Однозначно, точнее будет РИБТ.

Это исследование используют, чтобы перепроверить результаты ИФА, если в них сомневаются.

Тем не менее, если сравнивать эти два метода, РИБТ имеет и недостатки:

1. Метод мало информативен на раннем этапе развития заболевания. Он становится положительным только через 2 месяца после инфицирования. В то время как ИФА может быть положительной уже с 3 недели.

2. Дороговизна и трудоёмкость. В то время как ИФА – это простой метод, который позволяет обследовать в короткие сроки большое количество человек. Он не требует от лаборанта большого количества времени и недорого обходится пациенту.

3. Метод неинформативен в период приема антибиотиков, а также в течение определенного срока после окончания антибактериальной терапии. Использование пациентом антибиотиков делает РИБТ негативной.

Поэтому исследование целесообразно проводить:

не раньше, чем спустя 1 неделю после отмены водорастворимых пенициллинов;
не раньше, чем через 25 дней после прекращения введения дюрантных (длительного действия) антибиотиков.

Учитывая перечисленные недостатки, РИБТ – это метод, применяющийся для диагностики сифилиса очень редко. Но основное преимущество исследования – высокая достоверность. Поэтому РИБТ можно использовать в тяжелых диагностических случаях, чтобы подтвердить или исключить инфекцию.

Основные области применения:

дифференциальная диагностика с других анализов на сифилис;
диагностика нейросифилиса;
оценка целесообразности снятия пациента с учета венеролога, если данные, полученные в ходе других исследований, сомнительные;
выявление скрытого сифилиса;
определение висцеральной формы болезни;
выявления патологии у беременных при неинформативности других исследований или в случае подозрения на ложноположительные результаты.

ИФА относится к скрининговым методам. Он может быть подтверждающим, только если до этого уже было проведено другое исследование (например, антикардиолипиновый тест).

В отличие от ИФА, РИБТ – это самодостаточное исследование.

Наличие положительного результата является поводом для установления диагноза без дополнительных методов диагностики. Кроме того, РИБТ, как самый точный способ выявления бледной трепонемы, используется в судебно-медицинской практике для ретроспективной диагностики сифилиса.

Сифилис: РИФ, РИБТ – срочно

Если вам нужно сдать анализы на сифилис, включая РИФ или РИБТ, обращайтесь в нашу клинику. Мы сотрудничаем с несколькими крупными лабораториями Москвы.

Поэтому у нас есть широкие диагностические возможности, позволяющие проводить практически любые исследования. Однако следует понимать, что РИБТ – это не тот метод диагностики, где можно рассчитывать на срочность.

Само исследование и получение его результатов не займет много времени. Но для обеспечения его точности потребуется определенная подготовка.

Пациенту придется:

подождать 2 месяца с момента предполагаемого инфицирования (а иначе результат с высокой вероятностью будет отрицательным);
подождать 1 месяц с момента приема антибиотиков (они искажают данные исследования, делая его результаты ложноотрицательными).

Если необходимые условия соблюдены, вы можете сдать РИБТ. Его результаты вы получите уже через 1-2 дня. Если он окажется положительным, в нашей клинике вы сможете пройти курс лечения сифилиса.

У нас работают опытные врачи-венерологи, которые помогут избавиться от этого опасного заболевания.

Если вам необходимо сдать РИБТ и другие анализы на сифилис, обращайтесь к грамотным венерологам.

Сифилис сопровождается многочисленными симптомами и имеет большое количество клинических форм. Его распознавание основано на комплексном клинико-лабораторном обследовании пациента. Общий анализ крови при сифилисе несет мало информации, поэтому для диагностики болезни не применяется.

Для анализов могут браться следующие материалы:

кровь из пальца и вены;
ликвор — спинно-мозговая жидкость;
отделяемое твердого шанкра (язвы);
участки регионарных лимфоузлов.

Выбор материала и метода диагностики зависит от стадии болезни. О том, какие анализы сдают на сифилис, мы поговорим в следующей рубрике.

Классификация методов лабораторной диагностики болезни

В начальной стадии можно использовать бактериоскопический метод, основанный на определении возбудителя – бледной трепонемы – под микроскопом. В дальнейшем широко используются серологические тесты, основанные на определении микробных антигенов и вырабатываемых организмом антител в биологическом материале.

Бактериологические исследование не проводят, так как возбудитель сифилиса очень плохо растет на питательных средах в искусственных условиях.

Все методы обнаружения трепонемы, то есть виды анализов на сифилис, делятся на две большие группы:

1. Прямые, которые непосредственно обнаруживают сам микроб:

темнопольная микроскопия (выявление трепонем на темном фоне);
RIT-тест – заражение исследуемым материалом кроликов;
полимеразная цепная реакция (ПЦР), обнаруживающая участки генетического материала микроорганизма.

2. Непрямые (серологические), основанные на выявлении антител к микробу, которые вырабатываются организмом в ответ на инфицирование.

Серологические анализы делятся на две группы

Нетрепонемные:

реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном (РСКк);
реакция микропреципитации (РМП);
тест быстрых плазменных реагинов (RPR);
проба с толуидиновым красным.

