Mi a vér ifa? ELISA elemzés - mi ez: eredmények, módszerek. VI. Az enzimes reakció leállítása

A laboratóriumi kutatások modern típusát képviselő ELISA vagy enzimkapcsolt immunszorbens vizsgálat lehetővé teszi bizonyos betegségek elleni specifikus antitestek vagy antigének megtalálását a vérben. Ez lehetővé teszi a betegség etiológiájának és stádiumának meghatározását. Sőt, az ilyen típusú kutatások eredményei mennyiségileg és minőségileg is bemutathatók. Tehát nézzük meg részletesen az enzim immunoassay módszer elvét, módszertanát és lényegét.

Mi az enzim immunoassay

Az egészség legteljesebb átfogó felmérésére felírt enzim immunoassay lehetővé teszi az általános egészségi állapot felmérését és védő funkcióinak felmérését. Ez a laboratóriumi vizsgálat lehetővé teszi a fertőző, autoimmun, hematológiai patológiák diagnosztizálását vérvizsgálat segítségével.

Az enzim immunoassay lényegét az alábbi videó tárgyalja:

Kinek írják fel?

Ez a vizsgálat olyan betegek számára írható fel, akiknél a következő betegségeket diagnosztizálták:

• vírusos eredetű betegségek, beleértve a hepatitist;
• szexuális úton terjedő betegségek - chlamydia, trichomonas, szifilisz, ureaplasma, mycoplasma;
• immunhiány;
• preoperatív átfogó vizsgálat elvégzése.

ELISA vérvizsgálatot is előírnak a hormonszint meghatározására és az elvégzendő terápia minőségének értékelésére.

Az orvos előírhatja ezt az elemzést a meglévő betegség stádiumának meghatározására, amely lehetővé teszi az alkalmazott kezelés időben történő módosítását. A kapott adatok nagy pontossága pedig lehetővé teszi, hogy a legátfogóbb képet kapjon az egészségről. Ugyanakkor a vizsgálat után nagyon rövid időn belül olyan adatokat nyernek, amelyek lehetővé teszik a kóros folyamat fejlődésének dinamikájának nyomon követését.

Miért kell ilyen teszteket végezni?

Mivel az ELISA vérelemzésnek köszönhetően jelentős mennyiségű információ nyerhető az egészségi állapotról és a szervezetben előforduló kóros folyamatokról, ez teszi lehetővé a kiindulási adatok (általános egészségi állapot, stádium) legteljesebb figyelembevételét. betegség, a kóros folyamat fejlődésének dinamikája, az alkalmazott terápia hatékonyságának mutatója) a kezelési sémák összeállításakor.

Emiatt a legkifejezettebb kezelési eredmény és a szervezetben a kóros folyamat leggyorsabb leállása érdekében ELISA vérvizsgálatot írnak elő. A kapott adatok alapján a leghatékonyabb módszerekkel gyorsabban gyógyíthatók az immunrendszer súlyos megbetegedései, az antigének jelenléte a vérben és az allergiát kiváltó okok.

Az ELISA-elemzés kijelölését különféle patológiák esetén végezzük, és csak az orvos által előírt módon szabad elvégezni. Az elemzés gyakoriságát is az orvos határozza meg, és ha vért adnak az ELISA elemzéshez, a betegség képe a legteljesebb. Mivel a betegség lefolyásának dinamikájának elérése ennek a tesztnek a többszöri elvégzésével lehetséges, a véradást leggyakrabban három-öt alkalommal lehet előírni. Ez lehetővé teszi a vérben lévő antitestek mennyiségének összehasonlítását különböző időszakokban.

Az ilyen eljárások típusai

Az enzim immunoassay többféle típusa létezik. Különböznek az emberi szervezetből vett folyadék típusában, amely alapján összetételét és bizonyos antigének jelenlétét vizsgálják.

Ebben az esetben nemcsak egy személy vérét, hanem más folyadékait is lehet elemzésre venni:

• magzatvíz,
• gerincvelői folyadék,
• üveges tartalom,
• ütések,
• nyálka a húgycsőből és a nyaki csatornából.

Maga a művelet egy bizonyos típusú folyadék felvételére szabványos, és nappali kórházban végzik.

A tesztelés indikációi

Jellemzően ELISA-tesztet ír elő orvos, ha részletes képet kell kapni az aktuális betegségről, amely bármilyen formában előfordul: krónikus, lassú vagy akut. És a következő feltételek és kezelési célok tekinthetők az ilyen típusú elemzés indikációinak:

• bizonyos betegségek antigénjeinek keresése;
• a hormonális állapot meghatározása;
• a hepatitis vírus kimutatása a szervezetben;
• kutatás az adott témában ;
• bármilyen típusú fertőző betegség elleni antitestek keresése;
• vizsgálat a test autoimmun elváltozásainak jelenlétére.

