При аэрогенном заражении МБТ защитную роль играет система мукоцилиарного клиренса. Слизь, выделяемая бокаловидными клетками слизистой оболочки бронхов, способствует склеиванию поступивших в дыхательные пути микобактерий. Их элиминацию обеспечивают синхронные движения ресничек мерцательного эпителия и волнообразные сокращения мышечного слоя стенки главных бронхов и трахеи. Этот универсальный механизм защиты может оказаться весьма эффективным. В ряде случаев при эпизодическом, кратковременном контакте с бактериовыделителем он позволяет избежать инфицирования МБТ. При более длительном контакте здорового человека с источником инфекции мукоцилиарный клиренс способствует уменьшению числа микобактерий, проникающих в концевые отделы дыхательных путей.
В результате, несмотря на происходящее инфицирование, вероятность заболевания туберкулезом снижается. Нарушения мукоцилиарного клиренса, возникающие при остром или хроническом воспалении верхних дыхательных путей, трахеи и крупных бронхов, а также при воздействии токсичных веществ, создают предпосылки для поступления МБТ в бронхиолы и альвеолы. В этих случаях вероятность аэрогенного инфицирования МБТ и заболевания туберкулезом при прочих равных условиях значительно увеличивается. При алиментарном пути заражения МБТ возможность и исход первичного инфицирования в значительной степени зависят от состояния кишечной стенки и всасывающей функции кишечника.
В зависимости от места внедрения МБТ первоначально могут проникать в легкое, миндалины, кишечник и другие органы и ткани. Поскольку возбудители туберкулеза не выделяют экзотоксин, а возможности для их фагоцитоза на этом этапе весьма ограничены, присутствие в тканях небольшого числа микобактерий обычно проявляется не сразу.
Микобактерии находятся внеклеточно, медленно размножаются, а окружающая их ткань сохраняет нормальную структуру. Такое состояние определяется как латентный микробизм, при котором макроорганизм проявляет толерантность к МБТ. Независимо от начальной локализации микобактерии с током лимфы довольно быстро попадают в регионарные лимфатические узлы, а затем лимфогематогенным путем распространяются по организму. Возникает первичная облигатная (обязательная) микобактериемия. Микобактерии оседают в органах с наиболее развитым микроциркуляторным руслом - в легких, лимфатических узлах, корковом слое почек, эпифизах и метафизах трубчатых костей, ампуллярно-фимбриональных отделах маточных труб, увеальном тракте глаза. МБТ, оседая в различных тканях, продолжают размножаться. Популяция возбудителей туберкулеза может значительно увеличиться, прежде чем сформируется иммунитет и появится реальная возможность для их разрушения и элиминации.
В месте расположения микобактериальной популяции возникает неспецифическая защитная реакция - фагоцитоз.
Первыми фагоцитирующими клетками, которые пытаются поглотить и разрушить МБТ, являются полинуклеарные лейкоциты. Однако их бактерицидный потенциал оказывается недостаточным для защитной функции. Полинуклеарные лейкоциты, вступившие в контакт с МБТ, погибают. Вслед за полинуклеарами с МБТ взаимодействуют макрофаги. Первая фаза такого взаимодействия состоит в фиксации МБТ на клеточной мембране макрофага специальными рецепторами. Следующая, вторая фаза направлена на поглощение МБТ. Участок плазмолеммы макрофага погружается в цитоплазму и образуется фагосома, содержащая МБТ. Третья, завершающая фаза связана с формированием фаголизосомы, которая возникает при слиянии фагосомы и лизосомы макрофага. В этих условиях протеолитические лизосомальные ферменты могут оказывать расщепляющее действие на поглощенные МБТ и разрушать их.