Трепонемные:

реакция связывания комплемента с трепонемным антигеном (РСКт);
реакция иммобилизации трепонем (РИТ или РИБТ);
реакция иммунофлюоресценции (РИФ);
реакция пассивной гемагглютинации (РПГА);
иммуноферментный анализ (ИФА);
иммуноблоттинг.

Методики этих анализов достаточно сложны, поэтому мы остановимся в основном на том, когда они проводятся и насколько точную информацию дают.

Сразу скажем, что основа диагностики сифилиса – серологические методы. Как называется анализ на сифилис: в каждом случае обследование может включать разные методики. Ниже мы более подробно расскажем о них.

Прямые тесты

Убедительно доказывает наличие трепонем их обнаружение под микроскопом. Вероятность сифилиса при этом достигает 97%. Вместе с тем микробы можно обнаружить лишь у 8 больных из 10, поэтому отрицательный тест не исключает заболевание.

Диагностика проводится в и периодах, когда имеются твердый шанкр или кожная сыпь. В отделяемом этих заразных элементов и ищут возбудителей болезни.

Более эффективный, но вместе с тем более дорогой и сложный анализ – обнаружение трепонем после предварительной обработки их флуоресцентными антителами. Это вещества, «прилипающие» к микробам и образующие «свечение» их в поле микроскопа.

Чувствительность методов снижается при большой длительности болезни, обработке язв и сыпи антисептиками, а также после лечения.

Биологический метод диагностики RIT высокоспецифичен, но дорог, а результат получается лишь через долгое время, когда у зараженного животного разовьется заболевание. В настоящее время метод практически не используют, хотя он практически самый точный из всех. Отличный анализ крови на сифилис для обнаружения генетического материала трепонем – ПЦР. Единственное его ограничение – относительная дороговизна диагностики.

Серологические методы

Нетрепонемные тесты

РСКк и РМП

Самый известный из этих анализов – реакция Вассермана. Это способ быстрой диагностики (экспресс анализ на сифилис), основанный на сходной реакции антител из крови больного человека на сами трепонемы и на кардиолипин, полученный из бычьего сердца. В результате такого взаимодействия антител и кардиолипина образуются хлопья.

В России данный анализ практически не используется. Его заменила реакция микропреципитации. Недостатком метода является его низкая специфичность. Ложноположительный анализ крови на сифилис встречается при туберкулезе, болезнях крови, системной красной волчанке, при беременности, после рождения ребенка, во время менструального кровотечения и во многих других случаях. Поэтому при положительной RW применяют более точные методы диагностики.

После заражения реакция становится положительной через два месяца. При вторичном сифилисе она положительна практически у всех больных.

Сходный механизм имеет реакция микропреципитации, заменившая реакцию Вассермана. Она недорога, легко исполнима, быстра в оценке, но тоже может давать ложноположительный результат. Эти два теста используют как скрининговые.

РМП становится положительной через месяц после появления твердого шанкра. Для ее проведения используется кровь из пальца.

Может ли анализ на сифилис быть ошибочным? Конечно, да, особенно при использовании нетрепонемных тестов.

Причины острых ложноположительных проб при использовании РМП:

острые инфекционные заболевания;
воспаление легких;
инфаркт миокарда;
инсульт;
травмы и отравления.

Хронические ложноположительные результаты часто возникают при следующих болезнях:

туберкулез;
бруцеллез;
лептоспироз;
саркоидоз;
ревматические болезни;
инфекционный мононуклеоз;
злокачественные опухоли;
сахарный диабет;
цирроз печени и другие.

Если возникают спорные анализы – применяют трепонемные серологические тесты для уточнения диагноза.

RPR и проба с толуидиновым красным

Тест быстрых плазменных реагинов (анализ на сифилис rpr) – еще одна разновидность реакции с кардиолипиновым антигеном. Ее используют в следующих случаях:

скрининг населения;
подозрение на сифилис;
обследование доноров.

Упомянем еще и пробу с толуидиновым красным. Все эти способы используются для оценки эффективности лечения. Они являются полуколичественными, то есть уменьшаются при выздоровлении и возрастают при рецидиве инфекции.

Отрицательные результаты нетрепонемных тестов с большой вероятностью свидетельствуют, что сифилиса у обследуемого нет. Поэтому нетрепонемные тесты применяются для оценки излеченности. Первый такой анализ следует сдать через 3 месяца после завершения курса лечения.

Трепонемные тесты

Трепонемные тесты основаны на использовании трепонемных антигенов, что значительно повышает их диагностическую ценность. Они применяются в следующих ситуациях:

положительный скрининг-тест (реакция микропреципитации);
распознавание ложноположительного результата скрининга;
подозрение на сифилис;
диагностика скрытых форм;
ретроспективная постановка диагноза, когда пациент перенес заболевание ранее.

РИТ и РИФ

Самые качественные (высокочувствительные и высокоспецифичные) – РИТ и РИФ. Недостатки этих методов – сложность, длительность, необходимость современного оборудования и обученного персонала. У большинства вылеченных пациентов трепонемные тесты остаются положительными в течение многих лет, и поэтому не могут применяться как критерий излеченности.