Az enzim immunoassay-vel kapcsolatos információkért tekintse meg az alábbi videót:

Ellenjavallatok a

A mai napig nem azonosítottak ellenjavallatokat az enzim immunoassay-hez.

Terhesség alatt, amikor a vér hormonszintje folyamatosan változik, ezt az elemzést ismételten el kell végezni a kapott eredmény megerősítése érdekében. Az újszülötteknél és a csecsemőknél is tévesek lehetnek a vizsgálati adatok: a magzati fejlődés során bizonyos típusú antitestek az anya méhlepényén keresztül kerülhetnek a magzati vérbe. Ezért jelenlétük az elemzésben nem tekinthető egy meglévő fertőzés jelének.

Tesztelje a biztonságot

Bármilyen típusú folyadék emberi szervezetből történő eltávolítása nem jár negatív hatással a szervezetre. A teljes sterilitás a manipulációk során elkerüli a fertőzés kockázatát bármilyen típusú betegséggel.

Felkészülés az eseményre

A vizsgálat legmegbízhatóbb eredményeinek elérése érdekében tartózkodnia kell az alkoholos italok és a kábítószerek fogyasztásától, mielőtt vért (vagy más folyadékot) vesz az elemzéshez.

Hogyan működik az eljárás és mit érzel közben

Az ELISA-teszt elvégzéséhez a beteg vérét szigorúan éhgyomorra veszik: az eljárás előtt legalább órával semmilyen ételt nem szabad enni. Az elemzést az ulnaris vénából veszik.

Bármilyen betegség és szedett gyógyszer jelenlétét leggyakrabban a véradáskor leállítják. Az eljárás során az érzések hasonlóak a biokémiai elemzéshez szükséges vérvételhez.

Az eredmények dekódolása

Az ELISA diagnosztika lehetővé teszi a fertőzés jelenlétének meghatározását a szervezetben, a kóros folyamat aktivitását és a meglévő fertőzés etiológiáját. Az elemzési eredmények gyors (24 órán belüli) kézhezvétele az ilyen típusú kutatások egyik előnye.

A kapott információ dekódolásának folyamatát az orvos végzi. Figyelembe kell venni, hogy a folyamatok dinamikájára vonatkozó eredmények helyessége garantált, ha a vizsgálatokat egy laboratóriumban végzik.

Az eljárás átlagos költsége

Az ELISA teszt átlagos ára az elemzés fókuszától és a konkrét értékek meghatározásától függ. Így a különböző típusú fertőző betegségek (anti-HAV IgG, anti-HAV IgM, HBsAg) szerológiai markereinek meghatározása 200-320 rubelbe kerül, és 2 munkanapon belül megtörténik. Ennek az eljárásnak a költségét is előnyének tekintik: bármilyen típusú kutatás árának megfizethetősége lehetővé teszi, hogy bármilyen költségvetési méretű kutatást végezzen.

Az ELISA-teszt költsége az egészségügyi intézmény házirendjétől függ, de általánosan elérhető eljárásnak kell tekinteni, amely lehetővé teszi, hogy részletes képet kapjon a fennálló betegségről és a legteljesebb kezelést biztosítsa.

Az ELISA-kutatás normáiról és jellemzőiről lásd az alábbi videót:

(link a fájl 3. cikkére), amely lehetővé teszi a szervezet fertőző betegségekkel szembeni ellenálló képességének felmérését és a betegség fázisának kimutatását, fontos szerepet játszik az enzim-linked immunoszorbens assay (ELISA). A vizsgálat elvégzése lehetővé teszi a vér védő funkciójának átfogó értékelését, valamint az immunhiányos állapot azonosítását fertőző patológiákban, valamint vérbetegségekben, autoimmun folyamatokban és hormonális problémákban.

Hogyan lehetséges egy elemzésben ennyi célt lefedni, és milyen jelzések vannak a megvalósításra? Próbáljuk meg kitalálni.

Milyen vérvizsgálatot végeznek ELISA módszerrel?

Ez egy laboratóriumi vizsgálat, amely lehetővé teszi bizonyos antigének (kórokozók) elleni specifikus antitestek (fehérje jellegű védő vérfaktorok) jelenlétének meghatározását. Az antitestek közül elsődleges fontosságúak az immunglobulinok, amelyek immunkomplexek formájában is létezhetnek.

Az immunglobulinok komplex humán neurohumorális reakciók eredményeként keletkeznek, amelyek idegen antigének bejuttatására adott válaszként jelentkeznek. A kórokozó minden típusa saját specifikus antitesteket termel. Úgy hatnak, hogy „megkötnek” egy antigént vagy kóros mikroorganizmust, komplex „antigén-antitest” vegyületet képeznek, majd közömbösítés, enzimatikus lízis, fagocitózis reakciók és a szervezetből való eltávolítás következik.

