Бактериологическим посевом (сокращенно бакпосев) называют лабораторные микробиологические исследования человеческого материала, которые совершают с помощью посева таких частиц на разные питательные среды, расположены в разном температурном режиме. Такие эксперименты проводят для того, чтобы обнаружить в определенном материале количество условно патогенных и условно-патогенных микробов для дальнейшего лечения организма от заболеваний.
Если во время эксперимента произошло выделение определенных микробов, то необходимо провести еще одно исследование - антибиотикограмму, которая определит уровень чувствительности патогенов к препаратам антибактериального действия и бактериофагам.
Плюсы и минусы
При проведении данного исследования существуют свои преимущества (плюсы) и недостатки (минусы). К недостаткам можно отнести то, что процесс обнаружения микроорганизмов длится довольно долго. Также, материал для исследований должен быть взят согласно определенным требованиям. К лаборантам же тоже выдвигаются строгие требования, они должны иметь определенную квалификацию.
Но у такого метода исследования бактериологического посева существует и масса преимуществ. Например, таким образом можно проверить любую жидкость человека. Также, высокая специфичность эксперимента позволяет исключить ложные реакции, что позволит точно поставить диагноз больному. Процедура бакпосева помогает применить максимально эффективное лечение с помощью точного определения реакции микроорганизмов на то или иное медицинское средство.
Когда назначают проведения бактериологического посева
Основными показаниями для проведения данного микробиологического исследования являются воспалительные процессы в организме человека, а также подозрение на сепсис. Бакпосев широко распространен во всех отраслях медицины. Так, его применяют в онкологии, гинекологии, хирургии, урологии, в частности, при вирусных инфекциях.
Что такое бактериологический посев
Материал, доставленный для анализа в лабораторию, помещают в различные питательные среды, то есть, делают посев. В зависимости от того, возбудителя какой болезни нужно найти, посев делается в разных условиях. К примеру, рост одного возбудителя возможен в элективной или избирательной среде, но при этом другие микроорганизмы там погибнут. Такой средой может служить свернутая лошадиная сыворотка, в которой выявляется возбудители дифтерии, или же селенит, желтые соли, в которых определяется присутствие кишечной палочки.
Среда Гиса (дифференциально-диагностическая среда) обычно используется для определения бактериальных видов. Иногда лаборанты делают пересев с жидких питательных веществ на твердые, что помогает идентифицировать колонии бактерий.
После этого питательные среды перемещают в термостат, в котором поддерживается необходимая температура и влага для роста и размножения бактерий. По истечению определенного времени проводится осмотр бактериальных колоний, именуемых культурой микроорганизмов. Также, возможно и микроскопическое исследование колоний, предварительно окрасив их специальными средствами.
При контрольном осмотре бакпосева лаборант оценивает плотность колоний, цвет, а также, способность разлагать органические и неорганические соединения. Затем подсчитывают количество возбудителей. Для подсчета используют такую единицу измерения – КОЕ (колониеобразующая единица). КОЕ – это колония микроорганизмов, образовавшаяся из одной клетки микроба. По этим данным определяется количество микроорганизмов в материале, который исследовался.
Методы подсчета колоний:
- секторный метод;
- метод серийных разведений;
- подсчет единиц колоний под микроскопом.
- Срок готовности результатов посева разный, и зависит от исследуемого материала.
Забор материала для проведения анализа на бактериологический посев.
Исследования
Для проведения исследования бактериологического посева берется такие материалы из человеческого организма:
- слизь из носоглотки;
- слизь из зева;
- испражнения (кал);
- слизь уретры;
- мокрота из бронхиального дерева;
- слизь цервикального канала;
- моча;
- кровь;
- секрет простаты;
- грудное молоко;
- спинномозговая жидкость;
- содержимое кист;
- желчь;
- раневое отделяемое;
- содержимое очагов воспаления.