РИФ становится положительной через два месяца после заражения. Если она отрицательная – пациент здоров, если положительная – высока вероятность заболевания.

РИТ особенно часто применяется при положительных результатах РМП, чтобы исключить или подтвердить заболевание. Она высокочувствительна и позволяет с большой точностью сказать, есть у пациента сифилис, или нет. Однако анализ становится положительным только через три месяца после инфицирования.

Иммуноблоттинг

Иммуноблоттинг еще более чувствителен, чем РИФ, но менее чувствителен, чем РПГА. Его используют нечасто, в основном для диагностики сифилиса новорожденных.

Перечисленные методы не подходят для скрининга, то есть быстрого выявления болезни, потому что становятся положительными позднее, чем реакция микропреципитации.

ИФА и РПГА

Современные высокоинформативные стандартизированные методы диагностики сифилиса – ИФА и РПГА. Они недороги, быстро ставятся и проверяются в больших количествах. Эти тесты могут быть применены для подтверждения диагноза.

Анализ РПГА становится положительным при первичном серопозитивном сифилисе, то есть при появлении твердого шанкра (через месяц после заражения). Особенно он ценен при диагностике поздних, и врожденных форм заболевания. Однако РПГА должна быть дополнена как минимум одним нетрепонемным и одним трепонемным тестом для точности диагностики. Такой тройной тест – самый достоверный анализ на сифилис. Недостаток РПГА – сохранение положительной реакции в течение долгого времени, что не позволяет применять тест как критерий излеченности.

Анализ ИФА на сифилис становится положительным уже через три недели после заболевания. Минусом ИФА является то, что он бывает ложный. Ложноположительная реакция возникает при системных заболеваниях, нарушениях обмена веществ, а также у детей, рожденных больными матерями.

Недостатки серологических методов привели к разработке самых совершенных способов, не дающих ошибок, но пока дорогих и редко применяемых – газовой хроматографии и масс-спектрометрии.

Алгоритм диагностики сифилитической инфекции на разных стадиях

В первичном серонегативном периоде (до 2 месяцев после заражения) проводят поиск трепонемы в темном поле или с использованием флюоресцирующих антител.

При первичном серопозитивном, вторичном и скрытом сифилисе используют РМП и ИФА, а как подтверждающий тест – РПГА.

У пациентов с рецидивами вторичного сифилиса исследуют элементы сыпи, пытаясь выделить из них трепонемы для микроскопического изучения.

В третичном периоде РМП у трети больных отрицательная. ИФА и РПГА положительные, но они могут свидетельствовать не о третичном сифилисе, а о перенесенном ранее заболевании. Слабоположительный анализ скорее говорит о выздоровлении, чем о третичном сифилисе.

При выставлении диагноза «врожденный сифилис» принимают во внимание наличие болезни у матери, разницу в показателях РМП у матери и ребенка, положительные ИФА и РПГА у новорожденного, иммуноблоттинг.

Обязательно обследуются на сифилис беременные женщины, особенно те, у которых уже были роды мертвым плодом, неразвивающаяся беременность, ранние выкидыши. Им проводится РМП, ИФА, РПГА. Обследуют на наличие заболевания и перед прерыванием беременности.

Правила получения анализа на сифилис

Чтобы получить направление в лабораторию, нужно посетить своего участкового терапевта. Если хочется сдать анализ быстрее, это можно сделать в частной лаборатории без направления (например, лаборатории Инвитро анализ на сифилис делают быстро и анонимно).

Как сдать анализ на сифилис? Кровь сдается с утра, натощак. Можно пить лишь чистую воду.

Подготовка: за два дня до сдачи анализа нужно исключить из питания жирную пищу и особенно алкоголь.

Как берут анализ? обычным способом из пальца или локтевой вены.

Сколько делается анализ на сифилис? Результат пробы обычно бывает готов уже на следующий день. Расшифровка может быть взята у врача или в лаборатории.

Сколько действителен анализ? На срок до трех месяцев.

Анализ спинно-мозговой жидкости

В некоторых случаях для диагностики нейросифилиса берут анализ ликвора.

Это обследование назначается всем пациентам со скрытым сифилисом, если у них существуют признаки патологии нервной системы, а также при скрытом и позднем нейросифилисе.

Кроме того, анализ выполняется всем пациентам после выздоровления при сохранении у них положительных серологических реакций. Мы уже писали в нашей статье, что такое явление случается нередко.

Анализ ликвора при сифилисе назначает и проводит только врач.

Спинно-мозговую жидкость получают путем прокола между двумя позвонками поясничного отдела. Ее собирают по 4 мл в две пробирки. Затем место пункции обрабатывается йодом и накрывается стерильной повязкой. После пункции пациент должен лежать на животе с приподнятым ножным концом кровати не менее 3-4 часов, затем он может лечь на бок. Постельный режим после пункции показан в течение двух суток.

Ликвор из первой пробирки исследуют с помощью общепринятых реакций на содержание белка, клеток, определение признаков менингита (воспаления мозговых оболочек).