Jegyzet:Az ELISA módszer bizonyos komplexek jelenléte alapján határozza meg a betegben jelen lévő kórokozó vagy káros anyag típusát.

Az emberi immunitás működésének alapelveit megismerheti, ha megnézi ezt a videót:

Mik azok az immunglobulinok?

Az immunglobulinok 5 fő osztályát fedezték fel és tanulmányozták – IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. a többiek szerepe még nem teljesen tisztázott, tudományos kutatás alatt áll.

Jegyzet:A gyakorlati gyógyászatban az A, M és G osztályú immunglobulinok a legfontosabbak.

Tekintsük ezt a kérdést részletesebben.

A fő feladat immunglobulin A (IgA) a légutak, a gyomor-bél traktus és a húgyúti nyálkahártyák védő funkcióiból áll. A betegség akut kezdetén lehetetlen azonosítani őket. Ezek a védőkomplexek csak a betegség kezdetének 2. hetétől jelennek meg, néha később. Az immunglobulin A nagy része a nyálkahártyákban koncentrálódik. Körülbelül 80%. A fennmaradó antitestek a vérben keringenek. A fő funkció a mikroorganizmusok semlegesítése és elpusztítása. Miután a betegség akut megnyilvánulásai enyhülnek, ezen immunglobulinok mennyisége csökkenni kezd, és a betegség kezdete után 8 hétig teljesen eltűnik. Ha egy későbbi időpontban IgA-t észlelnek, ez krónikus folyamatot jelez.

A kialakuló patológia akut fázisának fő és első markerei az M osztályú immunglobulinok (IgM). A betegség kezdetétől számított 5. napon észlelik őket. Jelenlétük a vérben körülbelül 6 héten belül meghatározható. Aztán gyorsan kezdenek eltűnni.

A reziduális immunválaszt a vérben való jelenlét jellemzi G osztályú immunglobulinok (IgG). Ezeknek a tényezőknek a megjelenését a vérben körülbelül egy hónappal a betegség kezdete után észlelik. A jövőben hosszú hónapokra, évekre, sőt akár egy életre is meghatározhatók, védő funkciót töltenek be a betegség visszatérése (relapszusa) ellen, esetenként pedig lehetetlenné teszik a patológia másodlagos fejlődését. Ha a G immunglobulin mennyisége ismét növekedni kezd, akkor újbóli fertőzésre lehet gyanakodni. Hasonló következtetést vonhatunk le, ha két vagy három mintát veszünk 2 hetes időközönként.

Immunglobulin D (IgD) a B-limfocitákon található, egészséges emberekben alacsony koncentrációban található meg. 10 éves élettartam után éri el maximális értékét. Az immunglobulin D mennyisége nő terhesség alatt, szisztémás kötőszöveti betegségben szenvedő betegeknél, valamint immunhiányos állapot okozta betegségekben.

Az enzim immunoassay vérvizsgálat felírásának indikációi

A kórokozó mikrobák szervezetben való jelenlétére irányuló antitestek meghatározása, amelyek a következőket okozzák:

• trichomoniasis;
• ureaplasmosis és

Növekszik az immunglobulinok mennyisége és azzal.

A diagnosztikát a következők kimutatására végzik:

• herpeszes betegségek;
• vírusos hepatitis csoportok;
• Epstein-Barr vírus;
• citomegoalovírus.

Az ELISA segítségével meghatározhatja 600 típusú allergén elleni antitestek jelenlétét, kimutathatja az immunhiányos állapotot, átfogó vizsgálatot végezhet a transzplantációs műtét előtt, és átfogó elemzést végezhet a kezelés hatékonyságáról.

Az ELISA egy további módszer a rákos sejtek kimutatására.

Hogyan történik a vér ELISA?

Az enzimes immunoassay-hez a legtöbb esetben a páciens vérét használják, néha üvegtestet, gerinccsatorna-folyadékot és magzatvizet vesznek.

A vért injekciós tűn keresztül fecskendőbe szívják a cubitalis vénából. A vizsgálatot üres gyomorban végzik. Emlékeztetni kell arra, hogy bizonyos gyógyszerek szedése befolyásolhatja a vizsgálat eredményét. Véradás előtt tartózkodnia kell a dohányzástól és az alkoholfogyasztástól. A kábítószer-használat torzíthatja az eredményeket.

Az IgM, IgG, IgA immunglobulinok negatív értékei esetén a betegség hiányáról vagy annak kezdeti szakaszáról negatív eredmény is lehetséges, ha jelentős idő után teljes felépül.

Ha az IgA és IgM nem mutatható ki, és az IgG pozitív, akkor nagy valószínűséggel fertőző betegség vagy védőoltás után kialakult immunitásról beszélünk.

Ha az IgM magas titere van negatív IgG és IgA értékekkel, akkor arra lehet következtetni, hogy akut fertőző betegségről van szó.