В большинстве случаев первичный контакт МБТ и макрофага происходит на фоне дисфункции лизосом фагоцитирующей клетки. Появление этой дисфункции связано с повреждающим воздействием на лизосомальные мембраны АТФ-положителъных протонов, сульфатидов и корд-фактора, которые синтезируются МБТ. Дисфункция лизосом препятствует образованию фаголизосомы, и лизосомальные ферменты не могут воздействовать на поглощенные микобактерии. В этих случаях макрофаг становится своеобразным контейнером для возбудителя туберкулеза. Внутриклеточно расположенные МБТ продолжают расти, размножаться и инициировать образование веществ, которые оказывают повреждающее действие на клетку-хозяина. Макрофаг постепенно погибает, и микобактерии вновь попадают в межклеточное пространство. Такое взаимодействие МБТ и макрофага называют незавершенным фагоцитозом. Дальнейшая судьба микобактерий и исход первичного инфицирования зависят от способности организма активировать макрофаги и создавать условия для завершенного фагоцитоза. В активации макрофагов и повышении устойчивости организма к действию МБТ ведущая роль принадлежит приобретенному клеточному иммунитету. В основе приобретенного клеточного иммунитета лежит эффективное взаимодействие макрофагов и лимфоцитов. Особое значение приобретает контакт макрофагов с Т-хелперами (CD4+) и Т-супрессорами (CD8+). Макрофаги, поглотившие МБТ, экспрессируют на своей поверхности антигены микобактериальных клеток в виде пептидов. Они также выделяют в межклеточное пространство медиаторы, в частности интерлейкин-1 (ИЛ-1), которые активируют Т-лимфоциты (CD4+). В этих условиях Т-хелперы (CD4+) взаимодействуют с макрофагами и воспринимают информацию о генетической структуре возбудителя. Сенсибилизированные Т-лимфоциты (CD4+;
CD8+) выделяют медиаторы-лимфокины - хематаксины, гамма-интерферон, интерлейкин-2 (ИЛ-2), которые активируют миграцию макрофагов в зону расположения МБТ, повышают ферментативную и общую бактерицидную активность макрофагов. Активированные макрофаги способны усиленно генерировать весьма агрессивные формы кислорода и перекись водорода, что сопровождается так называемым кислородным взрывом, воздействующим на фагоцитируемый возбудитель туберкулеза. Одновременно с участием L-аргинина и фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-а) образуется оксид азота (N0), который также обусловливает выраженный антимикобактериальный эффект. Под влиянием всех этих факторов способность микобактерий препятствовать образованию фаголизосомы значительно ослабевает. Завершающая стадия фагоцитоза, направленная на переваривание возбудителя, протекает благополучно, и МБТ подвергаются разрушающему действию лизосомальных ферментов.
При адекватном развитии иммунного ответа каждое последующее поколение макрофагов, вступающее во взаимодействие с туберкулезным возбудителем, становится все более иммунокомпетентным. Высокий бактерицидный потенциал активированных макрофагов обеспечивает возможность разрушения поглощенных МБТ и защиту человека от возбудителя туберкулеза. Выделяемые макрофагами медиаторы активируют и В-лимфоциты, ответственные за синтез иммуноглобулинов. Однако накопление в крови имуноглобулинов практически не повышает устойчивость организма к МБТ. Полезным можно считать лишь образование опсонизирующих антител, которые формируются к полисахаридным компонентам МБТ. Они обволакивают микобактерии и способствуют их склеиванию, облегчая последующий фагоцитоз.
При первичном инфицировании МБТ становление иммунитета происходит одновременно с медленным размножением микобактерий и развитием локальных воспалительных изменений. Повышение ферментативной активности макрофагов и лимфоцитов приводит к дополнительному синтезу веществ, инициирующих повышение сосудистой проницаемости и развитие воспалительной реакции. Такими веществами являются фактор роста, фактор переноса, кожно-реактивный фактор, ФНО-а, оксид азота. С их действием связывают появление у клеток повышенной чувствительности замедленного типа (ПЧЗТ) к антигенам МБТ. В месте локализации туберкулезного возбудителя возникает специфическая клеточная реакция, способная ограничить распространение микобактерий. Под воздействием медиаторов иммунного ответа фагоцитирующие и иммунокомпетентные клетки устремляются к месту локализации микобактерий. Макрофаги трансформируются в эпителиоидные клетки и гигантские многоядерные клетки Пирогова-Лангханса, участвующие в ограничении зоны воспаления. Образуется экссудативно-продуктивная или продуктивная туберкулезная гранулема, которая по сути является морфологическим проявлением иммунной реакции организма на микобактериальную агрессию. Формирование гранулемы свидетельствует о высокой иммунологической активности и способности организма локализовать туберкулезную инфекцию. Компактное расположение клеток гранулемы обеспечивает лучшие условия для взаимодействия фагоцитирующих и иммунокомпетентных клеток. На высоте гранулематозной реакции в гранулемах преобладают Т-лимфоциты, присутствуют и В-лимфоциты. В гранулеме находится множество макрофагов, которые продолжают выполнять фагоцитарную, аффекторную и эффекторную функции в иммунном ответе. Эпителиоидные клетки менее способны к фагоцитозу, они активно осуществляют пиноцитоз и синтез гидролитических ферментов. В центре гранулемы может появиться небольшой участок казеозного некроза, который формируются из тел макрофагов, погибших при контакте с МВТ. Реакция ПЧЗТ появляется через 2-3 нед после инфицирования, а достаточно выраженный клеточный иммунитет формируется через 8 нед.