Спинно-мозговая жидкость из второй пробирки исследуется на содержание антител к трепонеме с помощью реакции Вассермана, РМП, РИФ и РИБТ, о которых мы говорили выше.

По степени выраженности нарушений различают четыре вида изменений ликвора. Анализируя их, врач может сделать вывод о наличии разных форм поражения нервной системы (сосудистый нейросифилис, сифилитический менингит, менинго-васкулярный сифилис, спинная сухотка, поздний мезенхимальный нейросифилис), а также о выздоровлении больного с положительными серологическими тестами.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — серологическая реакция, позволяющая выявить антитела к известным антигенам. Метод заключается в микроскопии окрашенных мазков.

Данную реакцию используют в иммунологии, вирусологии и микробиологии. Она позволяет определить наличие вирусов, бактерий, грибов, простейших и ИКК. РИФ очень широко применяется в диагностической практике для обнаружения вирусных и бактериальных антигенов в инфекционном материале. Метод основан на способности флюорохрома вступать в связь с белками, не нарушая при этом их иммунологической специфичности. В основном применяется при диагностике инфекций мочеполовых путей.

Различают следующие методы проведения реакции иммунофлюоресценции: прямой, непрямой, с комплементом. Прямой метод заключается в окрашивании материала флюорохромами. Благодаря способности антигенов микробов или тканей светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа, они определяются как клетки с ярко окрашенной каймой зеленного цвета.

Непрямой метод заключается в определении комплекса антиген+антитело. Для этого опытный материал обрабатывается антителами антимикробной кроличьей сыворотки, предназначенной для диагностики. После того как антитела свяжутся с микробами, их отделяют от не связавшихся и обрабатывают антикроличьей сывороткой, помеченной флюорохромом. После этого комплекс микроб+анимикробные антитела+анитикроличьи антитела определяется с помощью ультрафиолетового микроскопа также, как и при прямом методе.

Реакция иммунофлюоресценции незаменима при диагностике сифилиса. Под воздействием флюорохрома возбудитель сифилиса определяется как клетка с желто-зеленой каймой. Отсутствие свечения означает, что пациент не заражен сифилисом. Этот анализ часто назначается при положительной реакции Вассермана. Данный метод очень эффективен при диагностике, так как позволяет определить возбудителя на ранних стадиях заболевания.

Кроме того, что РИФ позволяет диагностировать сифилис, его также применяют для определения наличия таких возбудителей как хламидии, микоплазма, трихомонады, а также возбудителей гонореи и генитального герпеса.

Для проведения анализа используют мазки или венозную кровь. Процедура взятия мазка совершенно безболезненная и не представляет никакой опасности. К сдаче данного анализа необходимо подготовиться. За двенадцать часов до него не рекомендуется пользоваться средствами гигиены, такими как мало или гели. Также иногда по показаниям врача проводиться провокация. Для этого рекомендуют прием острой пищи или алкоголя или проводится инъекция провоцирующего вещества, например гоновакцина или пирогенал. Помимо этого промежуток между приемом антибактериальных препаратов и сдачей анализа должен быть не менее четырнадцати дней.

При оценке результатов следует учитывать тот факт, что свечение наблюдается не только у живых бактерий, но и у мертвых, особенно это относится к хламидиям. После курса антибиотиков мертвые клетки хламидий также обладают свечением.

При правильной подготовке пациента и соблюдении техники взятия мазка, данный анализ позволяет определить заболевания на ранних стадиях, что очень важно для своевременного лечения. Положительными сторонами данного метода является короткие сроки получения результата, простота выполнения и небольшая стоимость анализа.

К недостаткам можно отнести то, что для проведения анализа необходимо достаточно большое количество исследуемого материала. Кроме того, оценку результатов может проводить только опытный специалист.

РИФ, РИБТ, РПГА

РИФ - реакция иммунофлюоресценции - трепонемный тест. Является одним из самых чувствительных анализов на сифилис. РИФ становится положительной через 10-20 дней после инфицирования, что относит ее к методам раннего выявления сифилиса.

Показания проведения РИФ:

Постановка РИФ проводится у лиц с симптомами сифилиса, при этом отрицательными реакциями - РМП, РВ;
в качестве дифференциальной реакции у лиц с положительными реакциями RW, микрореакции и отсутствием симптомов;
у беременных при отсутствии клинических проявлений и сифилиса в анамнезе.

Методика проведения РИФ:

При проведении реакции в сыворотку пациента добавляется кровь кролика, зараженная бледной трепонемой(возбудитель сифилиса) и флюоресцирующая(светящаяся) сыворотка. Исследование заключается в наблюдении свечения комплексов под люминесцентным микроскопом. Результаты реакции интерпретируются в зависимости от интенсивности свечения от 1+ до 4+, что указывает на наличие сифилиса. Отсутствие свечения - отрицательный результат РИФ обозначает, что обследуемый здоров. Ложные результаты анализа встречаются крайне редко при системных процессах, беременности и т.д.
Реакция ставится в модификации РИФ-200 и РИФ-авс(абсорбция).
Чувствительность реакции при первичном сифилисе составляет порядка 85%
при вторичном сифилисе - 100%
при третичном сифилисе - 98-100% .