Az immunglobulin eredmények egyidejű pozitív értékei - IgA, IgM, IgG egy meglévő krónikus betegség relapszusának akut fázisára jellemzőek.

A folyamat enyhülési fázisában (remisszió) lévő krónikus fertőzés esetén az ELISA az immunglobulin M (IgM) negatív értékeit mutatja, míg a G (IgG) és A (IgA) immunglobulinok eredménye pozitív lesz.

Az enzim immunoassay vérvizsgálati módszer előnyei

Az ELISA módszer fő előnyei:

• alacsony elemzési költség;
• diagnosztikai specifitás, pontosság;
• dinamikus kontroll (az elemzés megismétlése a kezelés hatékonyságának és a betegség stádiumainak meghatározására);
• tömeges vizsgálatok elvégzésének lehetősége a fertőzési területeken;
• az eredmények elérésének sebessége;
• az elemzés viszonylagos egyszerűsége;
• az információs technológia felhasználásának lehetősége a feldolgozás során;
• biztonság és fájdalommentesség a beteg számára.

Vannak-e hátrányai a vér ELISA-nak?

A vizsgálat fő negatív aspektusa a hamis negatív és hamis pozitív adatok megszerzésének lehetősége. A félreértések hátterében technikai hiányosságok vagy gyógyszerhasználat állhat, ami torzíthatja a képet.

Az ELISA-t a következők kimutatására használják:

• (ascaris, pinworms);
• az opisthorchiasis akut és krónikus formái;
• trichinózis;
• Giardia jelenléte (kiegészítő elemzésként);
• a leishmaniasis formái;
• amőbiasis;
• Toxoplazma tartalom;

Összefoglalva, meg kell jegyezni, hogy a modern immunológia folyamatosan a fejlődés szakaszában van, új módszereket keres a betegségek diagnosztizálására és kezelésére.

Stepanenko Vladimir, sebész

Az ELISA analízis egy modern laboratóriumi diagnosztikai technika számos különböző betegség esetében. A rövidítés az enzim immunoassay rövidítése. A technika lényege az antitestek titerének (aktivitásának) meghatározása.

Az ELISA technika jelenleg egyre nagyobb népszerűségnek örvend. A klinikai gyógyászatban különféle patológiák diagnosztizálására, valamint olyan kísérleti vizsgálatokra használják, amelyek a vizsgált táptalajban a különböző vegyületek koncentrációjának pontos meghatározását igénylik.

Az ELISA módszer elve

Az enzimes immunoassay egy immunológiai reakció. Ez specifikus antitestek hozzáadásán alapul
vagy antigéneket a tesztközegbe (leggyakrabban a vizsgált vérbe), majd a kapott antigén-antitest komplexek koncentrációjának enzimatikus meghatározása következik. A komplex koncentrációja alapján meg lehet ítélni a vizsgálandó vegyület szintjét vagy aktivitását a tesztközegben.

Az antigén-antitest komplexek koncentrációjának meghatározását általában speciális berendezéssel, kromatográfiás módszerrel végzik.

Használati javallatok

Az ELISA elemzést különféle indikációkra végzik, a klinikai gyógyászatban a főbbek a következők:

• A túlnyomórészt szexuális úton terjedő fertőző patológia (STI) diagnosztizálása, amely magában foglalja a chlamydia, mycoplasmosis, ureaplasmosis, trichomoniasis, valamint a fertőző ágens elleni specifikus antitestek azonosítását.
• Különböző lokalizációjú fertőző betegségek diagnosztizálása a kóros folyamat stádiumának meghatározására, elsősorban a parenterális vírusos hepatitis és a HIV diagnosztizálásának folyamatában.
• Hormonkoncentrációk meghatározása az endokrin rendszer szerveinek (endokrin mirigyek) különféle patológiáinak diagnosztizálására.
• Különböző vegyületek meghatározása mérgezés, rovar- vagy kígyócsípés esetén a szervezet mérgezésének okának diagnosztizálására.

Ezen orvosi indikációk esetén ELISA vérvizsgálatot végeznek. Ezt a technikát a kísérleti gyógyászatban is aktívan alkalmazzák különböző klinikai vizsgálatok során, az immunprofilaxis új gyógyszerek és vakcinák kifejlesztése során.

Hogyan történik a kutatás

Az ELISA-val végzett vérvizsgálatot speciális laboratóriumban végzik. Ennek végrehajtásához először vénás vért vesznek, általában a cubitalis vénából 5-10 ml térfogatban, amelyet azután a laboratóriumba küldenek. Átlagosan a vizsgálat eredményét már másnap meg lehet kapni, ami fontos pont a betegség diagnosztizálását követő azonnali kezelés felírásához.