Для получения достоверных результатов, необходимо правильно собрать образцы для анализа. Слизь, кровь или другие элементы необходимо собирать чистыми инструментами и помещать в чистую емкость. При несоблюдении этих требований произойдет контаминация, которая приведет к размножению бактерий, не имеющих значения для эксперимента, на материале. Поэтому, для взятия нужных образцов, в лабораториях выдают специальную стерильную емкость на руки пациенту. А забор образцов тканей из различных очагов болезни проводит только медсестра с использованием стерильных инструментов (ложек, петель, шпателей и других).
Мочу и кровь пациенты сдают в сухих пробирках, а для сдачи остальных видов образцов, выдаются емкости с транспортной питательной средой.
Сдать анализы на бактериологический посев необходимо до начала антибиотикотерапии. Поскольку, матери для исследования, взяты в период приема антибиотиков, не покажут правильного результата. До забора образцов необходимо выдержать 10 дней после приема антибиотиков.
Необходимо также вовремя доставлять образец в лабораторию, чтобы избежать гибели бактерий от высыхания или изменения среды. Например, для бакпосева доставляют в лабораторию в теплом виде. Если необходимо собрать мочу для анализа, то это делают после утренних процедур, и берут только среднюю струю мочи (примерно 15 мл). Материал собирают в стерильную емкость и привозят в лабораторию в течение 2 часов.
При необходимости сдать мазок из зева или носоглотки, то нельзя утром есть, пить и выполнять утренние гигиенические процедуры.
Кал собирают утром, используя стерильные инструменты и емкость. Объем материала должен составлять примерно 20 гр. Кал должен быть чистый, без примесей мочи. Доставляют его не позже чем через 5 часов после дефекации. Также, очень важно собирать кал без использования свечей, клизм и слабительных препаратов.
Необходимо собирать в период подъема температуры и до приема антибиотиков. Забор проводится в количестве 15 мл для взрослых, и 5 мл для детей.
Сбор мокроты проводится утром, до приема пищи. Ее собирают в специальную емкость во время кашля. Перед забором нужно прополоскать рот и почистить зубы. Такой материал должен оказаться в лаборатории не позже чем через 1 час.
Сбор грудного молока для исследования на бактериологический посев проводится после обработки околососковой зоны 70% этиловым спиртом. Необходимо в течение 2 часов принести в лабораторию 5 мл жидкости.
Забор отделяемого половых органов проводится с учетом таких правил: женщины сдают материал по истечению двух недель после менструации, и через месяц после окончания курса антибиотиков. При сборе желательно не ходить в туалет, по-маленькому хотя бы 2 часа. А мужчинам нельзя мочиться в течение 6 часов до сдачи анализа.
Результаты
Результаты бактериологического посева составляет как количественная оценка, так и качественная. То есть, в материале обнаруживают возбудитель инфекции и количество этих микробов.
Определение количественного роста бактерий проводится таким способом: существуют 4 степени роста микробов в материале. В первой степени микробы медленно растут в жидкой среде, а в твердой их рост вообще останавливается. Вторая же степень подразумевает до 10 колоний одного вида бактерий, образовавшихся в плотной среде. Для 3 степени эти показатели значительно выше – 10-100 колоний, а четвертая насчитывает более 100 колоний.
Это очень важно для результатов исследования и определения возбудителя болезни. Например, при 1 и 2 степени материал не считается зараженным, а всего лишь загрязненным, а при 3 и 4 степени – уже наблюдается возбудитель заболевания.
Расшифровка подсчетов колоний выглядит следующим образом: 103/мл – это 1 колония, 104/мл – до 5 колоний, 105/мл – от 5 до 15 колоний, 106/мл – более 15 колоний.
Точный подсчет важен не только для правильности результата, но и для проведения необходимого лечения.
Какие же бактерии может обнаружить в материале бакпосев? В слизи зева и носоглотки возможно обнаружения гемолитических стрептококков (Streptococcuc pyogenes, Streptococcuc agalactiae), золотистого стафилококка (Staphylococcus auereus), пневмококка (Streptococcuc pneumoniae), дифтерии (Corynebacterium diphtheriae), листерии (Listeria), гемофильную палочку (Haemophilus influenzae типа b) и менингококк (Neisseria meningitidis).
