte användas för att bedöma lämpligheten av behandling för syfilis.

Det kan bli negativt endast i de fall där behandlingsåtgärder påbörjades så snart patienten blev sjuk i syfilis.

RPGA ger också falskt positiva resultat vid vissa sjukdomar och patologiska tillstånd. Falska positiva resultat skiljer sig från sanna positiva resultat genom att de blir negativa mycket snabbt, efter några veckor eller månader.

Dessutom sker detta spontant, även utan specifik behandling. RPGA hänvisar också till screeningdiagnostiska metoder. Om resultatet är positivt utförs andra treponemala tester.

Enzymimmunanalys är också baserad på antigen-antikroppsreaktionen.

Enzymimmunanalys ELISA

Enzymimmunanalys är också baserad på antigen-antikroppsreaktionen. Treponemala antigener är fixerade på ytan av vilket fast material som helst.

Som regel är detta polystyren, av vilket moderna testsystem är gjorda, som ser ut som plattor med brunnar. Testserumet tillsätts till dessa brunnar. Om detta serum innehåller antikroppar bildar de komplex med antigenerna i testsystemen.

Gul färg på testmaterialet indikerar närvaron av antikroppar. Ju fler av dessa antikroppar, desto intensivare blir färgningen.

Antikroppar tillhör immunglobuliner (Ig), och representeras av flera varianter - IgA, IgM och IgG. Deras antal är inte detsamma under olika perioder av sjukdomen. Därför kan förekomsten av ett eller annat Ig användas för att bedöma sjukdomens varaktighet.

ELISA blir positiv redan efter 3 veckor och kan förbli så resten av livet. Men falska positiva resultat är också vanliga här, vilket är en betydande nackdel.

Bland fördelarna med ELISA är tillgången på metoden och möjligheten att genomföra ett stort antal studier på relativt kort tid.

Immunfluorescensreaktionen är baserad på ljusindikation av antigen-antikroppskomplexet

Immunofluorescensreaktion (RIF)

Immunfluorescensreaktionen är baserad på ljusindikation av antigen-antikroppskomplexet. Det befintliga antigenet blandas med testserumet. Om antikroppar är närvarande bildar de immunkomplex med antigener.

Därefter tillsätts anti-art kaninserum innehållande fluorescein, ett ämne som lyser i ultraviolett ljus, till det diagnostiska materialet. Glödet detekteras när det ses genom ett fluorescerande mikroskop.

Beroende på intensiteten av glöden, vars färg varierar från knappt märkbar till gulgrön, finns det 4 grader av positiv RIF.

Fördelarna med denna metod är dess specificitet och känslighet. Med befintlig syfilis ger RIF ett positivt resultat i början av sjukdomen, redan i slutet av 1 vecka. infektion, även innan chancre uppträder.

Falskt positiva resultat upptäcks praktiskt taget inte. Nackdelar med denna metod inkluderar tekniska svårigheter och behovet av specialutrustning.

Därför tillgrips RIF när resultaten av andra tester som behöver förtydligas är positiva.

Immobiliseringsreaktionen av Treponema pallidum är baserad på fenomenet immobilisering, immobilisering av patogenen i närvaro av testserumet.

Treponema pallidum immobiliseringsreaktion (TPI)

Immobiliseringsreaktionen av Treponema pallidum är baserad på fenomenet immobilisering, immobilisering av patogenen i närvaro av testserumet. Serumet från en patient med syfilis innehåller immunglobulinantikroppar, som kallas immobiliner på grund av deras förmåga att immobilisera spiroketer.

Immobilisiner frisätts mycket senare än andra antikroppar, och RIBT ger ett positivt resultat först efter 3 månader. efter infektion.

Metoden är tillförlitlig, mycket känslig och skulle kunna användas vid falskt positiva resultat i andra studier. Det är dock tekniskt komplicerat, tar lång tid att färdigställa och kräver dyr utrustning och specialutbildad personal.

Därför används RIBT, som utvecklades i mitten av förra seklet, för närvarande inte i klinisk praxis. Det utförs endast i forskningssyfte.

Precipitation microreaction har ett annat namn - snabb plasmareagin test

Mikroreaktion av MP-utfällning

Utfällningsmikroreaktionen har ett annat namn - det snabba plasmareagintestet. Som svar på skadade komponenter i vävnadscellmembran eller komponenter i själva treponemes membran, frisätter immunsystemet antikroppar som kallas reagin.

Denna diagnostiska metod är baserad på detektering av dessa reaginer. Träkolspartiklar tillsätts till ett givet antigen, vilket inkluderar kolesterol, kardiolipin och lecitin, för indikation.

Antigenet blandas sedan med testserumet. Om det innehåller reaginer uppstår en flockningsreaktion med bildandet av ett flockigt sediment, som är svart till färgen på grund av närvaron av kolpartiklar.

Ett positivt MP-resultat kan observeras tidigast 4-5 veckor senare. efter infektion. Som med andra serologiska reaktioner kan det finnas olika svårighetsgrad och olika titrar av reagin-antikroppar.