Негативация РИФ происходит в течение нескольких лет после лечения сифилиса. После проведенной противосифилитической терапии необходимо наблюдение за показателями в динамике.

РИБТ - реакция иммобилизации бледных трепонем - является самым специфичным анализом крови на сифилис. РИБТ высококачественный, дорогостоящий анализ крови, выполнение которого могут позволить себе хорошо оснащенные лабораторные комплексы. РИБТ является основополагающей реакцией при скрытых формах сифилиса, нейросифилисе, висцеросифилисе. Позволяет отдифференцировать ложноположительные реакции от истинного заболевания сифилисом.

Постановка реакции основана на обездвиживании (иммобилизации) возбудителя сифилиса видоспецифичными антителами. Путем микроскопического исследования читается результат реакции: 0-20% - отрицательная, 21-30%- сомнительная, 31-50% - слабоположительная, 51-100% - положительная реакция. То есть к положительным результатам на сифилис относятся те, где РИБТ более 50%. При сифилисе РИБТ становится положительной достаточно медленно: в первичный периоде сифилиса она еще отрицательна, во вторичном свежем периоде - положительна в 50% случаев, во вторичном рецидивном периоде - положительна в 90-100%, в третичном периоде - положительна в 99-100%.

Негативация РИБТ осуществляется десятилетиями, поэтому как критерий достоверности излеченности ее использовать неправомочно, тем не менее динамическое наблюдение после проведенного противосифилитического лечения необходимо.

Проведение реакции РИБТ целесообразно не ранее чем через 30 дней после окончания лечения. РПГА - реакция пассивной гемагглютинации - относится к трепонемным тестам, проводится в комплексе с нетрепонемными. Используется для подтверждения диагноза сифилиса на любой его стадии.

Реакцию целесообразно проводить через 4 недели после предполагаемого заражения. При проведении реакции к сыворотке крови пациента добавляют препарат, приготовленный из эритроцитов животного происхождения, сенсибилизированных антигеном бледной трепонемы - возбудителя сифилиса.

Суть реакции РПГА заключается в склеивании (агглютинации) в присутствии антител к трепонеме и образовании агглютината - фигуры, которую наблюдает врач - лаборант. Реакция оценивается по количеству +: 4+- резкоположительный результат, 3+-положительный, 2+-слабоположительный, 1+-сомнительный, - - отрицательный результат. При положительном результате реакции проводится количественная оценка с определением концентрации (титра) антител. При прогрессировании сифилиса - титр антител постоянно растет.

РПГА остается положительной в течение десятилетий после лечения сифилиса, поэтому не может использоваться в качестве критерия достоверности излеченности. Однако необходимо наблюдать титр антител РПГА в динамике.

Метод обладает высокой чувствительностью. Результаты РПГА могут быть ложноположительны. К таким результатам анализа могут приводить болезни соединительной ткани, некоторые инфекции, и т.д.

Собственно говоря, этот анализ не один – их несколько. Для выявления сифилиса кровь исследуют несколькими способами. Помимо крови в лабораторной диагностике этого заболевания используют и другой биологический материал, в котором содержится возбудитель, бледная спирохета (син. – бледная трепонема).

Это отделяемое из сифилидов (специфических изъязвлений и высыпаний на коже и слизистых), при нейросифилисе – спинномозговая жидкость (ликвор).

Все методы диагностики сифилиса можно разделить на прямые и непрямые. Прямые методы направлены на непосредственное обнаружение бледной трепонемы. Что касается непрямых, то они основаны на обнаружении антител к спирохете. Есть антитела, значит, есть и сама спирохета. Непрямые методы диагностики сифилиса – это не что иное, как серологические реакции, в которых в качестве исследуемого материала используется сыворотка крови.

Антитела обнаруживаются при их взаимодействии с антигенами. Для проведения серологических реакций используются препараты, содержащие заданный антиген. В зависимости от типа этого антигена серологические реакции могут быть трепонемными и нетрепонемными. В трепонемных реакциях участвует антиген, специфичный для бледной трепонемы.

К трепонемным реакциям относят:

РСК – реакцию связывания комплемента с трепонемным антигеном
РПГА – реакцию пассивной гемагглютинации
ИФА – иммуноферментный анализ
РИФ – реакцию иммунофлуоресценции
РИБТ – реакцию иммобилизации бледных трепонем

К нетрепонемным серологическим реакциям относят реакцию связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном и реакцию микропреципитации или тест быстрых плазменных реагинов.

Используемый в этих реакциях кардиолипиновый антиген не является антигеном бледной спирохеты. Это экстракт из бычьего сердца, по своей структуре сходный с кардиолипин-фосфолипидныс антигеном клеточной мембраны спирохет.

Поэтому антитела, вырабатывающиеся при появлении возбудителя сифилиса, будут реагировать и на этот антиген.