Кровь обычно проверяют на стерильность методом бактериологического посева.
В содержимом гнойников, ран и биопунктате обычно можно обнаружить синегнойную палочку или псевдомонады.
При обследовании слизи половых путей обычно пытаются обнаружить наличие возбудителей инфекций, которые передаются половым путем. Это гонококка, трихомонады, листерия, грибы (Neisseria gonorrhoeae ,Trichomonas vaginalis, грибы рода Candida), уреаплазма (Ureaplasma urealyticum), а также микроплазма и бактериальная флора.
Также, такие образцы для анализа как соскобы, мазки, молоко, кровь, моча, секрет простаты, суставная жидкость, желчь и содержимое ран обследуют и на бактериальную флору, то есть на общую обсемененность.
Что такое антибиотикограмма?
Антибиотикограмма – это перечень препаратов, антибактериального действия, к которым резистентен или чувствителен возбудитель инфекции. Такое исследование чвляется важно частью бактериологического посева, поскольку очень важно определить, какова реакция микробов на то или иное лекарство.
Чувствительностью возбудителя инфекции называют его восприятие медицинского препарата. Это значит, что антибиотик должен каким-то образом повлиять на рост и размножение бактерий.
Резистентностью называют устойчивость микробов к лекарственному средству, это значит, что прием данного препарата не поможет вылечить болезнь.
Антибиотикограмма проводится в такой единице измерения – МИК (минимальной ингибирующей концентрации).
Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам – это точный микробиологический анализ, который проходит в лабораторных условиях. Для исследования берется биологический материал и помещается в среду, благоприятную для развития патогенных микроорганизмов.
Он дает возможность врачу поставить корректный диагноз и сразу определить группу эффективных антибиотиков.
Есть много ситуаций, когда назначают бак посев. Большинство воспалительных процессов в организме приходится проверять. Поэтому анализ используют хирурги, урологи, онкологи, гинекологи, отоларингологи и еще ряд специалистов.
Лечащий врач даст направление на анализ, где будет указан нужный материал: мокрота; кал; кровь; урина; желчь; грудное молоко; слизь из носоглотки, зева, цервикального канала или уретры; отделяемое из раны; спинномозговая жидкость.
Какие организмы показывает?
Каждый вид биологической жидкости относится к определенной системе. А системы, в свою очередь, имеют наборы распространенных заболеваний. После прохождения теста положительный ответ может говорить о наличии следующие организмов.
Исследования ротовой полости и носа:
- Золотистый стафилококк;
- Менингококк;
- Гемофильная палочка;
- Гемолитический стрептококк;
- Пневмококки;
Исследование кала:
- Специфические бактерии кишечника – сальмонелла, иерсиния, шигелла;
- Тифопаратифозные бактерии;
- Условно патогенные возбудители;
- Дисбактериоз;
Исследование проблемных и гнойных ран:
- Псевдомонады;
- Синегнойные палочки;
Исследование половых органов:
- Трихомонады;
- Гонококк;
- Листерии;
- Уреаплазма;
- Бактериальная флора;
Другие виды исследования:
- Изучение общего состояния флоры и обнаружение возбудителей воспалительных процессов.
Методика бактериального посева всегда ставит точный диагноз, но нужно понимать, как проходит сбор той или иной биологической жидкости, чтобы лично не повлиять на некорректность результата.
Процесс исследования
Учитывая локализацию воспаления и симптоматику, специалисты помещают собранный материал в определенную среду.
Например, среда с солями желчных кислот показывает кишечную инфекцию, элективная среда определяет возбудителя дифтерии, а дифференциально-диагностические среды могут указать на определенную бактериологическую культуру.