По мере развития иммунного ответа размножение микобактерий замедляется, их общее число уменьшается, специфическая воспалительная реакция затихает. Однако окончательной ликвидации возбудителя туберкулеза не происходит даже при полноценном взаимодействии макрофагов и Т-лимфоцитов. Определенная популяция МБТ сохраняется в организме хозяина в виде живых, нередко биологически измененных особей (в частности, L-форм). Они локализуются в единичных туберкулезных гранулемах, окруженных плотной фиброзной капсулой. Сохранившиеся МБТ локализуются внутриклеточно и предотвращают формирование фаголизосомы, поэтому для лизосомальных ферментов они недоступны. В связи с сохранением микобактерий противотуберкулезный иммунитет называют нестерильным. Оставшиеся в организме МВТ поддерживают популяцию сенсибилизированных Т-лимфоцитов и обеспечивают достаточную эффективность защитных иммунологических реакций. Инфицированный микобактериями человек сохраняет их в своем организме весьма длительное время, иногда всю жизнь. При возникновении нарушений в иммунном балансе появляется реальная угроза активации сохранившейся микобактериальной популяции и заболевания туберкулезом. Антимикобактериальная эффекторная функция макрофагов варьирует в зависимости от генетической структуры человека, его возраста, пола, гормонального фона, наличия или отсутствия сопутствующих заболеваний. Она зависит также от вирулентности МБТ.
Допускают, что особенности генетической структуры человека детерминируют функциональную активность макрофагов, Т- и В-лимфоцитов и тем самым способствуют развитию клеточного иммунитета или сдерживают его. Установлена ассоциация заболевания туберкулезом с наличием в генотипе человека определенных аллелей - HLA А11-В15 и HLA DR-2. Эти аллели рассматривают как генетические маркеры повышенной восприимчивости к возбудителю туберкулеза. Приобретенный иммунитет снижается при СПИДе, сахарном диабете, язвенной болезни, злоупотреблении алкоголем, длительном применении наркотиков. Противотуберкулезный иммунитет ослабевает при голодании, стрессовых ситуациях, беременности, лечении гормонами или иммунодепрессантами.
Для защиты от возбудителя туберкулеза определенное значение имеют гуморальные факторы естественной резистентности (комплемент, лизоцим, пропердин, интерферон и др.). Они приобретают существенное значение у новорожденных детей, имеющих физиологическую недостаточность иммунной системы и неспособных к формированию клеточного иммунитета. У взрослых этим факторам защиты от МБТ принадлежит второстепенная роль. В целом риск развития туберкулеза у впервые инфицированного человека составляет около 8 % в первые 2 года после заражения, в последующие годы он постепенно снижается.
Микобактерии туберкулеза – МБТ открыты более 30 лет назад, однако до сих пор продолжается их изучение, что связано с высокой скоростью развития туберкулеза в обществе при инфицировании хотя бы одного человека.
Свойства и опасность микобактерий
Эти микроорганизмы относят к семейству Лучистых грибов (Актиномицеты). Представляют собой различного размера палочки, способные к размножению путем простого деления или почкования. Они неподвижны и не способны к образованию спор. Обладают хорошей устойчивостью к различным факторам окружающей среды. Чаще всего их называют в честь первооткрывателя.
Палочки Коха являются грамположительными бактериями, что представляет собой их способность окрашиваться красным цветом при воздействии на них фуксина. Такой метод называется окраской по Цилю-Нильсену. Эта их особенность лежит в основе всех микроскопических способов выявления МБТ.
Микобактерий туберкулеза на данный момент известно множество видов. Наибольший интерес представляют микроорганизмы, опасные для человека и способные вызывать инфекционные заболевания.
К ним относится 2 вида:
- Mycobacterii tuberculosis;
- Mycobacterii africanum.
Палочки Коха обладают повышенной жизнеспособностью, поэтому лечение туберкулеза может длиться месяцами с последующим ежегодным контролем больного. Обусловлено это способностью их к персистированию и реверсии.
То есть микобактерии туберкулеза под действием лекарственных препаратов или агрессивных условий окружающей среды преобразуются в промежуточные, более устойчивые формы. Из такого вида они через определенное время возвращаются к исходному состоянию – после прекращения внешнего воздействия.
Важным для диагностики является химический состав возбудителя. Он хорошо изучен. Основу составляет вода и специальные белки (туберкулопротеины), которые являются чужеродными для человеческого организма. На этом построено массовое на ранних этапах для любых возрастных групп – туберкулинодиагностика.
Свойствами МБТ являются:
- высокая степень патогенности (способность вызывать развитие заболевания за счет корд-фактора);
- склонность к массовому заражению в коллективах, особенно детских;
- невосприимчивость ко многим дезинфицирующим средствам;
- устойчивость к спиртам, кислотам и щелочи;
- непосредственное токсическое воздействие на клетки, блокирующие воспаление в организме человека – лейкоциты;
- изменчивость и способность к мутации, что обусловливает низкую эффективность определенных противотуберкулезных препаратов.
Корд-фактор представляет собой особое вещество, склеивающее МБТ между собой и обуславливающее тем самым их высокую концентрацию.
Крайне важным для недопущения эпидемии является своевременное выявление инфицированных пациентов. Для этого в настоящее время разработаны ежегодные профилактические осмотры во взрослых и детских коллективах. Задачей их считается определение наличия МБТ или уже развившегося тубзаболевания у конкретного человека.