Когда говорят об анализе на сифилис, то чаще всего подразумевают именно этот метод, реакцию Вассермана

Реакция Вассермана (RW)

Когда говорят об анализе на сифилис, то чаще всего подразумевают именно этот метод, реакцию Вассермана. Данная реакция была разработана для диагностики сифилиса немецким иммунологом Вассерманом более столетия назад, еще в самом начале прошлого века. Однако ее проводят и сегодня, правда, с существенными изменениями.

По сути своей RW в нынешнем варианте относится к РСК. Под комплементом в иммунологии подразумевают систему плазменных белков, которые формируют врожденный иммунитет. RW основана на реакции антигенов с антителами с участием комплемента. Антитела к бледной трепонеме присутствуют в сыворотке больного сифилисом. Если к такой сыворотке добавить антигены, то антитела вступят с ними в реакцию.

Для RW используют уже готовые наборы специфических и неспецифических антигенов. Специфические антигены выделены из культур бледной трепонемы, выращенных на питательных средах.

Неспецифические антигены представлены кардиолипином бычьего сердца. Таким образом, RW можно отнести и к трепонемным, и к нетрепонемным исследованиям.

Реакция специфических и неспецифических антигенов с антителами исследуемой сыворотки внешне не видна. Для ее индикации используют бараньи эритроциты.

В составе гемолитической сыворотки иммунизированного кролика их добавляют к исследуемому материалу. Что же получается в конечном итоге?

Если исследуемый здоров, то антитела к трепонеме в его сыворотке отсутствуют. При этом под действием комплемента бараньи эритроциты гемолизируются (разрушаются), и это отчетливо видно в пробирке, содержимое которой равномерно окрашено без осадка («лаковая кровь»).

Таким образом, гемолиз говорит об отсутствии антител. В этом случае реакция отрицательная.

У больных сифилисом все наоборот. У них весь комплемент связывается при образовании иммунных комплексов антигенов с антителами, и его на разрушение эритроцитов, попросту говоря, не хватает.

Поэтому отсутствие гемолиз свидетельствует о наличии антител к спирохетам, и, соответственно, о сифилисе. В этом случае реакция положительная, и ее обозначают знаком плюс.

Точнее, плюсов может быть несколько, ведь задержка гемолиза имеет различную степень выраженности:

1 плюс – реакция сомнительная
2 плюса – реакция слабоположительная
3 плюса – реакция положительная
4 плюса – реакция резкоположительная.

На медицинском сленге плюсы в данном случае именую крестами, и результат обозначают соответственно: +, ++, +++ или ++++.

Методика RW довольно проста, недорога, занимает немного времени, и не требует сложного лабораторного оборудования. Поэтому к данной реакции прибегают повсеместно, причем не только при наличии конкретных показаний (подозрение на сифилис, наличие характерных симптомов).

Ее проводят в качестве скринингового метода при плановых профосмотрах, беременным при постановке на учет, всем пациентам при госпитализации в стационар.

Между тем, методика не лишена существенных недостатков. Во-первых, она не всегда дает положительный результат при имеющемся сифилисе. Ведь антитела формируются не сразу, а спустя некоторое время.

Этот промежуток времени, когда нет антител, именуют серонегативным периодом сифилиса, и длится он 5-8 нед. с момента заражения.

А серопозитивный период сифилиса начинается уже в конце первичного сифилиса. Вторичный сифилис практически всегда серопозитивен, а третичный осложненный сифилис может быть серонегативным. В данном случае это вовсе не говорит о том, что бледной трепонемы нет в организме. Просто иммунная система за долгие годы истощилась, и антитела перестали выделяться.

С другой стороны, в ряде случаев даже после успешного лечения сифилиса 1-2 креста в анализе могут сохраняться долгие годы, а иногда и пожизненно.

Таким образом, количество крестов в RW не зависит от активности бледных трепонем и тяжести течения сифилиса. Для этого используют другой показатель – титр антител. Это максимальная степень разведения сыворотки, при которой имеется резкоположительная реакция.

Еще один недостаток RW – ее низкая специфичность с частыми ложноположительными результатами, когда идет задержка гемолиза при отсутствии сифилиса.

Среди причин ложноположительных результатов – другие бактериальные и вирусные инфекции, системные коллагенозы, беременность, алкоголизм, наркомания, прием лекарств, погрешности в питании, и многое другое. Поэтому очень важно правильно подготовится к анализу.

За 7-10 дней до взятия крови прекращают прием антибиотиков. В течение последних суток нужно воздержаться от приема обильной, жирной пищи, алкоголя.

Кровь для анализа берется из вены натощак. Отрицательные результаты при отсутствии характерных клинических проявлений в виде твердого шанкра с большой степенью достоверности свидетельствуют об отсутствии сифилиса. При наличии хотя бы одного из крестов прибегают к другим методам диагностики.

Реакция пассивной гемагглютинации заключается в склеивании или агглютинации эритроцитов.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

Реакция пассивной гемагглютинации заключается в склеивании или агглютинации эритроцитов. На используемых в этой реакции эритроцитах фиксируют трепонемные антигены. Затем к этому материалу добавляют исследуемую сыворотку.