Второй этап исследования – выращивание колоний микробов, которые были обнаружены. Для этого их помещают в термостат, где регулируются все параметры для благоприятного развития.
Третий этап – подсчет количества возбудителей. Это могут быть отдельные бактерии или целые колонии. Иногда для определения лечения колонии изучают под микроскопом.
Материал для бактериального посева: основные правила
Несмотря на профессиональную работу лаборатории, от самого пациента многое зависит. Если он не будет придерживаться правил сбора материала, то исследования буду считать недействительными.
Обратите внимание на несколько важных аспектов:
- Стерильность! Это касается и тары, и инструментов, которыми собирается биологическая жидкость.
- Отказ от антибиотиков на 10 дней. Информирование лечащего врача обо всех медикаментах, которые вы принимаете.
- Быстрая доставка в лабораторию. Хранить материал больше нескольких часов нельзя, так как меняется его кислотность.
Кроме того, каждый вид материала имеет свои нюансы сбора. Моча сдается утром после подмывания. Объем – 10-15 мл. Сдать ее нужно в течение 2 часов. Когда вы идете сдавать мазок со рта или носа, то нельзя ничего есть пить, полоскать рот или чистить зубы.
Для забора кала используется специальный стерильный контейнер. Объем – 10-15 г. Доставить его в течение 5 часов. Ни в коем случае нельзя использовать клизму или слабительные средства. Запрещено помещать кал в холодильник.
Мокрота собирается утром натощак. Перед этим стоит почистить зубы. Сдать нужно в течение 1 часа. Грудное молоко собирают только после тщательного душа. Соски обрабатываются спиртом. Объем – 5 мл. Доставить материал нужно за 2 часа.
Для сдачи крови никаких правил нет. Но нужно помнить про антибиотики. Никаких лекарств в течение 10 дней. А мазки половых органов требуют отсутствия лекарств в течение месяца. Женщинам нельзя сдавать мазок в течение первых 2 недель цикла.
Перед процедурой нельзя мочиться 2 часа женщинам и 5 часов мужчинам.
Расшифровка
Результат исследования несет в себе два главных значения:
- Во-первых, это наличие определенной бактерии.
- Во-вторых, ее концентрация в организме. Не обязательно быть специалистом, чтобы расшифровать полученные данные.
Выделяют 4 степени роста микроорганизмов в организме:
- Первая и вторая степени ничем не угрожают. Они говорят о наличии до 10 колоний бактерий. Но эти показания свидетельствуют не о диагнозе, а о загрязнении самого материала.
- Третья (до 100 колоний) и четвертая (больше 100 колоний) степени уже указывают на проблему. Количество колоний – это важный показатель, так как по нему ставят степень диагноза.
Тест на чувствительность к антибиотикам
Данный тест показывает, какие антибиотики могут справиться с патогенными бактериями. Если у пациента есть аллергия на определенную группу лекарств, то лечение не будет давать нужно эффекта.
Исследование показывает, как собранный материал реагирует на тот или иной антибиотик. Это позволяет найти лучшее решение и сразу начать профессиональное лечение.
Особое внимание нужно обратить на буквы R и S. Если в результатах вы увидели букву R, значит, бактерии не поддаются действию антибиотика, если S, значит, был найдет отличный способ лечения.
Вывод
Бактериальный посев с определением чувствительности к антибиотикам – это лучший способ исследования для многих диагнозов. Он гарантирует точный результат, постановку диагноза и определение антибиотика. Главное, все сделать по указанным правилам и сохранить стерильность собранного материала.
Осуществляется для изучения биологических и физико-химических свойств бактерий, которые используются для диагностики инфекционных заболеваний на основе микробов одного вида. Современные технологии позволяют получить необходимые бактерии с помощью и , которые, однако, могут показать ложные результаты, не определив возбудителя инфекции.
В зависимости от среды обитания микроорганизмы и бактерии имеют возможность размножаться. Для обеспечения интенсивно размножения бактериям необходимы температурный режим и пищевые добавки.