Методы для раннего обнаружения инфицирования
К этой группе можно отнести туберкулинодиагностику и экспресс-тесты.
Первым этапом при проведении плановых осмотров является туберкулинодиагностика. Она является обязательной для детей, а также для взрослых при подозрении ни туберкулезную инфекцию. Лишь при положительных результатах проводится дальнейшее обследование с выделением МБТ из различных материалов.
Методы туберкулинодиагностики основаны на введении в кровоток специального лекарства, содержащего туберкулин (белок бактерии), или его аналогов. Препарат вводится внутрикожно. Через 72 часа оценивают результат.
Если пациент инфицирован либо переболел туберкулезом, то при инъекции чужеродных антигенов, организм отреагирует местной аллергической реакцией в виде папулы (красное пятно с пузырьком) на месте укола.
Существует 2 метода туберкулинодиагностики:
- проба Манту;
Преимуществом их является возможность применения с 1 года. Это наиболее безопасные и простые способы для определения инфицирования МБТ у детей.
Диаскинтест является хорошим современным препаратом, однако он не может заменить пробу Манту. Часто их назначают одновременно, особенно при положительных первых исследованиях. Однако эти методы лишь позволяют врачам заподозрить инфицированность микобактерией человека, но не могут дать 100% гарантию.
Минусами туберкулинодиагностики являются:
- частые ложноположительные результаты;
- невозможность представить полную оценку клинической картины;
- невозможность выявления конкретного возбудителя заболевания.
Однако туберкулинодиагностика является важным этапом для выявления МБТ при туберкулезе. Лишь после ее положительных результатов фтизиатр назначает последующее углубленное обследование.
В связи с необходимостью быстрой и более точной диагностики туберкулеза современная фтизиатрия предлагает к использованию так называемые экспресс-методы диагностики.
Они являются удобными, быстрыми, в большинстве случаев достоверными, однако их стоимость и необходимость соответствующего оснащения учреждения делают их невостребованными. Из экспресс-методов применяют:
4 и 5 методы позволяют выявить МБТ в исходном материале на 2-4 сутки. Это высокоэффективные способы, позволяющие выявить вид и форму возбудителя в самые ранние сроки.
Методы, позволяющие выделить конкретный возбудитель
С учетом развития современной науки и медицинской техники, фтизиатрия предлагает много способов для выявления МБТ.
Наиболее часто в клинической практике применяются:
- Бактериоскопия: прямая, люминесцентная, фазово-контрастная, флотационная.
- Бактериология.
- Биологические методы.
Сущность этих методов состоит в проведении лабораторных исследований, при которых из различных материалов выделяют МБТ. Для этого при легочном туберкулезе чаще всего используют мокроту. При внелегочном туберкулезе исследуют:
- мочу;
- плевральный выпот;
- спинномозговую жидкость;
- каловые массы;
- выделения свищей; пунктаты;
- промывные воды желудка.
Мокроту больной собирает с утра натощак в специальный контейнер. Если ее выделяется небольшое количество, то допустим сбор в течение дня.
Часто у больных с туберкулезом кашля может и не быть. При этом проводят бронхоальвеолярный смыв или бронхоскопию. В последнем случае при проведении процедуры проводят бронхоальвеолярный лаваж с последующей биопсией «подозрительных» участков.
Промывание желудка и последующий сбор промывных вод часто назначают детям, не умеющим хорошо откашливать мокроту (особенно младшие возрастные группы). Это более щадящий метод, чем бронхоскопия.
Анализ мочи на микобактерии туберкулеза проводят при подозрении на инфицирование ими почек. Показанием для этого является обнаружение в осадке большого количества лейкоцитов (более 15 в каждом поле зрения).
Выявление МБТ в цереброспинальной жидкости важно для диагностики туберкулезного менингита, однако эффективность данной процедуры невелика.
Любой полученный от больного материал подлежит специальной подготовке мазков из него для дальнейшего исследования в зависимости от метода, назначенного фтизиатром. Анализы проводятся только в противотуберкулезных учреждениях специально обученным медицинским персоналом.
Бактериоскопический метод
Суть состоит в окрашивании специальными красителями препаратов, полученных из материала больного, с последующим рассмотрением их под микроскопом.
При прямой бактериоскопии, после окраски мазка по Цилю-Нильсену, врач его тщательно изучает.
МБТ при этом имеют вид красных палочек, которые хорошо видны под микроскопом. Анализ проводится достаточно быстро, но он позволяет обнаружить возбудителя только при большом его количестве в исходном материале.
Делают бактериоскопию несколько дней подряд. Результаты записывают на определенные бланки. Указывается при этом вид (грамположительная палочка) и приблизительное количество.
Наиболее эффективными являются люминесцентная и фазово-контрастная микроскопия. В первом случае флуоресцентно окрашенный препарат изучают при облучении ультрафиолетовыми лучами.