Если в ней содержатся антитела, то они вступают во взаимодействие с антигенами на эритроцитах, что приводит к их агглютинации. Таким образом, агглютинация свидетельствует о положительной РПГА и об имеющемся сифилисе, а отсутствие агглютинации и отрицательная РПГА о том, что обследуемый здоров. Здесь также имеется 4 степени положительного результата с различным титром антител.

Чувствительность РПГА более высокая в сравнении с RW. Однако и этот анализ отрицателен в самом начале заболевания, в течение первых 2-4 нед., а иногда и 6 нед. В дальнейшем, во вторичном и третичном периоде, РПГА всегда положительная, как и при латентном сифилисе.

Поэтому ее можно использовать для диагностики заболевания без четких клинических проявлений. Подобно другим трепонемным исследованиям РПГА остается положительной пожизненно, даже после полного излечения. Поэтому ее нельзя использовать для оценки адекватности лечения сифилиса.

Отрицательной она может стать лишь в тех случаях, когда лечебные мероприятия начали проводиться сразу же, как только пациент заболел сифилисом.

РПГА также дает ложноположительные результаты при некоторых заболеваниях и патологических состояниях. От истинных положительных результатов ложноположительные отличаются тем, что они очень быстро, спустя несколько недель или месяцев становятся отрицательными.

Причем происходит это спонтанно, даже без специфического лечения. РПГА также относится к скрининговым методам диагностики. При положительном результате проводят другие трепонемные анализы.

Иммуноферментный анализ также основан на реакции антиген-антитело.

Иммуноферментный анализ ИФА

Иммуноферментный анализ также основан на реакции антиген-антитело. Трепонемные антигены фиксируют на поверхности какого-либо твердого материала.

Как правило, это полистирол, из которого изготовлены современные тест-системы, имеющие вид планшетов с лунками. В эти лунки добавляют исследуемую сыворотку. Если в этой сыворотке имеются антитела, то они образуют с антигенами тест-систем комплексы.

Желтое окрашивание исследуемого материала указывает на наличие антител. Чем больше этих антител, тем интенсивнее окрашивание.

Антитела относятся к иммуноглобулинам (Ig), и представлены несколькими разновидностями – IgА, IgМ, и IgG. Их количество неодинаково в различные периоды заболевания. Поэтому по преобладанию того или иного Ig можно судить о давности заболевания.

ИФА становится положительной уже с 3 нед., и может оставаться таковой до конца жизни. Однако здесь тоже нередки ложноположительные результаты, что является существенным недостатком.

Среди достоинств ИФА – доступность метода и возможность проводить большое количество исследований за относительно короткий срок.

Реакция иммунофлуоресценции основана на световой индикации комплекса антиген-антитело

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ)

Реакция иммунофлуоресценции основана на световой индикации комплекса антиген-антитело. Имеющийся антиген смешивают с исследуемой сывороткой. Если в ней присутствуют антитела, то они образуют с антигенами иммунные комплексы.

После этого к диагностируемому материалу добавляют антивидовую кроличью сыворотку, содержащую флуоресцеин, вещество, светящееся в ультрафиолетовом свете. Свечение обнаруживается при осмотре в люминесцентный микроскоп.

В зависимости от интенсивности свечения, цвет которого варьирует от едва заметного до желто-зеленого, выделяют 4 степени положительной РИФ.

Достоинства этого метода – его специфичность и чувствительность. При имеющемся сифилисе РИФ дает положительный результат в самом начале заболевания, уже к концу 1 нед. инфицирования, еще до того как появился шанкр.

Ложноположительные результаты практически не выявляются. Среди недостатков данного метода – технические сложности и необходимость специального оборудования.

Поэтому к РИФ прибегают при положительных результатах других анализов, нуждающихся в уточнении.

Реакция иммобилизации бледных трепонем основана на феномене обездвиживания, иммобилизации возбудителя в присутствии исследуемой сыворотке.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)

Реакция иммобилизации бледных трепонем основана на феномене обездвиживания, иммобилизации возбудителя в присутствии исследуемой сыворотке. В сыворотке пациента, больного сифилисом имеются антитела-иммуноглобулины, которые называют иммобилизинами из-за их способности обездвиживать спирохеты.

Иммобилизины выделяются гораздо позже, чем другие антитела, и РИБТ дает положительный результат лишь спустя 3 мес. после инфицирования.

Метод надежен, высокочувствителен, и мог бы использоваться при ложноположительных результатах других исследований. Однако он сложен в техническом отношении, долго проводится, требует дорогостоящего оборудования и специально обученного персонала.

Поэтому РИБТ, разработанная еще в середине прошлого века, в настоящее время с в клинической практике не используется. Ее проводят лишь в научно-исследовательских целях.

Микрореакция преципитации имеет еще одно название – тест быстрых плазменных реагинов

Микрореакция преципитации МП

Микрореакция преципитации имеет еще одно название – тест быстрых плазменных реагинов. В ответ на поврежденные компоненты клеточных мембран тканей или на компоненты мембран самих трепонем иммунная система выделяет антитела, именуемые реагинами.

На обнаружении этих реагинов и основан данный метод диагностики. К заданному антигену, включающему в себя холестерин, кардиолипин и лецитин, добавляют частицы угля для индикации.