Условия для размножения микроорганизмов
Бактерии способны к размножению только в определенной рН среде, которая обеспечивает необходимые параметры влажности, кислотности, восстановительных параметров, вязкости и осмотических свойств . Определенный набор бактерий питаются и существуют в определенной среде, которая может быть простой, сложной, мягкой, твердой, универсальной или индивидуальной . Универсальная среда обеспечивает необходимыми условиями многие виды микроорганизмов, в то время как индивидуальная среда обеспечивает жизнедеятельность определенного вида бактерий.
Виды бактерий
Бактерии и микроорганизмы, живущие на коже и слизистых оболочках человеческого организма, являются интересной сферой изучения и диагностики болезней и используются во многих отраслях медицины. Бактерии и микроорганизмы, живущие в слизистых оболочках и на коже человека, распределяются по представителю:
- Постоянный обитатель организма, не несущий угрозы для здоровья и не способствующий развитию заболеваний. Однако исчезновение этих бактерий приводит к появлению и развитию заболеваний. Примерами заболеваний может послужить дисбактериоз в кишечнике или бактериальный вагиноз. Данные заболевания вызваны нарушениями нормальной микрофлоры и исчезновением необходимых бактерий;
- Условно-патогенная микрофлора – является причиной развития болезней при высоком показателе условных патогенных микробов, размножающихся при иммунодефиците;
- Патогенные микробы, отсутствующие в здоровом человеческом организме . Попадая в среду размножения, провоцируют заболевания и дают начало инфекционным процессам. являются возбудителями наиболее опасных заболеваний, например, чумы, оспы, холеры и венерических заболеваний.
Назначение бактериологических посевов
Для выявления инфекционных процессов, вызванных микробами и микроорганизмами, проводятся бактериологические посевы, способные определить вид микроорганизма и предотвратить размножение бактерий. В зависимости от среды обитания бактерий, методы посевов также имеют отличия, позволяющие получить чистую культуру микроорганизмов, не содержащую бактерии другого вида.
Обследуя пациента, которого тревожат те или иные проблемы со здоровьем, доктор назначает бактериологический посев, который может подтвердить предположение доктора о проникновении патогенного возбудителя, нарушение нормальной микрофлоры или чрезмерное размножение . Результаты анализа показывают:
- вид возбудителя и его название на латинском языке;
- концентрацию и количество бактерий;
- патогенность микроорганизма.
При исследовании некоторых биологических материалов основной единицей измерения является КОЕ\мл , которая сообщает о количестве колониеобразующих единиц бактерий на миллилитр биологического материала. При анализе на патогенные микробы результаты исследования могут оказаться положительными или отрицательными. Получая анализы исследования, сообщающие о наличии или превышающие показатель колониеобразующих единиц, назначается повторный анализ, подтверждение которого информирует об инфекционном процессе в организме и требует лечения.
При исследованиях патогенного микроорганизма, выявленного во флоре, проводятся дополнительные анализы – посев микрофлоры , показывающие чувствительность организма к антибиотикам, которые могут устранить . Действующие препараты, к которым микробы проявляют чувствительность, обозначаются буквой S, антибиотики неспособные устранить заболевание – R.
Данное исследование помогает точно определить вид антибиотика, способного бороться с патогенным заболеванием без нанесения вреда организму.
Подготовка к бактериологическому посеву
Исследованию может подлежать любой биологический материал. Основным материалом для анализа служат:
- кожа;
- кровь;
- сперма;
- слизистая оболочка ротовой полости;
- слизистая оболочка дыхательных путей;
- слизистая мочеиспускательных путей;
- сок желудочно-кишечного тракта;
- органы слуха, зрения, обоняния.