Это позволяет в более короткие сроки рассмотреть большое количество препарата и точнее установить диагноз.
При проведении фазово-контрастной бактериоскопии врач может наблюдать МБТ и их различные формы в живом состоянии. Такой вид исследования является единственным способом выявления возбудителя, позволяющим его зафиксировать «вживую». Это достигается путем использования специального фазово-контрастного оборудования. Такой метод исследования позволяет поставить правильный диагноз в большинстве случаев. Минусом является высокая стоимость медицинских устройств.
При любом проведенном виде бактериоскопии врач делает заключение, в котором указываются:
- найденные формы МБТ;
- среднее количество МБТ.
Второй показатель имеет наибольшее значение для оценки динамики проводимой терапии.
Бактериологический метод
Важное клиническое значение при выявлении МБТ имеет посев на специальные среды. При наличии палочки Коха в исходном материале будет происходить рост их колоний. Плюсом этого является возможность выявления возбудителя при малой его концентрации в начальной жидкости, из которой делаются посевы.
Главный недостаток бактериологического метода – большое время ожидания результата, которое составляет от 3 недель и дольше. Обусловлено это крайне медленным ростом колоний МБТ после посева на питательной среде.
Неотъемлемой частью при проведении бактериологического метода, когда получены возбудители заболевания, является определение их чувствительности к противотуберкулезным препаратам.
При выдаче результатов врач обязан указать КОЕ (колониеобразующие единицы) в посеве. Их количество важно для интерпретации полученных данных. В заключении оно указывается следующим образом:
- Скудное, когда обнаруживается до 20 КОЕ.
- Умеренное, если их количество доходит до 100.
- Обильное, когда выявляется свыше 100 КОЕ.
При 1 варианте необходимо обязательное повторное исследование, потому что такое количество КОЕ не является достоверным для постановки диагноза.
При выявлении чувствительности к противотуберкулезным средствам в заключении указывается наиболее распространенный список лекарств, используемых фтизиатрами для лечения заболевания. Около названия каждого препарата латинскими буквами ставится – S или R. S обозначает чувствительность МБТ к данному лекарству, R – резистентность (устойчивость).
Один возбудитель может быть восприимчив как к одному, так и к нескольким препаратам, исходя из этого, фтизиатр назначает рациональную терапию.
Биологический метод исследования является, скорее, теоретическим. Заражение лабораторных животных различными видами МБТ с последующим их выделением и изучением носит научный характер и в реальной клинической практике практически не применяется.
При туберкулезе выявление МБТ происходит различными методами. Чаще всего в клинической практике используют несколько способов для обнаружения возбудителя, обязательно включающих посев на специальные среды. Такие методы являются абсолютно безопасными и широко применяются при диагностике туберкулеза у детей и взрослых.
Судя по питанию, об иммунитете и своем организме вы абсолютно не заботитесь. Вы очень подвержены заболеваниям легких и других органов! Пора полюбить себя и начинать исправляться. Необходимо срочно корректировать свое питание, свести к минимуму жирное, мучное, сладкое и алкоголь. Кушать больше овощей и фруктов, кисломолочной продукции. Подпитывать организм принятием витаминов, пить больше воды (именно очищенной, минеральной). Закаливайте организм и уменьшайте количество стресса в жизни.
Вы подвержены заболеваниям легких на среднем уровне.
Пока что в хорошем, но если вы не начнете о ней заботиться более тщательно, то заболевания легких и других органов не заставят себя ждать(если еще не было предпосылок). А частые простудные заболевания, проблемы с кишечником и прочие «прелести» жизни и сопутствуют слабому иммунитету. Вам стоит задуматься о своем питании, свести к минимуму жирное, мучное, сладкое и алкоголь. Кушать больше овощей и фруктов, кисломолочной продукции. Подпитывать организм принятием витаминов, не забывайте, что нужно пить много воды (именно очищенной, минеральной). Закаливайте организм, уменьшайте количество стресса в жизни, думайте более позитивно и Ваша иммунная система будет крепкой еще многие годы.
Поздравляем! Так держать!
Вы заботитесь о своем питании, здоровье и иммунной системе. Продолжайте в том же духе и проблемы с легкими и здоровьем в целом еще долгие годы не будут вас тревожить. Не забывайте, что это в основном происходит благодаря тому, что вы правильно питаетесь и ведете здоровый образ жизни. Кушайте правильную и полезную пищу(фрукты, овощи, кисломолочная продукция), не забывайте употреблять большое количество очищенной воды, закаливайте свой организм, мыслите позитивно. Просто любите себя и свой организм, заботьтесь о нем и он обязательно будет отвечать вам взаимностью.
В.А. Кошечкин, З.А. Иванова
Лабораторная диагностика обеспечивает выполнение главной задачи диагностики и лечения туберкулеза - выявление у больного МБТ.