Hogyan készüljünk fel az ELISA-ra

Ahhoz, hogy megbízható kutatási eredményeket kapjon az enzim immunoassay segítségével, kövesse néhány egyszerű előkészítő ajánlást, amelyek magukban foglalják:

• A vizsgálat előtti napon abba kell hagynia a zsíros ételek (hús, füstölt hús) és az alkoholfogyasztást.
• A vizsgálathoz szükséges anyagot reggel, éhgyomorra kell benyújtani.
• A vizsgálat napján tanácsos kerülni a fizikai és pszicho-érzelmi stresszt.
• A vizsgálat előtt meg kell próbálnia nem dohányozni.

Az enzimhez kötött immunszorbens teszt hamis pozitív eredményének többsége az előkészítő ajánlások nem megfelelő végrehajtásából adódik. Ez a legtöbb esetben a zsíros ételek fogyasztásával jár, ami a trigliceridek (zsírok) koncentrációjának növekedéséhez vezet a vérplazmában, ami csökkenti az ELISA specifitását.

Az eredmények dekódolása

Az ELISA-val végzett antitestek vérvizsgálatának 2 módosítása van - minőségi és mennyiségi meghatározás. Nál nél
Az antitestek kvalitatív meghatározásánál az eredmény lehet pozitív (az antitestek kimutathatók, jelezve a fertőző ágens által okozott kóros folyamat esetleges jelenlétét) vagy negatív (nincs antitest, ami fertőző folyamat hiányát jelzi).

Az antitestek hiánya nem mindig 100%-ban jelzi a fertőző folyamat hiányát. Ez annak a ténynek köszönhető, hogy a fertőzést követően az antitestek nem azonnal képződnek, hanem egy bizonyos ideig (legalább körülbelül 2 hétig). Ezért a fertőzés hiányának megerősítésére az ELISA-t egy idő után meg lehet ismételni.

A kvantitatív ELISA-t az antitestek titerének (aktivitásának), valamint osztályainak meghatározására használják. A legtöbb esetben a fertőző betegségek diagnosztizálásához IgG (immunglobulin G) és IgM (immunglobulin M) osztályú antitesteket határoznak meg, amelyek a fertőzés után különböző időközönként képződnek a szervezetben, így a vizsgálati eredmény megfejtésének több jelentése is lehet:

• Az IgM aktivitás növekedése és az IgG hiánya a közelmúltban történt fertőzés és a fertőző folyamat akut lefolyásának bizonyítéka.
• Az IgM és IgG aktivitásának növekedése a fertőző folyamat súlyosbodása annak krónikus lefolyása és hosszan tartó fertőzése során.
• A magas IgG aktivitás és az IgM hiánya a fertőző folyamat krónikus lefolyása egy régóta fennálló fertőzés hátterében, amely után több mint hat hónap telt el (az IgG osztályú antitestek képződéséhez szükséges idő).

Általánosságban elmondható, hogy az egyes fertőző folyamatok ELISA-eredményeinek megfejtése bizonyos jellemzőkkel rendelkezik. A fertőző betegség jelenlétének pontosabb meghatározását, valamint lefolyásának szakaszát orvos végzi el.

Az ELISA jelenleg a választott módszer a legtöbb fertőző betegség diagnosztizálására. Az ilyen vizsgálat eredményei alapján az orvosnak lehetősége van pontos diagnózis felállítására és a kóros folyamat stádiumának meghatározására a későbbi megfelelő és hatékony kezelés előírása érdekében.

A biológiailag aktív anyagok, például az immunológiai komplexek szintjének meghatározásához speciális laboratóriumi vizsgálatra van szükség. Ha hematológiai, fertőző vagy autoimmun betegség gyanúja merül fel, a szakemberek ELISA vérvizsgálatot írnak elő. A cikk előrehaladtával megnézzük, mi ez, hogyan kell felkészülni rá, mit mutat, és hogyan lehet megfejteni saját kezűleg.

Milyen vizsgálat ez - ELISA vérvizsgálat? A rövidítés az enzim immunoassay of blood rövidítése, melynek során meghatározzák a biológiai anyagokban található különféle biológiailag aktív anyagok, valamint antitestek és antigének mennyiségi és minőségi tartalmát.

Mit használnak a vér enzimes immunoassay-jében:

• gerincvelői folyadék;
• húgycső nyálka, nyaki csatorna;
• magzatvíz;
• az üvegtest tartalma.

Az enzimes immunoassay-t szexuális úton terjedő betegségek, fertőző és onkológiai folyamatok, allergiás reakciók, endokrin és reproduktív rendszeri rendellenességek, autoimmun és immunhiányos betegségek diagnosztizálására, valamint egyes vesebetegségek kialakulásának kockázatának felmérésére írják elő.

A terhesség alatti ELISA vérvizsgálatát a korai felismerés, a fejlődési rendellenességek kezdeti szakaszában és dinamikájának nyomon követése érdekében írják elő. Ezenkívül az ELISA elemzés lehetővé teszi azon antitestek szintjének szabályozását, amelyek súlyos neurológiai rendellenességek kialakulását idézhetik elő a gyermekben, ezáltal megakadályozva a szövődmények kialakulását nemcsak a terhesség, hanem a szülés során is.