Бактериологический посев требует подготовки и соблюдения определенных правил. Анализ крови совершается врачами и не требует серьезной подготовки, а назначенный урологом или гинекологом анализ мочи или мазок слизистой половых органов, требует выполнения правил перед анализом. Анализ мочи у женщин может захватить непатогенные кокки, но при этом моча остается стерильной, мужской анализ мочи может захватить непатогенные бактерии, стафилококки, дифтероиды. Чтобы увеличить качество исследуемого биологического материла, и избежать повторного анализа, необходимо обеспечить максимальную стерильность.
- Перед анализом необходимо уделить время гигиене половых органов;
- Женщинам, которым необходимо сдать мочу на анализ, следует закрыть вход во влагалище ватным тампоном;
- Анализ проводится на средней порции мочи, составляющей примерно 10 мл;
- Время обработки мочи, взятой на посев, - не более 2 часов.
При посеве из прямой кишки, уретры, влагалища, шейки матки процедура проходит в медицинских учреждениях, однако требует выполнения одного правила перед анализом: накануне посева запрещено спринцевание, подмывание и использование любых антисептических средств .
Время исследования и анализа биологического материала зависит от самого материала, таким образом, период ожидания результата может занять от 3 до 14 дней . Стоимость анализа также зависит от вида посева, но в некоторых случаях в поликлинике по назначению врача и в женской консультации посев осуществляется бесплатно. Для беременных женщин бактериологический посев является обязательной процедурой и должен проводиться дважды, второй раз включает посев слизистой оболочки носа и рта.
Интересные факты о бактериологическом посеве
Патогенные гонококки, которые можно выявить путем бактериологического посева, осваиваются в организме на третий день, провоцируя гонорею, постепенно захватывающую весь организм. Для выявления болезни проводятся посев, культивирование, микроскопия и другие анализы.
Иногда в мазке половых путей при анализе выявляются диплококки - парные «кофейные зерна». Данная находка не указывает на венерическое заболевание, оно появляется в постменопаузе.
Посев мочи назначается только в необходимом случае, так как требует серьезной и трудной работы, поэтому врачи часто избегают анализа мочи.
Большое количество анализов требует , которую довольно тяжело диагностировать. Инфекцию определяют с помощью посева, затем культивируют, изучая чувствительность к антибиотикам и различным терапиям.
Беременность предоставляет уникальные возможности для маскировки микроорганизмов. Поэтому бактериологические посевы являются обязательной программой для беременных женщин.
Все бактериологические посевы и анализы – это безболезненные процедуры, которые, однако, помогают выявить болезнь и найти средство для ее устранения.
Методы проведения бактериологического посева
Для выявления микроорганизмов используются приспособления, позволяющие перенести материал на среду в стерильных условиях. Процедура осуществляется бактериальной петлей , пастеровской пипеткой или стеклянной палочкой . Приспособления, известные медицинским работникам с XIX века, прошли через изменения и усовершенствования, появились улучшенные стерильные способы использования инструментов благодаря одноразовым пластиковым приспособлениям.
Процедура проводится в стерильных условиях рабочей зоны, обработанной дезинфицирующими средствами. Медработники используют стерильные перчатки, которые, как одежда и рабочая зона, должны быть обработанными средствами, не мешающими выделению изолированных штаммов. Время посева должно быть минимальным, но процедура требует внимательность и аккуратности.
Выделение штаммов и исследование чистых культур
Из-за особенностей некоторых микроорганизмов, которые требуют индивидуального подхода и изучения, выделение штаммов проходит различными способами, подходящими под исследование бактерий определённых видов. Таким образом, мазок может помещаться в определённую среду, которую через некоторое время следует сменить другой средой. В некоторых случаях жидкость следует центрифугировать, а затем изучить осадок с помощью посева.
Бактериологический посев позволяет определить размер, форму, тип бактерии, наличие жгутиков, спор или капсул на теле микроорганизма, а также определить свойства бактерий к окрашиванию. Данные исследования информируют медицинского работника, делающего анализ, о наличии заболеваний, патогенных бактерий, и возможностях выделения отдельной клетки, что делает анализ посева важным этапом научных целях для изучения генетических исследований.