В лабораторную диагностику на современном этапе входят следующие методики:
- сбор и обработка мокроты;
- микроскопическая идентификация МБТ в выделяемых субстанциях или тканях;
- культивирование;
- определение резистентности к препаратам;
- серологические исследования;
- использование новых молекулярно-биологических методов, включая полимеразную цепную реакцию (ПЦР) и определение полифиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ).
Сбор мокроты, содержащей МБТ, проводится в специально подготовленном помещении больницы или в амбулаторных условиях. Собранные образцы должны быть немедленно отосланы для микробиологического исследования.
Для этого необходимо использовать специальные контейнеры. Они должны быть прочными, устойчивыми к разрушению, иметь широкую горловину с герметически завинчивающейся пробкой, чтобы предотвратить случайное вытекание из нее содержимого.
Существует два типа контейнеров. Один - распространяемый международной организацией UNICEF (Детский фонд ООН) - является пластмассовой пробиркой с черным основанием, прозрачной крышкой, утилизация которого может быть обеспечена сжиганием. На контейнере (не на крышке) отмечаются данные обследуемого.
Другой тип контейнера сделан из прочного стекла с завинчивающейся крышкой. Такой контейнер может многократно использоваться после дезинфекции, кипячения (10 мин) и полной очистки.
При сборе образцов риск инфицирования очень большой, особенно когда больной выкашливает мокроту. В связи с этим процедуру необходимо проводить как можно дальше от посторонних лиц и в специальном помещении.
Дополнительные процедуры для сбора МБТ
Забор образцов из гортани тампоном.
Оператор должен носить маску и закрытый халат. Язык пациента вытягивается изо рта, одновременно вводится тампон за языковое пространство ближе к гортани. Во время кашля пациента можно собрать часть слизи. Тампон помещается в закрытый сосуд и направляется в бактериологическую лабораторию.
Промывные воды бронхов . Для своевременной диагностики туберкулеза легких и других органов большое значение имеет раннее распознавание поражения бронхов. Для этой цели в практике применяется исследование промывных вод бронхов. Методика получения промывных вод не сложна, но надо помнить о противопоказаниях к ее использованию. Людям старческого возраста промывание бронхов следует делать с большой осторожностью. Процедура противопоказана при бронхиальной астме и явлениях сердечно-легочной недостаточности.
Для получения промывных вод бронхов больному анестезируют дыхательные пути. Гортанным шприцем вводят 15-20 мл физиологического раствора, подогретого до 37 °С. Это усиливает секрецию слизистой бронхов. Откашливая, больной выделяет промывные воды. Их собирают в стерильную посуду и обрабатывают обычным способом для бактериоскопии и посева на средах для выращивания МБТ. Производится исследование отдельного бронха или целого ветвления. Метод бактериоскопии промывных вод и особенно их посев способствует увеличению числа находок МБТ на 11-20%.
Промывные воды желудка . Промывные воды желудка нередко исследуются у детей, которые не умеют откашливать мокроту, а также у взрослых при скудном количестве мокроты. Метод не труден и дает довольно большой процент обнаружения МБТ в промывных водах желудка у больных не только легочным туберкулезом, но и туберкулезом других органов (кожи, костей, суставов и др.).
Для получения промывных вод больной утром натощак должен выпить стакан кипяченой воды. Затем желудочным зондом собирают воды желудка в стерильную посуду. После этого воды центрифугируют, мазок делают из гнойных элементов полученного осадка, обрабатывают и красят обычным способом, как мокроту.
Исследование спинно-мозговой жидкости . При подозрении на туберкулезный менингит необходимо в первые дни сделать анализ спинно-мозговой жидкости. При взятии спинно-мозговой жидкости обращается внимание на степень давления, под которым она вытекает из спинно-мозгового канала. Жидкость, вытекающая непрерывной струей и под большим давлением, свидетельствует о повышенном внутричерепном давлении. Жидкость, выделяющаяся крупными частыми каплями, говорит о нормальном давлении, а редкими малыми каплями - о пониженном давлении или о препятствии для ее истечения.
Материал для исследования берут в две стерильные пробирки. Одну оставляют на холоде, и через 12-24 ч в ней образуется нежная паутинообразная пленка. Из другой пробирки берут ликвор для биохимических исследований и изучения цитограммы.
Бронхоскопия . В том случае, если другие методы не сумели обеспечить постановку диагноза, применяется сбор материала непосредственно из бронхов, через бронхоскоп. Биопсия выстилающих бронхи тканей может иногда содержать типичные для туберкулеза изменения, выявляемые при гистологическом исследовании.
Плевральная жидкость . В плевральной жидкости МБТ могут быть выявлены с помощью флотации, но обычно обнаруживаются только в культуре. Чем большее количество жидкости используется для культурального исследования, тем вероятней положительный результат.
Биопсия плевры . Биопсия плевры может быть полезна в тех случаях, когда имеется плевральный выпот. Для ее проведения необходимы обученный персонал, средства для проведения гистологического исследования, специальная биопсийная игла.