Lehetővé teszi a felismert problémák előzetes reagálását, és jelentősen javítja mind az anya, mind a baba egészségét.

A vér ELISA előnyei a következők:

• magas (akár 90%) érzékenység;
• a korai diagnózis lehetősége a betegség stádiumának egyidejű meghatározásával;
• a reagensek alacsony költsége, és ennek következtében a rendelkezésre állás;
• minimális anyagmennyiség a kutatáshoz;
• minimális átvételi feltételek;
• a reagensek hosszú távú tárolásának lehetősége;
• a kóros folyamat fejlődésének dinamikájának szabályozásának képessége.

Tesztrendszerek

Az enzim immunoassay hátrányai:

• lehetetlen meghatározni a betegség kórokozóját, csak a laboratóriumban immunválaszt kapnak
• hamis eredmény megszerzésének lehetősége (nagyon ritka esetekben, főleg terhesség alatt).

Készítmény

Az ilyen típusú vérvizsgálat elve specifikus antitestek képződésén alapul az emberi szervezetben, amikor az antigének bejutnak, vagyis olyan idegen anyagok, amelyek egy adott betegség kialakulását okozzák. Kölcsönhatásuk eredményeként „antigén-antitest” komplexek képződnek, amelyeket az enzim immunoassay során vizsgálnak.

Ebben a tekintetben, annak érdekében, hogy ne befolyásolják ezeket a komplexeket, és ennek megfelelően a kapott eredmények megbízhatóságát, a vér és más biológiai anyagok ELISA-elemzése bizonyos előkészítést igényel.

Ezenkívül 14 nappal a javasolt vizsgálat előtt felfüggesztik a specifikus kezelést, és leállítják az antibakteriális és vírusellenes gyógyszerek alkalmazását.

Az ELISA-hoz vért vénából adnak. Közvetlenül a vérvétel előtt korlátozni kell a fizikai aktivitást, valamint kerülni kell a dohányzást és az alkoholos italok fogyasztását.

Az enzim immunoassay elvégzésére többféle módszer és módszer létezik: direkt és indirekt módszerek, kompetitív és blokkoló módszerek.

A vér (bármely más biológiai anyag) ELISA-val történő vizsgálatának alapja egy két reakcióból álló algoritmus - immun- és enzimatikus.

Az első során a kutatásra vett biológiai anyag sejtjeinek védőelemeihez kórokozók kötődnek. Antigén-antitest immunkomplex képződik. Ez így néz ki. Az antigének abszolút minden sejt felszínén jelen vannak.

Amikor az idegen sejtek bejutnak a szervezetbe, azokat az immunsejtek (amelyek felületén antitestek találhatók) befogják, amelyek összehasonlítják az újonnan érkezett sejtek felszínéről származó antigénekre vonatkozó adatokat a saját „memóriájukban” tárolt információkkal. Ha ezek az adatok nem esnek egybe, a szervezet védő funkciói aktiválódnak, ami egy immunkomplex kialakulásából áll.

Ezt követően enzimatikus reakciót hajtanak végre, amely megjeleníti az előző reakció eredményeit. Elve egy anyag egyikből a másikba való átalakulásán alapul. Az egyes ELISA-típusokhoz az immunreakció során képződő anyagban van egy specifikus enzim, melynek kezelésével (az oldat színének intenzitása alapján) meghatározzák az idegen anyag koncentrációját.

Dekódolás

Az ELISA vérvizsgálatnak köszönhetően a laboratóriumi technikusok meghatározzák az A, G és M értéket. A vér (egyéb biológiai nyersanyagok) ELISA-vizsgálatának pozitív eredménye nemcsak a diagnózis felállítását teszi lehetővé, hanem a betegség stádiumát is. valamint lefolyásának jellege (akut vagy krónikus).

Ezek az immunglobulinok a beteg szervezetében kóros folyamat jelenlétében a betegség különböző időszakaiban képződnek:

• Immunglobulinok M, IgM– a betegség kezdete után öt nappal keletkeznek, és 1,5 hónapig a vérben maradnak, majd eltűnnek. Az IgM kimutatása akut primer kóros folyamat jelenlétét jelzi a szervezetben és fokozott terápiás beavatkozás szükségességét.
• Immunglobulinok G, IgG– a fertőzés után négy héttel jelentkeznek, jelenlétük a szervezetben több hónapig kimutatható. Az IgG kimutatása azt jelzi, hogy egy személy korábbi betegsége volt. Szintjük emelkedése is jelezheti az újrafertőződést.
• Immunglobulinok A, IgA– a fertőzés időpontjában jelennek meg, és négy hétig jelen vannak a szervezetben. Tartalmuk csökkenése a gyógyulás kezdetét jelzi. Ha egy személy kezelésen átesett és felépült a vizsgálatok során, az azt jelzi, hogy a betegség krónikussá vált. Az IgA és IgG egyidejű kimutatása az ELISA eredményekben egy krónikus folyamat jelenlétét is jelzi a szervezetben.