När den patologiska processen utvecklas ökar antikroppstitern, men i de senare stadierna minskar den, och reaktionen blir svagt positiv eller tveksam. Dessutom har denna forskningsmetod också många falskt positiva resultat.

Fördelarna inkluderar det faktum att baserat på det snabba plasmareagintestet kan man bedöma sjukdomsförloppet och effektiviteten av dess behandling. Här används trots allt ett icke-treponemal antigen, och efter att treponemet förstörts blir MP-resultatet negativt, medan det i andra serologiska reaktioner med treponemalantigener kan bestå livet ut.

Denna metod kombinerar elektrofores och ELISA. Treponema pallidums separeras i antigena fraktioner genom elektrofores. Därefter behandlas det resulterande materialet med patientens serum, som, vid syfilis, innehåller specifika immunglobuliner, IgM och IgG. Därefter tillsätts serum med antikroppar mot dessa immunglobuliner, märkta med radioisotoper eller enzymer.

I detta fall tar de områden som innehåller dessa immunglobuliner formen av karakteristiska ränder. Immunoblotting är en modern metod för att diagnostisera syfilis, som utvecklades relativt nyligen. Den är känslig och pålitlig, men kräver dyr utrustning och är därför inte billig.

För närvarande används immunblotting främst för att diagnostisera medfödd syfilis.

Mikroskopi

Med standardmikroskopi är spiroketer svåra att urskilja, eftersom de färgar mycket dåligt. Det var därför spiroketen kallades blek. Mikroskopi utförs bäst med ett mörkfältsmikroskop.

Till skillnad från ett konventionellt mikroskop är sidobelysningen här fokuserad för att framhäva lysande treponemes mot en mörk bakgrund.

Materialet för studien är chancre flytningar och inslag av hudutslag. Därför används mörkfältsmikroskopi främst för att diagnostisera primär och sekundär syfilis.

I stadium av tertiär syfilis, komplicerad av neurosyfilis, kan treponemes hittas i cerebrospinalvätskan och i medfödd syfilis - i navelsträngsvävnaden.

Visuell upptäckt av treponemes är ett tillförlitligt tecken på syfilis. Patogenen kanske inte alltid upptäcks, men bara i 80% av fallen.

Med långvarig syfilis med specifik behandling och behandling av patologiska områden i huden och slemhinnorna med antiseptika minskar sannolikheten för att upptäcka treponemes i ett mörkfältsmikroskop.

För effektivare diagnostik kan treponema behandlas med fluorescerande antikroppar, som fixeras på dem och förstärker glöden ytterligare. Men denna metod kräver ytterligare materialkostnader.

Polymeraskedjereaktion (PCR)

Polymeraskedjereaktionen är baserad på detektering av en mikrobiell patogen (i detta fall treponema) av dess DNA. Allt genetiskt material multipliceras många gånger med deltagande av enzymet DNA-polymeras. Treponema DNA hittas sedan med hjälp av elektrofores.

Känsligheten för PCR är maximal, eftersom upptäckten av en mikrobiell DNA-kedja indikerar syfilis. PCR kan användas för att diagnostisera alla stadier av syfilis.

Beroende på sjukdomsstadiet och dess komplikationer kan det biologiska materialets roll vara blod, urin, cerebrospinalvätska, lymfkörtelvävnad och flytning av syfilis. Känsligheten hos dessa material för PCR kan variera.

De flesta treponema finns i utsöndringen av syfilider, och i ett urinrör eller vaginalt utstryk kanske de inte upptäcks alls. Dessutom, efter framgångsrik behandling, stannar ofta fragment av döda treponemes kvar i kroppen under en tid, vars DNA också identifieras med PCR.

Med hjälp av denna metod är det därför inte alltid möjligt att avgöra om det finns en aktiv fas av sjukdomen eller om den redan är i läkningsstadiet. PCR är dock den mest effektiva metoden för att diagnostisera syfilis. Dess användning hämmas av komplexiteten i utförandet och behovet av dyr utrustning.

Vilken analys är bäst?

Allt beror på sjukdomsstadiet. För primär seronegativ syfilis är mörkfältsmikroskopi och RIF mest att föredra. Vidare, för primär seropositiv och sekundär syfilis, utförs RW och ELISA, och för att utesluta falskt positiva resultat kompletteras de med RPGA.

I den tertiära perioden är RW negativ, och RPG och ELISA är positiva. För att utesluta falskt positiva resultat kompletteras de med RIF. För att diagnostisera medfödd syfilis undersöks både mamma och nyfödd. Kvinnan undersöks för RW, RPGA och RIF. Hos en nyfödd kan diagnosen kompletteras med immunblotting. I alla kontroversiella fall används PCR.

Kära besökare på Farmamirs webbplats. Den här artikeln utgör inte medicinsk rådgivning och bör inte fungera som en ersättning för konsultation med en läkare.