Биопсия легкого . Биопсия легкого должна выполняться хирургом в стационарных условиях. Диагноз может быть сделан на основе гистологического исследования или обнаружения МБТ в секционном материале.
Микроскопия мокроты
Уже более 100 лет существует самый простой и быстрый метод выявления кислотоустойчивых микобактерий (КУМ) - микроскопия мазка. КУМ - это микобактерии, способные оставаться окрашенными даже после обработки кислотными растворами. Они могут быть выявлены с помощью микроскопа в окрашенных образцах мокроты.
Микобактерии отличаются от других микроорганизмов характерным составом своей клеточной стенки, состоящей из миколовых кислот. Кислоты благодаря своим сорбционным свойствам обеспечивают способность окрашиваться по методикам, выявляющим КУМ.
Резистентность к стандартным методам окрашивания и способность МБТ сохранять раннее окрашивание является следствием высокого содержания липидов во внешней оболочке клетки. Вообще грамположительные бактерии в своем составе имеют приблизительно 5% липидов или воска, грамотрицательные организмы - около 20% и МБТ – примерно 60%.
Бактериоскопия мокроты или другого отделяемого проводится «простым» методом и методом флотации.
При простом методе мазки приготавливают из комочков мокроты или капель жидкого вещества (экссудата, промывных вод и др.). Материал помещают между двумя предметными стеклами. Один из мазков окрашивают по Граму на общую флору, другой - на туберкулезные микобактерии.
Основным методом окрашивания является карбол-фуксиновый (метод Циля-Нильсена). Главный принцип этого метода - в способности наружной оболочки МБТ адсорбировать карбол-фуксин. Поглощая красный карбол-фуксин, наружная мембрана МБТ настолько прочно связывает краску, что ее нельзя удалить обработкой серной кислотой или солянокислым спиртом. Затем образец обрабатывается метиленовым синим. При эмерсионной микроскопии МБТ появляются в виде красных палочек на синем фоне.
Начиная с 1989 г., в современных лабораториях флюоресцентная микроскопия в значительной степени вытеснила старые методы, основанные на кислотоустойчивости микобактерий. Этот метод базируется на тех же свойствах МБТ, связанных со способностью наружной мембраны МБТ, богатой липидами, удерживать соответствующий краситель, в данном случае - аурамин-родамин. МБТ, поглощая это вещество, одновременно устойчивы к обесцвечиванию солянокислым спиртом. При этом МБТ, окрашенные аурамин-родамином, флюоресцируют под воздействием ультрафиолета или других световых спектров, выделенных соответствующими фильтрами. Под воздействием ультрафиолета МБТ проявляются как ярко-желтые палочки на черном фоне.
Подготовка образца для культурального исследования
При поступлении в современную лабораторию диагностического материала с возможным содержанием МБТ проводятся следующие диагностические манипуляции:
- 1. Обработка материала миколитическими разжижающими веществами с целью удаления белковых масс.
- 2. Деконтаминация образца для удаления сопутствующей бактериальной флоры.
- 3. Встряхивание смеси и ее отстаивание.
- 4. Холодное центрифугирование.
- 5. Содержимое центрифужной пробирки используется для микроскопии посева на:
- 5.1. плотную яичную среду (Левенштейна-Йенсена или Финна III);
- 5.2. агаровые среды (7Н10 и 7Н11);
- 5.3. автоматизированную систему бульонного культивирования (МВ/ВасТ или ВАСТЕС MGIT 960).
Молекулярно-генетические методы диагностики МБТ
Расшифровка генома МБТ открыла неограниченные перспективы в разработке генетико-молекулярных тестов, в том числе в изучении и выявлении МБТ и диагностике в организме человека.
Классические методы, применяемые для обнаружения в организме микобактерий туберкулеза, такие, как бактериоскопия, культуральный, иммуноферментный, цитологический, весьма эффективны, но отличаются или недостаточной чувствительностью, или длительностью выявления МБТ. Развитие и совершенствование молекулярно-диагностических методов открыло новые перспективы для быстрого выявления микобактерий в клинических образцах.
Наибольшее распространение получил метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)
.
Этот метод основан на амплификации особых фрагментов бациллярной ДНК, которая обнаруживается в диагностических образцах. Тест предназначен для выявления МБТ в мокроте или идентификации разновидности бактерий, которые произрастают в культуральной среде.
Реакция ПЦР позволяет проводить идентификацию МБТ в диагностическом материале за 5-6 ч (включая обработку материала) и обладает высокой специфичностью и чувствительностью (в диапазоне от 1-10 клеток в образце).
Что собой представляет туберкулёз? При опросах нередко обнаруживается: представления об этой болезни у многих приблизительные.
Самый частый ответ – «это такой кашель». Кто-то припомнит другие симптомы: небольшая температура и слабость. При этом мало кто в курсе, что туберкулёз – это заболевание с огромным количеством форм, проявлений и осложнений.