Azt is meg kell jegyezni, hogy az IgG és IgM egyidejű jelenléte az elemzésekben azt jelzi, hogy a krónikus folyamat súlyosbodott, és a betegnek el kell kezdenie a kezelést. Ha a vizsgálat során egyik immunglobulin sem volt kimutatható, az immunválasz hiányát jelenti.

Az enzimes immunoassay vérvizsgálat gyakori módszer a különféle patológiák azonosítására. A vérvizsgálat eredménye, melynek ELISA-értelmezését laboratóriumi diagnosztikus orvos értelmezte, a legtöbb esetben megbízható.

Mi az ELISA

Az ELISA egy modern diagnosztikai módszer, amelyet fertőzések, hormonális és immunrendszeri rendellenességek, valamint rák diagnosztizálására alkalmaznak laboratóriumi körülmények között. A módszer lehetővé teszi a fertőzés elleni antitestek kimutatását a betegség korai szakaszában. Ez a módszer a közvetett diagnosztikai módszerek közé tartozik, mivel feltárja a szervezet immunválaszát. Az ELISA előnyei között szerepel a többi diagnosztikai módszerhez képest a magas szintű gyárthatóság, amely csökkenti a hibák valószínűségét. A módszer rendkívül érzékeny, és gyermekek és felnőttek betegségeinek diagnosztizálására is alkalmazható. Az ELISA-nak sokféle változata létezik.

Az ELISA módszer az immunkémiai reakciók specifitásán, valamint az antigén-antitest komplexek reakcióinak fizikai-kémiai mintázatán alapul. A reakciókat specifikus enzimek részvételével hajtják végre, amelyek az antitestek kimutatásának markerei. Egy immunkémiai reakció eredményeként szigorúan meghatározott antitestek kötődnek a megfelelő antigénekhez. Az enzim immunoassay segítségével végzett vérvizsgálat szinte kizárja a hamis pozitív eredmény elérésének lehetőségét. A laboratóriumi diagnosztikai szakemberek az alapján ítélik meg a pozitív vagy negatív eredményt, hogy az oldat elszíneződik-e az antigén-antitest komplex enzimatikus indikációja során. Ha az oldat elszíneződik, akkor az antigén kölcsönhatásba lép az antitesttel, az ELISA eredménye pozitív.

Milyen betegségeket lehet kimutatni ELISA-val?

Az enzim immunoassay segítségével végzett kutatások lehetővé teszik:

• számos fertőző betegség azonosítása;
• autoimmun betegségek diagnosztizálása;
• az onkológia jelenlétének kimutatása;
• meghatározza a hormonális rendellenességeket;
• egyéb kutatásokat végezni.

Az ELISA módszerrel végzett vérvizsgálat lehetővé teszi a következő fertőzések jelenlétének meghatározását:

A módszert számos fertőzés kórokozói antigénjeinek azonosítására, valamint különféle osztályok antitesteinek azonosítására használják. Az ELISA módszer nagyon népszerűvé vált a szifilisz, a HIV és a vírusos hepatitis kimutatására. Az STI-k elsődleges diagnosztizálása céljából nem javasolt az antitestek jelenlétének és szintjének meghatározása a vérszérumban. Ebben az esetben az antitestek jelenléte a vérben csak annak a jele lehet, hogy a beteg szervezete a múltban érintkezett a fertőző ágenssel.

A különböző autoimmun betegségek ELISA-val történő diagnosztizálása a következők vizsgálatával történik:

• antinukleáris testek;
• kettős szálú DNS elleni antitestek;
• antitestek oldható nukleáris antigének ellen (ENA screen);
• antikardiolipin antitestek;
• IgG - citrullinált peptid;
• rheumatoid faktor;
• C-reaktív protein;
• autoantitestek a neutrofil citoplazmatikus antigének ellen (ANCA-szűrés).

A specifikus immunkomplexek bizonyos autoimmun betegségekre jellemzőek. Például a kettős szálú DNS antitestek olyan betegségekre jellemzőek, mint a szisztémás lupus erythematosus.

A rákot a vérszérum enzimes immunológiai vizsgálatával határozzák meg specifikus tumormarkerek, például PSA, CA-125 kimutatására.

A PSA a prosztata adenoma és a prosztatarák jelenlétét jelzi. A CA-125 a petefészekrák tumormarkere. Az érték nő a méh, az emlőmirigyek és a méhnyálkahártya rákos daganatainál is.