Затем антиген смешивают с исследуемой сывороткой. Если в ней содержатся реагины, происходит реакция флоккуляции с образованием хлопьевидного осадка, который из-за присутствия частиц угля имеет черный цвет.

Положительной результат МП может отмечаться не ранее чем спустя 4-5 нед. после инфицирования. Как и при других серологических реакциях, здесь может быть неодинаковая степень выраженности и различный титр реагиновых антител.

По мере развития патологического процесса титр антител нарастает, но на поздних стадиях он снижается, и реакция становится слабоположительной или сомнительной. К тому же у этого метода исследования тоже много ложноположительных результатов.

К достоинствам можно отнести то, что на основании теста быстрых плазменных реагинов можно судить о течении заболевания и об эффективности его лечения. Ведь здесь используется нетрепонемный антиген, и после того как трепонема уничтожена, результат МП становится отрицательным, в то время как у других серологических реакций с трепонемными антигенами он может сохраняться пожизненно.

Данный метод сочетает в себе электрофорез и ИФА. Бледные трепонемы под действием электрофореза разделяются на антигенные фракции. Затем полученный материал обрабатывают сывороткой пациента, которая при заболевании сифилисом содержит специфические иммуноглобулины, IgM и IgG. После этого добавляют сыворотку с антителами к этим иммуноглобулином, меченную радиоизотопами или ферментами.

При этом участки, содержащие эти иммуноглобулины, принимают вид характерных полосок. Иммуноблоттинг – современный метод диагностики сифилиса, который был разработан сравнительно недавно. Он чувствителен и достоверен, но требует дорогостоящего оборудования, и потому недешев.

В настоящее время к иммуноблоттингу в основном прибегают для диагностики врожденного сифилиса.

Микроскопия

При стандартной микроскопии спирохеты трудноразличимы, т.к. они очень плохо окрашиваются. Именно поэтому спирохету и назвали бледной. Лучше всего микроскопию проводить в темнопольном микроскопе.

В отличие от обычного микроскопа боковое освещение здесь сфокусировано так чтобы выделить светящиеся трепонемы на темном фоне.

Материалом для исследования служит отделяемое шанкра, элементы кожной сыпи. Поэтому темнопольную микроскопию в основном используют для диагностики первичного и вторичного сифилиса.

На стадии третичного сифилиса, осложненном нейросифилисом, трепонемы могут быть обнаружены в ликворе, а при врожденном сифилисе – в тканях пуповины.

Визуальное обнаружение трепонем – это достоверный признак сифилиса. Тем не менее, возбудитель может быть выявлен не всегда, а лишь в 80% случаев.

При длительно протекающем сифилисе с проведением специфического лечения и обработке антисептиками патологических участков кожи и слизистых вероятность обнаружения трепонем в темнопольном микроскопе снижается.

Для более эффективной диагностик трепонемы могут обрабатываться флуоресцентными антителами, которые фиксируются на них и дополнительно усиливают свечение. Но этот метод требует дополнительных материальных затрат.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Полимеразная цепная реакция основана на обнаружении микробного возбудителя (в данном случае – трепонемы) по его ДНК. Весь генетический материал многократно размножается с участием фермента ДНК-полимеразы. Затем с помощью электрофореза находят ДНК трепонем.

Чувствительность ПЦР максимальна, ведь обнаружение цепи микробной ДНК свидетельствует о сифилисе. ПЦР можно использовать для диагностики любых стадий сифилиса.

В зависимости от стадии заболевания и его осложнений в роли биологического материала может выступать кровь, моча, ликвор, ткани лимфоузлов, отделяемое сифилидов. Чувствительность этих материалов к ПЦР может быть различной.

Больше всего трепонем в отделяемом сифилидов, а в уретральном или вагинальном мазке они могут вообще не обнаруживаться. К тому же после успешного лечения в организме в течение некоторого времени часто сохраняются фрагменты погибших трепонем, ДНК которых тоже идентифицируется ПЦР.

Поэтому с помощью данного метода не всегда можно определить, имеется ли активная фаза заболевания, или оно уже на стадии излечения. Тем не менее, ПЦР является наиболее эффективным методом диагностики сифилиса. Его применение тормозится сложностью исполнения и необходимостью дорогостоящего оборудования.

Какой анализ самый лучший?

Все зависит от стадии заболевания. При первичном серонегативном сифилисе наиболее предпочтительна темнопольная микроскопия и РИФ. Далее, при первичном серопозитивном и вторичном сифилисе проводят RW и ИФА, а для исключения ложноположительных результатов их дополняют РПГА.

В третичном периоде RW отрицательна, а РПГ и ИФА положительны. Для исключения ложноположительных результатов их дополняют РИФ. Для диагностики врожденного сифилиса обследуют и мать, и новорожденного. Женщина обследуется на RW, РПГА и РИФ. У новорожденного диагностика может быть дополнена иммуноблоттингом. Во всех спорных случаях прибегают к ПЦР.

Дорогие посетители сайта Фармамир. Статья не является медицинским советом и не может служить заменой консультации с врачом.