Медицинский факт! Туберкулёз вызывается особой группой микобактерий. Чаще всего инфицируются именно лёгкие. Однако фактически туберкулёзная палочка способна поразить абсолютно любой внутренний орган и даже кости .
Характеристика болезни
Туберкулёзная интоксикация – это одна из форм туберкулёза. Это состояние встречается в основном у детей и подростков. Диагностика у взрослых, особенно стариков, – крайне редкий случай. Специфика туберкулёзной интоксикации в следующем:
- пациент инфицирован микобактерией туберкулёза (МБТ);
- у больного отмечены общие симптомы туберкулёза;
- заболевание ещё не поразило какой-либо определённый орган;
- исключены заболевания с похожими на туберкулёзную интоксикацию проявлениями.
Наиболее часто инфицирование организма МБТ выявляют по результатам пробы Манту. Диагноз требует уточнения, это делается различными методами.
Чаще всего заражение возбудителями туберкулёза происходит внутри семьи, между родственниками. Больные активной формой туберкулёза обязаны соблюдать определённые гигиенические правила. Если этого не делать, у любого ребёнка или подростка может наступить туберкулёзная интоксикация.
В сельской местности туберкулёзная палочка может обнаружиться у коров и быков. Такие животные также заразны. Крайне редко человек может заразиться и от птиц. Такие случаи единичны и происходят при очень низком уровне иммунитета.
Возможны несколько способов передачи инфекции:
- Аэрогенный (через воздух). Это самый распространённый путь.
- Алиментарный (то есть через ротовую полость и пищеварительный тракт).
- Контактно-бытовой (когда больные и здоровые люди касаются одних и тех же предметов).
- Плацентарный (возбудители туберкулёза с током крови матери передаются не рождённому ещё ребёнку).
Как возникает заболевание
Симптомы, которые должны встревожить
- потливость, особенно во время ночного сна;
- снижение аппетита, что ведет к потере массы тела;
- раздражительность, приступы агрессии или плаксивости;
- иногда по вечерам до 37,3-37,5 градусов;
- бледность кожных покровов , «мраморность».
На фоне всего этого школьник начинает хуже учиться, отстает от сверстников. Зачастую именно снижение успеваемости и резкая потеря веса становятся причиной, по которой взрослые ведут ребенка к врачу.
Дополнительные признаки вероятного заражения туберкулезной палочкой
- Увеличение пяти групп лимфатических узлов. При прощупывании они мягкие и сохраняют подвижность. Но если инфицирование произошло давно, отдельные лимфоузлы могут быть заметно плотнее.
- Учащенное сердцебиение при прослушивании сердца или проведении электрокардиограммы.
- Систолические шумы в сердце.
- Стойкое снижение артериального давления.
- Незначительное увеличение печени, но без патологических нарушения ее функций.
Еще раз стоит повторить: диагноз тубинфицирование или тубинтоксикация в детском возрасте ставится только в том случае, если одновременно совпадают все вышеописанные симптомы, реакция на пробу Манту дала положительный или сомнительный результат и никаких других причин, которые могли бы спровоцировать подобное состояние у ребенка, установить не удалось.
Помимо осмотра и опроса пациента и пробы Манту проводятся также клинические исследования мочи и крови, анализ кала на яйца глист, бактериологическое исследование мокроты. В крови будут выявлены умеренно повышенные лейкоциты , эозинофилия, лимфоцитопения, моноцитоз, незначительное повышение СОЭ, изменение нейтрофилов влево. В мокроте обнаружить микобактерии с помощью посева не удается.
Важно дифференцировать туберкулезную интоксикацию от интоксикации при ангине, глистных инвазиях , гайморите, запущенном кариесе, остром воспалении мочевыводящих путей.
Лечение, прогноз, профилактика
Лечение при подобном диагнозе предстоит длительное, не менее 6 месяцев, но далеко не всегда противотуберкулезными препаратами. Если состояние ребенка стабильное, курс терапии можно проходить в специализированном и подростков, в серьезных случаях ребенок помещается на стационар в тубдиспансере. Комплексное лечение включает такие моменты:
1. Восстановление и укрепление иммунитета.
2. (важно обеспечить достаточное употребление белков, витаминов и минералов).
3. Химиотерапия, если того требуют анализы: используются три классических препарата для подавления туберкулезной инфекции, изониазид, рифампицин, пиразинамид, этамбутол). Дозировка лекарственных средств устанавливается с учетом массы тела ребенка. При необходимости комбинация препаратов корректируется.
Зачастую штаммы МБТ проявляют резистентность к используемым медикаментозным средствам . В этом случае их заменяют резервными препаратами. После успешного лечения ребенок должен еще два года наблюдаться у фтизиатра, и только после этого снимается с учета при условии хороших анализов и отрицательной реакции Манту на протяжении всего периода.
| Статьи |