Felkészülés az elemzésre

Az eredmények maximális pontosságának biztosítása érdekében bizonyos szabályokat be kell tartania a vizsgálatra való felkészüléshez. Az ELISA módszerrel végzett laboratóriumi diagnosztikai elemzést általában reggel veszik az antecubitalis vénából. Szigorúan üres gyomorra kell vért adni. Ezen az egyszerű utasításon kívül a következő előkészítési ajánlásokat kell követni:

• 24 órával a vizsgálat előtt kerülni kell az alkoholfogyasztást és a dohányzást;
• kerülje a nehéz fizikai aktivitást;
• maradjon nyugodt állapotban;
• kerülje az ideges feszültséget;
• vért adni ELISA-hoz legkorábban 10 nappal a gyógyszer abbahagyása után;
• értesítse kezelőorvosát a szükséges gyógyszerek bevételéről.

Ezenkívül néhány nappal a vizsgálat előtt ajánlott betartani az étrendet. Ugyanakkor zárja ki az étrendből a zsíros ételeket és a sült ételeket. A vírusos hepatitis vizsgálata előtt ne csak a zsíros és sült ételeket, hanem a citrusféléket és a narancsos zöldségeket is kizárja az étrendből.

Meg kell jegyezni, hogy bizonyos hormonális vizsgálatok eredményeit olyan tényezők befolyásolják, mint a menstruációs ciklus fázisa. A menstruációs ciklus egyik vagy másik szakaszában történő vizsgálat szükségességét előzetesen meg kell beszélni kezelőorvosával. Ellenkező esetben váratlan eredményeket kaphat. Például a luteinizáló nemi hormon normál szintje a nőknél a ciklus napjától függően változik:

• 1-12 nap - 2-14 méz/l;
• 12-14 nap - 24-150 mU / l;
• az új ciklus kezdete előtti 15. naptól - 2-17 mU/l.

ELISA eredmények dekódolása

Az elemzés lehetővé teszi, hogy meghatározzuk a különböző osztályokba tartozó antitestek jelenlétét a szervezetben. Az antitesteknek 3 osztálya van:

Ezek az antitestek a betegség különböző szakaszaiban képződnek. A fertőzés után a szervezetben elsőként IgM antitestek termelődnek. Jelenlétük mindenesetre a betegség jelzője. Az antitestek ezen osztálya hiányzik az egészséges ember testében.

Ezek az immunglobulinok körülbelül 5-6 hétig vannak jelen a vérszérumban.

A vérben jelenlévő G osztályú immunglobulinok azt jelzik, hogy egy személy vagy már szenvedett a betegségben, vagy a fertőzés hordozója. Ezek az antitestek az M osztályú antitestek megjelenése után kezdenek termelődni, a legtöbb betegségben a fertőzés után 3-4 héttel. Jelenlétük a szervezetben több évig lehetséges. Egyes betegségekben (például szifiliszben) az IgG egész életen át jelen van a vérben.

Ha az IgA jelen van a szervezetben, akkor a lehető legintenzívebben kell küzdeni a fertőzés ellen. Az ebbe az osztályba tartozó antitestek csak krónikus fertőző betegség esetén jelennek meg. Az IgA eltűnése a fertőzés pusztulását jelzi.

Ha 1,5 év alatti gyermekeknél ELISA-tesztet végeznek, akkor a következő tulajdonságot kell figyelembe venni: a gyermek vére az anya IgG-jét tartalmazza különböző fertőzésekre. Ez nem jelenti azt, hogy a gyermek beteg. Ebben az esetben inkább ez a norma. Az IgM jelenléte a méhen belüli fertőzés vagy a születés után szerzett fertőzés bizonyítéka. Az anya IgM-je a placentán keresztül nem tud bejutni a baba szervezetébe.

A táblázat bemutatja a 3 osztályba tartozó antitestek jelenlétének vagy hiányának lehetséges kombinációit a szervezetben és azok értelmezését.

A tesztek dekódolásakor a (+) pozitív eredményt, a (-) pedig az ellenkezőjét, azaz negatívat jelez. Azt az eredményt, amely egy anyag jelenlétét vagy hiányát mutatja a szervezetben, kvalitatívnak nevezzük. Mennyiségileg kiegészíthető. A mennyiségi eredmény a szervezetben lévő különféle anyagok mennyiségi tartalmát tükrözi.

Érdemes megjegyezni, hogy a tesztrendszerek saját referenciaértékekkel rendelkeznek, amelyeket a gyártó határoz meg, és amelyek a mutatókat jellemzik. A referenciaértékek túllépése általában bizonyos patológiák jelenlétét jelenti a vizsgálati alany testében.

Az ELISA eredmények kézhezvétele után a kapott értékeket a kezelőorvosnak meg kell fejteni. Csak ő tudja helyesen értékelni a kapott eredményeket és meghatározni a betegség stádiumát.

Kapcsolatban áll